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基于双酶偶联高效合成红景天苷
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作者 闫子旭 戴景莉 +4 位作者 赵科学 李小利 徐雅婷 马静波 朱富成 《生物学杂志》 北大核心 2025年第5期75-80,共6页
为实现红景天苷绿色高效制备,在前期分子改造获得糖基转移酶高效突变体TW(S129T/F168W)的基础上,构建双酶偶联一锅法催化酪醇合成红景天苷反应体系,对温度、pH、尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)、蔗糖、酪醇、金属离子和双酶比例... 为实现红景天苷绿色高效制备,在前期分子改造获得糖基转移酶高效突变体TW(S129T/F168W)的基础上,构建双酶偶联一锅法催化酪醇合成红景天苷反应体系,对温度、pH、尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)、蔗糖、酪醇、金属离子和双酶比例进行优化,在最优条件下进行分批补料反应,实现尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate-glucose,UDPG)的循环再生,提高红景天苷产量。结果表明:双酶偶联催化酪醇合成红景天苷最佳条件为温度35℃,pH 8.0,UDP浓度0.5 mmol/L,蔗糖浓度1 mol/L,酪醇浓度5 mmol/L,Ca^(2+)浓度5 mmol/L,突变体TW∶AtSuSy的酶活比0.5∶6;在10 mL反应体系中通过分批补料策略获得10.3 g/L的红景天苷。结合分子对接探究突变体催化酪醇合成红景天苷分子机制,为绿色高效制备红景天苷奠定基础。 展开更多
关键词 糖基转移酶 红景天苷 双酶偶联 UDPG再生 分批补料
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β1,4-半乳糖基转移酶1对气道平滑肌细胞炎症反应的影响
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作者 张赛帅 张雪茹 +2 位作者 施锐 郭佳 邓林红 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第6期721-729,共9页
为了探究β1,4-半乳糖基转移酶1(β4GalT1)在气道平滑肌细胞中的功能,通过高通量基因表达数据库(GEO)分析β4GalT1在气道平滑肌细胞炎症反应存在功能,采用脂多糖刺激气道平滑肌细胞后检测白介素1β及β4GalT1的表达;采用慢病毒包装构建... 为了探究β1,4-半乳糖基转移酶1(β4GalT1)在气道平滑肌细胞中的功能,通过高通量基因表达数据库(GEO)分析β4GalT1在气道平滑肌细胞炎症反应存在功能,采用脂多糖刺激气道平滑肌细胞后检测白介素1β及β4GalT1的表达;采用慢病毒包装构建过表达β4GalT1的稳转细胞,并利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测稳转细胞中炎症相关细胞因子表达随时间的变化,同时通过细胞增殖实验、细胞周期和划痕实验检测稳转细胞的生物学行为变化,研究过表达β4GalT1的细胞分泌液在调节细胞因子表达过程中的作用。结果表明:脂多糖能引起白介素1β及β4GalT1的表达量增加;随着培养时间的延长,过表达β4GalT1的细胞中促炎因子表达量减小,抑炎因子表达量增加,同时过表达β4GalT1可改变气道平滑肌细胞的增殖、迁移行为,进而起到炎症修复功能;过表达β4GalT1的细胞可通过分泌液调节细胞因子的表达,表明β4GalT1能快速响应对气道平滑肌细胞的炎症刺激,并通过分泌物质调节气道平滑肌细胞的细胞行为及细胞因子变化。 展开更多
关键词 糖生物学 抑炎作用 β1 4-半乳糖基转移酶1 气道平滑肌细胞 细胞行为
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环糊精葡萄糖基转移酶的结构特征与催化机理 被引量:16
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作者 李兆丰 顾正彪 +2 位作者 堵国成 吴敬 陈坚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期144-150,共7页
随着环糊精在食品、医药等领域的应用越来越广,生产环糊精所必需的环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)已经成为当今研究的热点。特别是近二十年来,国外对该酶进行了比较深入的研究。首先介绍了CGT酶的功能特性与结构特征。CGT酶是一种多功能型... 随着环糊精在食品、医药等领域的应用越来越广,生产环糊精所必需的环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)已经成为当今研究的热点。特别是近二十年来,国外对该酶进行了比较深入的研究。首先介绍了CGT酶的功能特性与结构特征。CGT酶是一种多功能型酶,能催化三种转糖基反应(歧化、环化和耦合反应)和水解反应,其中,能将淀粉转化为环糊精的环化反应是特征反应;作为α-淀粉酶家族的成员,CGT酶除了具有与α-淀粉酶相同的A、B、C结构域外,还存在D和E结构域。另外,对CGT酶的催化机理包括底物结合方式、转糖苷反应机理以及环化机理等进行了详细的讨论。 展开更多
关键词 环糊精 环糊精葡萄糖基转移酶 结构特征 催化机理 环化反应
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植物UDP-糖基转移酶生化特性和功能研究进展 被引量:29
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作者 姬向楠 何非 +1 位作者 段长青 王军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期316-323,共8页
UDP-糖基转移酶催化糖基转移反应,将糖基从活化的供体分子转移到受体分子上,从而调节受体分子在细胞和机体内的活性,如生物活性、溶解性和转运性。糖苷化是植物次生代谢较为普遍的修饰反应,在调节植物体内激素平衡、解除外源毒素毒性以... UDP-糖基转移酶催化糖基转移反应,将糖基从活化的供体分子转移到受体分子上,从而调节受体分子在细胞和机体内的活性,如生物活性、溶解性和转运性。糖苷化是植物次生代谢较为普遍的修饰反应,在调节植物体内激素平衡、解除外源毒素毒性以及次生代谢产物的合成和贮存等方面发挥重要功能。本文就与植物次生代谢产物、植物激素及生物异源物质糖苷化相关的UDP-糖基转移酶的生化特性和功能研究进展进行综述,以期为本领域相关研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 植物次生代谢 UDP-糖基转移酶 生化及分子生物学
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β-半乳糖苷酶的应用研究进展 被引量:10
5
作者 秦燕 宁正祥 胡新宇 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2000年第6期595-599,共5页
论述了采用生物技术生产半乳糖苷酶以及此酶在生物技术各个方面的应用。
关键词 Β-半乳糖苷酶 生物技术 生产 制备 应用 基因表达系统 疾病诊断 生理活性物质合成
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利用重组大肠杆菌生产α-环糊精葡萄糖基转移酶 被引量:6
6
作者 成成 李兆丰 +3 位作者 李彬 刘花 陈坚 吴敬 《生物加工过程》 CAS CSCD 2009年第3期56-63,共8页
将来源于软化类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)的α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT)基因插入含pelB信号肽的质粒pET-20b(+)中,构建了表达载体pET-20b(+)/cgt,并将其转化表达宿主E.coliBL21(DE3)。对重组菌E.coliBL21/pET-cgt进行摇瓶... 将来源于软化类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)的α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT)基因插入含pelB信号肽的质粒pET-20b(+)中,构建了表达载体pET-20b(+)/cgt,并将其转化表达宿主E.coliBL21(DE3)。对重组菌E.coliBL21/pET-cgt进行摇瓶发酵条件的优化,确定了其胞外表达α-CGT酶的最适条件:葡萄糖8 g/L,乳糖0.5 g/L,蛋白胨12 g/L,酵母膏24 g/L,K2HPO472 mmol/L,KH2PO417 mmol/L,CaC l22.5 mmol/L;初始pH为7.0,诱导温度为25℃。在该条件下培养90 h后最终α-CGT酶的胞外比活达到22.1 U/mL,与来源菌P.macerans所产天然酶比活相比提高了42倍,实现了α-CGT酶的高效生产。将基因工程菌在上述条件下于3 L发酵罐中发酵,90 h后胞外酶比活达到22.6 U/mL,证实了工业化放大的可能性。 展开更多
关键词 Α-环糊精葡萄糖基转移酶 cgt基因 大肠杆菌 克隆
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中国传统发酵豆豉水提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外实验研究 被引量:6
7
作者 陈静 程永强 +4 位作者 刘晓庆 徐海蒂 孙健 李里特 八巻幸二 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期449-453,共5页
收集全国不同地区传统发酵生产的豆豉样品,综合评价其水提物对小鼠肠道内α-葡萄糖苷酶抑制活性,分析豆豉样品中的营养功能成分,揭示不同地区生产的豆豉样品所具有降糖活性的差异。结果表明:中国传统发酵豆豉水提取物具有一定程度的α-... 收集全国不同地区传统发酵生产的豆豉样品,综合评价其水提物对小鼠肠道内α-葡萄糖苷酶抑制活性,分析豆豉样品中的营养功能成分,揭示不同地区生产的豆豉样品所具有降糖活性的差异。结果表明:中国传统发酵豆豉水提取物具有一定程度的α-葡萄糖苷酶的抑制活性,其中三种豆豉样品(万年红豆豉、美味豆豉、浏阳球哥豆豉)水提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性显著高于其他样品(p<0.05)。此外,对豆豉样品中各种营养活性成分的分析结果显示,豆豉样品水提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性与样品中糖类物质成分含量的多少密切相关,表明豆豉中存在的α-葡萄糖苷酶抑制剂可能是一种糖类物质或者具有糖链结构的成分。全国各地不同产地、来源豆豉的降糖活性的差异显示,豆豉中降血糖活性因子的产生与其发酵条件、微生物、辅料等因素均可能相关。 展开更多
关键词 豆豉 α-葡萄糖苷酶抑制 降血糖
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金属离子对鲍鱼碱性磷酸酶活力的影响 被引量:13
8
作者 廖金花 陈清西 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B08期12-15,共4页
碱性磷酸酶(ALP,EC3.1.3.1)是一种金属酶,其结构的维持和酶活性的表现均需金属离子.本文研究了几种金属离子分别对鲍鱼ALP活力的影响.结果表明,Li+,Na+和K+等正一价碱金属离子对酶活力没有任何效应;碱土金属离子Mg2+,Ca2+和Ba2+对酶有... 碱性磷酸酶(ALP,EC3.1.3.1)是一种金属酶,其结构的维持和酶活性的表现均需金属离子.本文研究了几种金属离子分别对鲍鱼ALP活力的影响.结果表明,Li+,Na+和K+等正一价碱金属离子对酶活力没有任何效应;碱土金属离子Mg2+,Ca2+和Ba2+对酶有激活作用,其激活程度依次为:Mg2+>Ca2+>Ba2+,而且Mg2+在5.0mmol/L时可以使酶活力提高267%;在过渡金属离子中,Zn2+,Mn2+,Co2+和Cu2+对酶的效应不同,Zn2+、Cu2+为抑制作用,而Co2+、Mn2+表现为激活作用;重金属离子Hg2+、Pb2+、Ag+和Cd2+对酶有抑制作用,其中Hg2+的抑制效应最强,1.0mmol/LHg2+可使酶活力抑制94%.研究Mn2+和Cu2+的抑制类型表明,Mn2+为混合型激活作用,而Cu2+对酶的抑制类型为非竞争性抑制作用,其抑制常数(KI)为0.316mmol/L. 展开更多
关键词 鲍鱼 碱性磷酸酶 活力 碱土金属离子 重金属离子 过渡金属离子
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Arthrobacter sp.No.3细菌酶转化三醇类人参皂苷Rg_1生成Rh_1的反应条件 被引量:6
9
作者 孙斯宜 宋建国 +1 位作者 鱼红闪 金凤燮 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2011年第1期1-4,共4页
为了提高Arthrobactersp.No.3 GS 0202新细菌所产人参皂苷糖苷酶水解人参三醇类皂苷Rg1生成人参三醇类皂苷Rh1的能力,采用薄层层析法和高效液相色谱法,对该菌的发酵条件及所产糖苷酶的反应条件进行了研究。结果表明,在30℃发酵条件下,... 为了提高Arthrobactersp.No.3 GS 0202新细菌所产人参皂苷糖苷酶水解人参三醇类皂苷Rg1生成人参三醇类皂苷Rh1的能力,采用薄层层析法和高效液相色谱法,对该菌的发酵条件及所产糖苷酶的反应条件进行了研究。结果表明,在30℃发酵条件下,人参皂苷酶的诱导物人参茎叶总皂苷存在下,该细菌产生较好。其粗酶的最佳反应条件为人参皂苷Rg1质量浓度0.1 mg/mL,30℃下恒温反应24 h。该菌株所产酶液与人参三醇类皂苷Rg1反应后,检测发现该酶液可将人参三醇类皂苷Rg1转化为人参三醇类皂苷Rh1。高效液相色谱法检测,该酶在最佳反应条件下,能够将20%的Rg1转化为Rh1。 展开更多
关键词 人参三醇类皂苷Rh1、Rg1 酶水解 薄层层析 高效液相色谱
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棉花不同品种叶片和纤维中蔗糖磷酸合成酶活性变化及其与糖含量的关系 被引量:6
10
作者 刘凌霄 沈法富 +3 位作者 范作晓 卢合全 谢庆恩 王元格 《中国农学通报》 CSCD 2006年第4期252-254,共3页
利用山农棕02、丰抗6号、中棉453个品种在大田栽培的条件下,研究了叶片和纤维中蔗糖磷酸合成酶活性的变化及与糖含量的关系。结果表明,在3个品种的叶片和纤维中,蔗糖磷酸合成酶活性均出现双峰,在开花当天最高,花后18d次之,整体呈下降趋... 利用山农棕02、丰抗6号、中棉453个品种在大田栽培的条件下,研究了叶片和纤维中蔗糖磷酸合成酶活性的变化及与糖含量的关系。结果表明,在3个品种的叶片和纤维中,蔗糖磷酸合成酶活性均出现双峰,在开花当天最高,花后18d次之,整体呈下降趋势;与此同时可溶性总糖和蔗糖的含量变化以及光合速率的变化也成相似的变化。3个品种中,丰抗6号蔗糖磷酸合成酶活性和含糖量最高,中棉45次之,山农棕02最低。3个品种的相应观测指标之间均呈极显著差异。 展开更多
关键词 棉花 蔗糖磷酸合成酶 糖含量 叶片 棉纤维
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新细菌转化生产人参皂苷Rg_3的条件研究 被引量:5
11
作者 吴迪 孙斯宜 +1 位作者 鱼红闪 金凤燮 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期79-83,共5页
研究了新筛选的细菌Phycicoccus sp.BXN5-13转化人参二醇类皂苷生成Rd和Rg3皂苷酶反应条件。结果表明,该细菌产生的人参皂苷酶为胞内酶,最佳产酶发酵条件为在含胰蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L、NaCl 10 g/L的培养基中加入产酶诱导物,即人... 研究了新筛选的细菌Phycicoccus sp.BXN5-13转化人参二醇类皂苷生成Rd和Rg3皂苷酶反应条件。结果表明,该细菌产生的人参皂苷酶为胞内酶,最佳产酶发酵条件为在含胰蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L、NaCl 10 g/L的培养基中加入产酶诱导物,即人参茎叶总皂苷,在35℃培养72 h。其粗酶反应最佳条件:底物质量浓度为1 mg/mL,最适pH为6,在45℃反应24 h。其发酵液与人参二醇类皂苷反应后,用薄层层析法与高效液相色谱法检测结果;其酶液将Rb1等人参二醇类皂苷,转化为人参皂苷Rd,将Rd进一步转化为人参皂苷Rg3;转化率为44%。 展开更多
关键词 人参皂苷 酶水解 薄层层析 高效液相色谱
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钙调神经磷酸酶的研究进展 被引量:16
12
作者 符民桂 唐朝枢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期157-161,共5页
钙调神经磷酸酶 (CaN)是一种受Ca2 + /钙调素调节的丝 /苏氨酸蛋白磷酸酶 ,广泛存在于哺乳动物的组织细胞中 ,作为Ca2 + 信号下游的一种效应分子 ,参与多种细胞功能的调节 .在T细胞活化的信号传导中起到调节枢纽的作用 ;在神经递质的释... 钙调神经磷酸酶 (CaN)是一种受Ca2 + /钙调素调节的丝 /苏氨酸蛋白磷酸酶 ,广泛存在于哺乳动物的组织细胞中 ,作为Ca2 + 信号下游的一种效应分子 ,参与多种细胞功能的调节 .在T细胞活化的信号传导中起到调节枢纽的作用 ;在神经递质的释放、突触可塑性方面亦有重要的调节作用 .新近的研究表明 ,CaN在心肌肥厚的发生发展中起到中心作用 .对CaN的分子结构、酶学特性、组织分布、信号传导及生物学功能方面的研究进展进行了介绍 . 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 分子结构 信号传导 去磷酸化
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核苷磷酸化酶的产酶条件优化的研究 被引量:9
13
作者 闫蓬勃 邱蔚然 丁庆豹 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第2期83-85,共3页
以鸟苷和 5 氟尿嘧啶为底物 ,乙酰短杆菌菌体为酶源酶法合成 5 氟尿苷。采用酵母浸膏培养基(酵母浸膏 4.0 % ,葡萄糖 0 .4% ,NaCl 0 .3 % ,pH7.0 ) ,较高的溶氧量 ,同时添加 0 .6 %的豆油 ,培养 12h ,产酶量可提高 30 %。
关键词 乙酰短杆菌 核苷磷酸化酶 5-氟尿苷 产酶条件
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青霉T24-2和灰绿曲霉EU7-22降解甘蔗渣产糖的研究 被引量:3
14
作者 孟庆祥 鲍思龙 +1 位作者 王冠华 邬小兵 《江西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第6期733-736,共4页
青霉T24-2(Penicilliumsp.T24-2)和灰绿曲霉EU7-22(Aspergillus glaucusEU7-22)能利用甘蔗渣进行固态发酵产纤维素酶.通过对青霉和灰绿曲霉混合培养特性的研究,确定两个菌株不适合进行混合培养产纤维素酶.分别对两个菌株产纤维素酶的条... 青霉T24-2(Penicilliumsp.T24-2)和灰绿曲霉EU7-22(Aspergillus glaucusEU7-22)能利用甘蔗渣进行固态发酵产纤维素酶.通过对青霉和灰绿曲霉混合培养特性的研究,确定两个菌株不适合进行混合培养产纤维素酶.分别对两个菌株产纤维素酶的条件进行优化,单独用青霉曲酶时糖化率为31.4%,单独用灰绿曲霉曲酶时糖化率为34.1%.对其曲酶混合糖化进行研究,当两种曲酶以1∶1比例进行混合糖化时,糖化率可达51.3%.以青霉T24-2和灰绿曲霉EU7-22的曲霉混合糖化的研究国内外还未见报道,研究结果大大提高了糖化率. 展开更多
关键词 青霉 灰绿曲霉 甘蔗渣 纤维素酶 糖化
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应用细胞透性化技术快速提取氧化葡萄糖杆菌胞内右旋糖酐糊精酶 被引量:3
15
作者 王舒 毛相朝 +3 位作者 张鲁嘉 邢艳陇 王华磊 魏东芝 《生物加工过程》 CAS CSCD 2010年第3期35-39,共5页
将细胞透性化技术应用到右旋糖酐酶的提取检测过程中,根据单因素实验和正交试验设计确定了从氧化葡萄糖杆菌(Gluconobacter oxydans)细胞中提取胞内右旋糖酐糊精酶(DDase)的最佳方法:甘氨酸(Gly)质量分数15%,Triton X-100体积分... 将细胞透性化技术应用到右旋糖酐酶的提取检测过程中,根据单因素实验和正交试验设计确定了从氧化葡萄糖杆菌(Gluconobacter oxydans)细胞中提取胞内右旋糖酐糊精酶(DDase)的最佳方法:甘氨酸(Gly)质量分数15%,Triton X-100体积分数1%,菌悬液OD600为0.5~6.0,pH为6.81,冰浴处理时间1 h,透性化试剂的提取效率可达到酶活最大值的90%以上。与超声波细胞破碎法相比,该方法条件温和,酶的释放率较高并易于大量试样的平行实验操作。 展开更多
关键词 细胞透性化 氧化葡萄糖杆菌 右旋糖酐糊精酶 甘氨酸
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巯基化合物和磷酸盐及其类似物对鲍鱼碱性磷酸酶的抑制作用 被引量:2
16
作者 洪燕飞 廖金花 +1 位作者 吴国欣 陈清西 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B08期16-19,共4页
研究二巯基苏糖醇(DTT)、巯基乙醇(ME)等巯基化合物及磷酸盐(Na2HPO4)、砷酸盐(Na2HAsO4)、酸盐(Na3WO4)和钼酸盐(Na3MoO4)对鲍鱼碱性磷酸酶(ALP)活力的影响.结果表明:这些效应物对该酶都具有明显的抑制作用,而且它们的抑制作用强度... 研究二巯基苏糖醇(DTT)、巯基乙醇(ME)等巯基化合物及磷酸盐(Na2HPO4)、砷酸盐(Na2HAsO4)、酸盐(Na3WO4)和钼酸盐(Na3MoO4)对鲍鱼碱性磷酸酶(ALP)活力的影响.结果表明:这些效应物对该酶都具有明显的抑制作用,而且它们的抑制作用强度依次为:DTT>ME;Na2HPO4>Na3WO4>Na2HAsO4>Na3MoO4.进一步研究这些效应物对该酶的抑制作用机理,表明:巯基化合(DTT、ME)均非竞争性抑制;Na2HPO4、Na2HAsO4和Na2HWO4表现为竞争性抑制;本文测定了它们的抑制常数并加于比较. 展开更多
关键词 巯基化合物 磷酸盐 鲍鱼 碱性磷酸酶 杂色鲍 底物类似物 抑制动力学
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PP1γ2对昆明小鼠精子成熟和运动性的调控作用 被引量:2
17
作者 刘芳 杨明华 +1 位作者 朱方方 李亚辉 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第6期1054-1059,共6页
【目的】PP1γ2是一种特异表达于动物睾丸和精子的蛋白磷酸酶,为精子发生、运动性获得与调控所必需的关键酶,本文对PP1γ2与昆明小鼠精子成熟和运动性调控进行研究。【方法】通过Western-blot技术,分析昆明小鼠不同条件下附睾头和附睾... 【目的】PP1γ2是一种特异表达于动物睾丸和精子的蛋白磷酸酶,为精子发生、运动性获得与调控所必需的关键酶,本文对PP1γ2与昆明小鼠精子成熟和运动性调控进行研究。【方法】通过Western-blot技术,分析昆明小鼠不同条件下附睾头和附睾尾精子中磷酸化和非磷酸化PP1γ2的蛋白质表达量,探讨磷酸酶抑制剂okadaic acid (OA)和cyliculin A (CA)对附睾头和附睾尾精子运动度的影响。【结果】附睾尾精子中磷酸化PP1γ2的蛋白水平远远高于附睾头精子的(P<0.05);db-cAMP、IBMX和Ca^(2+)不改变磷酸化PP1γ2的蛋白水平;OA和CA能显著提高附睾头和附睾尾磷酸化PP1γ2的表达水平,且能显著提高精子(尤其是附睾头的精子)运动度。【结论】PP1γ2通过磷酸化和去磷酸化作用,其酶活性发生变化,从而对昆明小鼠附睾精子成熟和运动性进行调控,即在附睾头精子中PP1γ2酶活性较高,精子运动度较低;在附睾尾精子中PP1γ2酶活性较低,精子运动度得到显著提高。 展开更多
关键词 PP1γ2 精子成熟 运动性 昆明小鼠 附睾
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过氧乙酸-TAE缓冲液对硫修饰DNA切割条件的优化 被引量:2
18
作者 梁晶丹 汪志军 +1 位作者 周秀芬 邓子新 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期5-10,共6页
用乙酸和过氧化氢反应生成的过氧乙酸(PAA)辅配三羟甲基氨基甲烷-乙酸-EDTA(TAE,pH7.5)对硫修饰DNA的切割条件进行了优化.用6 mmol/L的PAA-TAE处理硫修饰基因组和质粒DNA,30 min可使降解程度达到最大饱和.用60 mmol/L的PAA-TAE经20 h处... 用乙酸和过氧化氢反应生成的过氧乙酸(PAA)辅配三羟甲基氨基甲烷-乙酸-EDTA(TAE,pH7.5)对硫修饰DNA的切割条件进行了优化.用6 mmol/L的PAA-TAE处理硫修饰基因组和质粒DNA,30 min可使降解程度达到最大饱和.用60 mmol/L的PAA-TAE经20 h处理低熔点琼脂糖包埋的菌丝体DNA,得到最佳切割效果.用PAA-TAE验证了一株在脉冲场凝胶电泳过程中基因组DNA降解的Salmonella菌株的Dnd表型;同时验证其质粒激活降解与已经验证的Streptomyces lividans质粒激活降解一样为位点专化性硫修饰. 展开更多
关键词 硫修饰DNA 过氧乙酸-三羟甲基氨基甲烷-乙酸-EDTA 激活 DNA降解
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Cosmc和T-合酶在黏蛋白型O-聚糖合成中的重要作用及其与人类疾病的相关性 被引量:4
19
作者 巨同忠 Richard D.Cummings +1 位作者 靳嘉巍 查锡良 《生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第7期630-642,共13页
从核心1结构(Galβ1,3GalNAcα1-O-Ser/Thr,core 1 structure,T antigen)中衍生出来的黏蛋白型O-聚糖在很多生理过程中发挥重要的生物学功能。T-合酶(core 1β3-galactosyltransferase,T-synthase)是合成核心1结构的唯一糖基转移酶,它... 从核心1结构(Galβ1,3GalNAcα1-O-Ser/Thr,core 1 structure,T antigen)中衍生出来的黏蛋白型O-聚糖在很多生理过程中发挥重要的生物学功能。T-合酶(core 1β3-galactosyltransferase,T-synthase)是合成核心1结构的唯一糖基转移酶,它主要的功能是将半乳糖(Galactose)添加到GalNAcα1-Ser/Thr(Tn抗原)糖链上。但是在人体和其他脊椎动物中有活性的T-合酶的形成需要一个重要的伴侣分子Cosmc;Cosmc功能丧失将直接导致T-合酶失活,其结果是机体细胞只能合成Tn抗原以及唾液酰化Tn(sialylTn,STn,Neu5Acα2,6GalNAcα1-O-Ser/Thr)。综述目前对T-合酶和Cosmc的研究以及在人类疾病(如异常O-聚糖表达相关的Tn综合征、IgA肾病和肿瘤)发生发展中的作用。 展开更多
关键词 O-聚糖 T-合酶 分子伴侣 Cosmc Tn抗原
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荧光法快速检测乳品中碱性磷酸酶含量 被引量:3
20
作者 韩立强 惠永华 +2 位作者 朱河水 郭豫杰 杨国宇 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第4期471-472,共2页
以4-甲基伞形酮磷酸酯(4-MUP)为底物,通过荧光法检测乳制品中碱性磷酸酶的含量,并与国标法进行比较,发现荧光法批内变异系数为2.81%,批间变异系数为4.34%,精密度与国标法相似,最低检测限为0.003 U.mL-1,优于国标法;回收率100.17%,准确... 以4-甲基伞形酮磷酸酯(4-MUP)为底物,通过荧光法检测乳制品中碱性磷酸酶的含量,并与国标法进行比较,发现荧光法批内变异系数为2.81%,批间变异系数为4.34%,精密度与国标法相似,最低检测限为0.003 U.mL-1,优于国标法;回收率100.17%,准确性较好,且操作步骤简便、快速。 展开更多
关键词 荧光法 碱性磷酸酶 乳制品
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