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Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较 被引量:49
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作者 张伟 梁智辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1209-1212,共4页
目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡... 目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况。结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符。结论与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性。 展开更多
关键词 凋亡 ANNEXIN V-FITC/PI Hoechst33342/PI 流式细胞术
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纳米Eu_2O_3对HEK-293T细胞的生物活性影响 被引量:2
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作者 周雪萍 侯惠智 +2 位作者 李英奇 杨斌盛 杨频 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第1期106-110,共5页
稀土化合物的生物效应研究已经引起广泛关注.利用激光共聚焦显微镜观察到纳米Eu2O3能进入活HEK-293T细胞中且位于细胞核周围.在体外培养条件下,利用流式细胞仪法检测了纳米Eu2O3对细胞的活力及对细胞周期的影响,结果表明当纳米颗粒浓度... 稀土化合物的生物效应研究已经引起广泛关注.利用激光共聚焦显微镜观察到纳米Eu2O3能进入活HEK-293T细胞中且位于细胞核周围.在体外培养条件下,利用流式细胞仪法检测了纳米Eu2O3对细胞的活力及对细胞周期的影响,结果表明当纳米颗粒浓度小于200μg?mL-1时,对细胞活性没有明显影响;而当纳米颗粒浓度≥400μg?mL-1时,对细胞活性明显抑制.当Eu2O3纳米颗粒在低浓度范围(≤50μg?mL-1)时对细胞周期基本没有影响,而高浓度(≥200μg?mL-1)时对细胞周期均有显著抑制,停滞在DNA合成后期.这些研究结果均表明纳米Eu2O3对HEK-293T细胞具有明显的生物效应. 展开更多
关键词 纳米Eu2O3 HEK-293T细胞 生物活性
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hCAP-18/LL-37基因转染对RAW264.7细胞活化功能的影响
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作者 刘超 袁红艳 +2 位作者 焦淑凡 余磊 常雅萍 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期153-156,共4页
目的探讨抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对巨噬细胞RAW264.7活化功能的影响。方法将重组质粒pcD-NA4/Myc-His-hCAP-18/LL-37瞬时转染RAW264.7细胞,MTT法检测细胞的增殖活性;中性红吞噬试验检测细胞的吞噬能力;RT-PCR法分析细胞活化相关分... 目的探讨抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对巨噬细胞RAW264.7活化功能的影响。方法将重组质粒pcD-NA4/Myc-His-hCAP-18/LL-37瞬时转染RAW264.7细胞,MTT法检测细胞的增殖活性;中性红吞噬试验检测细胞的吞噬能力;RT-PCR法分析细胞活化相关分子CD80、CD86、TLR4及细胞因子IL-1β、TNF-αmRNA的转录。结果 hCAP-18/LL-37基因转染可促进经脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理的RAW264.7细胞的增殖活性与吞噬能力(P<0.05);可上调RAW264.7细胞CD80、CD86、TLR4、IL-1β、TNF-α基因mRNA的转录水平。结论 hCAP-18/LL-37基因转染可通过促进RAW264.7细胞增殖活性、吞噬能力及活化相关分子表达,调控巨噬细胞的活化功能。 展开更多
关键词 抗菌肽 hCAP-18/LL-37 转染 巨噬细胞 活化 脂多糖类
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ZnO,TiO_(2),SiO_(2),and Al_(2)O_(3) Nanoparticles-induced Toxic Effects on Human Fetal Lung Fibroblasts 被引量:6
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作者 ZHANG Xiao Qiang YIN Li Hong +1 位作者 TANG Meng PU Yue Pu 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2011年第6期661-669,共9页
Objective This study aims to investigate and compare the toxic effects of four types of metal oxide(ZnO,TiO_(2),SiO_(2),and Al_(2)O_(3))nanoparticles with similar primary size(-20 nm)on human fetal lung fibroblasts(HF... Objective This study aims to investigate and compare the toxic effects of four types of metal oxide(ZnO,TiO_(2),SiO_(2),and Al_(2)O_(3))nanoparticles with similar primary size(-20 nm)on human fetal lung fibroblasts(HFL1)in vitro.Methods The HFL1 cells were exposed to the nanoparticles,and toxic effects were analyzed by using MTT assay,cellular morphology observation and Hoechst 33258 staining.Results The results show that the four types of metal oxide nanoparticles lead to cellular mitochondrial dysfunction,morphological modifications and apoptosis at the concentration range of 0.25-1.50 mg/mL and the toxic effects are obviously displayed in dose-dependent manner.ZnO is the most toxic nanomaterials followed by TiO_(2),SiO_(2),and Al_(2)O_(3)nanoparticles in a descending order.Conclusion The results highlight the differential cytotoxicity associated with exposure to ZnO,TiO_(2),SiO_(2),and Al_(2)O_(3)nanoparticles,and suggest an extreme attention to safety utilization of these nanomaterials. 展开更多
关键词 Metal oxide nanoparticles Toxic effects FIBROBLASTS
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3D打印丝素蛋白支架结构对支气管上皮细胞体外生长的影响
5
作者 陈仲春 钟农萍 +2 位作者 董涛 邵正中 赵霞 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期475-483,共9页
目的探讨3D打印丝素蛋白(silk fibroin,SF)/羟丙基羧甲基纤维素(hydroxypropyl methylcellulose,HPMC)支架结构对体外气管上皮细胞生长的影响。方法应用3D生物打印机通过调节SF/HPMC溶液浓度和打印参数,并结合冷冻干燥法制备6种不同孔... 目的探讨3D打印丝素蛋白(silk fibroin,SF)/羟丙基羧甲基纤维素(hydroxypropyl methylcellulose,HPMC)支架结构对体外气管上皮细胞生长的影响。方法应用3D生物打印机通过调节SF/HPMC溶液浓度和打印参数,并结合冷冻干燥法制备6种不同孔隙率、孔径大小和表面粗糙度的3D打印SF/HPMC支架。选用人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞,在支架上培养7天。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖,通过扫描电子显微镜观察细胞生长形态,通过活/死细胞染色观察细胞在支架上的活性。结果粗糙表面和光滑表面的20%(质量百分数)SF/HPMC支架的孔隙率分别为70.5%±2.0%和65.5%±6.1%,粗糙表面和光滑表面的30%(质量百分数)SF/HPMC支架的孔隙率分别为63.9%±2.1%和59.6%±2.1%。粗糙表面的20%SF/HPMC支架有两种孔径,分别为(443.9±104.1)μm和(681.1±115.1)μm。BEAS-2B细胞在粗糙表面支架上的延展更好,在高孔隙率和小孔径支架上的增殖更好。结论3D打印SF/HPMC支架适合支气管上皮细胞生长,粗糙表面、高孔隙率和小孔径的支架结构可能有利于细胞生长。 展开更多
关键词 丝素蛋白(SF) 3D打印 上皮细胞 支气管 表面形态 孔隙率
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Luminescent terphen[3]arene sulfate-activated FRET assemblies for cell imaging
6
作者 Zhixue Liu Haiqi Chen +5 位作者 Lijuan Guo Xinyao Sun Zhi-Yuan Zhang Junyi Chen Ming Dong Chunju Li 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2024年第9期183-186,共4页
Multicharged supramolecular assemblies based on luminescent macrocycle play an important role in extending their optical properties and functions.Herein,we reported macrocyclic supramolecular assemblies based on lumin... Multicharged supramolecular assemblies based on luminescent macrocycle play an important role in extending their optical properties and functions.Herein,we reported macrocyclic supramolecular assemblies based on luminescent terphen[3]arene sulfate(TP[3]AS)and tetraphenylethylene pyridinium(TPE-4Py)through electrostatic interactions,host-vip encapsulation andπ-πstacking interactions.F?rster resonance energy transfer(FRET)process from TP[3]AS to TPE-4Py was achieved with the energy transfer efficiency of 99.9%,accompanied by TPE-4Py fluorescence emission bathochromic shifted of 15 nm and enhanced by 1.68 times in PBS solution.In contrast,other non-luminescent sulfato-β-cyclodextrin and sulfobutylether-β-cyclodextrin only can enhance the fluorescence intensity of TPE-4Py without bathochromic shift.Due to the strong fluorescence and good stability of TPE-4Py@TP[3]AS,it can be used for optical imaging in living cells,which provided an effective approach for the construction of assembling-confined luminescent biomaterials. 展开更多
关键词 Luminescent macrocycle arene sulfate Multicharged assembly Multivalent interactions Forster resonance energy transfer Cell imaging
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可逆识别Cu^(2+)的吡唑啉荧光猝灭型探针及其在PK-15细胞成像中的应用 被引量:7
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作者 张应鹏 尤彩霞 +3 位作者 杨云裳 刘小育 郭慧琛 董玉莹 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1401-1406,共6页
设计合成了1-(2-羟基苯基)-4-(9-蒽基)-3-苯并噻唑基吡唑啉(P1),通过紫外吸收和荧光光谱法研究了化合物与金属离子的识别特性,并研究了其在PK-15活细胞中进行荧光显微成像实验.研究结果表明荧光探针P1能快速、高选择、可逆地识别Cu^(2+)... 设计合成了1-(2-羟基苯基)-4-(9-蒽基)-3-苯并噻唑基吡唑啉(P1),通过紫外吸收和荧光光谱法研究了化合物与金属离子的识别特性,并研究了其在PK-15活细胞中进行荧光显微成像实验.研究结果表明荧光探针P1能快速、高选择、可逆地识别Cu^(2+),细胞毒性实验和荧光免疫分析实验证明,所制备的荧光探针具有很好的生物相容性和低毒性. 展开更多
关键词 吡唑啉 荧光探针 铜离子 识别 PK-15活细胞
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miR-125a-5p通过靶向调控GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移能力 被引量:7
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作者 徐新伟 李佩瑞 +3 位作者 张增山 王学文 李洪利 尹崇高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期925-930,共6页
miR-125a-5p可负性调节GAB2表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭和转移。本研究旨在证明miR-125a-5p抑癌作用的普遍性,即miR-125a-5p是否可通过靶向抑制GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移。荧光素酶实验结果显示,miR-125a-5p可特异识别GAB2的3'-UTR,... miR-125a-5p可负性调节GAB2表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭和转移。本研究旨在证明miR-125a-5p抑癌作用的普遍性,即miR-125a-5p是否可通过靶向抑制GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移。荧光素酶实验结果显示,miR-125a-5p可特异识别GAB2的3'-UTR,抑制报告酶的表达。荧光定量PCR结果揭示,与正常乳腺上皮细胞MCF-10A比较,miR-125a-5p在乳腺癌细胞MDA231和MCF-7中的表达明显降低;与迁移能力相对较低的MCF-7细胞比较,miR-125a-5p在迁移能力较高的MDA231细胞中的表达量更低。Western印迹结果证明,与空载体(对照)和anti-miR125a-5p转染细胞比较,转染miR-125a-5p明显抑制GAB2蛋白在乳腺癌细胞中的表达。Transwell结果显示,与空载体转染的对照细胞比较,转染miR-125a-5p的乳腺癌细胞穿过基质胶的细胞数明显减少;相反,转染anti-miR125a-5p的细胞穿过基质胶的细胞数却明显增多。上述结果提示,miR-125a-5p在正常的乳腺细胞中高表达,而在乳腺癌细胞中低表达,其表达水平与癌细胞的迁移能力和GAB2表达呈反向关系。本研究结果还提示,miR-125a-5p通过靶向负调控GAB2抑制乳腺癌细胞的迁移能力。总之,本研究证明,miR-125a-5p在肿瘤中发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-125a-5p GRB相关结合蛋白2 迁移
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改良MTT法检测HePG-2细胞增殖的研究 被引量:19
9
作者 安飞云 廖春华 边寰峰 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期186-188,共3页
关键词 MTT法 二甲基甲酰胺 检测 HEPG-2细胞增殖
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Raptor通过Wnt3a/β-catenin信号通路对乳腺癌侵袭与转移的作用 被引量:9
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作者 徐新伟 杨玉玲 +4 位作者 孙志亮 张国新 曾国栋 李洪利 尹崇高 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期682-687,共6页
目的探讨Raptor是否可以通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。方法采用免疫印迹法(Western blotting)检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况;采用小RNA(RNAi)干扰技术将质粒转染MDA231,... 目的探讨Raptor是否可以通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。方法采用免疫印迹法(Western blotting)检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况;采用小RNA(RNAi)干扰技术将质粒转染MDA231,将过表达质粒转染MCF-7;趋化运动实验检测乳腺癌细胞的运动能力;Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞的侵袭能力;Western blotting检测上皮细胞-间充质转化(EMT)标志物的表达情况;核质分离实验检测β-联蛋白(β-catenin)的转核情况。结果 Western blotting法检测结果显示,Raptor在低转移细胞系MCF-7中低表达,而在高转移细胞系MDA231中高表达。转染后,SiRaptor/MDA231细胞组中Raptor蛋白的表达明显下降,MCF-7/Raptor细胞组中Raptor蛋白的表达明显升高,表明转染成功。用Wnt3a刺激处理后,趋化运动和Transwell侵袭实验结果显示,SiRaptor/MDA231细胞组运动和侵袭能力明显降低,MCF-7/Raptor细胞组运动和侵袭能力明显增强。Western blotting法检测结果显示,用Wnt3a和抑制剂Dkk1不同处理后,SiRaptor/MDA231细胞组中上皮-钙黏蛋白(E-cadherin)上调,波形蛋白(vimentin)下调,细胞核中β-catenin的表达降低,而MCF-7/Raptor细胞组中E-cadherin蛋白下调,vimentin蛋白上调,β-catenin蛋白的表达升高。结论 Raptor能通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进EMT的发生,进而促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 RAPTOR Wnt3a/β-catenin 上皮细胞-间充质转化 侵袭 免疫印迹法
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二甲基亚砜和胎牛血清对293T细胞冷冻效果的影响 被引量:4
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作者 李佳佳 程腾 +4 位作者 贺小英 梁波 陈秀莉 籍凤宇 马利兵 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第2期217-220,共4页
使用含不同体积分数二甲基亚砜(DMSO)(5%、10%、15%、20%)和不同体积分数胎牛血清(FBS)(5%、10%、20%、40%)的细胞冷冻液以三步冷冻法冻存293T细胞.台盼蓝染色法进行活细胞计数后计算出解冻后细胞存活率.结果表明:FBS对293T细胞冷冻效... 使用含不同体积分数二甲基亚砜(DMSO)(5%、10%、15%、20%)和不同体积分数胎牛血清(FBS)(5%、10%、20%、40%)的细胞冷冻液以三步冷冻法冻存293T细胞.台盼蓝染色法进行活细胞计数后计算出解冻后细胞存活率.结果表明:FBS对293T细胞冷冻效果的影响是显著的(P<0.05),但添加20%和40%FBS的效果无显著差异(P>0.05);DMSO对293T细胞冷冻效果的影响则是极显著的(P<0.01),添加10%DMSO时,细胞的冷冻效果最好;冷冻液中含10%DMSO、40%FBS时的冷冻效果最佳,细胞存活率可达到82.00%.而实际应用中,含10%FBS、10%DMSO或20%FBS、5%~10%DMSO的细胞冷冻液也可达到较理想的冷冻效果,足以达到一般实验的要求. 展开更多
关键词 293T细胞 二甲基亚砜 胎牛血清 冷冻效果
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牛结核分枝杆菌Mce4E蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOs、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响 被引量:3
12
作者 徐广贤 赵德明 +2 位作者 周向梅 尹晓敏 杨建民 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-6,共6页
探讨Mce4E蛋白在牛结核分枝杆菌致病机理中的作用。以Mce4E蛋白刺激肺泡巨噬细胞24和48h后,MTT检测分析表明,Mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用(P<0.05);用重组表达的Mce4E蛋白、人分枝杆菌纯化蛋白衍生物(Purified Protein... 探讨Mce4E蛋白在牛结核分枝杆菌致病机理中的作用。以Mce4E蛋白刺激肺泡巨噬细胞24和48h后,MTT检测分析表明,Mce4E蛋白对巨噬细胞的活性有显著的抑制作用(P<0.05);用重组表达的Mce4E蛋白、人分枝杆菌纯化蛋白衍生物(Purified Protein Derivative of M.tuberculosis,MtbPPD)、牛结核分枝杆菌纯化蛋白衍生物(Purified Protein Derivative of M.bovis,MbPPD)、卡介苗(Bacille Calmette Guerin,BCG)和刀豆蛋白A(con-canavalin A,ConA)分别刺激肺泡巨噬细胞48h后,real-time PCR方法检测显示,Mce4E蛋白能够促使牛肺泡巨噬细胞TNF-α和IL-6 mRNA的表达上调(P<0.05)、抑制肺泡巨噬细胞iNO的mRNA表达(P<0.05)而对IL-12表达没有影响(P>0.05)。Mce4蛋白能够促使肺泡巨噬细胞分泌炎性细胞因子,并对肺泡巨噬细胞有抑制作用,证实Mce4蛋白在分枝杆菌中具有重要的作用。 展开更多
关键词 牛结核分枝杆菌 Mce4E蛋白 牛肺泡巨噬细胞 real—time PCR
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PEEK-HA生物材料对成纤维细胞3T3的影响 被引量:3
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作者 倪卓 刘士德 +2 位作者 王应 刘学 姜振华 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2013年第4期392-397,共6页
聚醚醚酮(polyetheretherketone,PEEK)与纳米羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)共混制备PEEK-HA生物复合材料.通过倒置荧光显微镜观察材料对细胞形态影响,不同HA含量的PEEK-HA复合材料中活细胞数目与空白对照无明显差异.采用噻唑蓝(3-(4,5-... 聚醚醚酮(polyetheretherketone,PEEK)与纳米羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)共混制备PEEK-HA生物复合材料.通过倒置荧光显微镜观察材料对细胞形态影响,不同HA含量的PEEK-HA复合材料中活细胞数目与空白对照无明显差异.采用噻唑蓝(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoli-um bromide,MTT)染色法研究细胞增殖的作用,发现不同HA含量的PEEK-HA复合材料的质量浓度为4mg/mL时,该生物复合材料对细胞增殖有一定促进作用;8~64 mg/mL时,对细胞增殖作用逐渐减小;64mg/mL时,对细胞增殖作用最小,表明随着材料质量浓度增加可抑制细胞增殖.测定PEEK-HA生物复合材料材料对3T3细胞黏附率,发现随着HA含量的增加,细胞黏附率增大,HA可以改善材料黏附性能.PEEK-HA生物复合材料细胞毒性级别均在Ⅰ级,说明对3T3细胞无毒性. 展开更多
关键词 复合材料 骨替代材料 PEEK-HA生物复合材料 生物相容性 3T3细胞 细胞增殖 细胞毒性 黏附率
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用乙基环丙沙星重建受猪鼻支原体污染的BHK-21细胞的研究 被引量:3
14
作者 高林 廖德芳 +4 位作者 姚俊 肖雷 李华春 张念祖 李志华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第12期45-49,共5页
为重建受猪鼻支原体人为污染的BHK-21细胞,本研究采用含10mg/L乙基环丙沙星的培养液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理,并用DNA荧光染色法和PCR法对处理进行全程监测。结果发现,4次循环处理并再传3代后,猪鼻支原体... 为重建受猪鼻支原体人为污染的BHK-21细胞,本研究采用含10mg/L乙基环丙沙星的培养液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理,并用DNA荧光染色法和PCR法对处理进行全程监测。结果发现,4次循环处理并再传3代后,猪鼻支原体污染已被彻底清除,细胞恢复了健康。此方法为抢救受支原体污染的细胞提供了参考。 展开更多
关键词 乙基环丙沙星 猪鼻支原体 BHK-21细胞 清除污染
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MMP-2反义寡核苷酸对人胃癌SGC7901细胞增殖和侵袭能力的影响 被引量:2
15
作者 刘倩 吴小翎 +1 位作者 罗红春 连海峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期361-364,共4页
目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)反义寡核苷酸(ASODN)对人胃癌SGC7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将不同浓度的硫代磷酸化修饰的MMP-2ASODN转染入人中低分化胃腺癌SGC7901细胞株,RT-PCR法检测细胞MMP-2基因mRNA的转录水平;Transwel... 目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)反义寡核苷酸(ASODN)对人胃癌SGC7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将不同浓度的硫代磷酸化修饰的MMP-2ASODN转染入人中低分化胃腺癌SGC7901细胞株,RT-PCR法检测细胞MMP-2基因mRNA的转录水平;Transwell试验检测细胞体外迁移和侵袭能力变化;MTT法检测细胞的增殖活性。结果转染MMP-2ASODN后,SGC7901细胞中MMP-2基因mRNA的转录水平显著降低,细胞的体外迁移和侵袭能力受到抑制,且抑制作用随ASODN浓度的增加而增强;而细胞的增殖活性无明显变化。结论MMP-2ASODN可抑制胃腺癌SGC7901细胞MMP-2基因mRNA的转录水平及细胞的体外迁移和侵袭能力,但与胃癌细胞的增殖活性无明显相关性。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-2 反义寡核苷酸 胃癌 SGC7901细胞 增殖 侵袭
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用乙基环丙沙星重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞 被引量:2
16
作者 高林 廖德芳 +3 位作者 姚俊 张念祖 李华春 李志华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期214-217,共4页
为重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞,本研究采用药物乙基环丙沙星,先测出该药对大肠杆菌的最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),再测出该药对BHK-21细胞的MIC,从而确定10mg/L为乙基环丙沙星不影响细胞生长,又能抑制大肠... 为重建受大肠杆菌污染的BHK-21细胞,本研究采用药物乙基环丙沙星,先测出该药对大肠杆菌的最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),再测出该药对BHK-21细胞的MIC,从而确定10mg/L为乙基环丙沙星不影响细胞生长,又能抑制大肠杆菌的安全浓度。然后用含该浓度乙基环丙沙星的MEM生长液,对受污染的BHK-21细胞进行物理、化学相结合的循环处理。经过3次循环处理,再传3代后,确认大肠杆菌污染已经被彻底清除,细胞恢复了健康。此方法为抢救受细菌污染的细胞提供了参考。 展开更多
关键词 乙基环丙沙星 大肠杆菌 BHK-21细胞 清除污染
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家蝇抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖影响浓度的探索 被引量:2
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作者 杜斌 赵瑞君 +4 位作者 程璟侠 王文健 原发家 聂守民 李彦红 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2015年第1期24-28,共5页
本文初步探究不同浓度家蝇幼虫抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖的影响。采用诱导、研磨、离心、C18固相萃取等方法制备家蝇幼虫抗菌肽混合物,然后处理传代期的FBL-3细胞,调整浓度为2.25×10^6/mL并通过尾静脉注射C57BL/6小... 本文初步探究不同浓度家蝇幼虫抗菌肽对FBL-3红白血病原代细胞增殖的影响。采用诱导、研磨、离心、C18固相萃取等方法制备家蝇幼虫抗菌肽混合物,然后处理传代期的FBL-3细胞,调整浓度为2.25×10^6/mL并通过尾静脉注射C57BL/6小鼠,建立红白血病动物模型。待肿瘤生长较大时,处死并剥离肿瘤,再通过研磨、裂红液裂解、获取原代肿瘤细胞并培养。将抗菌肽混合物调整为不同浓度作用于传代期的FBL-3原代细胞,之后经倒置显微镜观察照相,台盼蓝染色试验计算死亡率、CCK-8试剂盒做细胞毒性检测。结果显示抗菌肽混合物浓度为250—350μg/mL作用FBL-3原代细胞时,细胞碎片大量增多,死亡率增高,细胞毒性变大。初步证明了抗菌肽混合物在250~350μg/mL抑制细胞增殖效果明显,在300μg/mL浓度下抑制作用最强,本研究结果可作为动物模型体内实验的参考。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 FBL-3原代细胞 浓度
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CCK-8法和MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的最佳条件比较研究 被引量:26
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作者 李宁 万文婷 金林红 《贵州大学学报(自然科学版)》 2009年第3期18-20,24,共4页
以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102-1×105个。在检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞的增殖影... 以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102-1×105个。在检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞的增殖影响实验中,发现CCK-8法测得数据的线性相关性优于MTT法,并且数据偏差较MTT法小。实验结果表明CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 CCK-8 MTT 前列腺癌 细胞增殖
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清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β_1mRNA基因表达的影响 被引量:2
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作者 汪受传 王文革 +1 位作者 陈四文 赵霞 《世界科学技术-中医药现代化》 2005年第3期34-37,共4页
目的:采用治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证的有效中药制剂清肺口服液,研究其对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞的转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA基因表达的影响。方法: 以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,用清肺口... 目的:采用治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证的有效中药制剂清肺口服液,研究其对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞的转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA基因表达的影响。方法: 以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,用清肺口服液含药血清作用于该细胞,另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组,采用原位杂交法检测不同组细胞TGF-β1的mRNA 基因表达,并进行比较。结果:病毒对照组较正常细胞组的TGF-β1mRNA基因表达明显增强(P <0.01),含药血清组可显著降低3I、7b型腺病毒攻击后细胞TGF-β1的mRNA表达(P<0.01)。结论:腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞TGF-β1mRNA表达增高;清肺口服液可下调TGF-β1的mR- NA表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。 展开更多
关键词 TGF-β1 肺成纤维细胞 腺病毒感染 基因表达 口服液 人胚 b型 转化生长因子-β1 mRNA表达 正常细胞 原位杂交法 抗病毒作用 中药制剂 体外培养 利巴韦林 病毒攻击 TGFβ 病毒性 血清组 对照 肺炎 行比
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PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞 被引量:1
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作者 张殿宝 李莹 +3 位作者 苏航 王竟 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期612-615,共4页
目的探索使用PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞(h AEC)。方法采用透射电子显微镜和动态光散射表征PEI-Fe_3O_4纳米颗粒。使用纳米颗粒标记原代培养的h AEC,普鲁士蓝染色评价其标记效率,台盼蓝染色法和CCK-8法检测细胞存活率和细... 目的探索使用PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞(h AEC)。方法采用透射电子显微镜和动态光散射表征PEI-Fe_3O_4纳米颗粒。使用纳米颗粒标记原代培养的h AEC,普鲁士蓝染色评价其标记效率,台盼蓝染色法和CCK-8法检测细胞存活率和细胞毒性。结果 PEI-Fe_3O_4纳米颗粒呈紧凑的球形,平均粒径为13 nm,水动力学半径为17.56 nm,zeta电位为+34.5 m V。浓度大于20μg/ml的纳米颗粒对h AEC的标记效率达到91%。50(t=16.37,P<0.0001;t=10.39,P<0.0001)、100μg/ml(t=29.89,P<0.0001;t=16.86,P<0.0001)纳米颗粒浓度下的h AEC存活率和细胞活力均明显低于未标记时。结论 PEI-Fe_3O_4纳米颗粒可用于标记h AEC,在其工作浓度下未表现出显著的细胞毒性。 展开更多
关键词 PEI-Fe3O4纳米颗粒 人羊膜上皮细胞 标记
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