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Traction force microscopy:Bridging cytology and mechanics through optics
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作者 Ming Liu Xuefei Chen +2 位作者 Bo Jiang Chunyang Xiong Hui Li 《Journal of Innovative Optical Health Sciences》 2026年第2期1-11,共11页
Cells interact with the extracellular matrix and generate traction forces,which play fundamental roles in many cytological activities,such as migration and differentiation.The quanti fication of these traction forces ... Cells interact with the extracellular matrix and generate traction forces,which play fundamental roles in many cytological activities,such as migration and differentiation.The quanti fication of these traction forces is a prerequisite for understanding the interaction and regulation between force and functions,which can be accomplished by traction force microscopy(TFM).In TFM,the forces are determined by tracking the displacement of fiducial markers through optical microscopy.The type of fiducial marker,microscopy modality,and image processing algorithms are key factors determining the final resolution of TFM.This review summarizes efforts in three aspects to enhance the performance of TFM and discusses the challenges of further development,particularly from an optical view. 展开更多
关键词 Cell Mechanics fiducial marker optical microscope SUPER-RESOLUTION
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Isthmin-1通过调控FoxO信号通路抑制非小细胞肺癌细胞生长的研究
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作者 王俪颖 周欣 +1 位作者 王雪融 黄文斌 《中国药科大学学报》 北大核心 2026年第1期60-67,共8页
为了探究多肽类分泌型蛋白isthmin-1(ISM1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和凋亡的影响,采用免疫组织化学方法检测人NSCLC组织标本中ISM1的表达;在肺癌细胞中通过瞬时转染和构建稳转细胞株的方法过表达ISM1,或者给予重组蛋白r ISM1处理,... 为了探究多肽类分泌型蛋白isthmin-1(ISM1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和凋亡的影响,采用免疫组织化学方法检测人NSCLC组织标本中ISM1的表达;在肺癌细胞中通过瞬时转染和构建稳转细胞株的方法过表达ISM1,或者给予重组蛋白r ISM1处理,用CCK-8法评价ISM1对细胞生长的影响;采用转录组测序的方法,分析rISM1调控的细胞内信号转导通路,并用qRT-PCR和Western blot进行验证;进一步用试剂盒检测细胞内ROS的水平和细胞凋亡。实验结果显示,ISM1在人NSCLC组织标本中的表达低于正常肺组织。在肺癌细胞株中过表达ISM1或者给予rISM1处理均显著抑制细胞生长。rISM1在细胞内主要调控FoxO信号通路,上调FoxO3、FoxO1的表达,促进ROS的产生和诱导细胞凋亡。研究结果表明,ISM1可通过调控FoxO信号通路抑制非小细胞肺癌细胞的生长。本研究为NSCLC的治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 isthmin-1 FoxO信号通路 细胞凋亡 过氧化物
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铁死亡基因NCOA4的表达水平与结肠癌预后和疗效的关系研究
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作者 刘晓霖 王琪慧 《生物技术进展》 2026年第1期178-189,共12页
作为一种铁死亡基因,核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)可通过消除游离铁和谷胱甘肽起到保护细胞的作用。为了了解NCOA4预测结肠癌的疗效,通过分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据中NCOA4在... 作为一种铁死亡基因,核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)可通过消除游离铁和谷胱甘肽起到保护细胞的作用。为了了解NCOA4预测结肠癌的疗效,通过分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据中NCOA4在结肠癌中的表达,探究了其与预后、免疫微环境及治疗的关系。研究结果显示,NCOA4在结肠癌组织中的表达低于正常组织(P<0.05),且其低表达与较短总生存期相关(P<0.05)。高、低NCOA4表达组间的差异基因主要富集于免疫及肿瘤相关通路。另外,NCOA4表达与免疫微环境、免疫细胞浸润及免疫检查点相关。进一步的药物敏感性与免疫治疗分析显示,NCOA4低表达的结肠癌患者对细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxic T lymphocyte antigen 4,CTLA4)靶向治疗以及Raf激酶抑制剂等化疗药物可能具有更好的治疗反应。综上,NCOA4低表达与结肠癌不良预后及免疫细胞浸润受损有关,针对免疫检查点靶向治疗并联合化疗药物可有效治疗NCOA4低表达的结肠癌患者。 展开更多
关键词 NCOA4 结肠癌 免疫细胞浸润 药物敏感性分析 免疫治疗
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CPEB1通过抑制上皮间质转化逆转卵巢癌细胞化疗耐药的研究
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作者 郭利佩 张群昌 +1 位作者 曹馨 张秀玲 《生物技术进展》 2026年第1期205-212,共8页
研究旨在探讨胞质多聚腺苷酸化结合蛋白1(cytoplasmic polyadenylation element-binding 1,CPEB1)在卵巢癌顺铂(cis-diamminedichloroplatinumⅡ, DDP)耐药性中的作用及其相关机制。通过基因表达谱交互式分析平台(gene expression profi... 研究旨在探讨胞质多聚腺苷酸化结合蛋白1(cytoplasmic polyadenylation element-binding 1,CPEB1)在卵巢癌顺铂(cis-diamminedichloroplatinumⅡ, DDP)耐药性中的作用及其相关机制。通过基因表达谱交互式分析平台(gene expression profiling interactive analysis, GEPIA)和基因表达数据库(gene expression omnibus, GEO)分析CPEB1在卵巢癌组织及耐药细胞系中的表达;采用浓度梯度递增法构建卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780/DDP和SKVO3/DDP,通过CCK-8法检测细胞活力及最大半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50);通过RT-qPCR和Western blot检测CPEB1mRNA和蛋白表达。在耐药细胞A2780/DDP和SKVO3/DDP中转染CPEB1过表达质粒,通过Transwell和划痕试验检测细胞侵袭和迁移能力;通过Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志蛋白(Ecadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达。结果发现,CPEB1在卵巢癌组织及顺铂耐药细胞系中低表达;过表达CPEB1可显著提高耐药细胞A2780/DDP和SKVO3/DDP对顺铂的敏感性,降低其IC50值,并抑制细胞的侵袭和迁移能力。同时,过表达CPEB1可上调上皮标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物N-cadherin和Vimentin的表达,逆转EMT进程。结果表明,CPEB1可通过抑制EMT过程增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性,逆转其耐药表型,有望成为卵巢癌耐药治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 CPEB1 卵巢癌 顺铂 化疗耐药 上皮间质转化
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应用微流控芯片技术研究流体剪切力对血脑屏障调控机制
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作者 郑朝雨 苗玉莹 +1 位作者 王杰菲 齐财 《微循环学杂志》 2026年第1期33-37,47,共6页
目的:探究微流剪切力对血脑屏障(BBB)致密性的保护和损伤机制。方法:采用人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D 3)构建BBB,利用微流控芯片技术构建体外BBB器官芯片模型。根据微流道参数计算剪切力,优化最佳流速。依据设置不同的培养液流速将实验... 目的:探究微流剪切力对血脑屏障(BBB)致密性的保护和损伤机制。方法:采用人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D 3)构建BBB,利用微流控芯片技术构建体外BBB器官芯片模型。根据微流道参数计算剪切力,优化最佳流速。依据设置不同的培养液流速将实验分为静止状态组(培养液流速为0μl/min)和流动状态组(培养液流速为1μl/min)。各组细胞培养12h后采用细胞阻抗分析仪检测跨内皮阻抗值(TEER值);免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞紧密连接相关蛋白(Claudin-5、ZO-1)和黏着连接相关蛋白(VE-cadherin)的分布;采用RT-PCR分析ZO-1和Claudin-5基因表达水平。结果:当流道参数宽×深为200×100μm,流速为1μl/min时,对应的剪切力为1.125dyn/cm^(2)。此时的TEER值约为800Ω/cm^(2),高于静止状态。随着时间的延长,两组TEER增大,内皮细胞数量下降,免疫荧光染色检测显示连接蛋白表达量同步提升,RT-PCR结果表明ZO-1基因表达量呈上升趋势,而Claudin-5的基因表达量呈现先下降后上升的趋势,且流动状态组较静止状态组变化更明显(P<0.05)。结论:流体剪切力会影响内皮细胞的正常生长,且对BBB的致密性具有调控作用。 展开更多
关键词 BBB器官芯片 剪切力 血脑屏障 内皮细胞
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细胞的力学智能
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作者 程波 卢梦楠 +1 位作者 贾渊博 徐峰 《力学进展》 北大核心 2025年第2期340-377,共38页
生物智能行为特征,如感知、记忆、学习、问题求解及决策等,在人类、动物及具有神经系统的高等生物中普遍存在.近期研究揭示,单个细胞在与其微环境相互作用的过程中,也表现出部分类似于人类智能的行为,如“多模态感知”“问题求解”“学... 生物智能行为特征,如感知、记忆、学习、问题求解及决策等,在人类、动物及具有神经系统的高等生物中普遍存在.近期研究揭示,单个细胞在与其微环境相互作用的过程中,也表现出部分类似于人类智能的行为,如“多模态感知”“问题求解”“学习记忆”及“演化适应”等.细胞智能作为新提出的颠覆性理论概念,其基本问题包括细胞智能的形成原理、群体细胞涌现群体智能行为机制及单细胞进化为多细胞生命的演化动力等.随着生物力学及力生物学的发展,大量研究表明细胞力学微环境对细胞生理行为具有重要影响.在力学刺激作用下,单个细胞同样表现出智能行为.基于此,本文提出了“细胞的力学智能”的概念,从细胞力学感知、力学决策、力学记忆及力学学习等方面对智能行为特征进行了总结,旨在为细胞力学智能的形成机制及其潜在应用方向(如细胞智能医学)提供新的思路与见解. 展开更多
关键词 细胞的力学智能 细胞力学感知 细胞力学记忆 细胞力学学习 细胞智能医学
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内质网Ca^(2+)释放介导盘基网柄菌细胞的趋电性迁移 被引量:1
7
作者 王一凡 袁淑琴 +1 位作者 高润池 赵三军 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第5期1252-1263,共12页
目的Ca^(2+)作为胞内信号转导的第二信使,在细胞迁移中发挥重要作用。研究表明,胞外Ca^(2+)内流能够促进细胞趋电性迁移,但胞内Ca^(2+)流对细胞趋电性迁移的影响尚不清楚。因此,本研究以盘基网柄菌为模型,探究胞内外Ca^(2+)流对细胞趋... 目的Ca^(2+)作为胞内信号转导的第二信使,在细胞迁移中发挥重要作用。研究表明,胞外Ca^(2+)内流能够促进细胞趋电性迁移,但胞内Ca^(2+)流对细胞趋电性迁移的影响尚不清楚。因此,本研究以盘基网柄菌为模型,探究胞内外Ca^(2+)流对细胞趋电性迁移的影响及其作用机制。方法应用模拟内源性电场的外源微直流电场和实时录像系统研究盘基网柄菌在电场中的趋电性迁移;利用激光共聚焦显微镜、钙离子通道抑制剂、胞外Ca^(2+)螯合剂EGTA以及无Ca^(2+)的发育缓冲液(development buffer,DB)缓冲液、咖啡因等探究细胞内外Ca^(2+)流对细胞趋电性迁移的影响;应用基因缺失突变株探究内质网Ca^(2+)释放调控细胞趋电性迁移的分子机制。结果盘基网柄菌以电压依赖的方式向电场负极进行趋电性迁移;电场刺激会增加细胞内Ca^(2+)浓度,抑制胞外Ca^(2+)内流与胞内Ca^(2+)释放均会抑制细胞趋电性迁移;咖啡因作用显著增加细胞内Ca^(2+)的浓度,抑制内质网Ca^(2+)释放会抑制细胞的趋电性迁移;Gα_(2)、Gβ、Gγ、Erk2缺失均导致细胞趋电性迁移能力显著降低,咖啡因作用完全或部分恢复了Gα_(2)^(-)、Gβ^(-)、Erk2^(-)突变株的趋电性迁移,但没有恢复Gγ-突变株的趋电性迁移。结论内质网Ca^(2+)释放介导盘基网柄菌细胞的趋电性迁移,且参与G蛋白和细胞外信号调节激酶2(ERK2)对细胞趋电性迁移的调控过程。 展开更多
关键词 钙离子 内质网 趋电性 细胞迁移 盘基网柄菌
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实际指数脉冲电场对细胞跨膜电位的影响 被引量:19
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作者 熊兰 石岭岭 +2 位作者 郑家波 谢子杰 陈加鹏 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期122-128,共7页
为了进一步增大细胞跨膜电位峰值,提高脉冲电场电穿孔效率,基于相关文献中球形单细胞多层介电模型的细胞跨膜电位计算方法,分析了实际RC指数衰减脉冲上升沿时间对细胞跨膜电位的影响。通过Matlab软件对细胞跨膜电位的传递函数频率响应... 为了进一步增大细胞跨膜电位峰值,提高脉冲电场电穿孔效率,基于相关文献中球形单细胞多层介电模型的细胞跨膜电位计算方法,分析了实际RC指数衰减脉冲上升沿时间对细胞跨膜电位的影响。通过Matlab软件对细胞跨膜电位的传递函数频率响应进行了仿真分析,结果表明:不同频段的电场对细胞跨膜电位的影响不同。建立了一种改进的RC指数衰减脉冲模型,并进行了仿真计算,结果表明:脉冲电场上升沿时间对细胞跨膜电位有很大影响:上升沿时间越小,频率响应就越高,减小上升沿时间可以提高细胞跨膜电位峰值。仿真结论对改进脉冲电场发生电路的结构和参数设计,以增大细胞跨膜电位峰值并提高电穿孔效率提供了理论依据。 展开更多
关键词 脉冲电场 上升沿 跨膜电位 电穿孔 球形单细胞 多层介电模型
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活性氧参与一氧化氮诱导的神经细胞凋亡 被引量:18
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作者 张春阳 卫涛涛 +5 位作者 马辉 丁尧 陈瓞延 侯京武 陈畅 忻文娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期81-85,共5页
采用激光共聚焦成像技术 ,用氧化还原敏感的特异性荧光探针 (DCFH DA和DHR12 3)直接研究了一氧化氮供体S 亚硝基 N 乙酰基青霉胺 (SNAP)诱导未成熟大鼠小脑颗粒神经元凋亡过程中的细胞胞浆、线粒体中活性氧水平的变化 ,发现神经细胞经 0... 采用激光共聚焦成像技术 ,用氧化还原敏感的特异性荧光探针 (DCFH DA和DHR12 3)直接研究了一氧化氮供体S 亚硝基 N 乙酰基青霉胺 (SNAP)诱导未成熟大鼠小脑颗粒神经元凋亡过程中的细胞胞浆、线粒体中活性氧水平的变化 ,发现神经细胞经 0 5mmol/LSNAP处理 1h后 ,细胞胞浆及线粒体中活性氧水平大大增加 .一氧化氮清除剂血红蛋白能够有效抑制细胞胞浆、线粒体中活性氧的产生 ,防止细胞凋亡 .外源性谷胱甘肽对细胞也具有良好的保护作用 ,而当细胞中谷胱甘肽的合成被抑制后 ,一氧化氮的神经毒性大大增强 .实验结果表明一氧化氮通过促进神经细胞产生内源性活性氧而启动细胞凋亡程序 ,而谷胱甘肽可能是重要的防止一氧化氮引发神经损伤的内源性抗氧化剂 . 展开更多
关键词 小脑颗粒神经元 细胞凋亡 一氧化氮 活性氧 激光共聚焦成像 谷胱甘肽
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Zn对细胞保护作用机理的研究 被引量:28
10
作者 章净霞 黄萍 +7 位作者 徐世文 安丽芝 姚惠英 肖延安 潘巨祥 巢志瑜 朱节清 邹显慷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第2期147-150,共4页
应用扫描质子微探针和同步辐射x荧光分析技术测定了细胞中元素的分布和组成,为确定Zn是细胞结构成分提供了直接的实验依据。用上述核技术结合有关生化指标,分析测定了正常和损伤细胞(脂质过氧化损伤)中Fe,Zn和丙二醛、SH... 应用扫描质子微探针和同步辐射x荧光分析技术测定了细胞中元素的分布和组成,为确定Zn是细胞结构成分提供了直接的实验依据。用上述核技术结合有关生化指标,分析测定了正常和损伤细胞(脂质过氧化损伤)中Fe,Zn和丙二醛、SH基含量变化的相互关系。实验结果表明,当细胞发生脂质过氧化损伤时,Fe含量和丙二醛含量同步增高,而Zn含量和SH基量则降低。给细胞补充Zn后,提高了细胞质膜中的Zn含量,SH基量也随之增加,同时丙二醛量降低。提示Zn保护细胞完整性的作用机理之一是控制脂质过氧化作用。Zn可保护膜蛋白的SH基,减少和阻止被Fe所催化的过氧化反应。 展开更多
关键词 细胞 保护 过氧化脂质
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高强度皮秒脉冲电场诱导HeLa细胞生物电效应分析 被引量:16
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作者 郭飞 姚陈果 +3 位作者 章锡明 孙才新 张玉 熊正爱 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期3381-3386,共6页
为研究高强度ps脉冲电场(psPEF)诱导HeLa细胞的生物电效应,将脉冲电场参数组合(电场强度为250kV/cm,脉宽为800ps,脉冲个数为1 000、3 000、5 000,频率为3Hz)作用于人宫颈癌HeLa细胞。利用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色... 为研究高强度ps脉冲电场(psPEF)诱导HeLa细胞的生物电效应,将脉冲电场参数组合(电场强度为250kV/cm,脉宽为800ps,脉冲个数为1 000、3 000、5 000,频率为3Hz)作用于人宫颈癌HeLa细胞。利用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测ps脉冲对细胞的生长抑制情况;钙离子指示剂(Fluo-3/AM)探针标记细胞,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子体积分数的改变;蛋白质印迹法检测促凋亡蛋白Bax与凋亡抑制蛋白Bcl-2释放水平的改变。实验发现:细胞死亡率与施加脉冲个数正相关,且处理后12h抑制率最高;激光扫描共聚焦半定量分析显示,处理组细胞荧光强度明显高于对照组(检验水准P<0.05);蛋白质印迹法检测结果表明,处理组细胞内Bax表达量增加(P<0.05),Bcl-2释放量略有降低。上述结果表明:高强度ps脉冲通过诱导细胞凋亡进而抑制了HeLa细胞的增殖。 展开更多
关键词 ps脉冲电场(psPEF) HELA细胞 生物电效应 噻唑蓝(MTT) 激光共聚焦显微镜 细胞凋亡
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几种超分辨率荧光显微技术的原理和近期进展 被引量:21
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作者 吕志坚 陆敬泽 +1 位作者 吴雅琼 陈良怡 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1626-1634,共9页
在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发... 在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发了多种实现超出普通共聚焦显微镜分辨率的三维超分辨率成像方法.主要介绍这些方法的原理、近期进展和发展趋势.介绍了光源的点扩散函数(point spread function,PSF)的概念和传统分辨率的定义,阐述了提高xy平面分辨率的方法.通过介绍单分子荧光成像技术,引入了单分子成像定位精度的概念,介绍了基于单分子成像的超分辨率显微成像方法,包括光激活定位显微技术(photoactivated localization microscopy,PALM)和随机光学重构显微技术(stochastic optical reconstruction microscopy,STORM).介绍了两大类通过改造光源的点扩散函数来提高成像分辨率的方法,分别是受激发射损耗显微技术(stimulated emission depletion,STED)和饱和结构照明显微技术(saturated structure illumination microscopy,SSIM).比较了不同的z轴提取信息的方法,并阐述了这些方法与xy平面上的超分辨率显微成像技术相结合所得到的各种三维超分辨率显微成像技术的优劣.探讨了目前超分辨率显微成像的发展极限和方向. 展开更多
关键词 超分辨率荧光显微技术 点扩散函数 PALM STORM STED SSIM
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6种多糖对小鼠免疫细胞活性作用的比较研究 被引量:26
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作者 王国秀 蔺威鸣 +2 位作者 赵瑞芳 林娜 王舒然 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期577-580,共4页
目的探讨香菇多糖等6种多糖(LPS)对小鼠免疫细胞活性的作用,并比较其免疫调节作用的途径和强度。方法6种多糖体外作用于小鼠免疫细胞,MTT法测脾淋巴细胞增殖活性,ELISA法测LPS诱导的脾淋巴细胞分泌IgG水平,吞噬中性红法测腹腔巨噬细胞... 目的探讨香菇多糖等6种多糖(LPS)对小鼠免疫细胞活性的作用,并比较其免疫调节作用的途径和强度。方法6种多糖体外作用于小鼠免疫细胞,MTT法测脾淋巴细胞增殖活性,ELISA法测LPS诱导的脾淋巴细胞分泌IgG水平,吞噬中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬功能,乳酸脱氢酶测定法测脾NK细胞活性。结果协同ConA促进脾淋巴细胞增殖作用强弱依次是香菇多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、人参多糖、海带多糖和地衣多糖(P<0.05);协同LPS促进脾淋巴细胞增殖作用依次是灵芝多糖、香菇多糖、地衣多糖、黄芪多糖和人参多糖(P<0.05);促进脾淋巴细胞分泌IgG的依次是黄芪多糖、灵芝多糖、人参多糖、地衣多糖和>香菇多糖(P<0.05);增强腹腔巨噬细胞吞噬活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、香菇多糖、海带多糖、灵芝多糖和人参多糖(P<0.05);增强脾NK细胞活性的依次是黄芪多糖、地衣多糖、海带多糖、香菇多糖和灵芝多糖(P<0.05)。结论6种多糖作用的机制和效果各不相同,香菇多糖、灵芝多糖、地衣多糖和黄芪多糖分别在增强细胞免疫、体液免疫和非特异免疫的某一功能上效果显著,可以适宜的剂量比例组合成复合多糖。 展开更多
关键词 多糖 免疫活性 细胞免疫 复合多糖
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镉诱导HEK293细胞凋亡及其线粒体凋亡途径 被引量:13
14
作者 叶记林 毛伟平 +5 位作者 吴爱莲 赵洁明 张超 张娜娜 姜平 田婷 《分子细胞生物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期7-16,共10页
本课题研究了氯化镉(CdCl_2)诱导HEK293细胞(人胚胎肾细胞系)的凋亡,初步探讨了凋亡过程中Caspase-3、Bcl-2的变化和凋亡诱导因子(AIF)的转移以及它们的意义。MTT法检测CdCl_2对HEK293细胞增殖的抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖... 本课题研究了氯化镉(CdCl_2)诱导HEK293细胞(人胚胎肾细胞系)的凋亡,初步探讨了凋亡过程中Caspase-3、Bcl-2的变化和凋亡诱导因子(AIF)的转移以及它们的意义。MTT法检测CdCl_2对HEK293细胞增殖的抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、激光共聚焦观察细胞凋亡;应用Western blot法和荧光免疫法测定Caspase-3酶原、Bcl-2蛋白的变化以及检测AIF蛋白在细胞中的定位。结果显示:CdCl_2对HEK293细胞具有显著的生长抑制作用,并呈明显的剂量和时间依赖性。在琼脂糖凝胶电泳中,显示有凋亡细胞特有的DNA梯状条带,其中30μmol/L作用6-9h梯状条带最为清晰,时间过长或浓度过高则梯状条带逐渐模糊,表明镉浓度过高或处理时间过长,细胞有坏死。流式细胞仪检测也印证了这一结果。形态学观察可见明显的细胞凋亡特征。同时线粒体膜电位明显下降,发现Caspase-3酶原蛋白、Bcl-2蛋白含量减少,并具有时间依赖性;另外检测到线粒体AIF向细胞核转移。而Bcl-2转染后有一定的抑制凋亡作用。实验结果提示,CdCl_2能够诱导HEK293细胞凋亡,线粒体损伤导致AIF转移与细胞色素c释放,从而引发的非Caspases与Caspases凋亡途径可能在镉引发的细胞凋亡过程中起重要作用,而Caspase-3, Bcl-2起着重要的调控作用。 展开更多
关键词 HEK293细胞 细胞凋亡 线粒体 凋亡诱导因子(AIF) Caspase-3 Bcl-2
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ns脉冲电场诱导细胞脂双层膜电穿孔的仿真分析 被引量:13
15
作者 姚陈果 王剑飞 +2 位作者 李成祥 米彦 孙才新 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期423-427,共5页
为探讨ns脉冲电场诱导细胞器膜产生电穿孔的机理,采用分子动力学软件从原子水平上分析了ns脉冲电场作用下细胞脂双层膜电穿孔形成及其孔径随时间变化的过程,研究了电穿孔形成的机理。结果表明,脂质分子的偶极子在脉冲电场作用下的振动... 为探讨ns脉冲电场诱导细胞器膜产生电穿孔的机理,采用分子动力学软件从原子水平上分析了ns脉冲电场作用下细胞脂双层膜电穿孔形成及其孔径随时间变化的过程,研究了电穿孔形成的机理。结果表明,脂质分子的偶极子在脉冲电场作用下的振动和转动导致脂双层膜出现初始缺损并诱导脂双层膜电穿孔;电穿孔初期的多微孔间存在耦合关系;在4~5 ns内电穿孔形成并达到动态稳定。结果与细胞脂双层膜的粗粒化模型计算吻合较好,为电穿孔技术在生物医学等方面的应用提供了理论指导。 展开更多
关键词 ns脉冲电场 电穿孔 机理 脂双层膜 分子动力学 仿真
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细胞受体外机械力作用的若干反响 被引量:17
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作者 杜春娟 郭碧云 +3 位作者 曾衍钧 徐小虎 于小军 赵虎 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2005年第2期118-122,共5页
细胞受力后会有很多反响,作者介绍当前对细胞施加机械力的多种试验方法以及受试后的各种反响。其中内容主要包括激活离子通道、对细胞膜上蛋白分子的作用、对内皮细胞ICAM-1表达的影响、对细胞骨架的作用、对内皮细胞ICAM-1表达的影响... 细胞受力后会有很多反响,作者介绍当前对细胞施加机械力的多种试验方法以及受试后的各种反响。其中内容主要包括激活离子通道、对细胞膜上蛋白分子的作用、对内皮细胞ICAM-1表达的影响、对细胞骨架的作用、对内皮细胞ICAM-1表达的影响、剪切力作用原癌基因c-fos和c-myc的表达等。 展开更多
关键词 细胞力学 内皮细胞 通透性 原癌基因
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纳秒级脉冲电场诱导肿瘤细胞凋亡的窗口效应 被引量:11
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作者 文燕青 姚陈果 +4 位作者 唐均英 郭飞 李成祥 米彦 孙才新 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2797-2802,共6页
ns级脉冲电场诱导肿瘤细胞凋亡用于肿瘤病变的治疗,展现出令人振奋的临床应用前景。由于ns级脉冲电场诱导的凋亡率高低与场强-脉宽等参数存在一定的选择性,使得目前脉冲参数的选择存在较大的盲目性。为寻求诱导肿瘤细胞有效凋亡的ns级... ns级脉冲电场诱导肿瘤细胞凋亡用于肿瘤病变的治疗,展现出令人振奋的临床应用前景。由于ns级脉冲电场诱导的凋亡率高低与场强-脉宽等参数存在一定的选择性,使得目前脉冲参数的选择存在较大的盲目性。为寻求诱导肿瘤细胞有效凋亡的ns级脉冲电场参数,将不同参数组合(电压幅值9 kV,脉宽分别为1、50、100与200 ns,脉冲个数分别为10、30、60与80,频率1 Hz)的ns级脉冲电场作用于SKOV3细胞。利用AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率和坏死率,DNA ladder凝胶电泳实验检测细胞晚期凋亡情况,AnnexinV/PI双染法以及DNA ladder凝胶电泳实验表明:细胞的早期凋亡率同施加的脉冲电场参数存在窗口效应,且脉冲参数为100 ns、30个脉冲时可得到最大的凋亡率与坏死率差值。 展开更多
关键词 ns级脉冲电场 肿瘤细胞 凋亡率 SKOV3细胞 窗口效应 凋亡率与坏死率差值
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大黄素升高豚鼠结肠带细胞[Ca^(2+)]_i的特征和GDP的抑制作用 被引量:12
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作者 杨文修 王津 +2 位作者 李俊英 余奕 许文胜 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期65-69,共5页
利用Fluo -3荧光探针检测细胞内自由Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i),研究了大黄素升高豚鼠结肠带细胞[Ca2 +]i 的量—效关系和动态变化特征,及GDP和胞外Ca2 +浓度对其的影响。较低浓度大黄素随药物浓度增加使[Ca2 +]i 显著升高 ,更高浓度大黄素... 利用Fluo -3荧光探针检测细胞内自由Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i),研究了大黄素升高豚鼠结肠带细胞[Ca2 +]i 的量—效关系和动态变化特征,及GDP和胞外Ca2 +浓度对其的影响。较低浓度大黄素随药物浓度增加使[Ca2 +]i 显著升高 ,更高浓度大黄素有超最大抑制效应。GDP对大黄素升高细胞[Ca2 + ]i 的抑制作用随其浓度增加而增强。GDP和胞外Ca2 + 浓度影响大黄素诱发的[Ca2 +]i 动态变化的结果表明 :GDP使[Ca2 +]i 峰消失 ,胞外无Ca2 +导致[Ca2 +]i 随时间显著下降 ,大黄素升高[Ca2 +]i 作用趋向消失。 展开更多
关键词 大黄素 豚鼠结肠带细胞 GDP 动力学 钙离子
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红细胞在不同pH值下膜动力学特性与携氧能力的变化 被引量:15
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作者 阮萍 黄耀熊 +1 位作者 屠美 林绍和 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2003年第23期2119-2121,共3页
目的 :研究单个活态人血红细胞在不同pH值 (pH5 .89.0 )下的膜动力学特性与携氧能力 .方法 :用新型快速显微多道分光光度技术和显微生物医学图像分析技术 (fastmulti channelmicro spectrophotometerandimageanalysistech niques,FMIA)... 目的 :研究单个活态人血红细胞在不同pH值 (pH5 .89.0 )下的膜动力学特性与携氧能力 .方法 :用新型快速显微多道分光光度技术和显微生物医学图像分析技术 (fastmulti channelmicro spectrophotometerandimageanalysistech niques,FMIA)对红细胞形态结构、弯曲弹性模量 (KC)、剪切弹性模量 (μ)和吸光度 (A)进行无扰、在位、实时、高灵敏度联合动态连续测量 .结果 :细胞形态随 pH增大而减小 ;KC,μ和形状因子 (roundnessfactor,REF)在pH 7.4 7.6时最小 ,随酸碱度增大而增大 ;A在 pH 7.4最大 ,随酸碱度增大而减小 .结论 :pH值与细胞的形态、膜的变形能力、流动特性和胞内血红蛋白分子氧合能力密切相关 . 展开更多
关键词 快速显微多道分光光度 显微图像分析 红细胞 PH值 膜动态特性 携氧能力
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p38 MAPK信号通路参与受体介导的细胞内吞的调控 被引量:12
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作者 龚小卫 魏洁 +3 位作者 李煜生 程蔚蔚 邓鹏 姜勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1388-1391,共4页
目的:观察p38MAPK信号转导通路在受体介导的细胞内吞中的作用。方法:利用Alexa594标记的转铁蛋白作为受体介导的内吞作用的观察指标,来研究p38特异性抑制剂SB203580或ERK通路特异性抑制剂PD98059预处理以及p38基因敲除对该过程的影响。... 目的:观察p38MAPK信号转导通路在受体介导的细胞内吞中的作用。方法:利用Alexa594标记的转铁蛋白作为受体介导的内吞作用的观察指标,来研究p38特异性抑制剂SB203580或ERK通路特异性抑制剂PD98059预处理以及p38基因敲除对该过程的影响。结果:在受体介导的细胞内吞中,p38被磷酸化激活。SB203580的预处理或p38基因的敲除都能阻断受体介导的细胞内吞,而PD98059的预处理对该过程没有影响。结论:p38MAPK信号转导通路参与了受体介导的细胞内吞的调控。 展开更多
关键词 P38 MAPK 受体介导的内吞作用 信号转导
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