目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基...目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。展开更多
文摘目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。
