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线粒体和细胞核的互作 被引量：8
1
作者 袁自强 杨金水 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期54-58,共5页
关键词 线粒体 细胞核 互作效应 基因表达 调控
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籼型杂交水稻品质性状的细胞质遗传效应研究——Ⅰ.稻米外观品质及氨基酸含量分析 被引量：8
2
作者 易小平 陈芳远 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 1991年第1期25-32,共8页
选用6个同核异质雄性不育系和相应保持系与两个恢复系,按7×2不完全双列杂交组配成14个组合为材料,研究了粒形、垩白、氨基酸含量3项指标,结果表明:粒长、粒宽、粒厚、长/宽比、长/厚比、无垩白米率、垩白等级、17种氨基酸含量、必... 选用6个同核异质雄性不育系和相应保持系与两个恢复系,按7×2不完全双列杂交组配成14个组合为材料,研究了粒形、垩白、氨基酸含量3项指标,结果表明:粒长、粒宽、粒厚、长/宽比、长/厚比、无垩白米率、垩白等级、17种氨基酸含量、必需氨基酸总量、氨基酸总量在同核异质及同质异核的不同组合间,均存在不同程度的差异。说明这3项指标不仅受到细胞核基因的控制,而且受到核质互作及细胞质基因的影响。 展开更多
关键词 细胞质雄性不育 细胞质遗传 水稻/籼型杂交水稻 同核异质雄性不育系 品质性状
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应用同源重组技术构建小鼠Cchl1a3基因R528H突变型打靶载体的策略 被引量：1
3
作者 姚合斌 高荣凯 +4 位作者 王晓英 黄火高 乔媛媛 尚健 尹义存 《海军总医院学报》 2010年第2期65-69,共5页
目的构建小鼠Cchl1a3基因R528H突变型基因敲入打靶载体,模仿低血钾周期性麻痹患者中的对应发现。方法采用置换型载体,分为长短、短臂设计(1.5～2.0kb),以便用聚合酶链反应(PCR)方法筛选中靶载体和ES细胞(embrgonic stem cell)。首先以Cc... 目的构建小鼠Cchl1a3基因R528H突变型基因敲入打靶载体,模仿低血钾周期性麻痹患者中的对应发现。方法采用置换型载体,分为长短、短臂设计(1.5～2.0kb),以便用聚合酶链反应(PCR)方法筛选中靶载体和ES细胞(embrgonic stem cell)。首先以Cchl1a3基因为模板设计引物,并引入与质粒内插入位点酶切序列相配的内切酶序列,扩增用于套取的同源臂a和b,以及用于插入筛选基因和实行定点突变的同源臂c和d,c和d首尾相接,用点突变特异性PCR在c内实现R528H突变。将a和b定向插入pBR322,借助于温度敏感的pSC101-BAD-gba-(tet)质粒的表达Red/ET重组酶,使其与携带Cchl1a3基因的细菌人工染色体(BAC)实现同源重组,套取含目的突变点、长约8kb的Cchl1a3的基因片断,形成pBR322-Cchl1a3。将c和d定向插入PL451质粒Frt-Neo-Frt片段两侧,酶切c-Frt-Neo-Frt-d片断纯化后,再与pBR322-Cchl1a3质粒一同转入含Red/ET重组酶基因的大肠杆菌EL250菌株,在重组酶的催化下再次实现同源重组,在Cchl1a3基因的给定位点实现R528H突变并插入包含筛选基因和重组酶识别位点的Frt-Neo-Frt片断,完成载体的构建。载体构建过程中,酶切位点变化导致的片断程度改变作为初筛,PCR产物测序结果作为最后的鉴定依据。结果打靶载体符合设计要求。结论运用点突变特异性PCR,结合Red/ET重组技术构建基因定点突变的基因敲入型打靶载体,在重组酶催化下仅需要2次同源重组即可完成。该策略成熟简便,省时省力,构建的载体易于鉴定。 展开更多
关键词 Cchl1a3基因 低血钾 打靶载体 基因敲入 同源重组
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