目的分析牙周炎骨破坏中M1/M2型巨噬细胞所发挥的作用以及可能的作用机制。方法2025年3—10月齐齐哈尔医学院医学技术学院临床病原教研室选取6~8周龄C57BL/6小鼠6只,构建牙周炎动物模型。模型构建成功后处死小鼠,分离双侧上颌骨标本,经...目的分析牙周炎骨破坏中M1/M2型巨噬细胞所发挥的作用以及可能的作用机制。方法2025年3—10月齐齐哈尔医学院医学技术学院临床病原教研室选取6~8周龄C57BL/6小鼠6只,构建牙周炎动物模型。模型构建成功后处死小鼠,分离双侧上颌骨标本,经组织学染色处理后,观察骨组织破坏形态及程度。对制备的石蜡切片进行组织学染色及免疫组化检测,检测巨噬细胞表面标志物分化抗原簇68(cluster of differen⁃tiation 68,CD68)、分化抗原簇86(cluster of differentiation 86,CD86)及分化抗原簇163(cluster of differentiation,CD163)的表达情况。另从小鼠骨髓中分离单核细胞,体外诱导分化为原代M1、M2型巨噬细胞;收集诱导成功的M1、M2型巨噬细胞条件培养基,将两种巨噬细胞分别与成骨细胞进行共培养,实验分组设为对照组(MC组)、M1型巨噬细胞共培养组(MC-M1组)及M2型巨噬细胞共培养组(MC-M2组)。培养结束后提取各组细胞总蛋白,采用蛋白质印迹法检测成骨细胞中runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,Ocn)的蛋白表达水平。结果牙周炎动物模型组织标本显示,牙槽骨呈现病理损伤:骨组织排列紊乱、结构完整性破坏,骨小梁稀疏且连续性中断,骨量减少,符合牙周炎典型病理改变特征。免疫组织化显示,骨吸收表面可见大量巨噬细胞浸润,骨吸收周缘M1和M2型巨噬细胞浸润。经蛋白质印迹法检测发现,M1、M2型巨噬细胞上清刺激成骨细胞后,成骨细胞中Runx2和Ocn表达减少。结论M1、M2型巨噬细胞均能抑制成骨细胞分化关键因子Runx2与Ocn的表达,从而干扰成骨过程、促进牙周炎骨破坏。其中,M1型巨噬细胞的抑制作用强于M2型,表明其可能是驱动牙周炎性骨丧失的关键效应细胞。展开更多
文摘目的分析牙周炎骨破坏中M1/M2型巨噬细胞所发挥的作用以及可能的作用机制。方法2025年3—10月齐齐哈尔医学院医学技术学院临床病原教研室选取6~8周龄C57BL/6小鼠6只,构建牙周炎动物模型。模型构建成功后处死小鼠,分离双侧上颌骨标本,经组织学染色处理后,观察骨组织破坏形态及程度。对制备的石蜡切片进行组织学染色及免疫组化检测,检测巨噬细胞表面标志物分化抗原簇68(cluster of differen⁃tiation 68,CD68)、分化抗原簇86(cluster of differentiation 86,CD86)及分化抗原簇163(cluster of differentiation,CD163)的表达情况。另从小鼠骨髓中分离单核细胞,体外诱导分化为原代M1、M2型巨噬细胞;收集诱导成功的M1、M2型巨噬细胞条件培养基,将两种巨噬细胞分别与成骨细胞进行共培养,实验分组设为对照组(MC组)、M1型巨噬细胞共培养组(MC-M1组)及M2型巨噬细胞共培养组(MC-M2组)。培养结束后提取各组细胞总蛋白,采用蛋白质印迹法检测成骨细胞中runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,Ocn)的蛋白表达水平。结果牙周炎动物模型组织标本显示,牙槽骨呈现病理损伤:骨组织排列紊乱、结构完整性破坏,骨小梁稀疏且连续性中断,骨量减少,符合牙周炎典型病理改变特征。免疫组织化显示,骨吸收表面可见大量巨噬细胞浸润,骨吸收周缘M1和M2型巨噬细胞浸润。经蛋白质印迹法检测发现,M1、M2型巨噬细胞上清刺激成骨细胞后,成骨细胞中Runx2和Ocn表达减少。结论M1、M2型巨噬细胞均能抑制成骨细胞分化关键因子Runx2与Ocn的表达,从而干扰成骨过程、促进牙周炎骨破坏。其中,M1型巨噬细胞的抑制作用强于M2型,表明其可能是驱动牙周炎性骨丧失的关键效应细胞。
