宿主模式识别受体介导的病毒免疫逃逸机制研究进展 被引量：5

1

作者 李倩 李向茸 冯若飞 《生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第9期865-870,共6页

随着病毒和机体斗争的不断发展,病毒逐步进化出各种免疫逃逸机制来躲避宿主的免疫应答,以实现增殖的目的。该文归纳总结了病毒通过宿主的Toll样受体、RIG-I样受体、DNA识别受体及NOD样受体等主要模式识别受体进行逃逸的机制,并且为深入... 随着病毒和机体斗争的不断发展,病毒逐步进化出各种免疫逃逸机制来躲避宿主的免疫应答,以实现增殖的目的。该文归纳总结了病毒通过宿主的Toll样受体、RIG-I样受体、DNA识别受体及NOD样受体等主要模式识别受体进行逃逸的机制,并且为深入探究病毒致病机制奠定基础,也为病毒疫苗和抗病毒药物的研发提供了新思路。 展开更多

关键词 免疫逃逸机制 TOLL样受体 RIG-I样受体 天然免疫

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沙门菌鞭毛蛋白增强新城疫病毒融合蛋白在小鼠中的免疫原性 被引量：3

2

作者 潘志明 文科 +3 位作者 游猛 耿士忠 方强 焦新安 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期827-829,共3页

目的:分析沙门菌鞭毛蛋白对新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F蛋白)免疫原性的增强作用。方法:提取鼠伤寒沙门菌SL7207株鞭毛蛋白,将鞭毛蛋白与F蛋白以皮下注射的方式联合免疫C3H/HeJ小鼠,间隔2周免疫,共免疫3次。分别在第2次免疫后2周和第3次... 目的:分析沙门菌鞭毛蛋白对新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F蛋白)免疫原性的增强作用。方法:提取鼠伤寒沙门菌SL7207株鞭毛蛋白,将鞭毛蛋白与F蛋白以皮下注射的方式联合免疫C3H/HeJ小鼠,间隔2周免疫,共免疫3次。分别在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血清,应用ELISA法测定小鼠血清抗体;在第3次免疫后2周取免疫小鼠脾脏细胞,检测IFN-γ和IL-4特异性分泌细胞。结果:鞭毛蛋白与F蛋白联合免疫能诱导产生特异性的免疫应答,血清抗体水平显著高于F蛋白单独免疫组;在脾脏细胞中,检测到较高水平的IFN-γ和IL-4分泌细胞,免疫应答以Th1型为主。结论:鞭毛蛋白与F蛋白的联合免疫,可显著增强F蛋白的免疫原性,显示出鞭毛蛋白良好的免疫佐剂效应。 展开更多

关键词 鞭毛蛋白 融合蛋白 联合 免疫原性 增强

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人白介素6受体结合功能域的构效关系研究 被引量：1

3

作者 冯健男 任蕴芳 +1 位作者 李松 沈倍奋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期53-57,共5页

以分子对接(docking)方法研究人白介素6受体胞外区配基结合功能域“WSXWS”区氨基酸残基定点突变对受体与配基人白介素6结合时的相互作用能量、分子间相互作用的影响,从分子力学、分子动态学分析了人白介素6受体胞外区功能域关键氨基酸... 以分子对接(docking)方法研究人白介素6受体胞外区配基结合功能域“WSXWS”区氨基酸残基定点突变对受体与配基人白介素6结合时的相互作用能量、分子间相互作用的影响,从分子力学、分子动态学分析了人白介素6受体胞外区功能域关键氨基酸残基在受体与配基结合中的构象变化以及与人白介素6间的相互作用. 展开更多

关键词 人白介素6 受体 分子对接 WSXWS 构效关系

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鱼类传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白的截短表达及免疫原性检测 被引量：6

4

作者 赵景壮 徐黎明 +4 位作者 刘淼 曹永生 尹家胜 刘红柏 卢彤岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1238-1242,共5页

目的研究鱼类传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)糖蛋白不同区域对免疫原性的影响。方法本研究通过DNAStar 6.0软件分析糖蛋白跨膜区、疏水性及抗原性后,对其进行截短表达;纯化后的糖蛋白制备兔抗血清,ELISA检测兔抗血清的效价,用间接免疫... 目的研究鱼类传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)糖蛋白不同区域对免疫原性的影响。方法本研究通过DNAStar 6.0软件分析糖蛋白跨膜区、疏水性及抗原性后,对其进行截短表达;纯化后的糖蛋白制备兔抗血清,ELISA检测兔抗血清的效价,用间接免疫荧光技术检测纯化后蛋白的免疫原性。结果 SDS-PAGE结果显示,截短糖蛋白相对分子质量(Mr)为40 000,纯化后的糖蛋白经高效液相色谱检测纯度达到90%。利用纯化后的蛋白制备兔抗血清,ELISA结果显示,所制备的兔抗血清与糖蛋白的反应效价为1∶80 000,与IHNV-Sn株细胞培养物的反应效价为1∶20 000;间接免疫荧光结果显示,兔抗血清与IHNV-Sn分离株及参考毒株均能发生特异性的反应。结论实验所表达的糖蛋白与天然的病毒表面糖蛋白具有几乎相同的免疫原性。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病毒 蛋白表达 糖蛋白 免疫原性

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硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响 被引量：6

5

作者 陈冠敏 陈润 +2 位作者 张荣标 林秀芬 孙丽 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期227-229,共3页

目的了解硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法将ICR雌性小鼠按体重随机分成低、中、高(150、300、900mg/kg bw)3个剂量组和对照组。连续灌胃30天后,进行脾指数、胸腺指数、细胞免疫、体液免疫、NK细胞、单核-巨噬细胞及NK细... 目的了解硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法将ICR雌性小鼠按体重随机分成低、中、高(150、300、900mg/kg bw)3个剂量组和对照组。连续灌胃30天后,进行脾指数、胸腺指数、细胞免疫、体液免疫、NK细胞、单核-巨噬细胞及NK细胞活性的测定。结果高剂量组小鼠的胸腺指数显著高于对照组(P<0.05);中、高剂量组小鼠迟发型超敏反应(DTH)应激能力、血清溶血素水平及抗体生成能力明显高于对照组(P<0.05);高剂量组小鼠的NK细胞的活性显著高于对照组(P<0.05);硫酸氨基葡萄糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖转化能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、碳廓清吞噬指数均无影响。结论硫酸氨基葡萄糖从细胞免疫功能、体液免疫功能及NK细胞活性方面能增强正常小鼠的免疫功能。 展开更多

关键词 硫酸氨基葡萄糖 细胞免疫 体液免疫 NK细胞活性

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新生大鼠下丘脑GnRH免疫反应性神经元的体外发育 被引量：3

6

作者 宋天保 姚向民 +2 位作者 李明众 周劲松 张芳婷 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1997年第2期49-53,共5页

应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术，研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元；１～３ｄ，ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快，胞体和突起的平均生长... 应用神经细胞培养、免疫细胞化学、图像分析等技术，研究了新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）神经元的体外发育规律。培养１ｄ即可见ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元；１～３ｄ，ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元生长最快，胞体和突起的平均生长速度分别为４５．５９μｍ２／ｄ和１９．３９μｍ／ｄ，染色加深；培养７ｄ，ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体截面积、胞体染色强度和突起长度均达最高峰，分别为１７１．２１±４３．１７μｍ２，０．２８９±０．０３４，８７．０１±２２．３３μｍ；培养１４ｄ，ＧｎＲＨ－ＩＲ神经元的胞体大小和突起长度维持在７ｄ时的水平，但染色减弱。结果提示，培养第１周是ＧｎＲＨ神经元体外发育成熟的关键时期。 展开更多

关键词 促性腺释放激素神经元 下丘脑 体外发育 细胞培养 免疫细胞化学 图像分析 新生大鼠

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IgG和IgE介导的免疫反应在旋毛虫病免疫机理中的作用 被引量：5

7

作者 闫玉文 李鹏 +2 位作者 邢杰 马平 王增田 《武警医学院学报》 CAS 2007年第4期348-351,共4页

【目的】探讨IgG和IgE依赖中性粒细胞（Neu）和单核细胞（Mon）介导的细胞毒效应杀伤旋毛虫肌幼虫的免疫机理。【方法】以雄性Wistar大鼠为旋毛虫病实验动物模型,在动态检测不同感染时相大鼠血清中IgE、IgG的基础上,应用体外培养法观察... 【目的】探讨IgG和IgE依赖中性粒细胞（Neu）和单核细胞（Mon）介导的细胞毒效应杀伤旋毛虫肌幼虫的免疫机理。【方法】以雄性Wistar大鼠为旋毛虫病实验动物模型,在动态检测不同感染时相大鼠血清中IgE、IgG的基础上,应用体外培养法观察经不同温度和时间处理的免疫血清对大鼠血液中Neu和Mon杀伤旋毛虫肌幼虫作用的影响。【结果】大鼠在感染旋毛虫后2～3周,血清中的总IgE和特异性IgE达最高值;总IgG和特异性IgG在5周达高峰。体外培养48 h后,Neus和Mons对旋毛虫肌幼虫的杀伤率分别为42.1%和23.2%。【结论】大鼠感染旋毛虫后,其血清中总IgE与特异性IgE及总IgG与特异性IgG同步增加。当免疫血清存在时,感染鼠和非感染鼠的Neu和Mon均具有杀伤旋毛虫肌幼虫的作用,但感染鼠的作用更强。Neu和Mon在发挥杀伤旋毛虫肌幼虫的作用时,主要依赖的是IgG。 展开更多

关键词 IGG IgE NEU Mon ADCC效应 旋毛虫病

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人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立 被引量：1

8

作者 包国强 马庆久 +2 位作者 邢金良 杨向民 陈志南 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期433-435,共3页

目的　建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法　自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝... 目的　建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库 ,经过扩增和筛选 ,得到目的抗体。方法　自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因 ,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中 ,建立人 鼠杂合Fab噬菌体抗体库。然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选 ,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化。结果　pComb3展示抗体库在 37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象。pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象。经过 4轮筛选后 ,噬菌体展示抗体ELISA显示 ,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应 ,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生。结论　通过建立杂合Fab抗体库 ,并对扩增和筛选条件进行优化 。 展开更多

关键词 抗体库 人源性 肝肿瘤

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RIG-I样受体信号通路介导的小RNA病毒免疫逃逸研究进展 被引量：3

9

作者 毕英杰 谢晶莹 +1 位作者 李倬 冯若飞 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1004-1010,共7页

病毒与宿主在长期的斗争中共同进化,病毒形成各种逃逸机制来躲避宿主的免疫应答。本文针对小RNA病毒科成员如何通过逃逸RIG-I样模式识别受体介导的先天免疫反应进行介绍,为深入了解RNA病毒的逃逸机制奠定基础,同时也为相关疫苗及药物的... 病毒与宿主在长期的斗争中共同进化,病毒形成各种逃逸机制来躲避宿主的免疫应答。本文针对小RNA病毒科成员如何通过逃逸RIG-I样模式识别受体介导的先天免疫反应进行介绍,为深入了解RNA病毒的逃逸机制奠定基础,同时也为相关疫苗及药物的研制提供思路。 展开更多

关键词 小RNA病毒 RIG-I样受体 免疫逃逸

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TLR21在斑马鱼免疫功能中的作用研究 被引量：3

10

作者 欧阳蒲月 郭成栓 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第3期1258-1260,共3页

[目的]研究斑马鱼TLR21受体家族的作用。[方法]用各种纯组分刺激斑马鱼,研究斑马鱼TLR21受体家族(zTLR21.1、zTLR21.3、zTLR21.4)的表达量变化,推测它们的功能。[结果]zTLR21.1对于LTA刺激无反应,对于LPS、ployI:C和Glucan刺激都有上调... [目的]研究斑马鱼TLR21受体家族的作用。[方法]用各种纯组分刺激斑马鱼,研究斑马鱼TLR21受体家族(zTLR21.1、zTLR21.3、zTLR21.4)的表达量变化,推测它们的功能。[结果]zTLR21.1对于LTA刺激无反应,对于LPS、ployI:C和Glucan刺激都有上调反应。zTLR21.3和zTLR21.4对于LPS、LTA和ployI:C刺激均无反应,对于Glucan刺激有明显上调变化。[结论]zTLR21.1可能是一种能够识别大部分抗原的模式识别受体。zTLR21.3和zTLR21.4的功能很类似,可能都是酵母的特异识别受体。 展开更多

关键词 TLR21 TLRS 斑马鱼

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NGF和bFGF对小鼠免疫细胞功能的影响 被引量：3

11

作者 张立平 端礼荣 《实验与检验医学》 CAS 2011年第1期9-11,共3页

目的探讨神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对免疫细胞功能的影响。方法通过小鼠巨噬细胞吞噬、脾细胞增殖、H2O2及O2-指标实验,观察NGF和bFGF对正常小鼠免疫细胞功能的影响。结果一定剂量的NGF、bFGF对小鼠免疫细胞功... 目的探讨神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对免疫细胞功能的影响。方法通过小鼠巨噬细胞吞噬、脾细胞增殖、H2O2及O2-指标实验,观察NGF和bFGF对正常小鼠免疫细胞功能的影响。结果一定剂量的NGF、bFGF对小鼠免疫细胞功能有较明显的促进作用,且表现具有协同促进效应,而同剂量的NGF对免疫功能的促进作用略强于bFGF。此外,NGF、bFGF还能协同促进脾细胞分泌H2O2及O2-。结论一定剂量的NGF、bFGF表现出较明显的免疫促进作用,并存在协同效应。 展开更多

关键词 NGF BFGF 免疫功能 过氧化氢 超氧阴离子

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P选择素单抗对肝缺血再灌注时细胞凋亡的影响 被引量：1

12

作者 陈金联 储榆德 +3 位作者 周同 许蕙敏 李晓 张明钧 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第3期239-241,共3页

目的探讨P选择素及其单克隆抗体对肝缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响。　方法建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型 ,分别采用免疫组化LSAB法和原位DNA片段末端标记法检测有或无P选择素单抗治疗组肝组织中P选择素表达及凋亡细胞。　结果大鼠肝... 目的探讨P选择素及其单克隆抗体对肝缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响。　方法建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型 ,分别采用免疫组化LSAB法和原位DNA片段末端标记法检测有或无P选择素单抗治疗组肝组织中P选择素表达及凋亡细胞。　结果大鼠肝缺血再灌注时 ,肝组织出现显著病理改变及细胞凋亡 ,且P选择素在肝组织中表达 ;P选择素单抗作用组肝组织无明显病理变化且细胞凋亡减少 ,肝组织中未见P选择素表达。　结论P选择素介导中性粒细胞浸润和细胞凋亡 。 展开更多

关键词 P选择素 肝缺血 再灌注损伤 单克隆抗体

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鼠TNF家族的B细胞活化因子ORF基因的克隆及原核表达

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作者 弓莉 王元占 +4 位作者 杨培梁 刘谋荣 朱玉峰 曾俊岭 吴湘慧 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第9期970-973,共4页

目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF O... 目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot分析。结果 RT-PCR扩增得到约930bp的cDNA,其序列与GenBank中登录的鼠BAFF ORF cDNA序列的同源性达99.9%;重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF经酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为76500,IPTG终浓度为0.9mmol/L,诱导时间为4h,目的蛋白的表达量最高,破菌上清和沉淀中均可见目的蛋白条带,可溶性蛋白的表达量占全菌总蛋白的49%;纯化的重组蛋白纯度可达90%,含量为0.9mg/ml,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了鼠BAFF ORF基因,并进行了原核表达及纯化,为进一步研究其生物功能奠定了基础。 展开更多

关键词 TNF家族的B细胞活化因子 克隆 分子 原核细胞 基因表达

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FK506作为佐剂刺激Tfh细胞增强体液免疫水平的研究

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作者 张婧瑶 黄波波 +4 位作者 高文娟 杨司韵 孙昕然 张一雪 康友敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期16-19,共4页

目的:探讨他克莫司(FK506)作为佐剂通过刺激Tfh细胞增强疫苗体液免疫水平的机制。方法:利用FK506与模式蛋白(卵清白蛋白,OVA)皮下注射免疫BALB/c小鼠,免疫三次,利用ELISA方法检测抗体水平;利用抗体染色流式细胞仪检测Tfh细胞、B细胞表... 目的:探讨他克莫司(FK506)作为佐剂通过刺激Tfh细胞增强疫苗体液免疫水平的机制。方法:利用FK506与模式蛋白(卵清白蛋白,OVA)皮下注射免疫BALB/c小鼠,免疫三次,利用ELISA方法检测抗体水平;利用抗体染色流式细胞仪检测Tfh细胞、B细胞表面分子IL-21R及记忆性B细胞标志分子CD27表达。结果:FK506作为OVA蛋白佐剂,能够显著提高小鼠OVA特异性的IgG水平,增强体液免疫水平;免疫后的小鼠Tfh细胞表达IL-21水平显著高于其他对照组。同时,B细胞表达IL-21R及记忆性B细胞标志分子CD27显著高于其他对照组。表明FK506作为佐剂刺激Tfh细胞表达IL-21,作用于B细胞增强抗体水平。结论:FK506能够作为蛋白疫苗佐剂刺激Tfh细胞表达IL-21;IL-21可能通过与B细胞表面IL-21R作用,增强抗体的分泌;并刺激记忆性B细胞的产生,进而增强体液免疫水平。 展开更多

关键词 FK506 佐剂 Tfh细胞 B细胞 体液免疫

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抗表皮生长因子受体3(HER3)单链抗体的制备及鉴定

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作者 刘梦苗 何佩彦 +3 位作者 温碧燕 邱创楠 李黄金 赵林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期938-943,共6页

目的表达、纯化并鉴定抗人表皮生长因子受体3(HER3)的单链抗体(scFv).方法从NCBI查找抗HER3单克隆抗体UM716的轻链和重链序列,构建抗HER3-scFv基因;利用毕赤酵母组成性表达载体pGAPZαA构建重组表达载体,电转化毕赤酵母,筛选高表达工程... 目的表达、纯化并鉴定抗人表皮生长因子受体3(HER3)的单链抗体(scFv).方法从NCBI查找抗HER3单克隆抗体UM716的轻链和重链序列,构建抗HER3-scFv基因;利用毕赤酵母组成性表达载体pGAPZαA构建重组表达载体,电转化毕赤酵母,筛选高表达工程菌;工程菌发酵上清经疏水层析和金属离子亲和层析纯化,Weslem blot法和ELISA鉴定纯化产物.结果成功构建了抗HER3-scFv基因,获得了高表达工程菌;发酵上清经两步层析纯化,获得了纯度达95%以上的抗HER3-scFv,产率为192mg/L;Western blot结果显示抗HER3-scFv得到正确表达,ELISA结果表明抗HER3-scFv可特异识别HER3.结论成功制备了特异的抗HER3-scFv. 展开更多

关键词 人表皮生长因子受体3(HER3) 单链抗体(scFv) 表达 纯化 鉴定

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骨唾液酸蛋白单克隆抗体的性质鉴定

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作者 彭如意 王捷 +4 位作者 刘增田 刘大志 夏冰 詹纯列 张宏斌 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第1期72-75,共4页

制备重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。采用杂交瘤技术制备mAb,并测定亚型、效价、亲和常数、抗原表位,同时应用竞争抑制ELISA法分析其特异性。结果:得到2株杂交瘤阳性细胞株AHB2和AHB6,亚型为IgM和IgG1,... 制备重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。采用杂交瘤技术制备mAb,并测定亚型、效价、亲和常数、抗原表位,同时应用竞争抑制ELISA法分析其特异性。结果:得到2株杂交瘤阳性细胞株AHB2和AHB6,亚型为IgM和IgG1,轻链均为κ型;AHB2和AHB6的效价分别为10-4,10-6,亲和常数分别约为3·01×108M-1,2·94×1010M-1。检测发现,AHB2和AHB6均与大鼠血清有弱阳性反应。通过竞争抑制ELISA法分析得出AHB2和AHB6两株抗体针对BSP的相同抗原表位。采用Envision法进行BSP免疫组化的检测研究。成功制备了rhBSP的特异性mAb,为进一步研究BSP的生物学功能和临床诊断实验研究打下基础。 展开更多

关键词 骨唾液酸蛋白 单克隆抗体 亲和常数 抗原表位

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