紫丁香、糖槭总RNA的快速提取方法 被引量：18

1

作者 王玉成 杨传平 姜静 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期90-91,共2页

以酸酚提取RNA的基本原理为基础 ,应用硼砂·CTAB·酸酚法和SDS·酸酚法两种方法成功地提取了紫丁香、糖槭的总RNA ,与常用的异硫氰酸胍方法比较 ,这两种方法具有快速。

关键词 紫丁香 糖槭 RNA 提取方法 硼矿·CTAB·酸酚法 SDS·酸酚法

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改进SDS-Phenol法快速提取细胞总RNA 被引量：16

2

作者 吴丽娟 黎燕 +1 位作者 胡美茹 沈倍奋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期57-59,共3页

目的：比较改进ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法与常用的ＡＧＰＣ法提取细胞之总ＲＮＡ优缺点。方法：同时采用两种方法对同批稳定培养的一株淋巴瘤细胞系进行总ＲＮＡ提取，以收获ＲＮＡ的产量和纯度为比较指标，并用甲醛变性电泳验证ＳＤＳ－... 目的：比较改进ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法与常用的ＡＧＰＣ法提取细胞之总ＲＮＡ优缺点。方法：同时采用两种方法对同批稳定培养的一株淋巴瘤细胞系进行总ＲＮＡ提取，以收获ＲＮＡ的产量和纯度为比较指标，并用甲醛变性电泳验证ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法提取ＲＮＡ的完整性。结果：改进ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法可从１×１０４细胞中提取（１．９３±０．２０）μｇ的总ＲＮＡ，是ＡＧＰＣ法的两倍以上。细胞数在１×１０５～１００×１０５范围内时其ＲＮＡ产量与细胞数量呈线性相关。５×１０５以上细胞所提取的ＲＮＡ，Ａ２６０／２８０在１．７８～１．８３之间，无蛋白质，纯度平均在９０％以上，甲醛变性电泳示ＲＮＡ完整无降解。５×１０６细胞可收获ＲＮＡ（５５．３４±３．０２）μｇ，变异系数５．４５％。结论：改进ＳＤＳ－Ｐｈｅｎｏｌ法优于ＡＧＰＣ法，有快速、简便和高效的特点，值得推广应用。 展开更多

关键词 RNA 提取 SDS-Phemol法

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芍药花瓣总RNA的提取 被引量：17

3

作者 黄凤兰 李长海 +2 位作者 孙婷婷 高秀琴 胡宝忠 《生物技术通讯》 CAS 2005年第3期282-283,共2页

用TRIzol法和改良的热硼酸盐法从芍药幼嫩花瓣中提取总RNA,总RNA的D260nm/D280nm值分别为1.803、1.974。琼脂糖电泳表明,用TRIzol法提取的RNA只有28S、18S2条带,带的亮度差,说明RNA有些降解;而用改良的热硼酸盐法提取的总RNA有28S、18S... 用TRIzol法和改良的热硼酸盐法从芍药幼嫩花瓣中提取总RNA,总RNA的D260nm/D280nm值分别为1.803、1.974。琼脂糖电泳表明,用TRIzol法提取的RNA只有28S、18S2条带,带的亮度差,说明RNA有些降解;而用改良的热硼酸盐法提取的总RNA有28S、18S、5S3条带,带的亮度强,且28S是18S宽度的2倍左右,说明提取的RNA完整、未降解,可用于后续实验。改良的热硼酸盐法更适于从芍药花瓣中提取总RNA。 展开更多

关键词 总RNA 提取 花瓣 芍药 琼脂糖电泳 酸盐法 28S 18S 改良 亮度差 条带 降解

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从小鼠不同组织有效提取总RNA的一种简单方法 被引量：7

4

作者 宋军 张鸣镝 +3 位作者 张学 金春莲 孙开来 唐小任 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1995年第2期143-145,共3页

从小鼠不同组织有效提取总ＲＮＡ的一种简单方法宋军，张鸣镝，张学，金春莲，孙开来（中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室）唐小任（日本筑波理化学研究所ＤＮＡ银行）关键词总ＲＮＡ；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹在研究动物的基因及某... 从小鼠不同组织有效提取总ＲＮＡ的一种简单方法宋军，张鸣镝，张学，金春莲，孙开来（中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室）唐小任（日本筑波理化学研究所ＤＮＡ银行）关键词总ＲＮＡ；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹在研究动物的基因及某些人类遗传病基因的过程中，常需分析... 展开更多

关键词 总RNA NORTHERN印迹 RNA 提取

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三种改良提取长雄野生稻根叶总RNA方法的比较研究 被引量：6

5

作者 林海妹 郭安平 +3 位作者 王晓玲 郭运玲 孔华 贺立卡 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第1期204-208,共5页

为探讨野生稻总RNA的提取,笔者尝试了改良SDS、CTAB和TRIzol三种提取方法分别提取长雄野生稻根和叶总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和分光光度计检测,比较这三种方法的提取效果。结果表明,改良SDS、CTAB法提取的根总RNA的电泳条带清晰,几乎没... 为探讨野生稻总RNA的提取,笔者尝试了改良SDS、CTAB和TRIzol三种提取方法分别提取长雄野生稻根和叶总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和分光光度计检测,比较这三种方法的提取效果。结果表明,改良SDS、CTAB法提取的根总RNA的电泳条带清晰,几乎没有污染,无明显降解,OD260/OD280在1.75～2.0之间,能满足一般的分子操作要求,但所提取的叶片总RNA则有明显的DNA污染和少量的蛋白质污染。用TRIzol法提取的总RNA,无论是根还是叶片,均有不同程度蛋白质污染。若要进行下一步的分子操作,需先进行RNA的纯化,以去除蛋白质。可见改良SDS、CTAB法提取根的总RNA是首选。 展开更多

关键词 总RNA 长雄野生稻 提取方法 电泳

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真核生物mRNA差显技术(Differential Display)的研究进展 被引量：12

6

作者 李玉京 李子银 李振声 《生物技术通报》 CAS CSCD 1998年第5期23-30,共8页

真核生物ｍＲＮＡ差显技术（ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌＤｉｓｐｌａｙ）的创立及其对该技术的一系列改进，为研究与生殖、发育、细胞分化、癌变、病变、衰老、程序化死亡及抗逆性与抗病性等生命过程有关的基因的差异表达，以及有关基因的... 真核生物ｍＲＮＡ差显技术（ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌＤｉｓｐｌａｙ）的创立及其对该技术的一系列改进，为研究与生殖、发育、细胞分化、癌变、病变、衰老、程序化死亡及抗逆性与抗病性等生命过程有关的基因的差异表达，以及有关基因的分子克隆提供了有效工具。本文简要概述差显技术的原理、优越性、主要缺陷、技术改进等方面的研究进展。 展开更多

关键词 真核生物 MRNA 差别显示 CDNA-AFLP cDNA-RFLP

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酸苯酚萃取总RNA方法的改进 被引量：5

7

作者 张琚 冯剑利 +2 位作者 赵洪 于自然 陈林锋 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期127-128,共2页

目前提取总ＲＮＡ普遍使用的是酸苯酚萃取法（或称硫氰酸胍法）．此法所提取的ＲＮＡ中存有少量基因组ＤＮＡ的污染．为了克服这一缺点，我们对酸苯酚提取ＲＮＡ的方法进行了改进．即先用酸苯酚萃取，然后用蛋白酶Ｋ消化，再次酸苯酚萃取．

关键词 RNA 酸苯酚 萃取 蛋白酶K消化

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小麦不同器官总RNA含量及提取方法的比较研究 被引量：7

8

作者 于秀梅 康振生 +1 位作者 崔素萍 赵杰 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第10期29-32,共4页

采用4种方法分别对小麦幼叶、幼茎、幼根及乳熟期籽粒的总RNA进行了提取和分析.结果表明,4种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作,其中TRIzol法提取的总RNA产量最高,用该法提取的小麦叶片总RNA产量为其他方法的2～4倍;天为时代试... 采用4种方法分别对小麦幼叶、幼茎、幼根及乳熟期籽粒的总RNA进行了提取和分析.结果表明,4种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作,其中TRIzol法提取的总RNA产量最高,用该法提取的小麦叶片总RNA产量为其他方法的2～4倍;天为时代试剂盒提取时间短,可在常温下操作;而醋酸钠/乙醇沉淀法具有提取步骤少、操作时间短、可用于大量样品提取且价格便宜等优点,适于小麦不同器官的总RNA提取;经紫外分光光度计检测,各样品总RNA的A260/A280均在1.88～2.09,表明所提取的总RNA中没有蛋白质及其他有机溶剂的污染,且A260/A230在1.89～2.41,表明盐类小分子的污染也较少,所提取的总RNA质量较高.除了细胞质rRNA外,小麦中还存在叶绿体rRNA,且叶绿体rRNA占总rRNA的比例较高,在甲醛变性琼脂糖凝胶电泳时,幼叶、幼茎比幼根明显多出2条带. 展开更多

关键词 小麦 总RNA含量 提取方法

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一种植物总RNA的快速提取方法 被引量：7

9

作者 刘芬 于秀梅 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页

为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiqui... 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。 展开更多

关键词 植物 总RNA提取 持家基因 小麦 RT—PCR

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介绍一种简便的RNA分离制备方法 被引量：16

10

作者 刘西平 袁恬莹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第1期65-66,69,共3页

用酸性异硫氰酸胍-苯酚-氯仿混合物,从人外周血白细胞、组织培养的细胞株及人胚组织中分离制备总RNA,所得产品纯度高,未降解,方法简便,可以同时操作较多的样品。此法确是一种较好的RNA分离制备方法,值得推广。

关键词 RNA 分离 制备 异硫氰酸胍

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RNA快速提取一步法的建立 被引量：10

11

作者 梁德勇 徐国恒 +3 位作者 崔振中 王晓民 朱丽霞 韩济生 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第5期461-463,共3页

关键词 RNA提取 快速提取 一步法

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钙调素mRNA和蛋白在水稻花药和雌蕊发育过程中的原位定位 被引量：5

12

作者 陈绍荣 韩红梅 +1 位作者 吕应堂 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第12期1087-1092,共6页

利用ＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学定位技术分别检测了钙调素ｍＲＮＡ和钙调素蛋白在水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）花药和雌蕊发育过程中的时空分布特征。钙调素基因在绒毡层、柱头、花粉管生长途径、退化助细胞以及维管薄壁细胞... 利用ＲＮＡ原位杂交和免疫组织化学定位技术分别检测了钙调素ｍＲＮＡ和钙调素蛋白在水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）花药和雌蕊发育过程中的时空分布特征。钙调素基因在绒毡层、柱头、花粉管生长途径、退化助细胞以及维管薄壁细胞中大量表达，也可在小孢子母细胞、小孢子、花粉、反足细胞、卵细胞以及中央细胞中检测到。钙调素基因的表达强度随不同的发育阶段而变化：花药发育早期表达强，以后逐渐减弱并向特定部位集中，如绒毡层和花粉萌发孔等。胚胎发育早期，钙调素基因在胚乳细胞中的表达比原胚中强，而后期则在分化胚中比胚乳细胞中强。推测在有性生殖过程中，钙调素可能通过Ｃａ２＋ＣａＭ信号途径调节小孢子发育、花粉萌发、花粉管生长。 展开更多

关键词 水稻 花药 雌蕊 钙调素 原位定位

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用T7RNA聚合酶体外转录合成大鼠肝tRNA^(Ile) 被引量：3

13

作者 张璐 钟雄霖 +1 位作者 彭朝晖 徐钤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第1期78-82,共5页

采用PCR技术从rec M1 3mp1 8中扩增出 1 2 0bp的大鼠肝tRNAIle合成基因片段 ,经限制性内切酶BstNⅠ酶切后作为模板 ,利用T7RNA聚合酶在体外无细胞体系转录由T7启动子带动的大鼠肝tRNAIle基因 ,生成不含修饰碱基的tRNAIle,并对体外转录... 采用PCR技术从rec M1 3mp1 8中扩增出 1 2 0bp的大鼠肝tRNAIle合成基因片段 ,经限制性内切酶BstNⅠ酶切后作为模板 ,利用T7RNA聚合酶在体外无细胞体系转录由T7启动子带动的大鼠肝tRNAIle基因 ,生成不含修饰碱基的tRNAIle,并对体外转录反应条件进行了优化 ,回收的tRNA产量可达DNA模板量的 4 展开更多

关键词 TRNA T7 RNA聚合酶 体外转录

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一种快速mRNA差异显示技术及用于分离辐射诱导转录子 被引量：8

14

作者 周平坤 孙国敬 +1 位作者 隋建丽 孙志贤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期622-625,共4页

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速ｍＲＮＡ差异显示技术．其特点是不用同位素标记，操作简便，在普通琼脂糖凝胶电泳中就能分辨差异显示的ｃＤＮＡ带，便于ＤＮＡ回收和进一步重组克隆．用此方法成功... 介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速ｍＲＮＡ差异显示技术．其特点是不用同位素标记，操作简便，在普通琼脂糖凝胶电泳中就能分辨差异显示的ｃＤＮＡ带，便于ＤＮＡ回收和进一步重组克隆．用此方法成功地分离到电离辐射诱导转录子． 展开更多

关键词 MRNA差异显示 转录子 分离辐射诱导

原文传递

五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较 被引量：2

15

作者 杨平 陈慧娟 +3 位作者 钟文英 邓未 黄杰 李敏惠 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2011年第4期242-246,共5页

为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过... 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高，OD260／OD280=2．093±0．264，RNA浓度为（0．134±0．021）μg／μL，RNA制备效率为（26．76±4．10）μg／g菌丝体，并且该方法操作简便，重复性最好，是制备P．guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。 展开更多

关键词 贵阳腐霉Pythium guiyangense 破壁 总RNA

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一种新铁炮百合花瓣总RNA的提取方法 被引量：2

16

作者 和凤美 朱永平 王博 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第6期1231-1236,共6页

本研究以新铁炮百合花瓣为材料,采用非异硫氰酸胍提取法、一步快速热酚抽提法、Trizol试剂法、天为时代植物RNA抽提试剂盒法、Trizol试剂法与天为时代的植物RNA抽提试剂盒相结合的改良法,提取花瓣总RNA。结果表明:Trizol试剂法与天为时... 本研究以新铁炮百合花瓣为材料,采用非异硫氰酸胍提取法、一步快速热酚抽提法、Trizol试剂法、天为时代植物RNA抽提试剂盒法、Trizol试剂法与天为时代的植物RNA抽提试剂盒相结合的改良法,提取花瓣总RNA。结果表明:Trizol试剂法与天为时代的植物RNA提试剂盒相结合的改良法是一种经济、有效的新铁炮百合花瓣总RNA的提取方法,能有效地抑制酚类物质、多糖等次生代谢产物对RNA的影响,可从新铁炮百合花瓣中获得质量高、完整性好的总RNA。提取的RNA经紫外光谱分析表明:A260/A280比值为1.722,电泳检测到28SRNA、18SRNA清晰的条带。反转录后双链cDNA的分子量大小分布区间介于0.1～5.0kb之间,符合植物基因cDNA的长度范围,可满足下一步的分子实验。 展开更多

关键词 新铁炮百合 RNA提取方法 花瓣

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细胞内RT-PCR法测定TNFαmRNA 被引量：1

17

作者 李树新 库宝善 +1 位作者 李昌龙 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期273-274,共2页

细胞内ＲＴ┐ＰＣＲ法测定ＴＮＦαｍＲＮＡ李树新库宝善李昌龙１林志彬（北京医科大学药理学系，北京１０００８３）１９９６－０８－１６收稿１９９７－０３－１２修回１卫生部老年医学研究所生化室，北京作者简介：李树新，男，３０... 细胞内ＲＴ┐ＰＣＲ法测定ＴＮＦαｍＲＮＡ李树新库宝善李昌龙１林志彬（北京医科大学药理学系，北京１０００８３）１９９６－０８－１６收稿１９９７－０３－１２修回１卫生部老年医学研究所生化室，北京作者简介：李树新，男，３０岁，现在美国进修学习；库宝善，男，... 展开更多

关键词 细胞内 RT-PCR 肿瘤坏死因子 MRNA

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mRNA差别显示技术及其在生命科学中的应用 被引量：1

18

作者 徐国恒 凌雁 +1 位作者 万有 王晓民 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期19-23,共5页

ｍＲＮＡ表达水平的变化决定细胞的功能状态。个体发育、细胞增殖分化与凋谢、生理刺激和药物治疗等过程，都会出现ｍＲＮＡ表达水平的变化。阐明这种变化有助于揭示细胞生理过程的分子机制。新近发展起来的ｍＲＮＡ差别显示技术为此提... ｍＲＮＡ表达水平的变化决定细胞的功能状态。个体发育、细胞增殖分化与凋谢、生理刺激和药物治疗等过程，都会出现ｍＲＮＡ表达水平的变化。阐明这种变化有助于揭示细胞生理过程的分子机制。新近发展起来的ｍＲＮＡ差别显示技术为此提供了强有力的工具。该技术无需更多的背景资料，可快速有效地分离表达水平出现差别的基因。 展开更多

关键词 MRNA差别显示 生命科学 方法技术

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异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取组织中的RNA 被引量：15

19

作者 王尧河 张云汉 +8 位作者 卞丽红 王宏 郑宇 李春海 张立新 付淑莉 高冬玲 张宏新 付保进 《河南医科大学学报》 1997年第3期25-27,共3页

为寻找一种简便、低消耗、提取高质量ＲＮＡ的方法，基于异硫氰酸胍酚氯仿一步法，省去变性液Ｄ二次溶解ＲＮＡ提取组织中的ＲＮＡ。结果：从２００多例肿瘤组织中提取出高质量的ＲＮＡ，所需费用与购买试剂盒相比节约了７５％。结... 为寻找一种简便、低消耗、提取高质量ＲＮＡ的方法，基于异硫氰酸胍酚氯仿一步法，省去变性液Ｄ二次溶解ＲＮＡ提取组织中的ＲＮＡ。结果：从２００多例肿瘤组织中提取出高质量的ＲＮＡ，所需费用与购买试剂盒相比节约了７５％。结果提示：异硫氰酸胍酚氯仿一步法是一种简便、经济、适合大量样本的ＲＮＡ提取方法。 展开更多

关键词 提取 RNA 异硫氰酸胍 酚 氯仿 肿瘤

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影响RNA提取质量的因素分析 被引量：12

20

作者 宗成志 左欣欣 严海燕 《广西农学报》 2011年第1期31-34,共4页

RNA提取技术已经成为分子生物学中一个基本技术。教学和有一定特殊要求的科学研究需要透彻了解影响RNA提取的详细因素。细节对RNA提取的质量至关重要。本文对CTAB法提取RNA的全过程中各种影响因子进行了分析:CTAB法可以被用于RNA的提取;... RNA提取技术已经成为分子生物学中一个基本技术。教学和有一定特殊要求的科学研究需要透彻了解影响RNA提取的详细因素。细节对RNA提取的质量至关重要。本文对CTAB法提取RNA的全过程中各种影响因子进行了分析:CTAB法可以被用于RNA的提取;在CTAB提取缓冲中的温育时间以及机械摇动力是影响所提RNA质量的两个主要因素;合适的温育时间是65℃5min;轻柔地将组织与CTAB提取缓冲液充分混合可以避免DNA的污染;采用此方法进行实验可在在酚抽提的步骤停下,同时不影响RNA的质量,给实验安排带了灵活性。这是一个用于一般实验室的简单便宜的方法。 展开更多

关键词 RNA提取 聚乙烯基吡咯烷酮 十六烷基三甲基溴化铵 加热时间 酚/氯仿—异戊醇

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