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假基因AC106872.1参与维持人类胚胎干细胞自我更新能力
1
作者 蒋正阳 孙梦瑶 +2 位作者 何浏 余佳 马艳妮 《基础医学与临床》 2025年第5期561-567,共7页
目的探究假基因AC106872.1对维持人类胚胎干细胞(hESCs)自我更新能力的影响。方法在hESCs中敲除假基因AC106872.1,通过PCR及琼脂糖凝胶电泳检测敲除情况;通过集落形成实验及碱性磷酸酶(AP)染色评估hESCs的集落形成能力,qPCR及流式细胞... 目的探究假基因AC106872.1对维持人类胚胎干细胞(hESCs)自我更新能力的影响。方法在hESCs中敲除假基因AC106872.1,通过PCR及琼脂糖凝胶电泳检测敲除情况;通过集落形成实验及碱性磷酸酶(AP)染色评估hESCs的集落形成能力,qPCR及流式细胞测量术分析检测hESCs的多能性及分化标志基因表达情况,高通量测序检测敲除假基因对细胞转录组的影响。结果敲除假基因AC106872.1后,hESCs的集落形成能力得到抑制(P<0.05),多能性标志基因表达水平显著降低(P<0.0001),分化标志基因表达水平显著上升(P<0.0001)。结论假基因AC106872.1通过调控多能性基因的表达,参与人类胚胎干细胞自我更新能力的维持。 展开更多
关键词 假基因 人类胚胎干细胞 多能性
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镧、钐、铕及镱化合物对体外培养HeLa细胞的作用 被引量：23
2
作者 聂毓秀 陈玉兰 +5 位作者 王晓辉 赵培林 张树功 牛春吉 倪嘉缵 李振祥 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期58-64,共7页
应用细胞培养、扫描电子显微镜、放射自显影及细胞化学等技术研究了镧、钐、铕及镱的15种化合物对体外培养HeLa细胞分裂活性的影响,并对其氯化物的生物效应进行了较系统的研究。实验结果表明当其浓度为1mmol/L时,HeLa细胞有丝分裂指数下... 应用细胞培养、扫描电子显微镜、放射自显影及细胞化学等技术研究了镧、钐、铕及镱的15种化合物对体外培养HeLa细胞分裂活性的影响,并对其氯化物的生物效应进行了较系统的研究。实验结果表明当其浓度为1mmol/L时,HeLa细胞有丝分裂指数下降,细胞表面结构紊乱,DAN及RNA合成、细胞内琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶及酸性磷酸酶活性等均发生了变化;浓度为0.01mmol/L时,HeLa细胞有丝分裂指数、细胞表面结构、DAN与RNA合成及细胞内上述三种酶活性均未发生明显变化。 展开更多
关键词 镧 铕 钐 镱 化合物 HELA细胞
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镧钐铕及镱对体外培养人二倍体细胞的作用 被引量：22
3
作者 聂毓秀 陈玉兰 +5 位作者 赵培林 王晓辉 张树功 牛春吉 倪嘉缵 李振祥 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期350-353,共4页
本文报道镧、钐、铕和镱的氯化物对体外培养人二倍体细胞的作用。实验结果表明小剂量的LaCl_3,SmCl_3,EuCl_3及YbCl_3对人二倍体细胞无毒性作用,对细胞的生长有一定的促进作用;剂量为1mmol/L的四种化合物对人二倍体细胞的毒性与对照相... 本文报道镧、钐、铕和镱的氯化物对体外培养人二倍体细胞的作用。实验结果表明小剂量的LaCl_3,SmCl_3,EuCl_3及YbCl_3对人二倍体细胞无毒性作用,对细胞的生长有一定的促进作用;剂量为1mmol/L的四种化合物对人二倍体细胞的毒性与对照相比无明显差异。表明小剂量的四种稀土氯化物对体外培养人二倍体细胞和人癌细胞之间的反应性存在着差异,这种差异主要与两种细胞膜及表面结构不同有关。 展开更多
关键词 镧 钐 铕 镱 人二倍体细胞 培养
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人脐带静脉内皮细胞的继代培养 被引量：20
4
作者 董玉兰 陈铁镇 +2 位作者 王铁吉 王跃中 张亚佳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第2期81-85,共5页
人脐带静脉内皮细胞继代培养25代。应用光镜、电镜及Ⅷ因子相关抗原的免疫荧光方法进行鉴定与观察。在RPMI-1640培养液中加入20%人血清,内皮细胞生长因子200μg/ml,肝素100μg/ml及培养皿的明胶覆膜是人内皮细胞长期培养的重要条件。
关键词 内皮细胞 继代培养 脐带 静脉
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西洋参茎叶皂甙单体P－F_（11）对培养大鼠心肌细胞动作电位的作用 被引量：14
5
作者 杨世杰 陈霞 +3 位作者 张文杰 钟国赣 孙成文 江岩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期284-287,共4页
从西洋参茎叶皂甙中分离提取的Ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ－Ｆ１１（３、１０、３０ｍｇ·Ｌ－１，Ｐ－Ｆ１１）使培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞动作电位的幅值、动作电位时程、阈电位、最大舒张电位、０期最大除极速率... 从西洋参茎叶皂甙中分离提取的Ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ－Ｆ１１（３、１０、３０ｍｇ·Ｌ－１，Ｐ－Ｆ１１）使培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞动作电位的幅值、动作电位时程、阈电位、最大舒张电位、０期最大除极速率和复极１０％、５０％水平的动作电位时程剂量依赖性增大。Ｐ－Ｆ１１（１０ｍｇ·Ｌ－１）的作用可被维拉帕米（２μｍｏｌ·Ｌ－１）所对抗，Ｐ－Ｆ１１（３０ｍｇ·Ｌ－１）与ＢａｙＫ８６４４（０．７５ｍｍｏｌ·Ｌ－１）比较对心肌细胞动作电位的电参数的作用相似。实验结果表明，Ｐ－Ｆ１１可能具有钙通道激活作用。 展开更多
关键词 皂甙 西洋参 心肌 细胞培养
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Vero细胞的微载体培养——放大过程中的接种工艺 被引量：16
6
作者 张立 严春 +2 位作者 范卫民 张元兴 俞俊棠 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期659-663,共5页
概述了用微载体系统培养贴壁细胞放大过程中的接种方法，研究了球转球的工艺条件，并建立了球转球的动力学模型。用此方法成功地在国产５０Ｌ生物反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞，细胞密度达１．１×１０７ｃｅｌｓ／ｍＬ。
关键词 细胞培养 VERO细胞 接种技术 微载体 放大培养
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星形胶质细胞、少突胶质细胞分离培养新方法研究 被引量：12
7
作者 屈卫东 彭晓东 +3 位作者 吴德生 肖帮良 翁贵武 刘发才 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期263-266,共4页
根据神经胶质细胞中星形胶质细胞、少突胶质细胞的生长存在时间差异，细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性不同，作者建立了体外分离培养方法。经光镜、扫描电镜证实，分离培养的细胞形态与先前用其它方法的研究结果相一致。免疫细胞... 根据神经胶质细胞中星形胶质细胞、少突胶质细胞的生长存在时间差异，细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性不同，作者建立了体外分离培养方法。经光镜、扫描电镜证实，分离培养的细胞形态与先前用其它方法的研究结果相一致。免疫细胞化学鉴定显示星形胶质细胞的标志蛋白胶原纤维酸性蛋白（ Ｇ Ｆ Ａ Ｐ）和少突胶质细胞标志蛋白髓鞘碱性蛋白（ Ｍ Ｂ Ｐ）的表达与分离的细胞相符。表明所分离细胞的纯度较好，该方法可靠易行。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 少突胶质细胞 分离 纯化
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谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生产的影响 被引量：9
8
作者 张淑香 李东晓 +2 位作者 朱明龙 谭文松 张嗣良 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期77-82,共6页
利用批培养和流加培养方式以及不同的流加培养成分,考察了谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响。谷氨酰胺限制降低了最大细胞密度和单抗比生产速率,说明谷氨酰胺限制阻碍了细胞生长和单抗生产。谷氨酰胺限制流加培养的Y... 利用批培养和流加培养方式以及不同的流加培养成分,考察了谷氨酰胺限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响。谷氨酰胺限制降低了最大细胞密度和单抗比生产速率,说明谷氨酰胺限制阻碍了细胞生长和单抗生产。谷氨酰胺限制流加培养的YLac/Gluc和YLac/Cells高于批培养和谷氨酰胺非限制流加培养的,说明谷氨酰胺限制促进了葡萄糖向乳酸的生成,增强了葡萄糖的溢流代谢。与批培养和谷氨酰胺非限制流加培养相比,谷氨酰胺限制流加培养的氨和丙氨酸浓度及其比生成速率较低,而且YAmm/Gln高,YAla/Gln和YAla/Cells低,说明谷氨酰胺限制使得较多的谷氨酰胺参与脱氢反应,提高了谷氨酰胺的利用率,降低了细胞对氨和丙氨酸的生成,从而削弱了氨对细胞生长和单抗生产的毒害。在流加培养中应严格控制谷氨酰胺的流加浓度及与葡萄糖的配比,要避免谷氨酰胺过分限制导致的葡萄糖溢流代谢和对细胞生长和单抗产率的不利效应。 展开更多
关键词 谷氨酰胺限制 流加培养 杂交瘤细胞 葡萄糖 氨
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铝对体外培养小鼠卵母细胞减数分裂的影响 被引量：22
9
作者 沈维干 季全兰 +3 位作者 李朝军 陈彦 毕春明 张锡然 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期267-268,共2页
本实验采用小鼠卵母细胞体外培养的方法研究了３～６０ｍ ｇ／ Ｌ 的硝酸铝对小鼠卵母细胞减数分裂的影响。结果表明，铝对卵母细胞生发泡破裂（ Ｇ Ｖ Ｂ Ｄ）没有影响，但可以抑制卵母细胞第一极体的排出，３０ｍ ｇ／ Ｌ和 ６０ｍ ｇ... 本实验采用小鼠卵母细胞体外培养的方法研究了３～６０ｍ ｇ／ Ｌ 的硝酸铝对小鼠卵母细胞减数分裂的影响。结果表明，铝对卵母细胞生发泡破裂（ Ｇ Ｖ Ｂ Ｄ）没有影响，但可以抑制卵母细胞第一极体的排出，３０ｍ ｇ／ Ｌ和 ６０ｍ ｇ／ Ｌ的两个剂量组可降低卵母细胞的存活率。实验结果提示铝对小鼠卵母细胞的减数分裂有破坏作用。 展开更多
关键词 铝 卵母细胞 体外培养
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A-100钢开缝衬套孔挤压强化残余应力场 被引量：13
10
作者 王强 陈雪梅 +1 位作者 张文光 王欣 《中国表面工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期64-67,共4页
为研究A-100钢开缝衬套挤压工艺,提高孔的抗疲劳性能,使用X射线衍射方法和中间开孔的板状试样,研究开缝衬套挤压过盈量、挤后铰削量和保温温度对残余压应力场的影响。研究表明,由于孔受挤压发生弹塑性变形而引入切向残余压应力(σh),σ... 为研究A-100钢开缝衬套挤压工艺,提高孔的抗疲劳性能,使用X射线衍射方法和中间开孔的板状试样,研究开缝衬套挤压过盈量、挤后铰削量和保温温度对残余压应力场的影响。研究表明,由于孔受挤压发生弹塑性变形而引入切向残余压应力(σh),σh值随开缝衬套挤压过盈量(Ice)增加而显著增大,当Ice为0.4mm时,σh值可达-500 MPa以上。未铰削的挤压试样,孔边缘残余压应力最大,可达到-680MPa,随着铰削量(R)的增大,σh降低,而当绞削量达到0.7mm时,σh仅剩余28%。保温10h后,各点σh值均明显降低,350℃下孔边缘σh仅存14%。 展开更多
关键词 开缝衬套挤压 残余应力 过盈量 应力松弛
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骨膜成骨细胞的分离培养及其成骨作用的放射自显影研究 被引量：16
11
作者 姚振强 曾才铭 +4 位作者 唐景清 王宏帮 黄向红 杨庆周 后嘉磷 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 1994年第3期168-171,T009,共5页
取４只家兔胫前骨膜进行成骨细胞分离培养，用３Ｈ－ＴｄＲ标记，然后回植于同一供体的皮下、耳软骨缺损处及挠骨缺损处。分别在２周和４周后处死动物，原位取材，用放射自显影方法观察种植细胞的转归。结果表明，种植的细胞在皮下转化... 取４只家兔胫前骨膜进行成骨细胞分离培养，用３Ｈ－ＴｄＲ标记，然后回植于同一供体的皮下、耳软骨缺损处及挠骨缺损处。分别在２周和４周后处死动物，原位取材，用放射自显影方法观察种植细胞的转归。结果表明，种植的细胞在皮下转化为类骨组织；在软骨缺损处转化为软骨组织；而在骨缺损处则转化为典型的骨组织。提示用骨膜分离培养成骨细胞，回植体内，有可能用于骨缺损和软骨缺损的修复。 展开更多
关键词 成骨细胞 放射自显影 细胞培养
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突触后致密蛋白95(PSD95)和突触小泡蛋白在神经元成熟过程中的分布 被引量：7
12
作者 柴继侠 王元元 +5 位作者 李徽徽 贺文欣 邹维艳 周艳梅 胡小冬 柴强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1619-1622,共4页
目的探讨突触后致密蛋白95(PSD95)和突触小泡蛋白(SYP)在原代培养不同时间神经元中的表达。方法采用免疫荧光技术检测原代培养3 d(3DIV)、7DIV和14DIV大脑皮层神经元内的PSD95和SYP的表达。结果 PSD95在3DIV时主要分布在神经元胞体;7DI... 目的探讨突触后致密蛋白95(PSD95)和突触小泡蛋白(SYP)在原代培养不同时间神经元中的表达。方法采用免疫荧光技术检测原代培养3 d(3DIV)、7DIV和14DIV大脑皮层神经元内的PSD95和SYP的表达。结果 PSD95在3DIV时主要分布在神经元胞体;7DIV时分布在胞体、突起末端和分支处;14DIV时分布在胞体和呈斑点状分布在神经元突起上。SYP在3DIV时无明显表达,7DIV时分布在神经元细胞核内,14DIV时分布在细胞核内和呈斑点状分布在突起上。结论随着培养神经元和突触的发育至成熟,PSD95和SYP最初主要位于神经元胞体和细胞核内,最终大都呈斑点状密集分布在突起上。表明PSD95和SYP虽产生部位不同,但最终都与突触的形成和成熟密切相关。 展开更多
关键词 突触后致密蛋白95(PSD95) 突触小泡蛋白(synaptophysin) 神经元 突触 细胞培养
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贝类组织培养及其应用研究 被引量：13
13
作者 郎刚华 王勇 +1 位作者 刘万顺 徐怀恕 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期15-18,共4页
关键词 贝类 组织培养 细胞培养 应用研究
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血竭提取物对角质形成细胞增殖的影响 被引量：31
14
作者 李丹 郭树忠 +4 位作者 王胜春 张琳西 易成刚 胡永武 张旭东 《中国美容医学》 CAS 2005年第3期274-276,i001,共4页
目的:观察血竭提取物对体外培养角质形成细胞增殖的影响,探讨血竭促进创面愈合的机制。方法:将血竭经过氯仿、乙酸乙酯、乙醇回流提取得到三种提取液,进行角质形成细胞的培养,噻唑蓝(MTT)法检测不同血竭提取物在不同浓度以及不同时间点... 目的:观察血竭提取物对体外培养角质形成细胞增殖的影响,探讨血竭促进创面愈合的机制。方法:将血竭经过氯仿、乙酸乙酯、乙醇回流提取得到三种提取液,进行角质形成细胞的培养,噻唑蓝(MTT)法检测不同血竭提取物在不同浓度以及不同时间点对体外培养角质形成细胞增殖的影响,并绘制最适浓度下细胞生长曲线。利用流式细胞仪分析最适浓度培养条件下角质形成细胞的细胞周期变化。结果:血竭乙酸乙酯提取物在0.0625～0.5mg/ml浓度范围内,促进角质形成细胞增殖,且呈剂量依赖性,在0.5mg/ml浓度值时促进作用最显著,此条件下细胞DNA合成S期较对照组增加25.7%(P<0.01)。结论:血竭乙酸乙酯提取物具有显著促进角质形成细胞增殖作用,提示血竭可能具有促进创面愈合中再上皮化的作用。 展开更多
关键词 血竭 角质形成细胞 细胞增殖 创面愈合
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转HCY-2基因对鸡胚神经管发育的影响 被引量：6
15
作者 李勇 李竹 +4 位作者 陈星 孟昭亨 刀京晶 刘虹 赵智榕 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期350-352,共3页
为探讨新基因ＨＣＹ－２与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用，应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长ＨＣＹ－２ ｃＤＮＡ（２０１４ｂｐ）的真核表达载体转入新生鸡受精卵，培养３．５天后观察其对神经管闭合... 为探讨新基因ＨＣＹ－２与神经管畸形表型的关系及明确其是否具有基因毒性作用，应用脂质体介导基因转移技术将构建的含有全长ＨＣＹ－２ ｃＤＮＡ（２０１４ｂｐ）的真核表达载体转入新生鸡受精卵，培养３．５天后观察其对神经管闭合时期胚胎的整体分子生物学效应，利用Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹和免疫组化等技术研究在整体环境下ＨＣＹ－２蛋白的表达和分布情况。结果显示转ＨＣＹ－２基因（５～２０μｇ）可诱导早期鸡胚发生神经管畸变，而空载质粒组胚胎发育正常；Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹和免疫组化分析发现有ＨＣＹ－２蛋白大量表达，主要分布于胚脑组织中，显著高于空载质粒对照组；透射电镜观察发现转ＨＣＹ－２基因后，胚脑细胞超微结构受损和出现呈弥散分布的凋亡细胞。结论是ＨＣＹ－２基因对神经管闭合时期的胚胎神经系统发育具有明显基因毒性作用。 展开更多
关键词 HCY-2基因 神经管畸形 胚胎 发育 鸡胚
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荷斯坦奶牛子宫内膜上皮细胞的体外培养 被引量：15
16
作者 张世栋 王东升 +3 位作者 王旭荣 潘虎 李宏胜 严作廷 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期134-137,共4页
为建立和完善奶牛子宫内膜上皮细胞的体外培养技术,采用组织培养和胶原酶消化相结合的方法,对中国荷斯坦奶牛的子宫内膜上皮细胞进行了原代分离培养,经胰酶差时消化进行纯化,并以免疫组化法检测角蛋白表达。结果显示,所采用的方法可高... 为建立和完善奶牛子宫内膜上皮细胞的体外培养技术,采用组织培养和胶原酶消化相结合的方法,对中国荷斯坦奶牛的子宫内膜上皮细胞进行了原代分离培养,经胰酶差时消化进行纯化,并以免疫组化法检测角蛋白表达。结果显示,所采用的方法可高效获得呈铺路石样的上皮细胞,角蛋白表达呈阳性,第2～8代的传代细胞在形态特征和增殖状态上保持着与原代细胞相近的生物学特征。 展开更多
关键词 子宫内膜上皮细胞 细胞培养 荷斯坦奶牛
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小鼠睾丸引带细胞的培养及己烯雌酚对培养睾丸引带细胞的影响 被引量：7
17
作者 张镟 蒋学武 +2 位作者 李建宏 马廉 黄天华 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期872-875,共4页
目的：探讨小鼠睾丸引带细胞体外培养的有效方法,并进行形态学观察。研究经典的外源性雌激素己烯雌酚（DES）体外对小鼠睾丸引带发育的影响。方法：手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织并进行细胞培养。台盼蓝染色检测细... 目的：探讨小鼠睾丸引带细胞体外培养的有效方法,并进行形态学观察。研究经典的外源性雌激素己烯雌酚（DES）体外对小鼠睾丸引带发育的影响。方法：手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织并进行细胞培养。台盼蓝染色检测细胞存活率,HE染色观察细胞形态。传代培养并随机分为空白对照组、溶剂对照组（DMSO组）和实验组（DES 1~4组）共6组。溶剂对照组加入DMSO,实验组分别加入0.01、0.10、1.00以及10.00μg/ml DES。分别于培养12、24、48 h后进行细胞形态学观察,CCK-8法检测睾丸引带细胞的生长情况。结果：培养睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞型,有少数的上皮样细胞。原代细胞的存活率为85%~90%。在不同剂量DES作用后的3个不同时间段里,细胞增殖性的检测结果存在时间-剂量效应的显著差异（P〈0.01）。结论：睾丸引带细胞可经一定的方法进行体外培养,外源性雌激素对睾丸引带细胞的生长有抑制作用,且呈现一定的时间-剂量效应。对培养睾丸引带细胞影响的研究是外源性雌激素影响生殖系统发育研究的一条有效的睾丸外途径。 展开更多
关键词 睾丸引带 细胞培养 己烯雌酚 小鼠
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芦荟苦素对黑素细胞与角质形成细胞混合培养模型中黑素合成的影响 被引量：13
18
作者 兰海龙 王正辉 +5 位作者 杨壮群 张铁良 屠军波 荔鹏 虎小毅 李国光 《中国美容医学》 CAS 2007年第3期310-313,共4页
目的:体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,观察芦荟苦素、熊果苷及茶多酚对此模型中黑素细胞的影响。方法:以包皮组织作为细胞来源,分别培养角质形成细胞、黑素细胞;体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合... 目的:体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,观察芦荟苦素、熊果苷及茶多酚对此模型中黑素细胞的影响。方法:以包皮组织作为细胞来源,分别培养角质形成细胞、黑素细胞;体外构建黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,检测芦荟苦素、熊果苷及茶多酚作用于此模型后对黑素细胞酪氨酸酶活性以及黑素合成的影响。结果:黑素细胞与角质形成细胞混合培养5天后出现浅灰色,继续培养,颜色逐渐加深。三种退色剂对酪氨酸酶活性及黑素的合成均呈浓度依赖性抑制。结论:成功构建了黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,三种退色剂均对黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成产生浓度依赖性抑制,以茶多酚作用最强,芦荟苦素次之。 展开更多
关键词 混合培养模型 黑素细胞 角质形成细胞 芦荟苦素 熊果苷 茶多酚
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小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究 被引量：7
19
作者 赵晓娥 兰杰 +3 位作者 王妍 杨培先 胡林勇 马保华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第2期30-34,共5页
建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、102、0 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35... 建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、102、0 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、507、5 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、902、40 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/LⅠ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min。原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法。传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞。组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳。用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好。原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养。 展开更多
关键词 输卵管上皮细胞 细胞培养 细胞纯化 小鼠
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不同温度对毛鱼藤和西非灰毛豆愈伤组织生长的影响 被引量：8
20
作者 谷文祥 曾鑫年 谢建军 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期125-126,共2页
关键词 温度 毛鱼藤 西非灰毛豆 愈伤组织 细胞培养
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