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功能基化聚丙烯酸甲脂固定化氨基酰化酶的研究
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作者 李民勤 何炳林 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期282-286,共5页
以功能基化聚丙烯酸甲酯为载体制备固定化氨基酰化酶时,载体制备时的交联度,致孔剂用量和混合致孔剂比例均会影响酶的固定化效率。结果表明25%交联度和100%致孔剂用量制备的载体最佳。用此载体固定化氨基酰化酶可提高酶对高底物浓度、... 以功能基化聚丙烯酸甲酯为载体制备固定化氨基酰化酶时,载体制备时的交联度,致孔剂用量和混合致孔剂比例均会影响酶的固定化效率。结果表明25%交联度和100%致孔剂用量制备的载体最佳。用此载体固定化氨基酰化酶可提高酶对高底物浓度、离子强度、温度、pH、有机溶剂和蛋白质变性剂的耐受能力。用固定化酶柱式反应器连续拆分N-乙酰基-DL-苯丙氨酸,使用一个月仍可保留90%的酶活力。 展开更多
关键词 氨基酰化酶 固定化酶 功能基化 聚丙烯酸甲酯
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血清胆碱酯酶同工酶的分离及其同工酶谱
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作者 龚成新 何善述 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第2期97-101,共5页
本文建立了分离SChE同工酶的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法,较其他方法简便,分辩力高且结果更清晰。本文对ChE抑制剂,血液抗凝剂和血清貯存时间对SChE同工酶谱的影响进行了研究,同时分离检测了39例正常人和38例肝损害者的SChE同工酶谱及其... 本文建立了分离SChE同工酶的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法,较其他方法简便,分辩力高且结果更清晰。本文对ChE抑制剂,血液抗凝剂和血清貯存时间对SChE同工酶谱的影响进行了研究,同时分离检测了39例正常人和38例肝损害者的SChE同工酶谱及其各带的相对百分活性。正常人均可分出9条同工酶带,部分人有10条(46.2%)和11条(15.4%),说明中国人存在SChE群体变异。肝损害患者的SChE带2—5的活性明显减弱甚至消失,可用于临床诊断。 展开更多
关键词 血清胆碱酯酶 同工酶 分离 酶谱
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GL-7-ACA酰化酶的分离纯化及性质研究 被引量:8
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作者 周宏伟 魏中荻 +1 位作者 杨蕴刘 焦瑞身 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期196-202,共7页
CU334是高表达GL-7-ACA酰化酶工程菌,其菌悬液用超声波处理后,经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、DEAE—纤维素DE-52柱层析、Sephadex G-200凝胶过滤及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的GL-7-ACA酰... CU334是高表达GL-7-ACA酰化酶工程菌,其菌悬液用超声波处理后,经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、DEAE—纤维素DE-52柱层析、Sephadex G-200凝胶过滤及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的GL-7-ACA酰化酶蛋白,纯化了22倍,得率4.0%,比活力为13.8U/mg。用浓度梯度PAGE测得GL-7-ACA酰化酶的分子量为134kD,用SDS-PAGE测得两个亚基分子量分别为15.5kD和58.4kD。用PI法测得等电点为3.5。GL-7-ACA酰化酶反应最适pH为7.0。反应最适温度为37℃,GL-7-ACA酰化酶对底物GL-7-ACA的K_m值为0.50mmol/L,V_(max)为13.10U·mg^(-1)。Ca^(2+)、EDTA和巯基乙醇对该酶有激活作用,Cu^(2+)、Fe^(2+)和Mg^(2+)等有一定程度的抑制作用。产物7-ACA、戊二酸均为GL-7-ACA酰化酶的反竞争性抑制剂,其K_1值分别为16.58mmol·L^(-1)和9.88mmol·L^(-1)。 展开更多
关键词 酰化酶 GL-7-ACA酰化酶 纯化 性质
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高效液相色谱法检测乙酰基转移酶表型
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作者 李倩 曹建湘 +2 位作者 苏敬东 尹松年 毕文芳 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期261-263,共3页
介绍了一种快速、简便的乙酰基转移酶表型的检测方法。口服100mg氨苯砜后3小时采血,用灵敏、特异的高效液相色谱法(分离柱:Spherisorb○RODS-C18)分别检测血浆中氨苯砜(DDS)及其乙酰化代谢产物单乙酰... 介绍了一种快速、简便的乙酰基转移酶表型的检测方法。口服100mg氨苯砜后3小时采血,用灵敏、特异的高效液相色谱法(分离柱:Spherisorb○RODS-C18)分别检测血浆中氨苯砜(DDS)及其乙酰化代谢产物单乙酰氨苯砜(MAD)的浓度,流动相为水∶乙腈∶冰乙酸=1060∶300∶25,紫外检测波长254nm时分离检测效果最好。DDS和MAD的平均回收率为84.5%和90.3%,最小检出浓度分别为0.001mg/L和0.01mg/L。 展开更多
关键词 乙酰基转移酶 表型 高效液相色谱 氨苯砜
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荧光法测定微生物转谷氨酰胺酶的探讨 被引量:1
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作者 秦昉 王利平 《郑州粮食学院学报》 1999年第1期32-34,共3页
讨论了荧光法测定微生物TGase的条件,对反应体系中MDC的浓度、反应时间、DTT的浓度、硫铵的浓度、酶浓度等因素与体系荧光强度的关系进行了探讨,得出30μmol/LMDC1.0mL,2.29mg/mLDMC1.0m... 讨论了荧光法测定微生物TGase的条件,对反应体系中MDC的浓度、反应时间、DTT的浓度、硫铵的浓度、酶浓度等因素与体系荧光强度的关系进行了探讨,得出30μmol/LMDC1.0mL,2.29mg/mLDMC1.0mL,5.5mmol/LDTT0.3mL,加入一定量酶样品,37℃反应30min后用1mol/L硫铵溶液01mL灭活,测定体系在360nm激发光下,530nm处的荧光强度值,以此作为定量的依据。 展开更多
关键词 转谷氨酰胺酶 丹磺尸胺 硫酸铵 荧光法 微生物
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