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用于人二倍体细胞狂犬病疫苗研究的PM1503-02毒株全基因组及结构蛋白序列分析
1
作者 左静 张伟业 +3 位作者 佟巍 崔莉 董浩欢 董进秋 《中国生物制品学杂志》 2025年第11期1281-1291,1298,共12页
目的从分子层面分析PM1503-02毒株在人二倍体细胞狂犬病疫苗(human diploid cell rabies vaccine,HDCV)生产研究中的应用。方法利用同源性对比及系统发育树等方法对PM1503-02与18株国内外疫苗株全基因组序列和氨基酸序列进行对比分析,... 目的从分子层面分析PM1503-02毒株在人二倍体细胞狂犬病疫苗(human diploid cell rabies vaccine,HDCV)生产研究中的应用。方法利用同源性对比及系统发育树等方法对PM1503-02与18株国内外疫苗株全基因组序列和氨基酸序列进行对比分析,同时对PM1503-02与18株国内外疫苗株糖蛋白(glycoprotein,G)的抗原结合位点和糖基化位点进行对比分析。与56株国内街毒株构建系统发育树,分析PM1503-02与国内街毒株的亲缘关系。并确定PM1503-02毒株不同传代代次的全基因组序列遗传稳定性。结果PM1503-02毒株全基因组序列与PM1503和CVS-11株同源性最高,达99%以上;与HEP-Flury、Flury LEP和Flury-LEP-C株次之,达95%以上。PM1503-02毒株G蛋白膜外域的抗原位点突变不大,仅在抗原位点Ⅱ第40位氨基酸突变为谷氨酸(E);糖基化位点分别位于第37、247和319位氨基酸。与56株国内街毒株构建的系统发育树结果显示,PM1503-02与国内街毒株具有较近的亲缘关系。PM1503-02毒株在HDC中传代至第63、64、65、66和70代,全基因组序列同源性66和70代出现了单点突变,但均为同义突变,不影响蛋白结构。结论本研究从分子层面为使用PM1503-02毒株研制更为有效的HDCV提供了支持,其在国内具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 狂犬病疫苗 全基因组序列 糖蛋白 同源性 系统发育树 遗传稳定性
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p53腺病毒重组体转染对p53缺失肿瘤细胞辐射敏感性的影响 被引量：1
2
作者 刘兵 张红 +5 位作者 罗晓红 谢漪 郝冀芳 段昕 周清明 周光明 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期402-406,共5页
目的观察p53腺病毒重组体(AdCMV-p53)转染对p53缺失肿瘤细胞辐射敏感性的影响。方法用腺病毒重组体(AdCMV-p53/GFP)转染经0、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0Gyγ射线辐射的H1299(nullp53)和PC-3(nullp53)细胞,用流式细胞分析法检测外源性p53... 目的观察p53腺病毒重组体(AdCMV-p53)转染对p53缺失肿瘤细胞辐射敏感性的影响。方法用腺病毒重组体(AdCMV-p53/GFP)转染经0、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0Gyγ射线辐射的H1299(nullp53)和PC-3(nullp53)细胞,用流式细胞分析法检测外源性p53表达,用克隆形成法检测肿瘤细胞增殖能力。结果辐射联合AdCMV-p53转染组p53阳性细胞所占比例均明显高于单纯辐射组、单纯AdCMV-p53转染组和辐射联合AdCMV-GFP转染组同种细胞p53阳性率(P<0.05);AdCMV-p53转染不仅明显提高肿瘤细胞辐射敏感性,而且与肿瘤细胞组织来源有关。结论p53腺病毒重组体转染对p53基因缺失肿瘤细胞低剂量辐射敏感性的增强作用与肿瘤细胞来源的组织器官和细胞类型有关。 展开更多
关键词 P53基因 辐射 腺病毒载体 肿瘤 辐射敏感性
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穿膜肽mCLOCK’s DNA-BIND作为药物载体的生物安全性初步评价
3
作者 甘露 薛建新 +3 位作者 刘延友 汪宇辉 鲁芳 王正荣 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期106-109,共4页
目的研究一种新的来源于节律蛋白mCLOCK's DNA结合域的穿膜肽mCLOCK's DNA-BIND(CDB)作为药物携带载体的生物安全性。方法化学合成穿膜肽CDB。体外采用Phorbol12-Myristate13-acetate(PMA)诱导NIH3T3细胞的近日节律。于诱导后... 目的研究一种新的来源于节律蛋白mCLOCK's DNA结合域的穿膜肽mCLOCK's DNA-BIND(CDB)作为药物携带载体的生物安全性。方法化学合成穿膜肽CDB。体外采用Phorbol12-Myristate13-acetate(PMA)诱导NIH3T3细胞的近日节律。于诱导后不同时间点,CDB与小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞共孵育,RT-PCR检测其对近日节律核心分子mPeriod1(mPer1)基因表达的影响。此外,培养的NIH3T3直接与CDB共孵育12h和24h后,MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的作用。结果CDB没有明显影响PMA诱导的mPer1节律基因表达。此外,CDB不干扰NIH3T3细胞增殖及生长周期,亦无明显的诱导凋亡作用。结论CDB对细胞近日节律、细胞增殖、生长周期及细胞凋亡均无明显毒副效应,可望作为一种安全有效药物载体,并具有广泛的临床应用前景。 展开更多
关键词 近日节律 穿膜肽 CLOCK基因 增殖 细胞周期 凋亡
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生态文明建设中转基因科普体系的探索 被引量：1
4
作者 韩立强 郭豫杰 +1 位作者 王江 杨国宇 《现代牧业》 2018年第2期22-25,共4页
生态文明建设的目标之一是实现人与自然和谐相处,在开展生态文明建设的大背景下,阐明转基因技术与生态文明间的相互关系,开展转基因技术的科普宣传已成为当务之急。本文就生态文明建设与转基因技术及科普宣传间的关系进行探讨,分析了我... 生态文明建设的目标之一是实现人与自然和谐相处,在开展生态文明建设的大背景下,阐明转基因技术与生态文明间的相互关系,开展转基因技术的科普宣传已成为当务之急。本文就生态文明建设与转基因技术及科普宣传间的关系进行探讨,分析了我国科普宣传的现状,并从顶层设计方面探讨转基因科普体系建立的内容和策略。 展开更多
关键词 生态文明 转基因 科普体系
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基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析
5
作者 刘洪博 林秀琴 +6 位作者 刘新龙 陆鑫 毛钧 徐超华 马丽 郭跃祥 蔡青 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2201-2209,共9页
该研究以甘蔗属热带种、中国种、印度种和杂交品种为参照,对‘德阳大叶子’进行表型、核型和SSR分子标记分析,以明确德阳大叶子的属种关系,为种间杂交利用奠定基础。结果表明:(1)表型性状和SSR标记聚类结果都能将‘德阳大叶子’、热带... 该研究以甘蔗属热带种、中国种、印度种和杂交品种为参照,对‘德阳大叶子’进行表型、核型和SSR分子标记分析,以明确德阳大叶子的属种关系,为种间杂交利用奠定基础。结果表明:(1)表型性状和SSR标记聚类结果都能将‘德阳大叶子’、热带种、中国种和杂交品种明显分成3个类群;其中‘德阳大叶子’与热带种、中国种、印度种和杂交品种的表型平均相似性系数分别为0.51、0.71、0.55和0.31,表型聚类与中国种最近。(2)‘德阳大叶子’的核型分析显示,体细胞染色体数为2n=116,核型公式为:2n=116=4M+104m+8sm,核型属于2B型,符合中国种染色体数范围。(3)利用13对引物进行SSR标记的UPGMA聚类结果表明,‘德阳大叶子’与热带种、中国种、印度种和杂交品种间的平均相似性系数分别为0.70、0.69、0.68和0.69,种间相似性系数相差不明显。研究认为,‘德阳大叶子’属于中国种或是中国种杂交后代的低世代材料。 展开更多
关键词 甘蔗 '德阳大叶子’ 属种鉴定
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ISSR和RAPD-PCR技术对东北地区主推玉米品种的鉴别 被引量：9
6
作者 李尚禹 王春艳 +1 位作者 张朝燕 李校堃 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期509-512,共4页
运用现代分子生物学简单重复区间序列扩增多态性(ISSR)和随机扩增片段多态性DNA(RAPD)两种分子标记技术,对吉林省主推6个玉米杂交种及其父本、母本共计18份基因图谱进行鉴别.以ISSR为主要检测方法、RAPD为验证方法,分别从30条ISSR引物... 运用现代分子生物学简单重复区间序列扩增多态性(ISSR)和随机扩增片段多态性DNA(RAPD)两种分子标记技术,对吉林省主推6个玉米杂交种及其父本、母本共计18份基因图谱进行鉴别.以ISSR为主要检测方法、RAPD为验证方法,分别从30条ISSR引物中选出4条、从30条RAPD引物中筛选出2条扩增效果明显、特异性高的引物.结果表明,运用ISSR和RAPD-PCR技术提高了玉米品种鉴定和纯度鉴定的准确性. 展开更多
关键词 玉米 ISSR RAPD 品种鉴别
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液相外延技术发展现状 被引量：5
7
作者 赵绪然 裴广庆 +2 位作者 杨秋红 夏长泰 徐军 《人工晶体学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1307-1312,共6页
本文介绍了液相外延技术在制备硅材料、碲镉汞材料、石榴石型单晶材料、III-V族半导体材料和其他一些无机材料方面的应用,简述了液相外延技术近十多年来在系统改善、工艺改进和相关理论研究方面的成果,并指出了液相外延技术相对于其他... 本文介绍了液相外延技术在制备硅材料、碲镉汞材料、石榴石型单晶材料、III-V族半导体材料和其他一些无机材料方面的应用,简述了液相外延技术近十多年来在系统改善、工艺改进和相关理论研究方面的成果,并指出了液相外延技术相对于其他外延技术的优势及其发展需要克服的困难。 展开更多
关键词 液相外延 系统 研究进展
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防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测 被引量：1
8
作者 马生秀 邓璐霞 +8 位作者 罗林 彭媛媛 路会侠 张敏 熊文碧 冯云 吴琦 王伯瑶 黄宁 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期151-153,共3页
目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体p... 目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用。结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础。 展开更多
关键词 防御素 HNP-3 成熟肽 酵母双杂交
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HLA高分辨分型模棱两可组合研究和问题解决的进展 被引量：1
9
作者 李恒聪 吴国光 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1345-1349,共5页
人类白细胞抗原(HLA)是迄今所知人类最复杂的免疫遗传多态性系统,准确的HLA分型对于临床造血干细胞移植、HLA与疾病相关性等研究有着重要的意义。聚合酶链反应-直接测序分型法(PCR-SBT)因达到高分辨水平和能鉴定新等位基因而被广泛应用,... 人类白细胞抗原(HLA)是迄今所知人类最复杂的免疫遗传多态性系统,准确的HLA分型对于临床造血干细胞移植、HLA与疾病相关性等研究有着重要的意义。聚合酶链反应-直接测序分型法(PCR-SBT)因达到高分辨水平和能鉴定新等位基因而被广泛应用,但PCR-SBT法的一个大问题是该法在分型判断时存在较高比例的模棱两可组合的结果,对HLA分型数据的精确判断带来了很大程度的困扰。本文对HLA高分辨基因分型模棱两可组合存在的原因和问题解决方法的研究进展进行了综述,并对研究前景作了简单的展望。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 高分辨分型 模棱两可
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1株内切葡聚糖酶基因Cel042的克隆与表达
10
作者 沈晓静 赵健 +2 位作者 王海娟 赵明敏 闹干朝鲁 《安徽农业科学》 2026年第2期88-92,共5页
从玉米秸秆还田土壤中分离1株具有高效降解玉米秸秆功能的菌株,即嗜麦芽寡养单胞菌CHB1。通过PCR扩增,成功地克隆出1株内切葡聚糖酶基因Cel042,并将其与大肠杆菌DH5α相连,从而证实了这株菌株中是否存在这种酶基因。将该纤维素酶基因连... 从玉米秸秆还田土壤中分离1株具有高效降解玉米秸秆功能的菌株,即嗜麦芽寡养单胞菌CHB1。通过PCR扩增,成功地克隆出1株内切葡聚糖酶基因Cel042,并将其与大肠杆菌DH5α相连,从而证实了这株菌株中是否存在这种酶基因。将该纤维素酶基因连接到表达载体pPIC9中,成功构建了重组表达质粒载体pPIC9-Cel042。通过在毕赤酵母GS115中表达,并在甲醇诱导下进一步明确该菌株中是否含有内切葡聚糖酶基因,发酵上清液经过刚果红检测,发现纤维素酶基因过表达菌株活性较强。经过纤维素酶过表达菌株GPC1、GPC2、GPC3、GPC4、GPC5和GPC6的处理,玉米秸秆的降解效果显著,其中GPC1的降解率最高,达到42.4%,而GPC6的降解率则更高,达到了42.5%。 展开更多
关键词 内切葡聚糖酶 基因克隆 基因表达 秸秆降解
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