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黄曲霉毒素B1荧光/LSPR双信号适配体传感器的构建及应用
1
作者 朱明明 胡建东 +2 位作者 张守杰 李光辉 张燕燕 《光谱学与光谱分析》 北大核心 2025年第4期1123-1128,共6页
食源性感染可能会引起新疾病产生和原有传染病再次出现,是发达国家和发展中国家疾病和死亡的主要原因之一,严重影响人类的公共卫生安全。黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是食源性霉菌毒素中毒性最大的一种,它可能通过受污染的谷类食品... 食源性感染可能会引起新疾病产生和原有传染病再次出现,是发达国家和发展中国家疾病和死亡的主要原因之一,严重影响人类的公共卫生安全。黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是食源性霉菌毒素中毒性最大的一种,它可能通过受污染的谷类食品对人体和动物健康造成严重危害。AFB1在食品中的普遍污染,加之人们对食品安全的日益重视,决定AFB1快速准确的检测方法发展具有越来越重要的意义。光学生物传感器将生物特异性识别元件和生物材料组合起来,将生物反应转化为可测量的信号,由于检测快速、灵敏度高、前处理简单等优点,光学生物传感器在生物检测传感领域有着广阔应用前景。本文利用金纳米球粒子(AuNPs)的局域表面等离子共振(LSPR)特性和荧光抑制性,构建以适配体(Aptamer,Apt)保护的金纳米粒子为信号探针的LSPR/荧光双信号输出适配体传感器,用于AFB1的定量检测。Apt保护的AuNPs在荧光分子罗丹明异硫氰酸酯(RBITC)存在的情况下分散良好,金纳米粒子的LSPR性能稳定,且RBITC荧光强度明显;由于AFB1与Apt之间的特异性,在目标物AFB1竞争作用下,AuNPs失去Apt保护,迅速被阳离子溶液RBITC分子吸附,造成金纳米粒子团聚,溶液颜色和LSPR性能发生改变,且RBITC分子的荧光基团在金纳米粒子作用下发生荧光猝灭;随后,在铁氰化钾(K_(3)[Fe(CN)_(6)])和碘化钾(KI)组成的刻蚀剂溶液作用下,金纳米粒子被氧化刻蚀消失,RBITC分子从金纳米粒子上脱落,荧光性能得到恢复,由此建立AFB1浓度与AuNPs的LSPR性能改变前后吸光度比值及RBITC分子荧光强度之间的定量关系。构建的双信号输出适配体传感器能够在0.0001~1 ng·mL^(-1)浓度范围内实现AFB1的定量检测,在真实样品检测中,LSPR实验回收率可达95.6%~105%,荧光光谱检测回收率为92.3%~118%。本文将纳米技术、生物技术、适配体技术、霉菌毒素检测技术结合起来构建的基于LSPR/荧光双信号适配体传感器是一种很有潜力且有望用于AFB1现场快速检测的技术。 展开更多
关键词 荧光光谱 局域表面等离子共振 黄曲霉毒素B1 金纳米粒子 罗丹明异硫氰酸酯
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基因脱毒百日咳疫苗菌株目的基因拷贝数双重TaqMan探针qPCR检测方法的建立及验证
2
作者 卜祥利 孙也婷 +4 位作者 张立志 赵冉 林纪胜 李晶 王淼 《中国生物制品学杂志》 2025年第5期595-604,共10页
目的建立基因脱毒百日咳疫苗菌株改造基因百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的拷贝数双重TaqMan探针qPCR检测方法,筛选最佳内参基因,以评估改造菌株的传代稳定性。方法设计改造基因PT和多个管家基因的特异性引物及探针,基于双重TaqMan探针... 目的建立基因脱毒百日咳疫苗菌株改造基因百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的拷贝数双重TaqMan探针qPCR检测方法,筛选最佳内参基因,以评估改造菌株的传代稳定性。方法设计改造基因PT和多个管家基因的特异性引物及探针,基于双重TaqMan探针qPCR法,使用GeNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT软件筛选最佳内参基因,通过相对定量法计算基因脱毒百日咳疫苗菌株PT目的基因拷贝数;对建立的方法进行特异性、线性、重复性验证。以基因脱毒百日咳疫苗生产用P1、P3、P5、P10、P15代菌株基因组DNA为模板,用建立的双重TaqMan探针qPCR法评估菌株传代稳定性。结果通过GeNorm、NormFinder、Bestkeeper、Delta CT软件分析内参基因稳定系数得出Rpob为最适内参基因。标准菌株58003既能扩增出PT目的基因,又能扩增出Rpob内参基因;样品浓度在0.001~10 ng/μL范围内,Ct值与样本量呈良好的线性关系,R2≥0.990;P1代菌株6次检测2-△△Ct值均在0.87~1.25之间,RSD小于20%。各代次菌株PT目的基因均为单拷贝,传代稳定性良好。结论建立的双重TaqMan探针qPCR法引物特异性、重复性好,可用于基因脱毒百日咳疫苗生产用菌株的传代稳定性评估,进而评价菌株质量。 展开更多
关键词 基因脱毒 百日咳疫苗 目的基因拷贝数 双重TaqMan探针qPCR 传代稳定性
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共掺La^(3+)和过量Sr^(2+)对荧光粉Sr_(1.96)Eu_(0.04)SiO_4发光性质的影响
3
作者 王伟 朱红波 吴梅 《兰州理工大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期12-16,共5页
采用高温固相法制备了荧光粉Sr_(1.96-x)Eu_(0.04)SiO_(4)∶xLa^(3+)(x=0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05)和Sr_(1.94+y)Eu_(0.04)La_(0.02)SiO_(4)∶ySr^(2+)(y=0、0.05、0.10、0.20、0.30).使用X射线粉末衍射仪、荧光分光光度计表征... 采用高温固相法制备了荧光粉Sr_(1.96-x)Eu_(0.04)SiO_(4)∶xLa^(3+)(x=0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05)和Sr_(1.94+y)Eu_(0.04)La_(0.02)SiO_(4)∶ySr^(2+)(y=0、0.05、0.10、0.20、0.30).使用X射线粉末衍射仪、荧光分光光度计表征了荧光粉的物质结构和发光性质.结果表明:荧光粉的XRD均与Sr_(2)SiO_(4)标准卡片PDF 39-1256对应,没有杂质相产生.荧光粉Sr_(1.96)Eu_(0.04)SiO_(4)中掺入La^(3+)能增强其发光强度,且发射峰的位置不变.当La^(3+)掺杂量为2%(摩尔分数)时,荧光粉Sr_(1.94)Eu_(0.04)La_(0.02)SiO_(4)的发光强度最强.在Sr_(1.94)Eu_(0.04)La_(0.02)SiO_(4)中掺入一系列过量浓度Sr^(2+),能增强其发光强度,且不改变发射峰的位置和形状.当Sr^(2+)过量10%时,荧光粉的发光强度最强.荧光粉的宽带发射光谱可以拟合为2个独立的发射峰,对应Eu^(2+)的4f~65d~1→4f~7跃迁,2个发射峰的强度随着通气量的增大有规律变化,使得荧光粉的发光颜色从绿光区过渡到黄光区. 展开更多
关键词 荧光粉 高温固相法 稀土离子 硅酸锶
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慢性阻塞性肺疾病小气道NOX4、TGF-β的表达与气道重塑的关系 被引量：17
4
作者 陈娟 崔节达 +2 位作者 郭晓桐 刘鲜艳 张红 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期481-487,I0013,I0014,共9页
目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、转化生长因子β(TGF-β)的表达与慢性阻塞性肺疾病(COPD)小气道重塑的关系。方法:收集55例因肺部肿瘤行肺叶切除的患者,根据临床资料及术前肺功能分为COPD组(36例)及对照组(19例),术... 目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、转化生长因子β(TGF-β)的表达与慢性阻塞性肺疾病(COPD)小气道重塑的关系。方法:收集55例因肺部肿瘤行肺叶切除的患者,根据临床资料及术前肺功能分为COPD组(36例)及对照组(19例),术中留取病变远端正常的肺组织标本。采用HE染色观察COPD组及对照组小气道形态学变化;采用免疫组织化学法、免疫荧光双染法及免疫印迹检测小气道组织NOX4、TGF-β、α-SMA及胶原蛋白Ⅳ的表达情况,并分析其与肺功能气流受限严重程度的相关性。结果:(1)COPD组小气道平滑肌厚度占气道外径的百分比(WT%)、小气道平滑肌面积占支气管断面面积百分比(WA%)明显高于对照组(P<0.05);WT%和WA%在不同肺功能分级的COPD组间比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。(2)COPD组上皮细胞增生明显,部分上皮细胞表达间质细胞表型α-SMA及胶原蛋白Ⅳ。COPD组上皮细胞α-SMA及Ⅳ型胶原蛋白免疫染色强度明显强于对照组(P<0.05)。(3)NOX4在COPD组小气道平滑肌及上皮细胞中的表达明显高于对照组(P<0.05),NOX4的表达在不同肺功能分级的COPD组间比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。(4)TGF-β在COPD组小气道平滑肌细胞及气道上皮细胞的表达均高于对照组(P<0.05)。(5)COPD小气道平滑肌WT%、WA%与肺功能FEV1%pred、FEV1/FVC%呈负相关(P<0.05);小气道平滑肌细胞NOX4的表达与肺功能FEV1%pred、FEV1/FVC%呈负相关(P<0.05)。结论:COPD存在以小气道平滑肌增生及细胞外基质沉积为主要表现的气道重塑,且气道重塑的程度与气流受限严重程度呈正相关,COPD小气道上皮细胞和小气道平滑肌细胞表达NOX4、α-SMA和TGF-β明显增高,NOX4、α-SMA、TGF-β的表达与COPD气流受限严重程度呈负相关,提示TGF-β、NOX4信号机制可能参与COPD气道重塑的发生发展。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 气道重塑 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶 转化生长因子Β
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雨生红球藻对大鼠运动性心肌损伤的保护作用 被引量：8
5
作者 周海涛 曹建民 +3 位作者 龚平 牛衍龙 王灿 王飙 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期539-543,共5页
目的:研究雨生红球藻对长时间、大强度运动导致的大鼠运动性心肌损伤的保护作用。方法:以大强度耐力训练大鼠为模型,将65只42 d龄雄性SPF级Wistar大鼠随机分为5组:安静组(C组)、运动对照组(M组)、运动+雨生红球藻低剂量组(HM Ⅰ组)、运... 目的:研究雨生红球藻对长时间、大强度运动导致的大鼠运动性心肌损伤的保护作用。方法:以大强度耐力训练大鼠为模型,将65只42 d龄雄性SPF级Wistar大鼠随机分为5组:安静组(C组)、运动对照组(M组)、运动+雨生红球藻低剂量组(HM Ⅰ组)、运动+雨生红球藻中剂量组(HM Ⅱ组)、运动+雨生红球藻高剂量组(HM Ⅲ组),每组12只(剔除不符合实验要求的大鼠5只)。雨生红球藻组剂量分别为0.067,0.133,0.4 g/kg,体积为5ml/kg,每天灌胃(ig)1次,其他组ig等量生理盐水。游泳训练42 d后,测定血清谷丙转氨酶(ALT)等心肌损伤标志物含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,血清、心肌内皮素(ET)及降钙素基因相关肽(CGRP)含量等相关生化指标。结果:血清ALT、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、心肌MDA、血清与心肌ET含量,M组较C组显著升高(P<0.05或P<0.01)。心肌SOD活性、血清与心肌CGRP含量,M组较C组显著降低(P<0.05)。血清ALT(P<0.01)、LDH(P<0.01)、CK(P<0.05或P<0.01)含量,HM各组较M组均有所降低,组间无差异,且随剂量增加而递减。血清a-HBDH、ET、心肌ET含量,HM各组较M组均有所降低(P<0.05或P<0.01),且组间随剂量增加而递减;HM Ⅲ组较HM Ⅰ组显著降低(P<0.05)。心肌MDA含量,HM各组较M组均显著降低(P<0.05或P<0.01),且组间随剂量增加而递减;HM Ⅱ、HM Ⅲ低于HM Ⅰ组(P<0.01)。心肌SOD活性,HM各组较M组均有所升高(P<0.05或P<0.01),且组间随剂量增加而递增;HM Ⅱ、HM Ⅲ高于HM Ⅰ组(P<0.01)。血清与心肌CGRP含量,HM各组较M组显著升高(P<0.05或P<0.01),且各组组间随剂量增加而递增;HM Ⅲ组较HM Ⅰ组显著升高(P<0.05)。结论:不同剂量雨生红球藻可有效地清除机体长时间、大强度运动产生的过量自由基;提高机体免疫力,增强血管c NOS活性,保证ET和CGRP浓度的相对平衡,从而阻止心肌脂质过氧化作用和心肌损伤。其中以高剂量组效果为最好。 展开更多
关键词 雨生红球藻 心肌损伤标志物 运动性心肌损伤 内皮素 降钙素基因相关肽 大鼠
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柴芩承气汤对重症急性胰腺炎并发肝损伤大鼠的治疗作用及其机制 被引量：14
6
作者 党琳 张晓芹 +4 位作者 刘芳 许小凡 李芳芳 魏旭 张红 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期550-554,I0018,共6页
目的:研究柴芩承气汤(CQCQD)对重症急性胰腺炎(SAP)并发肝损伤大鼠的治疗作用及其机制。方法:72只SD大鼠随机分为3组(n=24):假手术(sham)组,重症急性胰腺炎模型(SAP)组和柴芩承气汤治疗(CQCQD)组。去氧胆酸钠胰胆管逆行注射建立SAP大鼠... 目的:研究柴芩承气汤(CQCQD)对重症急性胰腺炎(SAP)并发肝损伤大鼠的治疗作用及其机制。方法:72只SD大鼠随机分为3组(n=24):假手术(sham)组,重症急性胰腺炎模型(SAP)组和柴芩承气汤治疗(CQCQD)组。去氧胆酸钠胰胆管逆行注射建立SAP大鼠模型,CQCQD组给予柴芩承气汤治疗,于造模后1 h、5 h、10 h观察各组不同时间点的胰腺、肝脏组织病理学变化,检测血清中淀粉酶(AMS)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、白介素-6(IL-6)水平及胰腺、肝脏组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和IL-6 mRNA的表达情况。结果:与sham组比较,SAP组血清AMS、ALT、AST活性及IL-6水平明显升高,胰腺、肝脏组织MCP-1及IL-6 mRNA表达升高(P<0.05);与SAP组比较,CQCQD组血清AMS、ALT、AST活性及IL-6水平明显降低;胰腺和肝脏组织病理损伤减轻,胰腺、肝脏组织MCP-1及IL-6 mRNA表达明显减弱(P<0.05)。结论:MCP-1参与了SAP并发肝损伤的进展;柴芩承气汤能显著抑制胰腺、肝脏组织MCP-1的表达,减轻SAP时胰腺、肝脏组织病理损伤,对SAP并发肝损伤起到治疗作用。 展开更多
关键词 柴芩承气汤 重症急性胰腺炎 肝损伤 单核细胞趋化因子蛋白-1 大鼠
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Apelin对改善小鼠低氧性肺动脉高压的作用及与调节脂质代谢的关系 被引量：6
7
作者 陈然 江璞 +6 位作者 刘玲燕 高媛 杨欣欣 蔡卓长 范小芳 龚永生 毛孙忠 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期493-496,567,共5页
目的:探讨外源性apelin对小鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用及其机制。方法:SPF级雄性apo E基因敲除(apo E-KO)小鼠30只,随机均分为3组(n=10),即常氧组、低氧组和低氧+apelin组,apelin组小鼠每天于低氧前经腹腔注射apelin-13(10 nmol/(kg&... 目的:探讨外源性apelin对小鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用及其机制。方法:SPF级雄性apo E基因敲除(apo E-KO)小鼠30只,随机均分为3组(n=10),即常氧组、低氧组和低氧+apelin组,apelin组小鼠每天于低氧前经腹腔注射apelin-13(10 nmol/(kg·d)),其他组腹腔注射相同体积的生理盐水。采用常压连续低氧方法(9%~11%O_)2,23 h/d)复制慢性低氧性肺动脉高压模型。低氧3周后,采用右心导管法测定小鼠右心室压(RVSP)和右心室与左心室加室间隔重量比[RV/(LV+S)],Elisa法检测血浆中高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和总胆固醇(TC)的含量;real-time PCR法检测肝组织中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、清道夫受体B1(SR-B1)、低密度脂蛋白受体(LDLR)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)等基因的表达。Western blot法检测小鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白的表达。结果:(1)低氧组小鼠RVSP、RV/(LV+S)较常氧组分别高87%、85%(P均<0.05),apelin组小鼠RVSP、RV/(LV+S)较低氧组分别低39%、33%(P均<0.05)。(2)apelin组小鼠血浆中HDL-C含量、HDL/LDL比值分别较hypoxia组高21%、20%(P均<0.05),而血浆中TC、LDL-C含量两组间无显著差异(P均>0.05)。(3)apelin组小鼠肝组织中LDLR、SR-B1、ABCA1基因表达分别较低氧组上调241%、112%、69%(P均<0.05),而HMGCR基因表达下调45%(P<0.05)。(4)apelin组小鼠肺组织中PPARγ蛋白表达较低氧组上调47%。结论:Apelin可降低小鼠低氧性肺动脉高压,其机制与调节脂质代谢有关。 展开更多
关键词 APELIN 脂质代谢 肺动脉高压 低氧 小鼠
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miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及迁移能力的影响 被引量：7
8
作者 王红磊 肖奕 +1 位作者 武力 马大昌 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期508-513,共6页
目的:通过敲低微小RNA(microRNA,miRNA)-449a的方法研究miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力的影响。方法:采用miRNA芯片在乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A筛选具有表达差异的miRNA;化学合成法制备miR-449a的抑制剂(in... 目的:通过敲低微小RNA(microRNA,miRNA)-449a的方法研究miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力的影响。方法:采用miRNA芯片在乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A筛选具有表达差异的miRNA;化学合成法制备miR-449a的抑制剂(inhibitor),转染后经real-time PCR验证表达的变化;细胞增殖CCK-8实验对转染后细胞增殖能力进行检测;划痕实验检测细胞转移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭的改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)实验对MCF-7细胞增殖和迁移相关的β-catenin和E-cadherin蛋白进行检测;通过生物信息学软件预测miR-449a潜在靶基因为Notch 1,荧光素酶实验检测Notch 1是miR-449a的靶基因。结果:分别收集MCF-7和MCF-10A细胞,芯片结果显示miR-449a在MCF-7细胞的表达水平显著高于MCF-10A;本研究将细胞分为未处理组(Mock组),阴性对照组(negative control组,NC组)和处理组,通过收集不同组MCF-7细胞进行试验,CCK-8结果显示miR-449a下调后MCF-7细胞增殖能力显著降低;划痕实验结果显示miR-449a表达降低导致MCF-7细胞转移能力降低;transwell实验结果显示MCF-7细胞侵袭受到抑制;Western blot结果发现miR-449a敲低后β-catenin表达降低,E-cadherin表达增加;荧光素酶试验结果显示,miR-449a能够显著降低Notch 1-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.01)。结论:在乳腺癌细胞MCF-7中敲低miR-449a能够显著抑制癌细胞增殖和迁移,而这一变化可能通过降低Notch 1蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 miR-449a 人乳腺癌MCF-7细胞 NOTCH1 增殖 迁移
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慢性心衰大鼠心肌2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+通道及Junctophilin 2表达的改变 被引量：3
9
作者 樊红琨 罗天霞 +5 位作者 杨阳 王国庆 常欢 马小芳 乔鹏 章茜 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期523-525,共3页
目的:检测慢性心力衰竭模型大鼠心肌细胞膜2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+(SK2)通道和Junctophilin 2(JP2)蛋白表达的变化,为人类心力衰竭机制的研究和针对性的治疗提供新思路。方法:10只健康成年SD大鼠随机分为假手术组(5只)和手术组(5只)... 目的:检测慢性心力衰竭模型大鼠心肌细胞膜2型小电导-Ca^(2+)-激活K^+(SK2)通道和Junctophilin 2(JP2)蛋白表达的变化,为人类心力衰竭机制的研究和针对性的治疗提供新思路。方法:10只健康成年SD大鼠随机分为假手术组(5只)和手术组(5只),手术组采用腹主动脉缩窄的方法制备慢性心衰模型,假手术组大鼠分离腹主动脉后不进行缩窄术。每周观察各组大鼠心电图的变化,称量大鼠的体重,之后杀死大鼠取心脏和肺称重,计算心脏重量指数和肺系数;提取心脏组织蛋白,用Western blot的方法检测心肌SK2通道和JP2蛋白的表达水平。结果:术后第8周,手术组大鼠心电图ST段抬高或T波高耸;并且与假手术组相比,手术组大鼠心脏重量指数和肺系数均显著增加;心肌组织SK2通道的表达显著增加,JP2表达下降(P均<0.05)。结论:慢性心衰模型大鼠心肌JP2蛋白表达减小,SK2通道表达增加。 展开更多
关键词 慢性心衰 SK2通道 JP2 大鼠
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腹腔注射2-DG对大鼠下丘脑orexin-A神经元表达的影响 被引量：2
10
作者 赵琳 丁敏 +3 位作者 贾鲲鹏 王璐 刘伯锋 杨彦玲 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期500-502,共3页
目的:探讨腹腔注射2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)对大鼠下丘脑增食欲素-A(orexin-A)神经元的影响。方法:12只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(3只)、生理盐水对照组(3只)及腹腔注射2-DG组(6只),2-DG剂量400 mg/kg,动物存活2 h,抽取脑脊液后... 目的:探讨腹腔注射2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)对大鼠下丘脑增食欲素-A(orexin-A)神经元的影响。方法:12只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(3只)、生理盐水对照组(3只)及腹腔注射2-DG组(6只),2-DG剂量400 mg/kg,动物存活2 h,抽取脑脊液后灌注固定。实验结束后,采用免疫组织化学方法观察下丘脑orexin-A的表达、以及orexin-A与Fos的双标情况,采用ELISA方法检测orexin-A在脑脊液中的含量。结果:2-DG组的orexin-A阳性神经元数量和双标细胞阳性率(双标细胞占orexin-A阳性细胞的百分率)均高于对照组和生理盐水组(P<0.05);并且2-DG组动物脑脊液中的orexin-A含量也明显高于其他两组(P<0.05)。结论:腹腔注射2-DG可激活大鼠下丘脑orexin-A神经元,orexin-A可能参与其诱导的急性应激反应。 展开更多
关键词 2-脱氧-D-葡萄糖 大鼠 下丘脑 增食欲素-A
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敦煌疗风虚瘦弱方对大鼠慢性心衰的治疗作用及其机制 被引量：3
11
作者 吴国泰 杜丽东 +3 位作者 陈振鹤 蔺兴遥 李金田 李芳 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期558-563,共6页
目的:观察敦煌疗风虚瘦弱方(LXD)对慢性心衰大鼠的治疗作用及机制。方法:48只Wistar雄性大鼠随机分为6组(n=8):正常组、模型组、卡托普利组和LXD高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组大鼠尾静脉注射阿霉素(2.5 mg/kg),每周1次,连续6... 目的:观察敦煌疗风虚瘦弱方(LXD)对慢性心衰大鼠的治疗作用及机制。方法:48只Wistar雄性大鼠随机分为6组(n=8):正常组、模型组、卡托普利组和LXD高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组大鼠尾静脉注射阿霉素(2.5 mg/kg),每周1次,连续6周复制慢性心衰模型,末次注射阿霉素60 min后,卡托普利组灌胃卡托普利,LXD高、中、低剂量组分别以灌胃LXD水煎液80、40、20 g/kg(生药/体重),正常组和模型组灌胃等容量生理盐水,每天1次,连续6周,同时每周腹腔注射15 mg/kg异丙肾上腺素1次。记录各组大鼠的呼吸、皮毛颜色、活动、体重、力竭游泳时间、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax),左室内压最大下降速率(-dp/dtmax),检测血清白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,评价抗氧化活性和心室质量指数,光镜下观察心肌组织形态变化。结果:与正常组比较,模型大鼠体重增长减慢,力竭游泳时间明显缩短,心脏功能减弱,出现细胞因子激活、自由基损伤、心肌酶释放增多,HE染色显示心肌组织形态出现损伤,心肌纤维断裂等。与模型组比较,各剂量LXD对模型大鼠有不同程度的治疗作用,给药第42天,LXD各剂量组体重明显增长;LXD高、中剂量组力竭游泳时间明显延长(P<0.05),MAP、血清IL-6、TNF-α、MDA、LVMI和RVMI显著降低(P<0.05,P<0.01),LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax均显著升高(P<0.05,P<0.01),LXD高剂量组LVEDP显著降低(P<0.01),LXD中、低剂量组CK和AST显著降低(P<0.05,P<0.01);LXD各剂量组血清SOD升高。结论:敦煌疗风虚瘦弱方对阿霉素诱导的慢性心衰模型大鼠具有一定的治疗作用,作用机制与改善血流动力学,降低心肌组织损伤有关。 展开更多
关键词 敦煌疗风虚瘦弱方 慢性心力衰竭 阿霉素 心肌损伤 血流动力学 大鼠
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超敏C反应蛋白与阵发性房颤射频消融术后早期复发的关系 被引量：2
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作者 赵月香 单兆亮 +3 位作者 郭红阳 林琨 国建萍 王玉堂 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期526-530,共5页
目的:前瞻性研究超敏C反应蛋白(hsCRP)与阵发性心房颤动射频消融术后早期复发的关系。方法:接受CARTO指导房颤射频消融术的非瓣膜性阵发性房颤患者57例,平均年龄(53.32±9.98)岁,其中男42例,女15例。术前及术后5 d连续测定外周血hs... 目的:前瞻性研究超敏C反应蛋白(hsCRP)与阵发性心房颤动射频消融术后早期复发的关系。方法:接受CARTO指导房颤射频消融术的非瓣膜性阵发性房颤患者57例,平均年龄(53.32±9.98)岁,其中男42例,女15例。术前及术后5 d连续测定外周血hsCRP和高敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)水平,记录体表心电图,行24 h动态心电图检查。术后5 d内,32名患者(56.14%)为窦性心律,为未复发组,25名(43.86%)复发房颤,为复发组。结果:未复发组与复发组患者的hsCRP与hs-cTnT日均升高量显著正相关,P=0.044,r=0.268。而两组间基线临床特征、手术前后血浆hsCRP、hs-cTnT水平、血浆hsCRP及hs-cTnT的总升高量(峰值水平-术前水平)、日均升高量(总升高量/达到峰值所用天数)无明显统计学差异(P均>0.05)。结论:房颤射频消融术后hsCRP升高变化与心肌损伤程度相关,与早期复发无直接关系,尚不能作为预测房颤术后早期复发的高危因子。 展开更多
关键词 心房颤动 超敏C反应蛋白 肺静脉隔离术 早期复发
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miR-148a在5-aza诱导间充质干细胞心肌样分化中的调控作用及机制 被引量：6
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作者 蒋昌科 龚放 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期514-518,543,共6页
目的:探讨miR-148a在5-aza诱导人骨髓间充质(hMSCs)成心肌样分化中的表达及miR-148a对hMSCs体外成心肌样分化的生物学作用。方法:免疫荧光检测5-aza诱导hMSCs分化后心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平;qRT-PCR和Western blot分别检测mi... 目的:探讨miR-148a在5-aza诱导人骨髓间充质(hMSCs)成心肌样分化中的表达及miR-148a对hMSCs体外成心肌样分化的生物学作用。方法:免疫荧光检测5-aza诱导hMSCs分化后心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平;qRT-PCR和Western blot分别检测miR-148a和DNMT1在hMSCs成肌样分化中的表达水平。利用Lipofectamine TM 2000将miR-148a mimics和miR-148a inhibitor分别瞬时转染hMSCs,Western blot检测心肌细胞特异性标志物α-MHC的蛋白表达水平。利用生物信息学技术预测miR-148a的靶基因结合位点利用双荧光素酶报告基因系统鉴定其对靶基因3’UTR的结合序列。通过DNMT1 shRNA和miR-148a inhibitors共转到hMSCs中,研究miR-148a在hMSCs成心肌样分化中的调控作用。结果:hMSCs经5-aza诱导分化后,心肌细胞特性标志物α-MHC蛋白水平明显上调。miR-148a在hBMSCs成肌样分化中显著性增加(P<0.01),DNMT1表达水平显著降低。过表达miR-148a能提高hBMSCs中心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平,而抑制miR-148a则能降低其水平(P<0.01)。DNMT1沉默可以阻断miR-148a对hMSCs的诱导成肌样分化作用。结论:miR-148a在hMCCs成肌样分化中表达上调,通过靶定和调控DNMT1基因的表达,并对hMSCs心肌向分化具有正向调控作用。 展开更多
关键词 miR-148a 骨髓间充质 心肌样分化 DNMT1
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MAPKs抑制剂对大鼠肝细胞GSH代谢相关酶的影响 被引量：1
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作者 高蔚娜 蒲玲玲 +5 位作者 韦京豫 辛中豪 王亚雯 石塔拉 李天 郭长江 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期497-500,共4页
目的:观察丝裂原活化的蛋白激酶(MAPKs)抑制剂对大鼠肝细胞谷胱甘肽(GSH)代谢的影响,确定哪条途径与GSH代谢相关。方法:体外培养BRL大鼠肝细胞,以c-Jun NH2-末端激酶(JNK)途径抑制剂SP600125、p38途径抑制剂SB203580、细胞外信号调节激... 目的:观察丝裂原活化的蛋白激酶(MAPKs)抑制剂对大鼠肝细胞谷胱甘肽(GSH)代谢的影响,确定哪条途径与GSH代谢相关。方法:体外培养BRL大鼠肝细胞,以c-Jun NH2-末端激酶(JNK)途径抑制剂SP600125、p38途径抑制剂SB203580、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径抑制剂PD98659处理24 h,采用MTT法测定细胞活力,高效液相色谱法测定细胞内GSH含量,Luminex法测定JNK和磷酸化JNK(p-JNK)的蛋白表达,采用试剂盒测定GSH代谢酶活性。结果:SP600125浓度>5μmol/L,SB203580浓度>20μmol/L,PD98659浓度>40μmol/L时,细胞活力受抑制;SP600125能显著减少大鼠肝细胞内还原型GSH的含量,SB203580和PD98659作用不明显;SP600125显著减少磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达,显著增强谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。结论:JNK MAPK途径参与了大鼠肝细胞GSH的代谢。 展开更多
关键词 MAPKs抑制剂 谷胱甘肽 代谢 BRL细胞株
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遗传学易位式教学改革尝试 被引量：2
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作者 张红梅 蔡宝宏 +2 位作者 李明 陈静 赵杰 《河北联合大学学报（医学版）》 2012年第5期747-748,共2页
主体性教育是指在素质教育过程中,尊重学生的主体地位,培养学生的主体意识和主体精神,在教师的引导下,最大限度地发挥学生的主体性,从而促进学生个性的全面发展,促进学生潜能的充分发挥。随着课程体系的逐渐改革,《遗传学》课程学时少... 主体性教育是指在素质教育过程中,尊重学生的主体地位,培养学生的主体意识和主体精神,在教师的引导下,最大限度地发挥学生的主体性,从而促进学生个性的全面发展,促进学生潜能的充分发挥。随着课程体系的逐渐改革,《遗传学》课程学时少（45～54学时）,但内容抽象、深奥,使教师和学生都感到压力大。为了更好地完成教学内容,变被动学习为主动学习, 展开更多
关键词 遗传学 易位 教学
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NaHS对ATP诱导大鼠小胶质细胞P2X受体表达的影响
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作者 马洁 郭康 +5 位作者 吕林亚 李新娟 王璐 魏林郁 赵红岗 李东亮 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期519-523,共5页
目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常规培养,不... 目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理。(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理。(3)NaHS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中。(4)KN-62(P2X_7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,荧光染料YO-PRO-1检测各组相对荧光单位(RFU)反映膜的通透性,Western blot检测各组P2X_7受体表达水平。结果:(1)与对照组相比,不同浓度的ATP(1、3、5、10 mmol/L)作用3 h均可明显降低大鼠小胶质细胞活力,Na HS(200μmol/L)干预后大鼠小胶质细胞活力较ATP组明显增加(P<0.01),但Na HS达400μmol/L浓度时,其保护作用未进一步增加。(2)随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P<0.01)。(3)ATP(3 mmol/L)能上调P2X_7受体蛋白表达水平,而Na HS(200μmol/L)预孵育则可明显抑制ATP引起的P2X_7受体蛋白表达的上调(P<0.01)。结论:Na HS可减少ATP致伤的大鼠小胶质细胞的P2X_7受体表达、降低通透性、增加细胞活力,提示调控P2X_7受体的表达和功能可能是H_2S神经保护作用的重要环节。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 嘌呤能P2X7受体 大鼠小胶质细胞 NaHS
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致心律失常性右室心肌病患者的诱导性多能干细胞系的建立
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作者 蒋彬 王国卿 +3 位作者 李红霞 蒋文平 陈涛 姜岩 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期503-507,共5页
目的:建立致心律失常性右室心肌病(ARVC)患者特异性的诱导性多能干细胞(iPSCs),为研究ARVC发病机制提供研究模型。方法:培养来源于ARVC患者皮肤成纤维细胞,并进行突变位点测序鉴定。通过仙台病毒转导入外源性多能转录因子,将ARVC患者皮... 目的:建立致心律失常性右室心肌病(ARVC)患者特异性的诱导性多能干细胞(iPSCs),为研究ARVC发病机制提供研究模型。方法:培养来源于ARVC患者皮肤成纤维细胞,并进行突变位点测序鉴定。通过仙台病毒转导入外源性多能转录因子,将ARVC患者皮肤细胞诱导为iPSCs,结合免疫荧光法,实时荧光定量PCR,以及体内外三胚层形成实验对iPS细胞全能型进行鉴定。通过调控Wnt信号通路诱导iPS细胞定向分化为心肌细胞。结果:ARVC患者来源的iPSCs显示碱性磷酸酶阳性,多能性相关基因高表达,胚胎干细胞标志物Oct4,SSEA4,TRA-1-81阳性。体外悬浮培养形成的拟胚体以及体内畸胎瘤形成实验均显示ARVC-iPSCs具有向3个胚层分化能力。经过体外心肌定向,ARVC-iPSC可诱导产生自主节律性搏动细胞团,免疫荧光显示cTnT阳性。结论:本研究使用仙台病毒,建立了无插入型ARVC患者特异的诱导性多能干细胞系,该细胞系具有多能分化特性,并可定向分化为心肌细胞,为研究ARVC的致病因素和药物筛选提供宝贵的实验模型。 展开更多
关键词 致心律失常性右室心肌病 诱导性多能干细胞 心肌定向分化
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动态超高压微射流对卵清蛋白微观结构的影响 被引量：17
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作者 涂宗财 王辉 +3 位作者 刘光宪 陈钢 豆玉新 张雪春 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期495-498,共4页
采用圆二色谱(CD)、X射线衍射(XRD)、ANS荧光探针和紫外(UV)光谱研究了动态超高压微射流对卵清蛋白微观结构的影响。结果表明:卵清蛋白的微观结构的变化与处理压力有关,CD显示不同压力处理的卵清蛋白二级结构中的α-螺旋,β-折叠,β-转... 采用圆二色谱(CD)、X射线衍射(XRD)、ANS荧光探针和紫外(UV)光谱研究了动态超高压微射流对卵清蛋白微观结构的影响。结果表明:卵清蛋白的微观结构的变化与处理压力有关,CD显示不同压力处理的卵清蛋白二级结构中的α-螺旋,β-折叠,β-转角和无规卷曲之间发生相互转化,二级结构的有序性提高;X射线衍射图谱直观显示不同压力处理的卵清蛋白晶体结构增加,160 MPa处理下结晶区最大,说明蛋白结构的有序性提高,与CD分析结果相似;ANS荧光探针光谱显示卵清蛋白的表面疏水性随着处理压力的增大而提高,120 MPa处理下达到最大;紫外光谱显示随着处理压力的增大,卵清蛋白最大紫外吸光值下降,卵清蛋白分子表面的具有紫外吸收的芳香氨基酸残基被包埋于分子内部,卵清蛋白的三维结构发生改变。 展开更多
关键词 动态超高压微射流 卵清蛋白 圆二色谱 X射线衍射 ANS荧光探针 紫外光谱
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稀土改性SAPO-34分子筛的制备及其在CO_2加氢合成低碳烯烃中的催化性能 被引量：16
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作者 刘蓉 王鹏飞 +2 位作者 查飞 田海锋 常玥 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第4期413-418,424,共7页
采用水热合成法分别制备了氧化钇、氧化镧和氧化铈改性SAPO-34分子筛(M-SAPO-34,M=Y、La、Ce),用XRD、SEM、FTIR、BET、NH3-TPD和TG进行了表征,结果表明,稀土金属成功地引入到了分子筛骨架中,改性后的催化剂比表面积增大,粒径减小,孔径... 采用水热合成法分别制备了氧化钇、氧化镧和氧化铈改性SAPO-34分子筛(M-SAPO-34,M=Y、La、Ce),用XRD、SEM、FTIR、BET、NH3-TPD和TG进行了表征,结果表明,稀土金属成功地引入到了分子筛骨架中,改性后的催化剂比表面积增大,粒径减小,孔径和酸性强度均有所改变。将CuO-ZnO-ZrO_2与稀土改性的SAPO-34分子筛按质量比1∶1机械混合制备了复合催化剂CuO-ZnO-ZrO_2/M-SAPO-34,用于催化二氧化碳加氢合成低碳烯烃,在反应温度为400℃、压强为3.0 MPa、碳氢摩尔比为1∶3、空速(SV)为1 800 m L/(gcat·h)、复合催化剂用量为1.0 g时,CuO-ZnO-ZrO_2/La-SAPO-34显示了良好的催化活性,二氧化碳的单程转化率为49.7%,低碳烯烃的选择性和产率分别为54.5%和27.1%。 展开更多
关键词 稀土改性SAPO-34 CuO-ZnO-ZrO_2 低碳烯烃 二氧化碳加氢 催化技术
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半闭弯尾姬蜂与菜蛾盘绒茧蜂寄生菜蛾幼虫时的种间竞争 被引量：14
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作者 施祖华 李庆宝 +1 位作者 李欣 刘树生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期342-348,共7页
在室内 2 5℃下 ,以菜蛾 3龄初幼虫作寄主 ,研究了菜蛾盘绒茧蜂Cotesiaplutellae和半闭弯尾姬蜂Diadegmasemiclausum的种间竞争。当寄主供 2种蜂同时产卵寄生时 ,2种蜂各自的寄生率与其单独寄生时无显著差异 ,合计寄生率比一种蜂单独存... 在室内 2 5℃下 ,以菜蛾 3龄初幼虫作寄主 ,研究了菜蛾盘绒茧蜂Cotesiaplutellae和半闭弯尾姬蜂Diadegmasemiclausum的种间竞争。当寄主供 2种蜂同时产卵寄生时 ,2种蜂各自的寄生率与其单独寄生时无显著差异 ,合计寄生率比一种蜂单独存在时有所提高 ,但差异不显著。 2种蜂均能产卵寄生已被另一种蜂寄生了的寄主幼虫。当寄主被 2种蜂寄生的间隔时间很短(少于 10h)时 ,所育出的蜂绝大部分 (80 %以上 )为绒茧蜂 ;当寄主先被绒茧蜂寄生 ,并饲养 2天以上再供弯尾姬蜂寄生时 ,所育出的全为绒茧蜂 ;当寄主先被弯尾姬蜂寄生 ,并饲养 2天以上再供绒茧蜂寄生时 ,寄主幼虫绝大部分不能存活 ,只有少部分能育出寄生蜂 ,且多为弯尾姬蜂。当 2种蜂的幼虫存在于同一寄主体内时 ,2种蜂的发育均受到另一种蜂的抑制 ;绒茧蜂 1龄幼虫具有物理攻击能力 ,能将弯尾姬蜂卵或幼虫致死。这些结果表明 ,菜蛾盘绒茧蜂与半闭弯尾姬蜂在同一寄主中发育时 ,前者具有明显的竞争优势。 展开更多
关键词 菜蛾 半闭弯尾姬蜂 菜蛾盘绒茧蜂 寄生 种间竞争
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