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筛选调控小鼠单倍体胚胎干细胞二倍体化的基因
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作者 董荠蔓 陈凌懿 《南开大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期1-5,33,共6页
小鼠单倍体胚胎干细胞(haESC)是来源于单倍体胚胎囊胚时期的内细胞团来,在体外合适培养条件下建立的一种细胞.相比于二倍体细胞,haESC由于只具有一套染色体,能够有效展示隐性基因或突变表型,因而可以直接地筛选出隐性突变,在遗传学筛选... 小鼠单倍体胚胎干细胞(haESC)是来源于单倍体胚胎囊胚时期的内细胞团来,在体外合适培养条件下建立的一种细胞.相比于二倍体细胞,haESC由于只具有一套染色体,能够有效展示隐性基因或突变表型,因而可以直接地筛选出隐性突变,在遗传学筛选中具有重要价值.但是小鼠haESC处于一种不稳定的状态,在体外培养或分化过程中,趋向于加倍为二倍体细胞.为了长期培养haESC,需要定期地利用Hoechst 33342活细胞染色结合细胞分选技术分选出G1期细胞以清除二倍体细胞,这严重限制了haESC在遗传学上的应用.因此探究haESC二倍体化的机制对其在遗传学筛选和隐性表型方面的研究至关重要.本研究借助FUCCI(fluorescent, ubiquitination-based cell cycle indicator)报告系统,实现了细胞周期从G1期向S期转变的可视化,因此可以成功分离单倍体和二倍体细胞.之后,利用了慢病毒靶向激酶组(kinome)的sgRNA文库在小鼠haESC中构建了激酶组突变的haESC突变体文库.通过长期培养和多次分选此突变体文库,筛选出多个潜在的调控haESC二倍体化的基因. 展开更多
关键词 单倍体胚胎干细胞 慢病毒sgRNA文库 二倍体化
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基于小鼠白血病模型探究不同定居部位对白血病细胞干性的影响
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作者 王尚尚 薛贞雅 +3 位作者 邢海燕 杨雪 王敏 饶青 《生物技术进展》 2025年第2期349-354,共6页
自我更新、静息及对化疗药物的抵抗是白血病干细胞的重要特征,也是白血病化疗后复发及预后不良的重要原因之一。骨髓及脾脏是白血病干细胞的定居部位,探索不同微环境下的白血病细胞干性特征对阐明其干性维持机制具有重要意义。利用AML1-... 自我更新、静息及对化疗药物的抵抗是白血病干细胞的重要特征,也是白血病化疗后复发及预后不良的重要原因之一。骨髓及脾脏是白血病干细胞的定居部位,探索不同微环境下的白血病细胞干性特征对阐明其干性维持机制具有重要意义。利用AML1-ETO9a(AE9a)小鼠白血病模型,探讨骨髓不同区域和脾脏中定居的白血病细胞干性特征;通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)及基因富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA),阐明干性相关的基因表达特征;通过DAPI和Ki67联合标记及流式细胞仪分析测定G0期细胞比例;通过集落形成实验确定集落形成能力,逆转录实时荧光定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)验证相关分子表达。研究结果发现,与脾脏相比,定居在骨内膜的白血病细胞具有更显著的干性基因表达特征、更高的G0期比例和更强的集落形成能力。骨内膜白血病细胞高表达的基因在白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)通路显著富集,其中相关分子IL-1β的表达显著升高。结果表明骨内膜定居的白血病细胞具有最强的干性特征,IL-1β可能通过IL-1通路介导骨髓微环境对白血病干细胞干性的维持,IL-1通路有望作为急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)的治疗靶点。 展开更多
关键词 白血病干细胞 骨髓微环境 静息 自我更新
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猪早期胚胎卵裂球发育追踪标记方法的比较
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作者 杨玉川 齐子成 +3 位作者 吴静 王兆伟 陈雪松 刘忠华 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期53-62,共10页
追踪卵裂球的发育过程对研究猪早期胚胎发育机制至关重要,虽然小鼠早期胚胎卵裂球发育追踪方法较成熟,但针对猪等家畜胚胎卵裂球发育的追踪方法尚未完善。根据小鼠和其他模式动物的卵裂球发育追踪方法,选择mCherry mRNA、nls-mCherry m... 追踪卵裂球的发育过程对研究猪早期胚胎发育机制至关重要,虽然小鼠早期胚胎卵裂球发育追踪方法较成熟,但针对猪等家畜胚胎卵裂球发育的追踪方法尚未完善。根据小鼠和其他模式动物的卵裂球发育追踪方法,选择mCherry mRNA、nls-mCherry mRNA和亲脂性羰花青染料(DiI)对猪早期胚胎卵裂球发育进行追踪,探究最佳标记条件,并比较各方法优缺点。结果表明:通过显微注射mCherry和nls-mCherry荧光蛋白mRNA的标记方法,在猪中存在荧光丢失、标记率低等情况,而DiI荧光染料可长时间对分裂的卵裂球进行追踪。因此,在不影响胚胎正常发育的情况下,DiI荧光染料可实现对猪早期胚胎卵裂球细胞膜的稳定追踪。 展开更多
关键词 卵裂球发育追踪 mCherry mRNA nls-mCherry mRNA DII
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脐带间充质干细胞长期体外培养的生物学特性及遗传稳定性 被引量:4
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作者 程梅 王洪岩 +6 位作者 于大海 李华伟 杜鹏程 魏负禾 张颢 邱林 马军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期356-360,共5页
目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)体外长期培养的生物学特性及遗传稳定性。方法从剖宫产足月健康新生儿脐带中分离培养UC-MSCs,并连续传代,显微镜下观察细胞形态。分别检测P3和P12代UC-MSCs的... 目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)体外长期培养的生物学特性及遗传稳定性。方法从剖宫产足月健康新生儿脐带中分离培养UC-MSCs,并连续传代,显微镜下观察细胞形态。分别检测P3和P12代UC-MSCs的增殖能力、免疫表型、向成脂肪细胞和成骨细胞的分化诱导率、衰老情况、成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)及染色体核型。结果 P3代UC-MSCs为形态相对均一的梭形贴壁细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长;P12代UC-MSCs宽大扁平,贴壁性减退,漂浮细胞增多,胞浆内出现黑色颗粒和空泡;P3和P12代UCMSCs均表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、CD45、HLA-DR;P3较P12代UC-MSCs的细胞增殖能力及向成脂肪细胞分化诱导率均明显升高(P均<0.05);向成骨细胞分化诱导率及细胞衰老率均明显降低(P均<0.05);成纤维细胞集落数及染色体中期分裂相明显增多(P<0.05)。结论长期体外培养的UC-MSCs生物学特性发生改变,遗传学特性稳定,但染色体中期分裂相减少。 展开更多
关键词 间充质干细胞 体外培养 生物学特性 遗传稳定性
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甘蔗与蔗茅杂交F_2BC_1代的染色体遗传分析 被引量:8
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作者 王先宏 李富生 +3 位作者 何丽莲 娄红波 杨清辉 何顺长 《中国农学通报》 CSCD 2014年第15期81-85,共5页
为更有效的将蔗茅杂交后代应用于现代甘蔗新品种的选育及对旧有甘蔗品种进行改良提供科学依据,采用压片法制备甘蔗与蔗茅(2n=20)杂交的F2及F2BC1子代及其亲本材料的染色体玻片,对其杂交获得的F2及F2BC1世代材料进行染色体数目的传递分析... 为更有效的将蔗茅杂交后代应用于现代甘蔗新品种的选育及对旧有甘蔗品种进行改良提供科学依据,采用压片法制备甘蔗与蔗茅(2n=20)杂交的F2及F2BC1子代及其亲本材料的染色体玻片,对其杂交获得的F2及F2BC1世代材料进行染色体数目的传递分析,以探索其染色体传递机制。结果表明,各后代材料的体细胞染色体数目均不恒定;双亲染色体在F2代04/14中以"2n+n"方式进行传递,在F2BC1代中均以"n+n"的方式进行传递。研究结果可为这些材料在甘蔗育种中的进一步利用提供细胞学依据。 展开更多
关键词 甘蔗 蔗茅 杂交后代 染色体传递
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菠萝蜜的染色体制片优化及核型分析 被引量:7
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作者 劳世辉 魏岳荣 +1 位作者 盛鸥 梁国鲁 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第16期215-219,共5页
应用改良的去壁低渗法研究,比较了不同预处理剂对菠萝蜜染色体制片的效果及其染色体数目和核型。结果表明:以0.002mol/L8-羟基喹啉与0.2%秋水仙素(1:1)混合液作为预处理剂,预处理3h效果较好。菠萝蜜的染色体数目为2n=2x=56,为二倍体,主... 应用改良的去壁低渗法研究,比较了不同预处理剂对菠萝蜜染色体制片的效果及其染色体数目和核型。结果表明:以0.002mol/L8-羟基喹啉与0.2%秋水仙素(1:1)混合液作为预处理剂,预处理3h效果较好。菠萝蜜的染色体数目为2n=2x=56,为二倍体,主要由中部和近中部着丝点染色体构成,9号染色体上附着1对随体;最长染色体/最短染色体为2.08:1,臂比大于2的染色体占全组染色体的3.5%,属2A核型,核型公式为2n=2M+50m(2SAT)+4sm。本研究首次发现菠萝蜜可能存在B染色体。 展开更多
关键词 菠萝蜜 染色体制片 B染色体 核型
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牦牛与其他家牛属动物SRY基因多态性及其父系进化关系分析 被引量:7
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作者 蔡欣 赵芳芳 孙磊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期190-195,共6页
为分析牦牛与其他家牛属动物SRY基因多态性及其父系进化关系,从5个麦洼牦牛个体基因组DNA扩增克隆SRY基因,同时从GenBank检索家牛属物种及野牛的SRY基因序列,分析家牛属物种在SRY基因的多态性及其SRY蛋白中HMG-box区域基因序列的变异特... 为分析牦牛与其他家牛属动物SRY基因多态性及其父系进化关系,从5个麦洼牦牛个体基因组DNA扩增克隆SRY基因,同时从GenBank检索家牛属物种及野牛的SRY基因序列,分析家牛属物种在SRY基因的多态性及其SRY蛋白中HMG-box区域基因序列的变异特征,并基于SRY基因序列构建家牛属物种间的父系系统进化树及其网络中介图,分析进化关系。家牛属物种编码SRY蛋白N、C两端氨基酸(HMG-box侧翼)基因序列的错义突变率(0.57)显著低于编码HMGbox区域基因序列的错义突变率(0.69),推测家牛属物种间在SRY基因进化过程中的正选择同时作用于编码HMG-box及其侧翼区的基因序列;相对水牛和牦牛,欧洲野牛与黄牛的亲缘关系更近,此结果从父系侧面支持现存的黄牛牛种由已经灭绝的野牛或原牛驯化而来的观点;牦牛可能有2个或多个父系祖先;非洲水牛和江河水牛与其他牛种之间在SRY基因存在较多变异导致明显的分歧进化,也支持可划分为沼泽型和江河型2个亚种的论断。所以,家牛属物种间在SRY基因具有特殊的变异特征,物种间的父系进化关系分析结果支持前人论断。 展开更多
关键词 牦牛 家牛属动物 SRY基因 变异特征 父系进化关系
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青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense)染色体G类带型研究 被引量:3
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作者 牟洪善 王昌留 李金萍 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期597-602,共6页
以青岛文昌鱼的晚期囊胚和早期原肠胚的胚胎细胞为实验材料,利用低渗处理、空气干燥法制备染色体玻片标本。在此基础上,为进一步探索显示青岛文昌鱼染色体G带的新方法,采用片龄、蛋白酶K和胰蛋白酶显带技术对青岛文昌鱼的染色体进行了... 以青岛文昌鱼的晚期囊胚和早期原肠胚的胚胎细胞为实验材料,利用低渗处理、空气干燥法制备染色体玻片标本。在此基础上,为进一步探索显示青岛文昌鱼染色体G带的新方法,采用片龄、蛋白酶K和胰蛋白酶显带技术对青岛文昌鱼的染色体进行了初步研究,显示了青岛文昌鱼染色体的G类带型,绘制了青岛文昌鱼染色体的G类带型模式图,并对三种G类带型作了比较,进而提出了文昌鱼染色体的G带带型与片龄的相互关系。 展开更多
关键词 青岛文昌鱼 染色体带型 G带 片龄
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雷公藤甲素诱导胰腺癌细胞凋亡 被引量:5
9
作者 乔志新 贺敏 +5 位作者 李伟静 任素萍 王春燕 苏丽华 王璇琳 于群 《生物技术通讯》 CAS 2013年第4期519-522,共4页
目的:观察雷公藤甲素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨雷公藤甲素抗胰腺癌的机制。方法:雷公藤甲素处理BxPC-3和PANC-1细胞后,用MTT法检测细胞的生长抑制,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH-D... 目的:观察雷公藤甲素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨雷公藤甲素抗胰腺癌的机制。方法:雷公藤甲素处理BxPC-3和PANC-1细胞后,用MTT法检测细胞的生长抑制,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH-DA染色方法测定细胞线粒体膜跨膜电位变化和活性氧(ROS)的产生,用Western印迹检测Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:雷公藤甲素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1具有生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,且呈时间和剂量依赖关系;处理72 h后,胰腺癌细胞线粒体跨膜电位明显下降,Bax表达上调,Bcl-2表达下降。结论:雷公藤甲素能有效抑制胰腺癌细胞增殖,通过增强线粒体通透性诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌细胞 雷公藤甲素 细胞凋亡
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IRE1-RIDD调控细胞功能的研究进展 被引量:1
10
作者 李林福 施伟梅 +2 位作者 刘海 杨建琼 吴龙火 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期3470-3475,共6页
内质网是细胞内能够精细调控细胞生长、存活及功能的膜系统,是促进细胞内环境稳定的重要细胞器。内质网应激(ERS)中的感应器IRE1具有促细胞存活及促凋亡活性,这主要归因于XBP1 m RNA剪切活性及RIDD(regulated IRE1-dependent decay)活性... 内质网是细胞内能够精细调控细胞生长、存活及功能的膜系统,是促进细胞内环境稳定的重要细胞器。内质网应激(ERS)中的感应器IRE1具有促细胞存活及促凋亡活性,这主要归因于XBP1 m RNA剪切活性及RIDD(regulated IRE1-dependent decay)活性。RIDD能特异性识别"XBP1样位点",识别条件较为复杂。但由于作用机制不同,RIDD可能不与XBP1 m RNA剪切活性产生底物竞争。XBP1 m RNA剪切活性和RIDD活性均具有细胞保护活性,而RIDD活性随着ERS强度的提高而上调。但当ERS持续存在时,RIDD就会诱导细胞发生凋亡。因此,IRE1可作为细胞生理活动的转折开关,其活性的变化可改变细胞的命运,本综述就此方面做一简要概述。 展开更多
关键词 内质网应激 IRE1 XBP1 RIDD 内环境稳定
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过表达MicroRNA-199a促进TNFα诱导的脂肪细胞凋亡 被引量:1
11
作者 齐仁立 王琪 +3 位作者 吴永江 王敬 黄金秀 杨飞云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期180-185,共6页
旨为探明micro RNA-199a(mi R-199a)对脂肪细胞凋亡的影响及核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)在其中的作用。培养3T3-L1脂肪细胞,使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)诱导细胞凋亡。在此基础上分别使用NF-κB阻... 旨为探明micro RNA-199a(mi R-199a)对脂肪细胞凋亡的影响及核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)在其中的作用。培养3T3-L1脂肪细胞,使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)诱导细胞凋亡。在此基础上分别使用NF-κB阻断剂PDTC和mi R-199a mimic处理细胞,判断过表达mi R-199a对TNFα诱导的脂肪细胞凋亡的影响及NF-κB在其中的作用。使用流式细胞仪分析细胞凋亡率,试剂盒检测Caspase3/7酶活,双荧光素酶报告系统检测NF-κB活性,q RT-PCR检测mi R-199a的表达水平,Western blotting检测NF-κB相关蛋白变化。结果显示,TNFα可以诱导分化的脂肪细胞凋亡并同时激活NF-κB,激活的NF-κB在TNFα诱导的脂肪细胞凋亡中发挥负调控作用。在脂肪细胞过表达mi R-199a明显抑制NF-κB的激活进而显著促进TNFα诱导的凋亡。mi R-199a通过调控NF-κB活性参与TNFα诱导的脂肪细胞凋亡。 展开更多
关键词 MI R-199a 脂肪细胞 凋亡 TNFA NF-ΚB
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m^6A甲基化修饰调控造血干细胞命运决定 被引量:3
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作者 张春霞 刘峰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期863-864,共2页
血液系统是维持机体生命活动最重要的系统之一,能够为机体提供氧气和营养物质,通过物质交换维持内环境的稳态,同时为机体提供免疫防御和保护。血细胞是血液的重要组成成分,可以分为髓系和淋系两大类,其中髓系细胞包括红系细胞、巨核系... 血液系统是维持机体生命活动最重要的系统之一,能够为机体提供氧气和营养物质,通过物质交换维持内环境的稳态,同时为机体提供免疫防御和保护。血细胞是血液的重要组成成分,可以分为髓系和淋系两大类,其中髓系细胞包括红系细胞、巨核系细胞、粒系细胞和单核系细胞。 展开更多
关键词 RNA 斑马鱼 造血干细胞 甲基化
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α-苦瓜素经LRP1受体介导的JNK信号通路诱导肝细胞L02早期凋亡的机制研究 被引量:1
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作者 邓念华 沈富兵 +2 位作者 郑崛村 沈岱 王玲 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第23期3203-3207,共5页
目的:探讨α-苦瓜素诱导肝细胞L02(简称"L02细胞")早期凋亡的信号通路。方法:制备并纯化α-苦瓜素。采用流式细胞术检测0(阴性对照)、160、80μg/mLα-苦瓜素作用L02细胞2~8 h后的细胞凋亡率。小干扰RNA(siRNA)沉默低密度脂... 目的:探讨α-苦瓜素诱导肝细胞L02(简称"L02细胞")早期凋亡的信号通路。方法:制备并纯化α-苦瓜素。采用流式细胞术检测0(阴性对照)、160、80μg/mLα-苦瓜素作用L02细胞2~8 h后的细胞凋亡率。小干扰RNA(siRNA)沉默低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)得到LRP1-siRNA细胞,然后采用液相芯片分析术检测α-苦瓜素(160μg/mL)分别作用L02细胞(正常组)和LRP1-siRNA细胞(沉默组)0、0.25、0.5、1、2 h后c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路中促调蛋白磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化凋亡前体蛋白(p-Bad)、胱天蛋白酶9(Caspase-9)及抑调蛋白磷酸化蛋白53(p-p53)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化B淋巴细胞瘤2(p-Bcl-2)、Caspase-8的表达情况,分析α-苦瓜素对L02细胞JNK信号通路的作用。结果:制备并纯化得到α-苦瓜素(纯度>97%);与阴性对照组比较,160μg/mLα-苦瓜素作用8 h时,可显著诱导细胞早期凋亡(P<0.05),80μg/mLα-苦瓜素诱导的早期凋亡不明显(P>0.05);与0 h比较,作用后0.25 h促调蛋白p-JNK、p-Bad和Caspase-9表达量显著增加(P<0.05),而抑调蛋白pp53、p-Akt、p-Bcl-2和Caspase-8表达量无变化;与正常组相比,沉默组各时间点的p-JNK、p-Bad和Caspase-9的表达均显著减少(P<0.05)。结论:α-苦瓜素可能通过LRP1受体介导JNK信号通路诱导肝细胞凋亡,为揭示其肝毒性提供了参考。 展开更多
关键词 α-苦瓜素 凋亡 肝细胞L02 c-Jun氨基末端激酶信号通路 低密度脂蛋白受体相关蛋白1
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甘蔗与蔗茅杂交双亲染色体在F_1及F_2子代中的传递 被引量:1
14
作者 王先宏 李富生 +3 位作者 何丽莲 娄红波 杨清辉 何顺长 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期7-11,共5页
甘蔗与蔗茅杂交的后代材料抗旱、耐寒,在甘蔗抗逆育种中具有较好的应用前景,为将其有效应用于甘蔗新品种的选育及品种改良,特对甘蔗与蔗茅杂交各世代的染色体传递方式进行研究。采用去壁低渗法对F1、F2杂种及其亲本材料的根尖体细胞... 甘蔗与蔗茅杂交的后代材料抗旱、耐寒,在甘蔗抗逆育种中具有较好的应用前景,为将其有效应用于甘蔗新品种的选育及品种改良,特对甘蔗与蔗茅杂交各世代的染色体传递方式进行研究。采用去壁低渗法对F1、F2杂种及其亲本材料的根尖体细胞染色体进行研究。结果表明:各后代材料的体细胞染色体数目均不恒定,F,材料的染色体变幅为10~11条,F2材料的变幅为6~14条;双亲染色体在F1代材料中的传递方式为“2n+n”,而在F2中既以“n+n”又以“2n+n”的方式进行传递。本研究结果可为诸类材料在甘蔗育种中的进一步利用提供细胞学依据。 展开更多
关键词 甘蔗 蔗茅 杂交后代 染色体数目
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线粒体DNA数目不同的人角质形成细胞模型的建立 被引量:1
15
作者 倪一平 王小娟 +7 位作者 孙一丹 张莉 马陈西南 刘纪廷 严锐 陶莎莎 张洁 安艳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第9期1188-1195,共8页
该研究采用溴化乙锭(ethidium bromide,Et Br)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)进行诱导,采用RT-PCR法、MTT法和健那绿染色技术联合鉴定Et Br对HaCaT细胞线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)拷贝数的影响,建立不同mt DNA拷贝数目的HaCaT... 该研究采用溴化乙锭(ethidium bromide,Et Br)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)进行诱导,采用RT-PCR法、MTT法和健那绿染色技术联合鉴定Et Br对HaCaT细胞线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)拷贝数的影响,建立不同mt DNA拷贝数目的HaCaT细胞模型。结果显示,HaCaT细胞经100 ng/m L和50 ng/m L Et Br分别处理10 d后,细胞形态随着处理时间的延长发生改变,由规则铺路石形状逐渐变圆,某些细胞体积变小,成团生长,细胞膜边缘不光滑,且随着mt DNA数目的减少,细胞增殖速率明显下降。RT-PCR分析结果显示,与对照组相比,50 ng/m L和100 ng/m L Et Br处理10 d的HaCaT细胞中,mt DNA的拷贝数分别减少了52.9%和97.6%[以线粒体DNA脱氢酶1(mitochondrial NADH dehydrogenase 1 gene,ND1)与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)的比值来表示mt DNA的相对拷贝数变化情况]。健那绿染色显示,对照组HaCaT细胞中可见分散存在的蓝绿色线粒体颗粒,100 ng/m L Et Br处理10 d后的HaCaT细胞中,显微镜下蓝绿色线粒体颗粒明显减少。综上所述,该研究证明了HaCaT细胞可通过Et Br诱导被成功培养成ρ–细胞,且Et Br浓度与HaCaT细胞mt DNA拷贝数的变化在一定的范围内存在着剂量–效应关系。 展开更多
关键词 线粒体DNA 线粒体DNA缺失HaCaT细胞系 溴化乙锭
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标记减数分裂遗传重组的免疫荧光染色方法 被引量:4
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作者 蔡欣 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1068-1071,共4页
联会复合体免疫荧光技术在全基因减数分裂遗传重组研究中具有精确和直观的优势.本研究通过免疫荧光染色方法制备小鼠精母细胞联会复合体,研究其形态组成与遗传重组特征,展示雄性小鼠遗传重组图谱并分析其重组位点(MLH1位点)的分布特征.... 联会复合体免疫荧光技术在全基因减数分裂遗传重组研究中具有精确和直观的优势.本研究通过免疫荧光染色方法制备小鼠精母细胞联会复合体,研究其形态组成与遗传重组特征,展示雄性小鼠遗传重组图谱并分析其重组位点(MLH1位点)的分布特征.4只小鼠共145个精母细胞在平均每个细胞的MLH1位点数为23.3±2.4;在常染色体联会复合体中,未发现有3个MLH1位点的联会复合体,具有1个MLH1位点的联会复合体较多,平均为14.2;无XY联会复合体的细胞占所有细胞的4.1%,XY联会复合体上有MLH1位点的细胞占30.2%;联会复合体上有裂缝的细胞占0.7%.通过联会复合体免疫荧光染色可以清晰地分辨出联会复合体(红色)、着丝粒(蓝色)和MLH1位点(绿色),是遗传重组分析的一种强有力工具. 展开更多
关键词 免疫荧光染色 减数分裂遗传重组 联会复合体 小鼠精母细胞
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西达本胺诱导胰腺癌细胞凋亡 被引量:1
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作者 乔志新 贺敏 +6 位作者 李伟静 王璇琳 王春燕 苏丽华 郐启源 任素萍 于群 《生物技术通讯》 CAS 2013年第4期523-527,共5页
目的:观察西达本胺对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨西达本胺抗胰腺癌的机制。方法:西达本胺处理BxPC-3和PANC-1细胞后,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH-DA染色方法测定细胞线粒体膜跨膜电... 目的:观察西达本胺对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨西达本胺抗胰腺癌的机制。方法:西达本胺处理BxPC-3和PANC-1细胞后,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH-DA染色方法测定细胞线粒体膜跨膜电位变化和活性氧(ROS)的产生,用Western印迹检测Bcl-2家族和γH2AX蛋白表达的变化。结果:西达本胺对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1具有生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,且呈时间和剂量依赖关系;处理72 h后,胰腺癌细胞内ROS产生增强导致DNA损伤发生,且线粒体跨膜电位明显下降;促凋亡蛋白Bax的表达,抑制抑凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达。结论:西达本胺具有抑制胰腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡的作用;西达本胺增强胰腺癌细胞内ROS的产生并导致DNA损伤,最终诱导细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 胰腺癌细胞 西达本胺 细胞凋亡
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基于强化学习的正弦优化算法求解能耗分布式流水车间节能调度问题
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作者 郎峻 殷晓明 顾幸生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期623-632,共10页
针对分布式流水车间节能调度中最大完工时间(makespan)与总能耗(TEC)的多目标优化难题,本文提出一种基于强化学习的正弦优化算法(RLSOA)。算法通过双重Q-learning策略协同优化加工序列与速度调整:底层Q-learning优先加速关键路径任务以... 针对分布式流水车间节能调度中最大完工时间(makespan)与总能耗(TEC)的多目标优化难题,本文提出一种基于强化学习的正弦优化算法(RLSOA)。算法通过双重Q-learning策略协同优化加工序列与速度调整:底层Q-learning优先加速关键路径任务以缩短makespan,顶层Q-learning降低非关键任务速度以减少TEC。结合自适应参数与4种速度调整算子,设计基于精英解导向的局部搜索策略,平衡全局探索与局部开发。基于480组不同规模算例的实验表明,相较于KCA、INSGA等对比算法,RLSOA在覆盖率(C-metric)和反世代距离(IGD)指标上平均提升23.6%和降低41.8%。消融实验验证双重Q-learning与局部搜索分别贡献65.3%和28.7%的解质量提升。统计检验(p<0.05)证实本文算法优越性,为分布式制造系统提供了高效的节能调度工具。 展开更多
关键词 节能 分布式流水车间调度 强化学习 元启发式算法 多目标优化
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lncSIL通过EZH2/P21/CDK6信号通路负向调控TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞间质转化 被引量:3
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作者 张万方 王琳 +10 位作者 潘鹏涛 李文昕 康瑞丽 朱子任 陈浩勤 方新宇 张星灿 张雨昕 姜依雯 李欣妍 袁本琪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期600-604,共5页
目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)... 目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达的影响;通过RNA pulldown分析lncSIL相互作用蛋白,并检测过表达或沉默lncSIL后对其靶基因组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)以及下游因子P21蛋白(P21)和细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)表达的影响,并结合流式细胞术分析lncSIL对细胞周期进程的作用。结果沉默lncSIL后,间质细胞标志蛋白α-SMA和Col I表达升高,肺泡上皮细胞标志蛋白E-cad表达下降;RNA pulldown实验结果显示EZH2是与lncSIL相互作用的靶蛋白,并且沉默lncSIL后EZH2表达升高,其下游基因P21表达下调,CDK6表达上调,同时S期细胞的数量显著升高;过表达lncSIL时,EZH2与CDK6表达下调,P21表达上调,同时S期细胞的数量明显降低。结论lncSIL通过负向调控EZH2/P21/CDK6信号通路抑制细胞周期进程进而抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞向间质转化。 展开更多
关键词 lncSIL 长链非编码RNA 特发性肺纤维化 上皮细胞间质转化 转化生长因子β1 Zeste同源物增强子2 细胞标志蛋白
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转酮酶在癌症中的作用及其机制研究进展 被引量:1
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作者 秦兆宇 贺福初 钟凡 《生物技术通讯》 CAS 2013年第6期861-864,共4页
肿瘤细胞的一大重要特征是代谢水平的改变。戊糖磷酸途径作为细胞产生NADPH和五碳糖的主要通路,在肿瘤发生发展过程中发挥着重要功能。转酮酶是戊糖磷酸途径中的关键酶之一,越来越多的研究表明其与癌症病人预后具有显著相关性。作为肿... 肿瘤细胞的一大重要特征是代谢水平的改变。戊糖磷酸途径作为细胞产生NADPH和五碳糖的主要通路,在肿瘤发生发展过程中发挥着重要功能。转酮酶是戊糖磷酸途径中的关键酶之一,越来越多的研究表明其与癌症病人预后具有显著相关性。作为肿瘤诊断、治疗的潜在靶标,转酮酶具有重要的研究价值。我们就目前癌症研究中对转酮酶的研究进展做简要综述。 展开更多
关键词 转酮酶 戊糖磷酸途径 肿瘤
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