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新形势下临床研究协调员岗位胜任力模型构建研究 被引量:2
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作者 陈娜 蔡雪玲 +2 位作者 邹艳琳 邹燕琴 钱怡 《中国新药杂志》 CSCD 北大核心 2024年第24期2594-2601,共8页
目的:构建临床研究协调员岗位胜任力模型,为国家生物医药研发事业高水平临床研究协调员的培养和考核提供参考依据。方法:通过文献检索、理论研究等方法初步构建临床研究协调员岗位胜任力评价指标体系。通过德尔菲专家咨询法对37位专家进... 目的:构建临床研究协调员岗位胜任力模型,为国家生物医药研发事业高水平临床研究协调员的培养和考核提供参考依据。方法:通过文献检索、理论研究等方法初步构建临床研究协调员岗位胜任力评价指标体系。通过德尔菲专家咨询法对37位专家进行2轮问卷咨询确定岗位胜任力评价指标体系,采用层次分析法确定指标权重。结果:2轮专家咨询问卷回收率均为100%,计算得到专家权威系数为0.8703。最终确定了一级指标5项、二级指标40项。一级指标中临床试验操作技能与能力、人格特质、临床试验专业知识、明确岗位职责和认知、价值观的权重系数分别为0.4035,0.2271,0.1827,0.1158,0.0710。将二级指标组合权重系数>0.04的指标定义为关键胜任特征,分别为源文件及源数据规范管理、法律法规知识、临床试验项目相关文件资料、保密意识、临床试验标准操作流程(standard operating procedure,SOP)、应变能力,权重系数分别为0.0606,0.0591,0.0544,0.0539,0.0479,0.0469。结论:本研究初步构建了临床研究协调员岗位胜任力模型,可靠性较高,为临床研究协调员的选拔、培训与考核等工作提供科学依据。 展开更多
关键词 临床研究协调员 药物临床试验 岗位胜任力 德尔菲法
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牛匈爱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量:2
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作者 朱鑫玥 董覃婷 +10 位作者 罗宇航 张广欣 乔成鹏 黄稳妃 邹延林 陈樱 欧阳康 韦祖樟 苏亚权 潘艳 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1252-1258,共7页
水牛匈爱病毒(BufHuV)是2021年在广西水牛中新发现的一种小核糖核酸病毒,本研究旨在建立一种可用于临床快速且特异检测牛匈爱病毒的方法。基于GenBank上公布的bovine hunnivirus、ovine hunnivirus和BufHuV的5′UTR保守区设计了1对特异... 水牛匈爱病毒(BufHuV)是2021年在广西水牛中新发现的一种小核糖核酸病毒,本研究旨在建立一种可用于临床快速且特异检测牛匈爱病毒的方法。基于GenBank上公布的bovine hunnivirus、ovine hunnivirus和BufHuV的5′UTR保守区设计了1对特异性引物,首次建立了检测牛匈爱病毒的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果表明,标准曲线在1.1×10^(8)copies/μL~1.1×10^(3)copies/μL质粒标准品稀释浓度范围内呈线性关系,斜率为-3.2657,相关系数为0.9998,熔解曲线为单峰,检测下限为1.1×10^(1)copies/μL,比常规PCR敏感性高100倍;特异性高,与多种常见的牛病病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间变异系数均小于1.0%。收集了257份有腹泻迹象的牛粪样品,用于对所建立平台的性能评估,结果,建立的实时荧光定量PCR的阳性检出率为3.89%,高于普通PCR的阳性检出率(1.56%)。上述结果表明,该方法将为牛匈爱病毒的临床样品检测、流行病学监测提供一种快速、可靠、低成本的替代方案,也为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 hunnivirus SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR 5′UTR 检测方法
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基于非洲猪瘟病毒B119L蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量:3
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作者 耿鑫梅 奚媖牡 +5 位作者 黄香梅 邹延林 吴青萍 卢丽飞 覃一峰 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1355-1359,共5页
为了建立一种针对非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的血清学检测手段,参考ASFV Pig/HLJ/2018株全基因组序列合成非结构蛋白B119L的基因序列,成功构建重组表达质粒pCold-Ⅰ-B119L,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达获... 为了建立一种针对非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的血清学检测手段,参考ASFV Pig/HLJ/2018株全基因组序列合成非结构蛋白B119L的基因序列,成功构建重组表达质粒pCold-Ⅰ-B119L,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达获得重组蛋白,利用纯化后的B119L重组蛋白作为诊断抗原,建立检测ASFV抗体的间接ELISA检测方法。结果显示:原核表达的B119L蛋白的分子质量为14.4 ku,与预期相符;以其为包被抗原建立的间接ELISA检测方法的批间及批内变异系数均小于10%;标准阳性血清的最低检测稀释度为1︰5120;对ASFV阳性血清具有特异性,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒阳性血清无交叉反应;该间接ELISA方法与商品化试剂盒的符合率为100%。本研究中建立的间接ELISA检测方法特异性、重复性、灵敏度良好,为ASFV的临床检测和流行病学调查提供了依据,对于预防ASFV的感染具有重要作用。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 B119L蛋白 pCold-Ⅰ载体 间接ELISA
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非洲猪瘟MGF360-11L蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量:3
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作者 奚媖牡 耿鑫梅 +5 位作者 黄香梅 邹延林 卢丽飞 吴青萍 覃一峰 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1496-1502,共7页
本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)HLJ/2018株(GenBank登录号:MK333180)MGF360-11L核苷酸序列,合成MGF360-11L基因序列,将其克隆至pET-32a(+)载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,纯化后的重组蛋白进行SDS-P... 本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)HLJ/2018株(GenBank登录号:MK333180)MGF360-11L核苷酸序列,合成MGF360-11L基因序列,将其克隆至pET-32a(+)载体。测序正确后转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达与纯化,纯化后的重组蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。以纯化的MGF360-11L重组蛋白作为包被抗原,建立了检测ASFV MGF360-11L抗体的间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体检测试剂盒分别对192份临床血清样品进行检测比较,结果显示,该间接ELISA方法的特异性为91.6%,敏感性为92.1%,符合率约为91.7%。表明,该间接ELISA方法敏感性高、重复性好和特异性强,可初步用于临床血清样品非洲猪瘟抗体的检测,该方法的建立为ASFV的快速诊断提供了更多选择,对非洲猪瘟的防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF360-11L蛋白 原核表达 间接ELISA
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广西地区水牛E2型牛肠道病毒的分离和鉴定 被引量:5
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作者 罗宇航 乔成鹏 +7 位作者 朱鑫玥 刘黄豪 苏亚权 刘海峰 邹延林 黄稳妃 黄伟坚 潘艳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期53-58,共6页
为了解广西地区水牛感染中肠道病毒(BEV)的情况,本研究在广西南宁某水牛规模养殖场腹泻粪便样品中成功分离出2株BEV,分别命名为GXNN2106和GXNN2102。将2株病毒空斑纯化后测定GXNN2106毒株TCID 50为107.99/0.1 mL,GXNN2102毒株TCID 50为1... 为了解广西地区水牛感染中肠道病毒(BEV)的情况,本研究在广西南宁某水牛规模养殖场腹泻粪便样品中成功分离出2株BEV,分别命名为GXNN2106和GXNN2102。将2株病毒空斑纯化后测定GXNN2106毒株TCID 50为107.99/0.1 mL,GXNN2102毒株TCID 50为107.37/0.1 mL。多步生长曲线结果显示,GXNN2106毒株在MDBK细胞中复制增殖良好。经BEV VP 1、5′UTR特异性引物逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定,2株病毒均属于E2型,与其他E2型BEV 5′UTR核苷酸同源性为75.7%~78.6%,VP 1核苷酸同源性为87.1%~91.1%。本研究首次在广西地区水牛粪便中分离得到E2型BEV毒株,为广西水牛源牛肠道病毒的流行分布情况和疫苗的研发提供数据支持。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 水牛 分离鉴定 基因分型
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水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备
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作者 邹延林 张广欣 +11 位作者 罗宇航 朱鑫玥 刘黄豪 莫筱可 谢江 王小玲 陈樱 欧阳康 韦祖樟 覃一峰 潘艳 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期700-705,共6页
为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,... 为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体,通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示,制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合,表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。 展开更多
关键词 牛匈爱病毒 结构蛋白 原核表达 多克隆抗体
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Heteroclitins R-S: new dibenzocylooctadiene lignans from Kadsura heteroclita 被引量:8
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作者 CHEN Min LUO You-Ping +2 位作者 zou yan-lin LANG Ling-Hu CHEN Dao-Feng 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2014年第9期689-692,共4页
AIM: To study the dibenzocylooctadiene lignans from the stems of Kadsura heteroclita. METHOD: Chromatographic separations of silica gel and semi-preparative HPLC were used. All of the structures were elucidated on the... AIM: To study the dibenzocylooctadiene lignans from the stems of Kadsura heteroclita. METHOD: Chromatographic separations of silica gel and semi-preparative HPLC were used. All of the structures were elucidated on the basis of spectroscopic analysis,including 2D-NMR and HR-MS techniques. RESULTS: Four dibenzocylooctadiene lignans were isolated from K. heteroclita. Their structures were identified as heteroclitin R(1), heteroclitin S(2), gonisin O(3), and schisanlignone A(4). CONCLUSION: Heteroclitin R(1) and heteroclitin S(2) are new natural lignans. 展开更多
关键词 lignans spectroscopic elucidated silica chromato methoxy amorphous dried Cotton purified
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