目的建立a型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type a,Hia）结合物游离多糖含量测定方法,并对方法进行验证。方法利用脱氧胆酸钠（Na DC）盐酸法和蒽酮硫酸法测定Hia结合物的游离多糖含量。通过检测Na DC盐酸法沉淀破伤风类毒素（t...目的建立a型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type a,Hia）结合物游离多糖含量测定方法,并对方法进行验证。方法利用脱氧胆酸钠（Na DC）盐酸法和蒽酮硫酸法测定Hia结合物的游离多糖含量。通过检测Na DC盐酸法沉淀破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）、TT ADH衍生物（ADH derivative of TT,TTAH）及TT琥珀酰化衍生物（succinic anhydride derivative of TT,TTSA）的最大能力以及沉淀多糖降解物（depolymerized polysaccharide,de-PS）或降解多糖ADH衍生物（ADH derivative of de-PS,de-PSAH）与相应载体蛋白质混合物的最佳离子强度,并利用最佳离子强度检测混合物中多糖与蛋白质质量的最小比例,以确定Hia结合物游离多糖含量的测定条件。通过添加回收试验验证方法的准确度,多次测定结合物的游离多糖含量验证方法的精密度。结果 Na DC盐酸法对蒽酮硫酸法测定多糖含量几乎无影响;Na DC盐酸法沉淀TT、TTAH和TTSA的最大能力分别为402.8、352.5和691.0μg/ml;在0.6 mol/L NaCl的离子强度下,Na DC盐酸法沉淀多糖与蛋白质混合物,当de-PS与TT或TTAH的质量比≥1∶2、dePSAH与TT的质量比≥1∶4、de-PSAH与TTSA的质量比≥1∶5时,多糖回收率均在95%以上。向结合物添加6、12、35和56μg/ml的de-PS或de-PS_（AH）时,多糖回收率均在80%-100%之间;游离多糖含量检测结果的CV值均在10%以内。结论建立的方法适用于不同结合方法制备的Hia结合物游离多糖含量的测定。展开更多
重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)是糖蛋白类药物,临床上主要用于治疗肾性贫血。糖基化是影响促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)药物质量、安全性和活性的关键因素。近年来,EPO药物的原始专利即将过...重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)是糖蛋白类药物,临床上主要用于治疗肾性贫血。糖基化是影响促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)药物质量、安全性和活性的关键因素。近年来,EPO药物的原始专利即将过期,生物仿制药(biosimilar)进入一个高速发展期。因此,亟需发展可有效评价其糖基化修饰形态的方法。本文对EPO药物的发展、糖基化与活性的关系及糖基化分析方法的最新研究进展作一综述。展开更多
文摘目的建立a型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type a,Hia）结合物游离多糖含量测定方法,并对方法进行验证。方法利用脱氧胆酸钠（Na DC）盐酸法和蒽酮硫酸法测定Hia结合物的游离多糖含量。通过检测Na DC盐酸法沉淀破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）、TT ADH衍生物（ADH derivative of TT,TTAH）及TT琥珀酰化衍生物（succinic anhydride derivative of TT,TTSA）的最大能力以及沉淀多糖降解物（depolymerized polysaccharide,de-PS）或降解多糖ADH衍生物（ADH derivative of de-PS,de-PSAH）与相应载体蛋白质混合物的最佳离子强度,并利用最佳离子强度检测混合物中多糖与蛋白质质量的最小比例,以确定Hia结合物游离多糖含量的测定条件。通过添加回收试验验证方法的准确度,多次测定结合物的游离多糖含量验证方法的精密度。结果 Na DC盐酸法对蒽酮硫酸法测定多糖含量几乎无影响;Na DC盐酸法沉淀TT、TTAH和TTSA的最大能力分别为402.8、352.5和691.0μg/ml;在0.6 mol/L NaCl的离子强度下,Na DC盐酸法沉淀多糖与蛋白质混合物,当de-PS与TT或TTAH的质量比≥1∶2、dePSAH与TT的质量比≥1∶4、de-PSAH与TTSA的质量比≥1∶5时,多糖回收率均在95%以上。向结合物添加6、12、35和56μg/ml的de-PS或de-PS_（AH）时,多糖回收率均在80%-100%之间;游离多糖含量检测结果的CV值均在10%以内。结论建立的方法适用于不同结合方法制备的Hia结合物游离多糖含量的测定。
文摘重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)是糖蛋白类药物,临床上主要用于治疗肾性贫血。糖基化是影响促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)药物质量、安全性和活性的关键因素。近年来,EPO药物的原始专利即将过期,生物仿制药(biosimilar)进入一个高速发展期。因此,亟需发展可有效评价其糖基化修饰形态的方法。本文对EPO药物的发展、糖基化与活性的关系及糖基化分析方法的最新研究进展作一综述。
文摘应用胶体滴定技术建立了测定丙烯酰胺（AM）/2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸钠（AMPSNa）共聚物中耐温抗盐单体AMPSNa含量的方法。探讨了p H值、标准聚阴离子试剂PAMPSNa特性粘数对测定结果的影响,并将PAMPSNa与传统阴离子试剂PVSK进行了比较。结果表明,p H值在3-10范围内,胶体滴定值与共聚物溶液浓度呈良好的线性关系,可计算出共聚物中AMPSNa的含量。PAMPSNa特性粘数在100-600 m L/g范围内,可以准确测定AMPSNa的含量。PAMPSNa与PVSK这两种试剂测试结果基本一致,与元素分析进行比较的结果表明,胶体滴定法与元素分析法测试结果非常接近。
