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西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白表型和基因突变分析 被引量:1
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作者 许楠 郭智 +2 位作者 梁亮 耿燕 李友琼 《现代检验医学杂志》 2025年第1期13-16,23,共5页
目的 了解西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白的突变谱和表型。方法 选取2022年1~12月西安交通大学第二附属医院就诊的30 356例患者,采用高效液相色谱法检测糖化血红蛋白Hb A1c,当提示有异常峰时,同时进行血细胞检测分析和血红蛋白分析... 目的 了解西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白的突变谱和表型。方法 选取2022年1~12月西安交通大学第二附属医院就诊的30 356例患者,采用高效液相色谱法检测糖化血红蛋白Hb A1c,当提示有异常峰时,同时进行血细胞检测分析和血红蛋白分析,最后Sanger法进行DNA序列分析。结果 西安地区糖尿病筛查人群的异常血红蛋白检出率为0.092%(28/30 356)。共检出7种异常血红蛋白28例,分别为Hb E(10例)、Hb G-Coushatta(6例)、Hb G-Taibei(6例)、Hb Q-Thailand(2例)、Hb North Manchester(2例)、Hb Ottawa(1例)和Hb Queens(1例)。其中1例是Hb GTaibei并发IVS Ⅱ-659_664 (-GCAATA),为首次世界报道。有7例Hb E血液学表型改变外,其他异常血红蛋白表型是正常的。除了Hb G-Coushatta和Hb Ottawa未见干扰糖化检测外,其他5种异常血红蛋白均影响了糖化检测结果。结论 西安地区糖尿病筛查人群存在一定的异常血红蛋白携带,以Hb E,Hb G-Taibei,Hb G-Coushatta为主。绝大部分异常血红蛋白的血液学表型是正常的,但是它们会干扰Hb A1c检测结果。 展开更多
关键词 西安地区 异常血红蛋白 高效液相色谱法 糖化血红蛋白
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外泌体分离技术研究进展
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作者 李帅 刘亚婷 仰大勇 《化学学报》 北大核心 2025年第4期428-438,共11页
外泌体是来源于母细胞的小细胞外囊泡,包裹有核酸、蛋白等内容物,能够动态实时地反映母细胞的生理病理状态,因此在药物递送、疾病诊断和治疗等生物医学领域有广泛的应用.外泌体应用的第一步是分离和纯化,不管是从血液、唾液等体液还是... 外泌体是来源于母细胞的小细胞外囊泡,包裹有核酸、蛋白等内容物,能够动态实时地反映母细胞的生理病理状态,因此在药物递送、疾病诊断和治疗等生物医学领域有广泛的应用.外泌体应用的第一步是分离和纯化,不管是从血液、唾液等体液还是细胞培养上清中获取外泌体,都需要对其进行分离纯化,以去除不需要的杂质.基于外泌体的尺寸、密度、电荷、组成,已经开发出了诸多分离方法,比如超速离心、超滤、尺寸排阻色谱、聚合物沉淀、免疫亲和等,这些传统的分离方法已经非常成熟,尤其是超速离心,被誉为是外泌体分离的金标准,为广大研究者所接受.然而这些方法在分离纯度、效率、处理量、操作便捷性等方面各有优缺点,因此将多种分离方法联用是一种新思路.此外,随着化学、材料学、生物学、医学、工程学、机械学等学科的发展和交叉,越来越多新兴的技术被开发出来,比如微流控法、基于流体流动原理分离、热泳法、脂质识别分离、DNA适配体亲合法等,在一定程度上提高了外泌体的分离效率和纯度.在本综述中,详细总结了传统分离方法和新兴分离方法的最新进展,并对未来发展进行了展望,以期促进该领域的发展,推动外泌体技术的产业化. 展开更多
关键词 外泌体 外泌体分离 细胞外囊泡 微流控 DNA适配体
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流式细胞术检测精子HSPA2方法初步建立及对体外受精低受精率的预测价值研究
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作者 梁晓东 冯敏怡 +3 位作者 莫淦文 纪鹏 骆强翔 郭江华 《现代检验医学杂志》 2025年第5期149-152,共4页
目的建立精子热休克蛋白A2(HSPA2)流式细胞检测法,并探索精子HSPA2的表达水平在预测体外受精(IVF)低受精率的作用。方法采用间接免疫荧光法(IIF)原理对精子HSPA2进行荧光染色,精子样本经透膜和封闭后,依次加入兔抗人HSPA2抗体(一抗)和... 目的建立精子热休克蛋白A2(HSPA2)流式细胞检测法,并探索精子HSPA2的表达水平在预测体外受精(IVF)低受精率的作用。方法采用间接免疫荧光法(IIF)原理对精子HSPA2进行荧光染色,精子样本经透膜和封闭后,依次加入兔抗人HSPA2抗体(一抗)和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的山羊抗兔IgG抗体(二抗)作为检测管,同时设立不加一抗的样本作为对照管,并用流式细胞仪(FCM)分别测定两管的阳性率,计算检测管的阳性率与对照管的比值(阳性率比值)。使用棋盘法对最适合检测的精子数、一抗及二抗最适工作稀释度进行探索。在最优条件下,分别评估方法的重复性、线性范围和参考值范围,从而初步建立流式细胞术检测精子HSPA2表达水平的方法。方法建立后,进一步对2023年在江门市中心医院生殖医学中心的IVF患者夫妇的精子样本共85例进行初步检测,比较IVF受精成功组(n=63)与低受精率组(n=22)患者的HSPA2阳性率比值,用受试者工作特征(ROC)曲线分析界值。结果对照管中的HSPA2阳性率较低,显示出较低的背景信号,而检测管荧光信号明显增强,提示此法能有效检测HSPA2。棋盘法确定的最适合检测的精子数为2×106,一抗及二抗最适工作稀释度分别为1∶300和1∶400。重复性及线性范围评估显示方法学性能较好。对IVF受精成功组和低受精率组的对比分析显示,低受精率组的精子HSPA2阳性率比值(6.19±4.07)低于受精成功组(10.69±8.26),差异具有统计学意义(t=2.446,P<0.05)。ROC曲线和Youden指数显示,阳性率比值的界值为5.5067时达到最佳预测效能,此时的敏感度和特异度分别为71.4%,55.5%。结论成功建立了精子HSPA2的流式细胞术检测法,通过此法检测的精子HSPA2表达水平提示其对IVF低受精率有预测价值,为今后临床科学选择受精方式提供了依据。 展开更多
关键词 热休克蛋白A2 流式细胞术 体外受精 低受精率 精子
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便捷式数字化等温扩增微流控芯片 被引量:1
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作者 张中平 曾佑鸿 +7 位作者 苗桂君 周奕杰 张毅泽 李天伟 刘凌轩 袁雅潭 张璐璐 邱宪波 《生物工程学报》 北大核心 2025年第5期2167-2178,共12页
本研究旨在开发一种低成本、便携式且绝对定量的数字核酸检测芯片,以解决现有数字核酸检测方法成本高、样本损失、操作复杂和对设备依赖性强等问题。为此,进行了一种创新的芯片设计:通过流体通道与真空通道的解耦和分离,采用分形结构设... 本研究旨在开发一种低成本、便携式且绝对定量的数字核酸检测芯片,以解决现有数字核酸检测方法成本高、样本损失、操作复杂和对设备依赖性强等问题。为此,进行了一种创新的芯片设计:通过流体通道与真空通道的解耦和分离,采用分形结构设计流体通道,实现了样本的高效自动分配和100%的样本利用率;同时,设计的真空通道有效解决了分形结构芯片在预脱气和负压维持方面的难题,无需预先进行耗时的脱气操作,使检测可随时进行。此外,基于黑色聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)材料开发的数字重组酶聚合酶扩增(digital recombinase polymerase amplification,dRPA)芯片,展现出优异的光学成像能力和强大的抗背景荧光干扰能力,为光学检测提供了理想平台。本研究还提出了一种新的防蒸发策略,通过水溶液包围每个微室防止试剂蒸发,进一步优化了检测性能。最终,本研究成功开发出一种便携式的dRPA核酸检测解决方案,仅需简单的手动操作和智能手机即可完成检测。该方案不仅保留了简单、低成本、可扩展性和绝对定量的优势,还显著提高了检测的便捷性和实用性,为便携式核酸检测的广泛应用奠定了基础。这种创新的检测方案有望在资源有限的环境中实现快速、准确的核酸检测,推动现场快速诊断技术的发展。 展开更多
关键词 便捷检测 数字重组酶聚合酶扩增 微室芯片 改色处理 真空进样
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噬菌体免疫沉淀测序技术研究进展 被引量:1
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作者 朱宇浩 朱文龙 +2 位作者 赖妤婕 张梦佳 李文涛 《生物工程学报》 北大核心 2025年第8期2987-3007,共21页
噬菌体免疫沉淀测序技术(phage immunoprecipitation sequencing,PhIP-Seq)是一种高通量、低成本分析目标蛋白与肽库特异性结合的方法。该方法使用寡核苷酸文库合成(oligonucleotide library synthesis,OLS)来编码蛋白质组规模的肽库以... 噬菌体免疫沉淀测序技术(phage immunoprecipitation sequencing,PhIP-Seq)是一种高通量、低成本分析目标蛋白与肽库特异性结合的方法。该方法使用寡核苷酸文库合成(oligonucleotide library synthesis,OLS)来编码蛋白质组规模的肽库以展示在噬菌体上,然后使用目标蛋白(抗体等)对这些文库噬菌体进行免疫沉淀,以便随后通过高通量DNA测序进行分析。通过PhIP-Seq可以筛选出与数百种蛋白质或病原体特异性反应的肽靶标。PhIP-Seq已成功应用于疾病检测、自身免疫性疾病生物标志物的筛选、疫苗开发和过敏原检测等领域,是一项重要的高通量诊断技术。本文系统地阐述了噬菌体免疫沉淀测序的发展、应用和结果评估,有助于研究人员更全面地了解该技术在各领域的应用和未来发展的前景。 展开更多
关键词 噬菌体免疫沉淀测序 肽库 诊断技术 疫苗开发
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米根霉全细胞催化油脂及其衍生物环氧化
6
作者 赵晴晴 许丽莉 +3 位作者 蔡小小 李青云 唐爱星 刘幽燕 《广西大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期1099-1110,共12页
为了研究油脂在塑料制造中的潜在应用价值,以米根霉(Rhizopus oryzae)CGMCC 3.5040全细胞为催化剂,采用化学酶法生产环氧油脂。本文考察了不同溶剂处理细胞对酶活的影响;研究了不同酶量下油脂及其衍生物环氧化的可行性;并对溶剂体系、... 为了研究油脂在塑料制造中的潜在应用价值,以米根霉(Rhizopus oryzae)CGMCC 3.5040全细胞为催化剂,采用化学酶法生产环氧油脂。本文考察了不同溶剂处理细胞对酶活的影响;研究了不同酶量下油脂及其衍生物环氧化的可行性;并对溶剂体系、温度、过氧化氢用量以及反应时间进行优化以提高油酸甲酯环氧化效率;最后,对比了不同增塑剂配方对应的材料力学性能。结果证明,经丙酮处理后的米根霉全细胞,其脂肪酶活力高达395.48 U/g。在丙酮处理细胞的基础上,对油酸甲酯环氧化反应条件进行了优化,在米根霉用量为200 U/g、过氧化氢与油酸甲酯的物质的量比为2∶1、反应温度为35℃时,无溶剂体系中油酸甲酯反应16 h后,取得了最佳效率,转化率达到94.69%,环氧值为5.24%。此外,PVC-MEM 60的共混物拉伸强度为10.28 MPa,断裂伸长率为300.54%,弹性模量为51.82 MPa。 展开更多
关键词 米根霉 环氧油脂 环氧化反应 化学酶法 增塑剂
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CALB@IRMOF-1催化α-蒎烯环氧化的研究
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作者 赵婷 李青云 +2 位作者 陈冬玲 刘幽燕 唐爱星 《广西大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期1111-1121,共11页
为了探究IRMOF-1固定化酶的环氧化效果,以MOF材料(IRMOF-1)为载体,通过1乙基(3二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide,EDC]交联成功制备固定化酶CALB@IRMOF-1,并探究不同固定化因素及环氧化因素... 为了探究IRMOF-1固定化酶的环氧化效果,以MOF材料(IRMOF-1)为载体,通过1乙基(3二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide,EDC]交联成功制备固定化酶CALB@IRMOF-1,并探究不同固定化因素及环氧化因素对固定化酶催化α-蒎烯的影响。结果表明:CALB@IRMOF-1固定化的最优组合方案为交联剂EDC浓度为0.18 mol/L,交联时间为5 h,酶质量浓度为0.5 g/L,硫酸铵质量分数为50%。以叔丁醇溶剂单相体系替代传统有机相水相双相体系加强反应的相间传质,在过氧化氢的浓度为0.5 mol/L、乙酸乙酯的浓度为3.0 mol/L、CALB@IRMOF-1的浓度为7.5 g/L的最优反应条件下,CALB@IRMOF-1环氧化α-蒎烯的转化率、收率分别达到100.0%、97.3%。 展开更多
关键词 Α-蒎烯 环氧化 金属有机框架化合物 固定化酶 单相体系
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基于稀土掺杂上转换纳米材料的DNA传感器在生物检测中的研究进展
8
作者 郭文 白安琪 +6 位作者 赵伟馨 武玥 许琳琳 彭微 罗利霞 李淑荣 孟佩俊 《分析科学学报》 北大核心 2025年第5期589-599,共11页
稀土掺杂上转换纳米材料(REEs-UCNPs)是一种具有上转换发光性质的新型纳米荧光材料,因具有良好的生物相容性和较低的细胞毒性,其在生物传感中表现出独特的应用潜力。脱氧核糖核酸(DNA)具有可编程性和可寻址性,利用结构多样性的DNA与光... 稀土掺杂上转换纳米材料(REEs-UCNPs)是一种具有上转换发光性质的新型纳米荧光材料,因具有良好的生物相容性和较低的细胞毒性,其在生物传感中表现出独特的应用潜力。脱氧核糖核酸(DNA)具有可编程性和可寻址性,利用结构多样性的DNA与光学性能优良的REEs-UCNPs构建的REEs-UCNPs-DNA传感器具有灵敏、快速、特异和成本低等显著特点,在生物检测中具有独特优势,表现出广阔的应用前景。本文综述了近十年国内外基于稀土掺杂上转换纳米材料与双链、三链、DNAzyme和分子信标等不同功能DNA基序构建的纳米传感器在生物检测中的应用,旨在为后续开发性能更加优良的REEs-UCNPs-DNA传感器提供参考和启示。 展开更多
关键词 稀土掺杂上转换纳米材料 DNA 传感器 生物检测
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微球数字化分析及其应用研究进展
9
作者 龚凤 吉邢虎 何治柯 《分析科学学报》 北大核心 2025年第3期353-361,共9页
微球数字化分析是一种直接以微球作为样品单分子分散载体的数字化分析方法。由于省去了传统数字化分析中复杂的液滴或阵列制备过程,该方法具有简便、快速的特点,在生物分子的高灵敏检测中具有极大的应用潜力。本文将在介绍微球数字化分... 微球数字化分析是一种直接以微球作为样品单分子分散载体的数字化分析方法。由于省去了传统数字化分析中复杂的液滴或阵列制备过程,该方法具有简便、快速的特点,在生物分子的高灵敏检测中具有极大的应用潜力。本文将在介绍微球数字化分析原理的基础上,对其在生物分子高灵敏检测中的应用进行综述,最后对微球数字化分析未来的发展趋势和应用方向进行展望。 展开更多
关键词 数字化分析 生物分子检测 微球 单分子检测
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基于荧光蛋白的生物探针设计策略及其应用
10
作者 张宁 田烨 《遗传》 北大核心 2025年第7期711-728,共18页
荧光蛋白的发现为细胞生物学研究带来了革命性进展。通过将荧光蛋白与目标蛋白融合,构建荧光生物探针,可以在活细胞和生物体内实时监测细胞事件的动态变化。荧光蛋白的独特理化特性,如光谱范围、发色团成熟速度、pH敏感性和稳定性等,为... 荧光蛋白的发现为细胞生物学研究带来了革命性进展。通过将荧光蛋白与目标蛋白融合,构建荧光生物探针,可以在活细胞和生物体内实时监测细胞事件的动态变化。荧光蛋白的独特理化特性,如光谱范围、发色团成熟速度、pH敏感性和稳定性等,为探针的设计提供了多样化的选择。基于这些特性,研究者开发了用于监测不同分子事件的多种荧光生物探针。本文系统总结了荧光蛋白探针设计的主要策略及其在生物学研究中的典型应用,为开发更高效、更专用的新型荧光生物探针以应对复杂生物学问题提供了参考。 展开更多
关键词 荧光蛋白 荧光生物探针 荧光时钟 循环重排荧光蛋白 双分子荧光互补 二聚化依赖荧光蛋白 荧光共振能量转移 光激活 光转换 光开关
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基于ThUBD的泛素化信号高通量检测技术评价
11
作者 刘慧 常蕾 徐平 《生物工程学报》 北大核心 2025年第8期3301-3310,共10页
泛素化是真核细胞中分布最广、结构最为多样、功能重要的蛋白质翻译后修饰类型之一,目前检测泛素化信号的方法主要包括基于特异性抗体的免疫学检测、质谱法和基于泛素结合结构域(ubiquitin binding domain,UBD)的检测等,这些方法共同构... 泛素化是真核细胞中分布最广、结构最为多样、功能重要的蛋白质翻译后修饰类型之一,目前检测泛素化信号的方法主要包括基于特异性抗体的免疫学检测、质谱法和基于泛素结合结构域(ubiquitin binding domain,UBD)的检测等,这些方法共同构成了蛋白质泛素化信号研究的工具库。本课题组前期开发了一种基于人工串联杂合泛素结合结构域(tandem hybrid ubiquitin binding domain,ThUBD)的高通量检测技术,实现了对所有多聚泛素链修饰信号普适、高灵敏的检测。本研究旨在探究ThUBD包被多孔板在检测泛素化信号中的特异性和检测范围,并进一步验证其在实际应用中的可靠性和实用性。通过对细胞、组织、尿液等不同生物样本中复杂多样的泛素化信号进行分析,以及对不同质量范围内泛素化信号的检测,发现该技术具有普适性强、特异性好的特点,可精准鉴别泛素化蛋白与非泛素化蛋白,并实现精准定量。本研究为蛋白质泛素化信号高通量检测研究领域提供了一种灵敏、特异、快速和高效的分析技术手段。 展开更多
关键词 泛素 串联杂合泛素结合结构域 高通量 泛素化信号检测
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环介导等温扩增检测特异性与准确性的改善方法
12
作者 吴泽勇 欧阳松应 王冬梅 《微生物学报》 北大核心 2025年第10期4326-4339,共14页
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种快速、灵敏的核酸等温扩增方法,具有良好的特异性和敏感性,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。然而,基于LAMP的检测方案开发也面临一些问题,例如在扩增过程中会出... 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种快速、灵敏的核酸等温扩增方法,具有良好的特异性和敏感性,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。然而,基于LAMP的检测方案开发也面临一些问题,例如在扩增过程中会出现非特异性和非模板扩增等情况,进而影响检测结果的准确性和特异性。本文阐述了近年来LAMP开发过程中在规避假阳性、提升检测效果等方面的研究进展,包括引物设计、优化条件、引入特殊化学物质等策略,并探讨了LAMP在检测领域的应用突破与创新。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 引物二聚化 假阳性 非特异性扩增
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基于CASFISH的检测染色体脆性位点表达的方法
13
作者 张鋆坤 杨雨蒙 +6 位作者 吴彤彤 仲昭华 林清雅 吴迪 陈志玲 王海龙 王丹 《首都师范大学学报(自然科学版)》 2025年第5期47-55,共9页
染色体脆性位点是染色体上易发生断裂的一些特殊区域。常见脆性位点(CFSs)是最主要的脆性位点类型,其稳定性与癌症密切相关。传统的CFSs稳定性检测技术具有诸多局限性,限制了该领域研究工作的发展。本研究意在建立一种基于CRISPR/dCas9... 染色体脆性位点是染色体上易发生断裂的一些特殊区域。常见脆性位点(CFSs)是最主要的脆性位点类型,其稳定性与癌症密切相关。传统的CFSs稳定性检测技术具有诸多局限性,限制了该领域研究工作的发展。本研究意在建立一种基于CRISPR/dCas9介导的荧光原位杂交(CASFISH)检测技术,以期提高检测CFSs表达的灵敏度和易操作性。以16号染色体FRA16D两侧的2个重复序列为靶标设计并制备了单链向导核糖核酸(sgRNA),利用纯化的GST-dCas9-EGFP和GST-dCas9-mCherry融合蛋白在U2OS细胞中开展CASFISH检测。结果显示,sgRNA/dCas9探针可以识别FRA16D两侧的脱氧核糖核酸(DNA),在细胞中实现FRA16D的成像观测。在诱导的复制压力下,双色荧光探针也可以定量检测FRA16D的断裂情况。在此工作基础上进一步优化将为在活细胞内观测CFSs表达的动态过程,研究DNA复制过程中CFSs的稳定性等工作提供便利。 展开更多
关键词 染色体脆性位点 CFSs CRISPR/dCas9介导的荧光原位杂交
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蛹虫草008发酵产多糖条件的优化与其生物活性研究
14
作者 孟玲琳 马迪娅 +7 位作者 张惠仪 吴约娣 叶文靖 汪曼 王娟娟 乔洁 宋仕勤 曾化伟 《中央民族大学学报(自然科学版)》 2025年第1期18-29,共12页
蛹虫草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link.)是一种名贵的中药材,其具有较强抗氧化活性和抗肿瘤活性。本研究以008菌株为研究载体,经过形态观察和分子鉴定为Cordyceps militaris 008。在液体发酵条件下,首先通过单因素优化,在此基础上... 蛹虫草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link.)是一种名贵的中药材,其具有较强抗氧化活性和抗肿瘤活性。本研究以008菌株为研究载体,经过形态观察和分子鉴定为Cordyceps militaris 008。在液体发酵条件下,首先通过单因素优化,在此基础上进行正交优化实验,确定其最优培养基,并对优化后的多糖进行抗氧化活性和抗肿瘤活性的研究。结果表明蛹虫草008最优培养基为:木糖量6%,酵母提取物量4.5%,K_(2)HPO_(4)量2.1%。培养条件为温度为21℃,转速为160r/min,装液量为80ml/250mL,接种量为10%,发酵2d。蛹虫草008所产粗多糖具有的较好的抗肿瘤活性,也具有一定的抗氧化活性。 展开更多
关键词 蛹虫草 液态发酵 胞外多糖 抗氧化活性 抗肿瘤活性
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2017~2023年呼和浩特市HIV感染人群临床实验室化学发光法筛查结果与确证病例分析
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作者 董佳 董莉 +1 位作者 张保平 赫晓霞 《现代检验医学杂志》 2025年第5期162-166,共5页
目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)的感染现状、分布特点及化学发光免疫分析(CLIA)筛查HIV呈反应性样本S/CO值与确证试验阳性的关系。方法选择2017~2023年内蒙古医科大学附属医院检验科用雅培CLIA检出的820例HIV呈反应性结果的病例为研究对... 目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)的感染现状、分布特点及化学发光免疫分析(CLIA)筛查HIV呈反应性样本S/CO值与确证试验阳性的关系。方法选择2017~2023年内蒙古医科大学附属医院检验科用雅培CLIA检出的820例HIV呈反应性结果的病例为研究对象,按不同年份、性别及年龄,用SPSS22.0软件进行统计学分析,比较筛查呈反应性和确证阳性的分布特点,回顾性分析确证试验(免疫印迹法)结果阳性、不确定和阴性与其S/CO值的关系,以及相应条带的分布情况。结果2017~2023年HIV确证试验阳性的年度总人数呈现先降后增趋势。确证阳性率为31.95%(262/820),男女比例为6.7∶1,性别差异具有统计学意义(χ^(2)=126.8,P<0.05)。筛查试验呈反应性的男女比例为1.4∶1。男性和女性确证阳性人数最多的年龄段均为30~50岁。根据S/CO值分为五组,1.0≤S/CO≤5.0组确证阳性率为0%(0/436),5.0<S/CO≤10.0组确证阳性率为6.90%(4/58),10.0<S/CO≤50.0组确证阳性率为25.86%(15/58),50.0<S/CO≤500.0组确证阳性率为82.09%(110/134),S/CO>500.0组确证阳性率为99.25%(133/134),五组间确证阳性人数差异具有统计学意义(χ^(2)=816.3,P<0.05)。确证阴性473例,女性多于男性,差异有统计学意义(χ^(2)=98.3,P<0.05),其中S/CO值≤10.0的结果占90.49%(428/473);不确定85例,性别差异无统计学意义(χ^(2)=1.3,P>0.05),其中S/CO值≤10.0的结果占72.94%(62/85)。确证试验阳性中条带gp120和gp160在所有结果中均出现,p55出现次数最少,占51.91%(136/262);不确定结果的条带以p24为主,其次为gp160等。在一定程度上,CLIA筛查试验S/CO值越高,确证试验为阳性时条带越多,确证试验为不确定时显现的条带也越多。结论CLIA筛查HIV时,S/CO值越高,确证试验阳性率越高,阳性条带也越多,对实验室分析检测结果和临床早期诊断具有实用价值。 展开更多
关键词 化学发光免疫分析 人类免疫缺陷病毒 免疫印迹法 艾滋病
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CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪对结核分枝杆菌核酸检测的性能评估
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作者 孙玉杰 宋喜诺 +3 位作者 孙宏莉 刘仪威 杨城林 伊洁 《现代检验医学杂志》 2025年第5期178-181,199,共5页
目的 评估CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪上检测结核分枝杆菌(MTB)核酸的性能,以确定其临床适用性。方法 收集20例临床痰液样本,同时将MTB菌液倍比稀释制备样本,使用热裂解法提取核酸后,通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)在CFX Opus 9... 目的 评估CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪上检测结核分枝杆菌(MTB)核酸的性能,以确定其临床适用性。方法 收集20例临床痰液样本,同时将MTB菌液倍比稀释制备样本,使用热裂解法提取核酸后,通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)在CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪上应用分枝杆菌核酸检测试剂对MTB DNA进行扩增,评估最低检测限、精密度、交叉反应、抗干扰能力、人员和仪器间比对及方法学符合率性能。结果 CFX Opus96 Dx实时荧光PCR分析仪检测MTB DNA的最低检测限(LOD)符合试剂说明书要求的1×10~2个菌/ml。重复检测3次5×10~2个菌/ml菌液样本,批内变异系数(CV)分别为1.04%,1.61%和1.29%;重复检测3次5×10~3个菌/ml菌液样本,批内CV分别为0.92%,0.74%和0.59%,均<5%。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、奴卡菌、奇异变形杆菌、嗜肺军团菌、耶氏肺孢子菌、甲型流感病毒、乙型流感病毒、肺炎支原体及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)与MTB无交叉反应。干扰物质血红蛋白、黏蛋白、利福平、异烟肼、阿莫西林和左氧氟沙星加入MTB阳性标本前后的Ct值变化差异无统计学意义(均P>0.05)。2位操作人员和3台PCR仪间比对的CV均<5%。ABI 7500实时荧光PCR分析仪与CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪检测MTB DNA的阳性符合率、阴性符合率和总符合率均为100%。结论 CFX Opus 96 Dx实时荧光PCR分析仪检测MTB DNA的最低检测限、精密度、交叉反应、抗干扰能力、人员和仪器间比对及方法学符合率均符合临床分子生物学检验的要求,可为临床检测提供可靠依据。 展开更多
关键词 实时荧光PCR分析仪 结核分枝杆菌 核酸检测 性能验证
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尿素变性PAGE中ssDNA回收方法的研究与优化
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作者 郑楚君 黄海轩 +3 位作者 王雨萱 叶煜玮 徐斐 袁敏 《工业微生物》 2025年第1期110-115,124,共7页
从变性PAGE中获得高纯度、高回收率的ss DNA,是功能核酸研究及适配体筛选的关键环节之一。文章采用直取法、改良煮沸法、试剂盒回收和正丁醇回收4种方法,在尿素变性PAGE中对ss DNA进行了提取回收研究,并发现改良煮沸法的ss DNA回收效率... 从变性PAGE中获得高纯度、高回收率的ss DNA,是功能核酸研究及适配体筛选的关键环节之一。文章采用直取法、改良煮沸法、试剂盒回收和正丁醇回收4种方法,在尿素变性PAGE中对ss DNA进行了提取回收研究,并发现改良煮沸法的ss DNA回收效率显著优于其他3种回收方法。对实验条件作进一步优化,使ss DNA回收效率达到了70.33±0.35%,并获得了较高的回收纯度(A260/A280=1.85)。可见,该种方法操作简便、回收速度快,且不易受有机试剂的干扰,同时成本低廉,单次回收成本不足1元,在功能核酸的筛选及回收利用方面具有良好的实际应用前景。 展开更多
关键词 尿素变性PAGE ss DNA回收 改良煮沸法
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一氧化氮检测荧光探针在疾病诊断中的应用进展
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作者 冯永威 许佑君 +1 位作者 张青扬 胡海宇 《中国医药生物技术》 2025年第2期181-189,共9页
一氧化氮(NO)作为重要的气体信号分子,与人类多种疾病紧密相关,NO浓度的实时监测和定量分析在疾病机制研究中具有重要意义。荧光探针因其高灵敏度、选择性、时空分辨率、非侵入性及操作便捷性,已成为NO检测的重要工具。然而,开发同时具... 一氧化氮(NO)作为重要的气体信号分子,与人类多种疾病紧密相关,NO浓度的实时监测和定量分析在疾病机制研究中具有重要意义。荧光探针因其高灵敏度、选择性、时空分辨率、非侵入性及操作便捷性,已成为NO检测的重要工具。然而,开发同时具备高选择性、高灵敏度、低荧光背景干扰、低细胞毒性可以用于NO实时定量检测的荧光探针仍面临诸多挑战。本综述全面回顾了近五年来NO响应型荧光探针的研究进展,按疾病类型进行分类,重点讨论了探针设计策略、NO响应机制以及其在生物成像和疾病实时监测中的应用潜力。 展开更多
关键词 一氧化氮 荧光探针 疾病诊断 可视化 实时检测
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如何向国际期刊提交未经裁剪的Western blot原始图像?
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《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第7期I0001-I0001,共1页
蛋白免疫印迹(western blot,WB)检测技术相对于ELISA和其他基于抗体的检测方案而言,更易于操作,并且可以提供有关蛋白质大小的信息,因而其广泛用于样本蛋白表达水平的定量检测。然而,随着WB技术应用的日渐普及,近来科学家们对提交给同... 蛋白免疫印迹(western blot,WB)检测技术相对于ELISA和其他基于抗体的检测方案而言,更易于操作,并且可以提供有关蛋白质大小的信息,因而其广泛用于样本蛋白表达水平的定量检测。然而,随着WB技术应用的日渐普及,近来科学家们对提交给同行评审期刊的WB数据的重复性和可靠性产生了担忧。2014年,美国国立卫生研究院与《科学》和《自然》期刊以所发表科学数据的重复性和透明度为主题,携同其他出版商和科学家组织了一次会议。通过这次合作,制定出了一系列指南文件。会议聚焦的特定领域之一涉及基于图像的数据,如蛋白免疫印迹,并就此提出了许多改进建议。会议结束后,许多期刊针对WB数据制定了更严格的审查指南,修订了它们关于提交WB数据的说明。 展开更多
关键词 国际期刊 同行评审 科学数据 审查指南 美国国立卫生研究院 原始图像 《科学》 出版商
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如何向国际期刊提交未经裁剪的Western blot原始图像?
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《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第8期I0001-I0001,共1页
蛋白免疫印迹(western blot,WB)检测技术相对于ELISA和其他基于抗体的检测方案而言,更易于操作,并且可以提供有关蛋白质大小的信息,因而其广泛用于样本蛋白表达水平的定量检测。然而,随着WB技术应用的日渐普及,近来科学家们对提交给同... 蛋白免疫印迹(western blot,WB)检测技术相对于ELISA和其他基于抗体的检测方案而言,更易于操作,并且可以提供有关蛋白质大小的信息,因而其广泛用于样本蛋白表达水平的定量检测。然而,随着WB技术应用的日渐普及,近来科学家们对提交给同行评审期刊的WB数据的重复性和可靠性产生了担忧。2014年,美国国立卫生研究院与《科学》和《自然》期刊以所发表科学数据的重复性和透明度为主题,携同其他出版商和科学家组织了一次会议。通过这次合作,制定出了一系列指南文件。会议聚焦的特定领域之一涉及基于图像的数据,如蛋白免疫印迹,并就此提出了许多改进建议。会议结束后,许多期刊针对WB数据制定了更严格的审查指南,修订了它们关于提交WB数据的说明。 展开更多
关键词 国际期刊 同行评审 科学数据 审查指南 美国国立卫生研究院 原始图像 《科学》 出版商
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