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无毛基因突变促进无毛小鼠白色脂肪组织褐变的作用机制
1
作者 朱奎成 杜春燕 章金涛 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第6期1424-1430,共7页
背景:白色脂肪存储能量,棕色脂肪消耗能量。白色脂肪褐变是对抗肥胖和代谢紊乱的有效策略,但驱动这一过程的机制尚不清楚。目的:揭示无毛基因突变导致白色脂肪褐变的分子机制。方法:选取10周龄雄性豫医无毛小鼠和同窝出生的野生型小鼠... 背景:白色脂肪存储能量,棕色脂肪消耗能量。白色脂肪褐变是对抗肥胖和代谢紊乱的有效策略,但驱动这一过程的机制尚不清楚。目的:揭示无毛基因突变导致白色脂肪褐变的分子机制。方法:选取10周龄雄性豫医无毛小鼠和同窝出生的野生型小鼠各10只,记录小鼠体质量、采食量和腹股沟白色脂肪组织质量;ELISA法检测血清瘦素和脂联素水平;葡萄糖耐量实验评估糖代谢功能;胰岛素耐量实验分析胰岛素敏感性;苏木精-伊红染色观察腹股沟白色脂肪组织的形态学变化;实时荧光定量PCR和免疫染色分析腹股沟白色脂肪组织褐变相关基因和蛋白表达。结果与结论:①与野生型小鼠相比,豫医无毛小鼠褐色脂肪含量增加,并最终增加对葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性;无毛基因突变降低了小鼠体质量和腹股沟脂肪质量,但采食量与野生型小鼠比较无明显变化,表明体质量和脂肪质量减轻并非因食物摄入减少;②苏木精-伊红染色显示豫医无毛小鼠腹股沟白色脂肪组织的脂肪细胞发生褐变,变小、变圆并伴有多室细胞出现;③腹股沟白色脂肪组织中脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α表达升高,激活甲状腺激素受体α,驱动解偶联蛋白1、线粒体生物发生基因核呼吸因子1和线粒体转录因子A表达,促进脂肪细胞褐变。因此,无毛基因突变激活了过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α/甲状腺激素受体α/解偶联蛋白1信号通路,小鼠棕色脂肪含量增加,从而促进能量消耗和产热,抑制肥胖。 展开更多
关键词 无毛基因 脂肪细胞褐变 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)/甲状腺激素受体α(TRα)/解耦联蛋白1(UCP1)信号通路 解偶联蛋白1 肥胖 豫医无毛小鼠
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狗尾草生物量增大突变体的转录组分析及氮素代谢相关基因挖掘
2
作者 张丽丽 赵海旭 +4 位作者 胡帅 霍姗姗 夏启玉 郭安平 赵辉 《热带作物学报》 北大核心 2025年第4期853-865,共13页
生物量大小是植物进化适应和产量的关键因素,获得高产作物品种一直是作物育种的基本要求。本研究在对狗尾草ME34的组织培养过程中,发现1株生物量变大的突变体植株Mu,其性状可以稳定遗传给下一代。通过对狗尾草表型观察和幼苗、成苗的农... 生物量大小是植物进化适应和产量的关键因素,获得高产作物品种一直是作物育种的基本要求。本研究在对狗尾草ME34的组织培养过程中,发现1株生物量变大的突变体植株Mu,其性状可以稳定遗传给下一代。通过对狗尾草表型观察和幼苗、成苗的农艺性状统计分析,发现狗尾草突变体幼苗的生物量(鲜重和干重)及成苗的株高均显著高于狗尾草野生型植株,狗尾草突变体成苗的穗长和种子长度也显著长于狗尾草野生型植株,且均达极显著水平。同时,对ME34和Mu的叶和茎进行转录组测序,并对部分基因进行荧光定量PCR验证。差异表达基因分析发现,氮素代谢和调控相关的差异表达基因占差异基因总数的20%左右。GO功能和KEGG富集分析同样发现,生物量大小与氮素的代谢、调控有着密切的关系。利用DEGseq方法分析差异基因的变化,获得了参与氮素吸收、运输、同化和再利用的相关基因,如硝酸盐转运蛋白NRT、铵转运蛋白AMT、硝酸还原酶NR、亚硝酸还原酶NiR、谷氨酸合成酶GOGAT、NLP家族转录因子以及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶等。本研究为谷子等作物的育种工作提供重要分子依据和基础。 展开更多
关键词 狗尾草 生物量 转录组测序 氮素利用效率
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(Pyr1)Apelin-13提高大鼠布比卡因致死阈值的效果及其机制
3
作者 林婷婷 范巧云 +2 位作者 董娇娇 施克俭 刘乐 《温州医科大学学报》 2025年第6期431-437,共7页
目的:探讨Apelin/APJ系统对大鼠布比卡因致死阈值的影响及其潜在的作用机制。方法:20只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、(Pyr1)Apelin-13处理组(A组)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C处理组(C组)和Compound C联合(Pyr1)... 目的:探讨Apelin/APJ系统对大鼠布比卡因致死阈值的影响及其潜在的作用机制。方法:20只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、(Pyr1)Apelin-13处理组(A组)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C处理组(C组)和Compound C联合(Pyr1)Apelin-13处理组(CA组)。给C组和CA组大鼠静脉注射0.25 mg/kg Compound C,20 min后,A组和CA组大鼠注射150μg/kg(Pyr1)Apelin-13,NS组则注射等量0.9%氯化钠溶液。随后,四组大鼠均输注2.5 mg/(kg·min)速率的布比卡因直至心脏停止搏动。收集大鼠心肌组织样本,监测并记录血流动力学参数,计算心律失常时间(Tr)、心脏停搏时间(Ta)及布比卡因致死阈值(Elt)。电镜下观察心肌组织线粒体超微结构;采用试剂盒测定样本中肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、CPT2、肉碱酰基肉碱转位酶(CACT)和ATP的表达水平;荧光定量PCR检测样本中过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和AMPK mRNA的表达水平;Western blot测定样本中PGC-1α、AMPK和p-AMPK蛋白的表达。结果:与NS组相比,A组大鼠的Tr、Ta显著延长,Elt增加,血流动力学参数得到明显改善,心肌组织线粒体结构得到显著修复,心肌组织中CPT1、CPT2、CACT和ATP浓度显著升高,p-AMPK和PGC-1α蛋白及mRNA的表达均显著上调(P<0.05)。与A组相比,CA组大鼠的Ta缩短,Elt降低,心肌组织线粒体出现肿胀和空泡化现象,心肌组织中CPT1、CPT2、CACT和ATP浓度显著降低,p-AMPK和PGC-1α蛋白及mRNA的表达均显著下调(P<0.05)。结论:(Pyr1)Apelin-13能够提高大鼠布比卡因致死阈值,其机制可能与激活AMPK/PGC-1α信号通路改善能量代谢有关。 展开更多
关键词 (Pyr1)Apelin-13 布比卡因 AMPK/PGC-1α通路
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籽鹅产蛋相关插入和缺失变异挖掘与分析
4
作者 张震 张梦幻 +4 位作者 葛爱有 陈保君 韩志强 佟玲 陈国福 《黑龙江动物繁殖》 2025年第6期49-55,共7页
为挖掘与籽鹅产蛋性状密切相关的插入/缺失(InDel)变异,试验选择300日龄籽鹅60只,按产蛋量分为高、低产组,每组30只,进行全基因组重测序,应用选择消除分析(Fst)和全基因组关联分析(GWAS),挖掘与产蛋性状相关的InDel位点及候选基因。结... 为挖掘与籽鹅产蛋性状密切相关的插入/缺失(InDel)变异,试验选择300日龄籽鹅60只,按产蛋量分为高、低产组,每组30只,进行全基因组重测序,应用选择消除分析(Fst)和全基因组关联分析(GWAS),挖掘与产蛋性状相关的InDel位点及候选基因。结果显示:高、低产组分别鉴定出3110515个和3151037个InDel变异;选择消除分析后,GO富集分析得到RNA聚合酶Ⅱ介导的转录负调控和质膜两个条目与高频基因SMAD5,KEGG富集分析得到Wnt通路、促性腺激素释放激素通路、Hedgehog信号通路和丝裂原活化蛋白激酶信号通路、高频基因PRKACB、MAPK10和CAMK2D与产蛋性能高度相关;GWAS共筛选出4个与产蛋性状显著相关的InDel位点,即Chr1:156544412(位于OXGR1内含子区)、Chr2:89516407和Chr5:53656301(均位于未知区域)、Chr7:30180374(位于RBMS3基因内含子区),除Chr1:156544412外3个位点存在多态性。 展开更多
关键词 籽鹅 全基因重测序 产蛋性状 插入/缺失变异 候选基因 分子标记
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安氏新银鱼(Neosalanx anderssoni)性别特异性位点筛选及性别鉴定方法开发
5
作者 王心悦 邢腾飞 +2 位作者 杨昊 李玉龙 刘进贤 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第2期467-474,共8页
安氏新银鱼是我国重要的小型经济鱼类物种,具有较高的经济价值。但目前缺乏一种快速、经济有效的性别鉴定方法,极大地阻碍了其性别决定分子机制、性染色体演化历程的研究和水产育种与养殖技术方面的生产实践。本研究通过比较安氏新银鱼... 安氏新银鱼是我国重要的小型经济鱼类物种,具有较高的经济价值。但目前缺乏一种快速、经济有效的性别鉴定方法,极大地阻碍了其性别决定分子机制、性染色体演化历程的研究和水产育种与养殖技术方面的生产实践。本研究通过比较安氏新银鱼雌性与雄性的全基因组重测序数据,发现雌雄之间存在一个显著差异的基因组区域(chr02:2798574~5434239 bp)。基于测序深度差异分析筛选得到3个雌性特异性片段,长度分别为10 bp、167 bp和53 bp。在长为167 bp的雌性特异性位点附近设计引物,PCR扩增及凝胶电泳结果显示,雌性在该区域扩增产物具有2条带,雄性具有1条带,且雄性条带的亮度高于雌性两条带的亮度。该引物可以有效地区分安氏新银鱼的遗传性别,并分别在双洋港、秦皇岛已知性别的两个群体22个雌性和22个雄性个体中得到了验证。为了进一步验证研究结果的可靠性,分别从两个群体中随机选取雌雄个体样本的PCR产物进行测序分析,结果与预期相符,体现了该方法的有效性。研究结果也支持安氏新银鱼的性别决定系统为ZZ/ZW系统。本研究开发的方法可快速有效鉴定安氏新银鱼的遗传性别,并为该物种性别决定遗传机制及性染色体演化等后续研究提供理论支撑。 展开更多
关键词 安氏新银鱼 雌性特异性位点 遗传性别鉴定 性别决定系统 引物开发
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香蕉提取物对霍山石斛试管苗壮苗的影响 被引量：28
6
作者 李小军 刘石泉 +2 位作者 潘维陵 沈世缘 周根余 《江苏大学学报（自然科学版）》 EI CAS 2004年第6期469-472,共4页
研究了不同香蕉品种的提取物及其添加方式和质量分数对霍山石斛试管苗壮苗的影响,并对香蕉上清液的可溶性糖质量浓度进行了检测.结果表明:当1/2MS附加质量分数为20%菲律宾香蕉上清液时,对霍山石斛试管苗壮苗的促进作用最佳,而且试管苗... 研究了不同香蕉品种的提取物及其添加方式和质量分数对霍山石斛试管苗壮苗的影响,并对香蕉上清液的可溶性糖质量浓度进行了检测.结果表明:当1/2MS附加质量分数为20%菲律宾香蕉上清液时,对霍山石斛试管苗壮苗的促进作用最佳,而且试管苗可溶性糖质量浓度也最高,附加海南香蕉时促进作用次之,广东芝麻香蕉作用效果最差,这与三种香蕉品种可溶性糖质量浓度高低的检测结果相一致. 展开更多
关键词 霍山石斛 香蕉提取物 试管苗壮苗
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利用微卫星标记分析家鸡的群体遗传变异 被引量：30
7
作者 杨勇 朱庆 胡刚安 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期148-152,共5页
作者选用 10对微卫星引物分析了 8个家鸡品种 (系 )及两个杂交群体的遗传变异、群体内杂合度 ,并用计算出的遗传距离对 10个家鸡群体进行了UPGMA聚类分析 .试验结果表明 ,微卫星标记具有丰富的多态性 ,所有微卫星的PCR扩增结果全部能重... 作者选用 10对微卫星引物分析了 8个家鸡品种 (系 )及两个杂交群体的遗传变异、群体内杂合度 ,并用计算出的遗传距离对 10个家鸡群体进行了UPGMA聚类分析 .试验结果表明 ,微卫星标记具有丰富的多态性 ,所有微卫星的PCR扩增结果全部能重复 .所用 10个微卫星标记平均每对引物可检测 5.4个等位基因 ;微卫星标记可以准确反映 10个试验家鸡群体的真实杂合度 . 展开更多
关键词 鸡 微卫星 分子标记 群体遗传变异 杂种优势
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陆地棉免打顶对株高和主要经济性状的影响 被引量：7
8
作者 周小云 马盾 +3 位作者 王浩 高升旗 王子霞 海热古力 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期71-74,共4页
以陆地棉矮化免打顶突变体及其野生型为材料,运用形态学和统计学方法,对其株高、主茎节间长和主要经济性状进行比较。结果表明,在出苗至现蕾初期,突变体和野生型Ⅰ植株的株高无明显差异,现蕾期后,突变体与野生型Ⅰ的株高差异逐渐明显,... 以陆地棉矮化免打顶突变体及其野生型为材料,运用形态学和统计学方法,对其株高、主茎节间长和主要经济性状进行比较。结果表明,在出苗至现蕾初期,突变体和野生型Ⅰ植株的株高无明显差异,现蕾期后,突变体与野生型Ⅰ的株高差异逐渐明显,且差异显著,但主茎节间数无显著差异;突变体与野生型Ⅰ的籽棉产量和皮棉产量差异极显著,与野生型Ⅱ差异不显著,突变体与野生型Ⅰ、Ⅱ的纤维长度和强度的差异显著。从总体上看,本试验的突变体品系能够满足棉花生产需要。 展开更多
关键词 陆地棉 突变体 免打顶 株高 经济性状
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黄海带鱼、小带鱼RAPD和线粒体16S rRNA基因序列变异分析 被引量：15
9
作者 蒙子宁 庄志猛 +2 位作者 金显仕 唐启升 苏永全 《自然科学进展》 北大核心 2003年第11期1170-1176,共7页
对黄海带鱼、小带鱼各12个个体进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,对比多态位点比例、遗传多态度以及遗传距离,并构建Neighbor-joining系统树;通过PCR扩增出线粒体16SrRNA基因,纯化后直接测序,利用生物信息学方法进行序列分析和核苷酸变异... 对黄海带鱼、小带鱼各12个个体进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,对比多态位点比例、遗传多态度以及遗传距离,并构建Neighbor-joining系统树;通过PCR扩增出线粒体16SrRNA基因,纯化后直接测序,利用生物信息学方法进行序列分析和核苷酸变异比较,结合GenBank上大西洋叉尾带鱼同源序列构建UPGMA系统树.分析结果表明:(1)RAPD技术研究黄海带鱼和小带鱼的遗传多样性具有较高的灵敏度和检出率,带鱼的多态比例和遗传多态度均较小带鱼的低;(2)线粒体16S rRNA基因序列在分析这两物种遗传变异时表现出保守和变异的双重特性,种内变异极小而种间较大;(3)5个随机引物扩增出种特异的RAPD带,可作为种间分子鉴定标记;(4)研究证实带鱼和小带鱼是不同属的两个种,从而在基因水平上支持了Nelson分类系统的观点. 展开更多
关键词 黄海 小带鱼 RAPD 线粒体16SRRNA 基因序列变异 遗传多样性
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铁皮石斛不同繁殖代数遗传稳定性RAPD的研究 被引量：17
10
作者 刘石泉 李小军 周根余 《江南大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第5期518-521,共4页
研究铁皮石斛单蒴果种子内不同无性繁殖代数的遗传稳定性.利用从100个随机引物筛选出23个稳定性较好的10碱基引物,对来自单蒴果的7代无性繁殖种苗进行RAPD检测.发现7代无性繁殖的组培苗内代代之间遗传距离很小,但代数相差越大其遗传距... 研究铁皮石斛单蒴果种子内不同无性繁殖代数的遗传稳定性.利用从100个随机引物筛选出23个稳定性较好的10碱基引物,对来自单蒴果的7代无性繁殖种苗进行RAPD检测.发现7代无性繁殖的组培苗内代代之间遗传距离很小,但代数相差越大其遗传距离就越大,在0～0.043 5范围内.其中在1～3代未探查到变异,但从第4代始,有部分引物RAPD带型发生变化,但变化甚微.23个稳定引物只探查到了7个变异位点.铁皮石斛组培过程中种内存在一定的变异,但变异甚微,所以建立铁皮石斛稳定的无性快繁体系是切实可行的. 展开更多
关键词 铁皮石斛 随机扩增多态性DNA 蒴果 繁殖代数 遗传稳定性
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紫外线对果蝇生长发育和表型变异的影响 被引量：14
11
作者 张俊贤 郭光艳 齐志广 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2006年第1期90-93,共4页
对紫外线照射黄身果蝇进行了研究，结果表明：紫外线照射能够极显著地降低果蝇的寿命，使果蝇成蝇的存活时间比对照组降低66．31％～83．96％；能够抑制果蝇的产卵量。并降低卵的成活率；影响子代的个体发育，使子二代个体重量减少12．0... 对紫外线照射黄身果蝇进行了研究，结果表明：紫外线照射能够极显著地降低果蝇的寿命，使果蝇成蝇的存活时间比对照组降低66．31％～83．96％；能够抑制果蝇的产卵量。并降低卵的成活率；影响子代的个体发育，使子二代个体重量减少12．08％．紫外线照射还能影响当代或子代的行为性状。引起果蝇子代的表型变化．随着照射时间的延长和照射频率的增加，其伤害作用明显增加． 展开更多
关键词 紫外线 果蝇 寿命 产卵量 个体发育 表型变异
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鸡Myogenin基因单核苷酸多态检测及群体遗传分析 被引量：7
12
作者 王启贵 李辉 +2 位作者 李宁 王宇祥 唐志权 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第6期82-85,共4页
肌纤维在决定肌肉生长和肉质方面起主要作用,并受到MyoD基因家族的调控。该家族基因编码螺旋-环-螺旋蛋白。以鸡Myogenin基因为候选基因,通过PCR-SSCP分析该基因5′调控区的变异。结果表明,在鸡Myogenin基因5′调控区存在3处SNPs,这些S... 肌纤维在决定肌肉生长和肉质方面起主要作用,并受到MyoD基因家族的调控。该家族基因编码螺旋-环-螺旋蛋白。以鸡Myogenin基因为候选基因,通过PCR-SSCP分析该基因5′调控区的变异。结果表明,在鸡Myogenin基因5′调控区存在3处SNPs,这些SNPs产生的不同基因型及等位基因在7个品种鸡间分布存在极显著的差异(P<0.001)。推测该基因的变异对鸡生长发育可能有一定的影响。 展开更多
关键词 鸡 Myogenin基因 单核苷酸多态
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电子束辐照对唐菖蒲M1代花粉母细胞的影响 被引量：4
13
作者 张志伟 王丹 +1 位作者 闻方平 张晓雪 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1053-1056,共4页
为探讨电子束对花粉母细胞的影响,用不同剂量的3 MeV电子束辐照唐菖蒲"超级"球茎,对其M1代的花粉母细胞进行减数分裂观察及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明:唐菖蒲减数分裂时出现遗传损伤,产生的染色体畸变... 为探讨电子束对花粉母细胞的影响,用不同剂量的3 MeV电子束辐照唐菖蒲"超级"球茎,对其M1代的花粉母细胞进行减数分裂观察及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明:唐菖蒲减数分裂时出现遗传损伤,产生的染色体畸变类型包括滞后染色体、染色体桥、游离染色体、染色体不均等分离和微核等;在四分孢子期,则有较多三分孢子和多分孢子形成;小孢子的形状和大小有差异,主要表现为小孢子的体积变小。花粉母细胞染色体畸变类型及频率的统计表明,畸变类型以游离染色体和微核为主。SDS-PAGE分析观测到,电子束辐照能明显改变M1代花粉的蛋白表达,低剂量辐照即可产生明显作用,在不同辐照剂量下分别观测到特殊蛋白表达条带,剂量大于160 Gy时,蛋白表达条带较低剂量辐照时有所减少。研究结果表明,电子束辐照诱变可作为唐菖蒲育种的一个有效手段。 展开更多
关键词 电子束 唐菖蒲 小孢子母细胞 减数分裂 SDS-PAGE
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黄瓜正常品种及一个芽黄突变体的核型分析 被引量：8
14
作者 李娟娟 王蕾 +3 位作者 贾俊忠 陈福龙 陈芳 高剑峰 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第2期296-300,共5页
对黄瓜(Cucumis sativus L.)6个正常品种和1个芽黄突变体的根尖细胞染色体进行计数,并对其核型进行了分析。结果表明,正常黄瓜与芽黄突变体黄瓜的染色体数目均为2n=14,属于二倍体植物,染色体基数为7。芽黄突变体的染色体核型公式与正常... 对黄瓜(Cucumis sativus L.)6个正常品种和1个芽黄突变体的根尖细胞染色体进行计数,并对其核型进行了分析。结果表明,正常黄瓜与芽黄突变体黄瓜的染色体数目均为2n=14,属于二倍体植物,染色体基数为7。芽黄突变体的染色体核型公式与正常黄瓜品种长春密刺(C.sativus cv.Changchunmici)、津研4号(C.sativus cv.Jinyan No.4)、津优2号(C.sativus cv.Jinyou No.2)、津优3号(C.sativus cv.Jinyou No.3)、农城3号(C.sativus cv.Nongcheng No.3)、新泰密刺(C.sativus cv.Xintaimici)的染色体核型公式一致,均为2n=14=12m+2sm;核型不对称系数为55.49%～57.45%,核型类型均为1A型,属对称核型。在系统演化上,黄瓜可能属于较原始的种类。通过对不同黄瓜材料间的染色体长度进行方差分析,结果P>0.05,说明在染色体水平上芽黄突变体与正常的黄瓜几乎没有区别。 展开更多
关键词 黄瓜 芽黄突变体 染色体 核型分析
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层状岩质边坡失稳的燕尾突变模型 被引量：8
15
作者 姜永东 鲜学福 郭臣业 《重庆大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期553-557,共5页
根据层状岩质边坡含软弱夹层失稳的特点,建立了边坡地质力学模型,应用非线性科学理论中的突变理论建立了完善的边坡失稳燕尾突变模型。研究得出内外环境参数的变化改变系统控制变量的取值。边坡势函数形式发生变化,边坡在演化过程中可... 根据层状岩质边坡含软弱夹层失稳的特点,建立了边坡地质力学模型,应用非线性科学理论中的突变理论建立了完善的边坡失稳燕尾突变模型。研究得出内外环境参数的变化改变系统控制变量的取值。边坡势函数形式发生变化,边坡在演化过程中可能处于稳定状态,也可能处于失稳状态,其稳定性取决于边坡岩体的内在和外界因素。计算了边坡处于失稳状态下系统所释放出的能量。研究结果加深了对滑坡成因的认识,论证了应用突变理论研究边坡失稳现象的可行性。 展开更多
关键词 层状岩质边坡 稳定性 燕尾突变模型
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豆豉纤溶酶的定向进化 被引量：4
16
作者 张少平 崔堂兵 +1 位作者 陈亮 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期138-141,146,共5页
为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序... 为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序列分析表明突变酶mDFE3基因发生了6处碱基突变,其中4处突变发生氨基酸取代,2处为同义突变;通过swiss-model repository模拟突变酶mDFE3的结构,显示3个突变氨基酸位于回环结构上,1个位于α螺旋上;酶动力学测定结果表明突变酶mDFE3的Km值由0.58mmol/L降低至0.45mmol/L,突变酶mDFE3的催化效率(kcat)是野生型的2.57倍. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 豆豉纤溶酶 易错PCR 定向进化 筛选
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唐菖蒲电子束诱变作用同功酶及SDS-PAGE分析 被引量：5
17
作者 王丹 张志伟 +2 位作者 张冬雪 林绍森 匡猛 《北方园艺》 CAS 北大核心 2007年第8期180-182,共3页
为了探讨电子束对唐菖蒲诱变育种的可行性和不同剂量的电子束对唐菖蒲的影响;用能量为3MeV的不同剂量电子束辐照唐菖蒲"江山美人"和"超级"球茎,对不同处理植株的过氧化物酶、酯酶、淀粉酶和过氧化氢酶4种同功酶及SD... 为了探讨电子束对唐菖蒲诱变育种的可行性和不同剂量的电子束对唐菖蒲的影响;用能量为3MeV的不同剂量电子束辐照唐菖蒲"江山美人"和"超级"球茎,对不同处理植株的过氧化物酶、酯酶、淀粉酶和过氧化氢酶4种同功酶及SDS-PAGE的变化进行了研究。结果表明:同功酶及SDS-PAGE与对照相比均发生了明显的变化,随着辐照剂量的改变,出现了多种变异形式,变化与形态学变化相一致,但品种间存在较大差异。基于同功酶及SDS-PAGE谱带带型,数据分析使用SPSS11.5,采用单匹配相似系数组内连结分层聚类,分别得到了2品种的聚类树状图,图中显示,"江山美人"被分成了3个组:其中2组分别为200Gy处理材料和240Gy处理材料,另一组包含了小于等于160Gy剂量处理材料及对照;"超级"被分成了3个组:其中2组分别为对照和240Gy处理材料,另一组包含了小于等于200Gy的各处理材料。由聚类分析可以看出"江山美人"比"超级"有更强的电子束耐受性。试验表明,电子束辐照对植株能诱导明显的变异,试验为快中子诱变机理的进一步研究打下基础。 展开更多
关键词 电子束 唐菖蒲 同功酶 SDS-PAGE电泳
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“黄优1号＂条斑紫菜新品系遗传背景和营养成分分析 被引量：4
18
作者 曹原 汪文俊 +5 位作者 梁洲瑞 刘福利 孙修涛 姚海芹 李晓蕾 王飞久 《广西科学》 CAS 2016年第2期131-137,共7页
【目的】丰富我国北方紫菜(Pyropia)栽培种质,培育优良新品系。【方法】以山东长岛县砣矶岛野生紫菜作为亲本,经过选育,分别采集在南通、日照和砣矶岛海区栽培的"黄优1号"紫菜成体进行遗传背景(rbcL和细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基(C... 【目的】丰富我国北方紫菜(Pyropia)栽培种质,培育优良新品系。【方法】以山东长岛县砣矶岛野生紫菜作为亲本,经过选育,分别采集在南通、日照和砣矶岛海区栽培的"黄优1号"紫菜成体进行遗传背景(rbcL和细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基(Cycochrome oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因)和营养成分(藻胆蛋白、叶绿素a Chl a、类胡萝卜素Car和可溶性蛋白TSPs)分析。【结果】依据rbcL基因序列(约1 200bp)进行遗传多样性分析,仅砣矶岛养殖绳上全沉水生长的野生紫菜群体与其他品系(群体)具有1.1%的遗传差异,而其栽培群体("黄优1号")的rbcL基因序列与对照条斑紫菜品系完全一致;依据COⅠ基因序列(约680bp),仅南通的两栽培品系("黄优1号"和培育品系2)具有2bp差异,其他品系(群体)的COⅠ基因序列与对照条斑紫菜完全一致。日照海区栽培的"黄优1号"紫菜其营养物质含量比其他海区栽培的"黄优1号"紫菜、野生亲本以及培育品系2高;南通海区栽培的"黄优1号"条斑紫菜品质一般,大部分营养物质含量均低于日照栽培藻体。【结论】由rbcL和COⅠ基因序列推断砣矶岛岸边和养殖绳上的野生紫菜大部分为条斑紫菜,选育品系"黄优1号"为条斑紫菜;在不同海区进行栽培的"黄优1号"条斑紫菜营养成分均优于其野生亲本;初步研究结果表明该品系更适于在日照海区栽培。 展开更多
关键词 条斑紫菜 藻胆蛋白 叶绿素A 可溶性蛋白 RBCL基因 CO工基因
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时相温度梯度凝胶电泳在线粒体基因突变检测中的应用 被引量：2
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作者 谭端军 刘玲玲 +4 位作者 文毅 薛桥 王士雯 Lee-Jun C Wong 陈天健 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期139-141,共3页
目的　评价时相温度梯度凝胶电泳技术 (TTGE)在肿瘤患者线粒体基因同质性和异质性突变检测中的应用。方法　对117例肿瘤组织和配对正常组织的全线粒体基因进行PCR扩增和TTGE突变筛选分析 ,对TTGE显示在肿瘤和配对正常组织中具有不同类... 目的　评价时相温度梯度凝胶电泳技术 (TTGE)在肿瘤患者线粒体基因同质性和异质性突变检测中的应用。方法　对117例肿瘤组织和配对正常组织的全线粒体基因进行PCR扩增和TTGE突变筛选分析 ,对TTGE显示在肿瘤和配对正常组织中具有不同类型电泳带型变化的片段进行测序。结果　TTGE在总共 36 5 4片段中发现 16 0个体细胞性线粒体基因突变片段 ,经与直接测序结果比较 ,TTGE检测体细胞性突变的敏感性和特异性分别达 96 2 7%和 94 0 5 %。结论　TTGE是筛选线粒体基因体细胞性同质性突变和各种比例异质性突变的一种敏感方法。 展开更多
关键词 肿瘤 时相温度凝胶梯度电泳 DNA 线粒体 突变
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酿酒酵母海藻糖合成酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 被引量：3
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作者 杨波 戴秀玉 周坚 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期372-378,共7页
用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　... 用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＦＦ４１６９和ＦＦ４１６９和ＦＦ４０５０。对转化株的质粒ＤＮＡ酶切分析表明均含有１．５ｋｂＰＣＲ克隆片段。生长曲线实难证明，带有克隆片段的转化株在含０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的高渗透压基础培养基中生长良好；用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）结合蒸发光散射（ＥＬＳＤ）技术测定细胞内海藻糖实验证明转化株能够合成海藻糖。 展开更多
关键词 TPS1基因 海藻糖 PCR克隆 表达 酿酒酵母 海藻糖合成酶
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