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可降解磺胺嘧啶的重组细菌漆酶诱导表达和酶学性质研究 被引量:1
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作者 王婧涵 庞立 +4 位作者 田红 詹依雅 易永真 夏菠 刘霞 《食品安全质量检测学报》 2025年第6期232-238,共7页
目的 探究重组细菌漆酶诱导表达水平及酶学特性,提高细菌漆酶对磺胺嘧啶抗生素的降解效率。方法 本研究通过单因素实验探讨了诱导温度、诱导时间以及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度对酶表达... 目的 探究重组细菌漆酶诱导表达水平及酶学特性,提高细菌漆酶对磺胺嘧啶抗生素的降解效率。方法 本研究通过单因素实验探讨了诱导温度、诱导时间以及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度对酶表达量的影响。并通过p H和温度两方面对重组细菌漆酶的酶学性质进行探究。结果 24 h重组细菌漆酶对磺胺嘧啶的降解率达50%。重组细菌漆酶在大肠杆菌BL21 (DE3)中的最适表达条件为:诱导温度16℃,诱导时间16 h,IPTG浓度0.2 mmol/L。最适p H为3,在p H为7时,稳定性最好,6 h酶活达到150%;最适温度为80℃,在温度为70℃时热稳定性最好,1 h提高到120%,半衰期约为6 h。结论 本研究为细菌漆酶在磺胺嘧啶抗生素降解中的应用提供了实验基础,并为未来研究其在工业中的潜在应用奠定了理论依据。 展开更多
关键词 细菌漆酶 磺胺嘧啶 抗生素降解 异源表达 酶学性质 蛋白浓度
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有机溶剂体系中刺激响应性RNA切割型脱氧核酶的工程化
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作者 贺荣荣 游昕 +2 位作者 郑星 杨梦晗 常天俊 《高等学校化学学报》 北大核心 2025年第7期52-60,共9页
引入新的识别元件对脱氧核酶(DNAzyme)进行工程化是拓展其应用范围的重要途径,但这依赖于对其可工程化位点的系统表征.为此,本文对前期发现的需要有机溶剂的RNA切割型脱氧核酶(RNA-cleaving DNAzyme,RCD,名为E3)进行工程化改造,在其不... 引入新的识别元件对脱氧核酶(DNAzyme)进行工程化是拓展其应用范围的重要途径,但这依赖于对其可工程化位点的系统表征.为此,本文对前期发现的需要有机溶剂的RNA切割型脱氧核酶(RNA-cleaving DNAzyme,RCD,名为E3)进行工程化改造,在其不同区域发现了多个可工程化位点,并构建了多种刺激响应性RCD.首先,在可变区域将E3劈成两半,通过设计“DNA拉链”构建多组分酶(Multiple component DNAzyme,MNAzyme)的策略,在可变区鉴别了6个可用于工程化的位点;接着在可变区成功设计了由单个外加的DNA序列激活的MNAzyme系统;进一步在E3的底物结合臂发现了另一个可用于设计MNAzyme的区域,并设计了一系列需2个DNA引发剂同时存在才能激活的三组分酶系统.所有MNAzyme系统在35%(体积分数)DMSO和30%(体积分数)乙醇溶液中都有极高的选择性和极低的背景值,多种MNAzyme和引发剂共存体系中的反应信号接近单个引发剂产生信号的加和.本研究为在含有机溶剂的应用场景中构建响应性RCD探针提供了平台. 展开更多
关键词 脱氧核酶 刺激响应性 有机溶剂 分子工程 多组分酶
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嗜热酯酶对槲皮素的高度区域选择性酰基化反应研究
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作者 马雨婷 王子川 +3 位作者 杨梓博 路佳荫 于香雨 姜丽艳 《合成化学》 2025年第2期119-125,共7页
槲皮素是一种具有显著药理作用和治疗潜力的类黄酮,然而因其较差的生物利用度而使其开发应用受到严重阻碍。脂肪酶能够催化类黄酮发生酰基化反应来改善亲脂性,提高生物活性。采用源自古生菌Archaeoglo-bus fulgidus嗜热酯酶(AFEST)突变... 槲皮素是一种具有显著药理作用和治疗潜力的类黄酮,然而因其较差的生物利用度而使其开发应用受到严重阻碍。脂肪酶能够催化类黄酮发生酰基化反应来改善亲脂性,提高生物活性。采用源自古生菌Archaeoglo-bus fulgidus嗜热酯酶(AFEST)突变体AF-S48I对槲皮素进行酰基化研究,系统考察了在非水相有机介质中嗜热酯酶AF-S48I催化槲皮素酰基化反应的酶活及区域选择性的影响因素。结果表明:酰基供体、反应溶剂、水活度及反应温度对槲皮素的酰基化反应具有不同程度的影响,在槲皮素(0.1 mmol)、乙酸乙烯酯(3.5 mmol)、乙腈20 mL、水活度0.60的最佳催化条件下,60℃反应8 h,AF-S48I酶活性最高(155±3μmol·g^(–1)·h^(–1)),产物转化率可达95%±2%,而且对槲皮素的C—4'位置具有高度区域选择性(>98%)。 展开更多
关键词 槲皮素 嗜热酯酶 高度区域选择性 酰基化反应 酶活
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Rational Construction of Lignin-based FeN/C Nanozyme for Colorimetric Detection of Chlorpyrifos
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作者 CHEN Yu-xue WANG Xue-chun +5 位作者 SUN Qi-jun XUE Ying CAO Shuang CHEN Li-gang NIU Na ZHANG Sheng-huan 《分析测试学报》 北大核心 2025年第12期2535-2545,共11页
Nanomaterials exhibiting mimetic enzyme activity are promising candidates for colorimetric detection of chlorpyrifos.Herein,lignin-based FeN/C nanozymes(FeN/CNs)with peroxidase-like activity were synthesized by a one-... Nanomaterials exhibiting mimetic enzyme activity are promising candidates for colorimetric detection of chlorpyrifos.Herein,lignin-based FeN/C nanozymes(FeN/CNs)with peroxidase-like activity were synthesized by a one-pot method.Within the material,the nitrogen mainly exists as pyrrolyl nitrogen,which coordinates with iron to form an Fe-N structure that serves as the active site.The sensor incorporates acetylcholinesterase(AChE)to facilitate the restoration of oxidized 3,3',5',5'-tetramethylbenzidine(TMB),thereby restoring the blue solution to a color⁃less state.Furthermore,the presence of chlorpyrifos was found to inhibit AChE activity,causing the solution to turn blue again.A sensitive colorimetric method for chlorpyrifos has been established.The linear range of this method for the detection of chlorpyrifos was 0.90-80.00μg·g^(-1) and the limit of detection(LOD)was 0.13μg·g^(-1).When applied to real samples,the method achieved recoveries of 94.4%-109%for chlorpyrifos in soil,and relative standard devia⁃tions(RSD)of the assay were 3.6%-4.2%.Therefore,the constructed sensor holds significant potential for the reli⁃able detection of chlorpyrifos. 展开更多
关键词 carbon nanozyme ACETYLCHOLINESTERASE alkaline lignin COLORIMETRIC CHLORPYRIFOS
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V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC复合纳米酶制备及其可视化比色检测Mn^(2+)的应用研究
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作者 侯晓峰 马勤勤 +3 位作者 沈思宇 公海龙 王学东 刘婷婷 《分析测试学报》 北大核心 2025年第11期2236-2244,共9页
该研究通过煅烧法成功制备了含V^(4+)的V_(2)O_(5)/NC复合纳米酶(V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC,NC为氮掺杂碳材料),并对其进行了形貌、成分及结构等表征分析。V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC具有丰富的多孔结构和优异的类过氧化物酶活性(POD)。V^(4+)可... 该研究通过煅烧法成功制备了含V^(4+)的V_(2)O_(5)/NC复合纳米酶(V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC,NC为氮掺杂碳材料),并对其进行了形貌、成分及结构等表征分析。V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC具有丰富的多孔结构和优异的类过氧化物酶活性(POD)。V^(4+)可提高V_(2)O_(5)/NC的催化活性,促进H_(2)O_(2)产生‧O_(2)^(-)进而氧化无色3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)生成蓝色氧化态TMB(oxTMB)。Mn^(2+)加入到显色体系中会产生络合现象,使溶液由蓝色变为无色,基于此,构建了具有良好选择性和灵敏度的Mn^(2+)可视化比色检测方法。结果表明,Mn^(2+)浓度与652 nm处吸光度值呈线性关系,检测范围为0.01~50μmol/L,检出限为3.3 nmol/L。该比色检测方法操作简便、成本低廉,为Mn^(2+)快速检测提供了一种可行且可靠的选择。 展开更多
关键词 V^(4+)-V_(2)O_(5)/NC纳米酶 比色检测 Mn^(2+) H_(2)O_(2)
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CuTAPc-Fe_3O_4纳米复合粒子及其漆酶固定化研究 被引量:25
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作者 黄俊 周菊英 +2 位作者 肖海燕 龙胜亚 王军涛 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第14期1343-1347,i005,共6页
漆酶的固定化研究对基于漆酶催化的光纤生物传感器具有十分重要的意义.制备了四氨基酞菁铜(CuTAPc)-Fe3O4纳米复合粒子,并用红外(IR)、场发射扫描电镜(FEG-SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱、粒径仪等对其进行了表征.结果表明形成了以CuTAPc... 漆酶的固定化研究对基于漆酶催化的光纤生物传感器具有十分重要的意义.制备了四氨基酞菁铜(CuTAPc)-Fe3O4纳米复合粒子,并用红外(IR)、场发射扫描电镜(FEG-SEM)、X射线衍射(XRD)、能谱、粒径仪等对其进行了表征.结果表明形成了以CuTAPc包覆在Fe3O4纳米粒子表面的纳米复合粒子,粒子呈现不规则球形,且分布均匀,粒子平均粒径在50nm左右.用此纳米复合粒子通过戊二醛交联法固定了漆酶,固定后的酶比游离酶具有更好的贮存稳定性及操作稳定性.这为研制高性能的光纤生物传感器打下了较好的基础. 展开更多
关键词 纳米复合粒子 酶固定化 场发射扫描电镜 光纤生物传感器 戊二醛交联法 X射线衍射 FE3O4 操作稳定性 贮存稳定性 纳米粒子 平均粒径 酶催化 酞菁铜 不规则 游离酶 漆酶
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UPLC-MS法同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、甾体激素类及四环素类兽药残留 被引量:51
7
作者 李宁 张玉龙 +2 位作者 林涛 王继良 刘宏程 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期714-718,共5页
建立并优化了同时测定牛奶中10种磺胺类、6种喹诺酮类、8种甾体激素类以及1种四环素类药物共25种兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品中目标药物经5%乙酸乙腈提取,HLB固相萃取小柱净化后,通过UPLC-MS测定,外标法定量。25... 建立并优化了同时测定牛奶中10种磺胺类、6种喹诺酮类、8种甾体激素类以及1种四环素类药物共25种兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品中目标药物经5%乙酸乙腈提取,HLB固相萃取小柱净化后,通过UPLC-MS测定,外标法定量。25种兽药在不同加标浓度下的回收率为61.6%~119.2%,组内相对标准偏差(RSD)为2.5%~13.4%,组间RSD为5.8%~14.2%,方法检出限为0.5~2.0μg/kg。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱 牛奶 兽药残留 磺胺类 喹诺酮类 甾体激素类 四环素类
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固相萃取/液相色谱-串联质谱法同时测定面膜类化妆品中非法添加的53种糖皮质激素 被引量:37
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作者 罗辉泰 黄晓兰 +8 位作者 吴惠勤 朱志鑫 黄芳 林晓珊 马叶芬 邓欣 周培才 张秋炎 简艳婷 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期119-126,共8页
建立了固相萃取/液相色谱-串联质谱法(SPE/LC-MS/MS)同时测定面膜类化妆品中53种糖皮质激素的方法。样品经水分散后,加入甲醇涡旋提取,提取液用水稀释后,采用Cleanert PEP(60 mg,3 m L)固相萃取小柱净化。待测物经Waters CORTECS C1... 建立了固相萃取/液相色谱-串联质谱法(SPE/LC-MS/MS)同时测定面膜类化妆品中53种糖皮质激素的方法。样品经水分散后,加入甲醇涡旋提取,提取液用水稀释后,采用Cleanert PEP(60 mg,3 m L)固相萃取小柱净化。待测物经Waters CORTECS C18+(100 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱分离,在电喷雾离子源的正离子模式下以动态多反应监测(DMRM)模式采集数据并作定性筛查和定量分析。53种药物在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,在3个不同浓度加标水平下,平均回收率为66.8%~106.3%,相对标准偏差(RSD)为3.9%~13.2%,检出限(LOD,S/N≥3)和定量下限(LOQ,S/N≥10)分别为3μg/kg及10μg/kg。该方法操作简便、定性可靠、定量准确、灵敏度高,适用于化妆品中非法添加糖皮质激素的定性确证和准确定量。 展开更多
关键词 化妆品 糖皮质激素 固相萃取 液相色谱-串联质谱法 动态多反应监测 非法添加
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UHPLC-LTQ Orbitrap MS测定鸡肉组织中5种糖皮质激素残留 被引量:20
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作者 严华 云环 +6 位作者 刘鑫 崔凤云 李建辉 高洋洋 张杉 丁双阳 张朝晖 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期909-914,共6页
建立了鸡肉组织中地塞米松、泼尼松、氢化可的松、甲基氢化泼尼松、曲安那德5种糖皮质激素的QuEChERS前处理方法以及超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-LTQ Orbitrap MS)检测方法。对QuECh-ERS前处理条件进行优化,结果表明,以乙酸乙酯为... 建立了鸡肉组织中地塞米松、泼尼松、氢化可的松、甲基氢化泼尼松、曲安那德5种糖皮质激素的QuEChERS前处理方法以及超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-LTQ Orbitrap MS)检测方法。对QuECh-ERS前处理条件进行优化,结果表明,以乙酸乙酯为提取溶剂,乙二胺-N-丙基(PSA)为净化吸附剂,可达到最佳提取和净化效果。采用Waters AQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为250μL/min。通过LTQ Orbitrap MS质谱检测器进行检测,以保留时间和精确质量数进行定性,母离子的峰面积进行定量。5种糖皮质激素的线性范围为1~100μg/L,相关系数均大于0.99,在5、10、20μg/kg 3个加标水平下的回收率为87.5%~119.7%,相对标准偏差(RSDs)为2.0%~11.0%。5种糖皮质激素的检出限(LODs)为0.49~0.78μg/kg,定量下限(LOQs)为1.62~2.57μg/kg。该方法稳定、可靠,可满足鸡肉中地塞米松等糖皮质激素残留的检测与确证要求。 展开更多
关键词 地塞米松 糖皮质激素 鸡肉组织 QuEChERS前处理方法 UHPLC-LTQ ORBITRAP MS
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海藻酸钠固定化根霉脂肪酶的制备及其性质 被引量:25
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作者 杨本宏 蔡敬民 +1 位作者 吴克 潘仁瑞 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期977-981,共5页
研究了以海藻酸钠为载体,用包埋法制备固定化德氏根霉(Rhizopus delemar)脂肪酶的条件.将酶粉和海藻酸钠溶于pH 5.0的HAc-NaAc缓冲溶液,用注射器将此混合液滴入到0.05 mol/L无菌CaCl2溶液中,静置固化45 min,经过滤、洗涤和干燥后得到球... 研究了以海藻酸钠为载体,用包埋法制备固定化德氏根霉(Rhizopus delemar)脂肪酶的条件.将酶粉和海藻酸钠溶于pH 5.0的HAc-NaAc缓冲溶液,用注射器将此混合液滴入到0.05 mol/L无菌CaCl2溶液中,静置固化45 min,经过滤、洗涤和干燥后得到球状固定化酶.固定化酶的活力回收约为34.1%.酶学性质研究表明,此固定化酶的热稳定性较好.游离酶在60℃下保温1 h已完全丧失活力,而固定化酶在100℃下保温1 h仅损失36.2%的活力,在100℃下保温6 h仍可保持46.8%的酶活力.酶经固定化后,其橄榄油水解反应的最适温度由40℃上升至90℃,Km值由13.8 mg/ml下降为8.1 mg/ml.常见有机溶剂对固定化酶的活力影响较小.将该固定化脂肪酶用于非水溶剂中正戊酸异戊酯的合成,重复使用6次后,固定化酶仍保持95%的酶活力. 展开更多
关键词 海藻酸钠 包埋法 固定化 根霉 脂肪酶 生物催化
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多孔球状淀粉接枝共聚物的合成及其性质研究 被引量:18
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作者 葛玉斌 吴永革 +3 位作者 孙文田 周慧 李惟 沈家骢 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第6期978-980,共3页
报道了一种多孔球状淀粉接枝共聚物的合成.此球有很强的机械性能、良好的稳定性和较高的致孔率(30%~40%),平均孔径约为19.5nm.以其为载体固定化精化酶活力为1462IU/g干胶,比活为29.31IU/mg蛋白.
关键词 多孔 球状 淀粉接枝共聚物 酶载体 固定化
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含铜(Ⅱ)、铁(Ⅲ)、锰(Ⅱ)双核模型化合物的超氧化物歧化酶活性 被引量:19
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作者 廖展如 黄艳 +1 位作者 石巨恩 刘长林 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1992年第5期697-700,共4页
用邻苯三酚自氧化法测定自合成的N,N,N,N’,N’-四(2’-苯并咪唑甲基)-1,4-二乙氨基乙二醚(EGTB)的双核铜(Ⅱ)、铁(Ⅲ)、锰(Ⅱ)配合物的超氧化物歧化酶活性,它们均在10^(-6)~10^(-7)mol/L的浓度范围内具有50%以上的抑制率。
关键词 模型化合物 活性 SOD 双核
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超高效液相色谱-高分辨率质谱法筛查化妆品中12种糖皮质激素 被引量:23
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作者 李强 张晓光 +3 位作者 马俊美 李润岩 范素芳 张岩 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期179-184,共6页
建立了超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱快速筛查和确证化妆品中可能添加的12种糖皮质激素的分析方法。样品经乙腈提取,用Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行... 建立了超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱快速筛查和确证化妆品中可能添加的12种糖皮质激素的分析方法。样品经乙腈提取,用Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。以正离子全扫描模式得到糖皮质激素的精确质量数,与理论精确质量数对比,精确度偏差小于2×10-6。建立了筛查列表,并将12种糖皮质激素物质的二级质谱数据库加入确证条件中,实现了对12种糖皮质激素类物质的快速筛查。检出限为1~2μg/kg,定量下限为3~5μg/kg;加标水平为10,20,40μg/kg时,回收率为78.3%~112.5%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~11.2%。该方法可作为化妆品中非法添加糖皮质激素成分的高通量筛选和确认检测方法。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱 糖皮质激素 化妆品
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亲水梳状环氧聚合物载体柔性固定化脂肪酶 被引量:15
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作者 曲伟光 魏荣卿 +3 位作者 何冰芳 刘晓宁 仲玉 陈新营 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1869-1874,共6页
以氯乙酰化聚苯乙烯微球载体为大分子引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和亲水性丙烯酰胺为共聚接枝单体,以氯化亚铜及2,2′-联吡啶为催化体系,采用原子转移自由基聚合法接枝合成了具有柔性链的亲水梳状环氧聚合物载体PS-acyl-P(AM-co-GMA... 以氯乙酰化聚苯乙烯微球载体为大分子引发剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和亲水性丙烯酰胺为共聚接枝单体,以氯化亚铜及2,2′-联吡啶为催化体系,采用原子转移自由基聚合法接枝合成了具有柔性链的亲水梳状环氧聚合物载体PS-acyl-P(AM-co-GMA),并将其用于耐有机溶剂YCJ01脂肪酶的共价柔性固定化.结果表明,固定化酶催化对硝基苯酚棕榈酸酯水解的最适温度为45~55oC,pH=8.5,此时酶活为16.6U/g;在80oC以下,pH=5~10时,酶的活性稳定;连续进行7次间歇操作,固定化酶保留初始活性的73.5%;于4oC保存60d,酶活仍剩余86.8%.经亲水梳状环氧载体柔性固定化后,该脂肪酶对有机溶剂的耐受性有所提高. 展开更多
关键词 氯乙酰化聚苯乙烯 原子转移自由基聚合 梳状环氧聚合物 耐有机溶剂脂肪酶 柔性固定化
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固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法分析乙烯利在棉籽、棉叶和土壤中的残留 被引量:13
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作者 汤涛 张昌朋 +4 位作者 吴珉 许振岚 何红梅 张春荣 赵学平 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-74,共6页
建立固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱(SPE/UPLC-MS/MS)检测棉籽、棉叶和土壤中乙烯利残留的分析方法。各基质经甲醇-1%甲酸提取,Oasis MAX色谱柱净化,Cortecs Hilic超高效液相色谱柱进行分离,电喷雾负离子多重反应监测(MRM)模式进行... 建立固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱(SPE/UPLC-MS/MS)检测棉籽、棉叶和土壤中乙烯利残留的分析方法。各基质经甲醇-1%甲酸提取,Oasis MAX色谱柱净化,Cortecs Hilic超高效液相色谱柱进行分离,电喷雾负离子多重反应监测(MRM)模式进行测定。结果表明:在0. 02~1. 94 mg/L范围内,乙烯利在溶剂和各基质提取液中的峰面积与其对应的质量浓度间线性关系均良好,r^2≥0. 996 3;方法的检出限为0. 01mg/kg,定量下限为0. 02 mg/kg;在0. 02、0. 194、3. 88 mg/kg加标水平下,乙烯利在3种基质中的回收率为78. 3%~95. 1%,相对标准偏差(RSD)为1. 9%~5. 2%。该方法具有操作简单、重复性好、灵敏度高等特点,适用于棉籽、棉叶和土壤中乙烯利残留的检测。 展开更多
关键词 乙烯利 超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 残留 棉籽 棉叶 土壤
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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定祛痘化妆品中的15种禁用雄激素 被引量:19
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作者 李晶瑞 马强 +4 位作者 孟宪双 陈云霞 马会娟 张庆 白桦 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期43-49,共7页
建立了同时测定祛痘化妆品中15种禁用雄激素(肾上腺甾酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、氧甲氢龙、雄烯二酮、诺龙、去氢甲睾酮、睾酮、去氢表雄酮、氯司替勃、雄诺龙、美雄诺龙、醋酸氯睾酮、丙酸睾丸素)的超高效液相色谱-串联质谱方... 建立了同时测定祛痘化妆品中15种禁用雄激素(肾上腺甾酮、群勃龙、勃地酮、氟甲睾酮、氧甲氢龙、雄烯二酮、诺龙、去氢甲睾酮、睾酮、去氢表雄酮、氯司替勃、雄诺龙、美雄诺龙、醋酸氯睾酮、丙酸睾丸素)的超高效液相色谱-串联质谱方法。不同类型的化妆品样品,以甲醇为提取溶剂进行超声提取,样品提取液经离心处理后,上清液以Oasis HLB固相萃取柱净化,经ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱分离,目标化合物在正离子模式下电离,采用多反应监测模式进行定性、定量分析。结果表明,15种禁用雄激素的定量下限为1.0-20.0μg/kg,在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为76.5%-92.1%,相对标准偏差为1.3%-9.6%。本方法准确、快速、灵敏,能够为祛痘化妆品检验和生产质量控制提供科学依据及技术支持。 展开更多
关键词 祛痘化妆品 雄激素 超高效液相色谱-串联质谱 固相萃取
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黑曲霉发酵粉中一种β-葡萄糖苷酶的分离纯化与表征 被引量:13
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作者 郑淑霞 沈志扬 +2 位作者 刘树滔 邓文汉 饶平凡 《福州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2004年第1期101-105,共5页
黑曲霉发酵酶粉通过硫酸铵分级沉淀、SephadexG-25脱盐、再通过两步DEAE-TOYOPEARL650M弱阴离子交换色谱,分离得到一个新的电泳纯的β-葡萄糖苷酶.该酶对水杨素的比活力为597.12IU mg,并对其专一,不能水解棉花和羧甲基纤维素钠;DTT处理... 黑曲霉发酵酶粉通过硫酸铵分级沉淀、SephadexG-25脱盐、再通过两步DEAE-TOYOPEARL650M弱阴离子交换色谱,分离得到一个新的电泳纯的β-葡萄糖苷酶.该酶对水杨素的比活力为597.12IU mg,并对其专一,不能水解棉花和羧甲基纤维素钠;DTT处理前后分子量均为117.5kDa;最适pH和温度分别为4 5和70℃;在pH5.0、50℃下对水杨素钠的米氏常数Km为3.73mg mL,最大反应速率Vm为0.088mg葡萄糖 (mL·min). 展开更多
关键词 黑曲霉 发酵粉 Β-葡萄糖苷酶 分离纯化 表征 纤维素酶 生物催化剂
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定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力 被引量:11
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作者 赵博 陶进 +5 位作者 马吉胜 廉虹 王岩 常琳 高仁钧 曹淑桂 《催化学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期291-296,共6页
通过定向进化的方法,提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的脂肪酶(BSL2)的活力.经过两轮易错PCR以及高通量筛选,最终获得了比活力为野生出发酶4.5倍的突变体3-1B2.基因比对结果表明,共有两个氨基酸发生了突变.突变酶的... 通过定向进化的方法,提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的脂肪酶(BSL2)的活力.经过两轮易错PCR以及高通量筛选,最终获得了比活力为野生出发酶4.5倍的突变体3-1B2.基因比对结果表明,共有两个氨基酸发生了突变.突变酶的酶学性质研究发现,与野生酶相比,它的热稳定性及pH稳定性略有增加,最适温度和最适pH值则无太大的变化.同源模建了BSL2与3-1B2的结构,并与底物进行了分子对接.结果表明,突变体3-1B2的结合能比野生型BSL2低1.29 kcal/mol,活性中心Ser77残基与底物羰基的距离也由0.319 nm减小为0.278 nm,因而加快了酶反应速度,提高了酶活力. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肪酶 易错聚合酶链反应 定向进化 分子对接
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Recent advances in immobilized enzymes on nanocarriers 被引量:13
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作者 曹诗林 徐培 +5 位作者 马永正 姚潇晓 姚远 宗敏华 李雪辉 娄文勇 《Chinese Journal of Catalysis》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1814-1823,共10页
Recent progress in nanotechnology has provided high-performance nanomaterials for enzyme immobilization.Nanobiocatalysts combining enzymes and nanocarriers are drawing increasing attention because of their high cataly... Recent progress in nanotechnology has provided high-performance nanomaterials for enzyme immobilization.Nanobiocatalysts combining enzymes and nanocarriers are drawing increasing attention because of their high catalytic performance,enhanced stabilities,improved enzyme-substrate affinities,and reusabilities.Many studies have been performed to investigate the efficient use of cellulose nanocrystals,polydopamine-based nanomaterials,and synthetic polymer nanogels for enzyme immobilization.Various nanobiocatalysts are highlighted in this review,with the emphasis on the design,preparation,properties,and potential applications of nanoscale enzyme carriers and nanobiocatalysts. 展开更多
关键词 Enzyme immobilization Cellulose nanocrystal POLYDOPAMINE Biodegradable material
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一种胞外单宁酶的活力检测方法 被引量:33
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作者 保玉心 邱树毅 +1 位作者 李秧针 黄永光 《精细化工》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期621-624,共4页
介绍了一种胞外单宁酶的活力检测方法。根据绕丹宁与没食子酸在碱性条件下显色的原理,在520 nm波长下测定吸光值,避开了胞外单宁酶粗酶液中干扰物质的吸收峰波长,建立了一种适合固体发酵所产胞外单宁酶的酶活检测方法。
关键词 单宁酶 胞外酶 固体发酵
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