E3泛素连接酶作为泛素-蛋白酶体系统的核心组分,通过介导靶蛋白的泛素化修饰在维持细胞内蛋白质稳态中发挥着关键作用。近年来,E3泛素连接酶在肿瘤发生发展中的异常调控机制成为研究热点,但不同结构类型的E3泛素连接酶在肿瘤中的具体功...E3泛素连接酶作为泛素-蛋白酶体系统的核心组分,通过介导靶蛋白的泛素化修饰在维持细胞内蛋白质稳态中发挥着关键作用。近年来,E3泛素连接酶在肿瘤发生发展中的异常调控机制成为研究热点,但不同结构类型的E3泛素连接酶在肿瘤中的具体功能及调控机制仍有待系统解析。因此,系统梳理不同类型的E3泛素连接酶在肿瘤发生发展中的作用机制,对于阐释肿瘤的分子病理机制和开发新型靶向治疗策略具有重要的理论与临床价值。本文首先对E3泛素连接酶的分类及结构特征进行阐述,重点解析HECT(homologous to E6AP carboxyl-terminus)、RING(really interesting new gene)、RBR(RING-between-RING)和U-box家族E3泛素连接酶的结构域组成及转移泛素的作用机制;其次,深入探讨一些典型的E3泛素连接酶在4种常见的高发恶性肿瘤(肺癌、肝癌、结直肠癌和乳腺癌)发生发展过程中呈现的双重作用、调控的靶蛋白及相关信号通路,揭示E3泛素连接酶在肿瘤进展及耐药性调控中的分子机制;最后,总结E3泛素连接酶作为肿瘤治疗靶点的最新研究进展及潜在治疗策略,并探讨靶向E3泛素连接酶治疗策略的疗效和安全性风险等挑战。未来还需进一步整合结构生物学、高通量筛选和人工智能辅助药物设计等多学科交叉手段,推动E3泛素连接酶在肿瘤诊疗领域的深入发展,为改善肿瘤患者预后、提升治疗效果带来新的希望。展开更多
目的:从人肝癌组织中分离培养肝癌干细胞样细胞,为进一步研究肝癌干细胞靶向治疗奠定基础。方法:采用酶消化法和以原代培养结合短暂传代培养的方法从人肝癌组织中分离出含人肝癌干细胞样细胞(human liver cancer stem-like cells,hLCSL...目的:从人肝癌组织中分离培养肝癌干细胞样细胞,为进一步研究肝癌干细胞靶向治疗奠定基础。方法:采用酶消化法和以原代培养结合短暂传代培养的方法从人肝癌组织中分离出含人肝癌干细胞样细胞(human liver cancer stem-like cells,hLCSLCs)的连续传代细胞,分别加入肝素、白蛋白、氢化可的松以筛选适用于hLCSLCs的无血清悬浮成球培养基。以流式细胞术检测hLCSLCs和由无血清悬浮成球培养所获得的成球细胞中旁群(side population,SP)细胞、CD133及CD90等的表达,裸鼠成瘤实验检测这两种细胞的致瘤能力。结果:成功地从人肝癌组织分离获得hLCSLCs,其SP、CD133+和CD90+细胞含量分别为0.9%、0.8%和12.7%,裸鼠皮下接种2000个SP细胞的成瘤率为100%。含有肝素的无血清培养基更适于hLCSLCs的成球培养,所获成球细胞中SP、CD133+和CD90+细胞含量分别为4.6%、9.7%和48%,接种10000个成球细胞即可全部成瘤。结论:成功建立了从人肝癌组织中分离肿瘤干细胞样细胞的方法,添加肝素的无血清悬浮成球培养法可有效富集肝癌干细胞样细胞。展开更多
文摘E3泛素连接酶作为泛素-蛋白酶体系统的核心组分,通过介导靶蛋白的泛素化修饰在维持细胞内蛋白质稳态中发挥着关键作用。近年来,E3泛素连接酶在肿瘤发生发展中的异常调控机制成为研究热点,但不同结构类型的E3泛素连接酶在肿瘤中的具体功能及调控机制仍有待系统解析。因此,系统梳理不同类型的E3泛素连接酶在肿瘤发生发展中的作用机制,对于阐释肿瘤的分子病理机制和开发新型靶向治疗策略具有重要的理论与临床价值。本文首先对E3泛素连接酶的分类及结构特征进行阐述,重点解析HECT(homologous to E6AP carboxyl-terminus)、RING(really interesting new gene)、RBR(RING-between-RING)和U-box家族E3泛素连接酶的结构域组成及转移泛素的作用机制;其次,深入探讨一些典型的E3泛素连接酶在4种常见的高发恶性肿瘤(肺癌、肝癌、结直肠癌和乳腺癌)发生发展过程中呈现的双重作用、调控的靶蛋白及相关信号通路,揭示E3泛素连接酶在肿瘤进展及耐药性调控中的分子机制;最后,总结E3泛素连接酶作为肿瘤治疗靶点的最新研究进展及潜在治疗策略,并探讨靶向E3泛素连接酶治疗策略的疗效和安全性风险等挑战。未来还需进一步整合结构生物学、高通量筛选和人工智能辅助药物设计等多学科交叉手段,推动E3泛素连接酶在肿瘤诊疗领域的深入发展,为改善肿瘤患者预后、提升治疗效果带来新的希望。
