鸡骨草抗大口黑鲈虹彩病毒作用及其发酵物对鳜保护效果分析

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作者 刘励聪 王玥 +7 位作者 王蕊 王英英 张德锋 王亚军 陈建酬 李新宇 朱学芝 刘丽燕 《淡水渔业》 北大核心 2026年第2期79-89,共11页

为筛选出抗大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)的中草药并探究其对鳜的抗病毒效果,本研究选取了土茯苓(Smilax glabra Roxb)、鸡骨草(Abrus herb)、荷叶(Nelumbinis folium)、连翘(Forsythin suspensa)、金银花(Lonicera japonica Thunb.)、杜仲(Eu... 为筛选出抗大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)的中草药并探究其对鳜的抗病毒效果,本研究选取了土茯苓(Smilax glabra Roxb)、鸡骨草(Abrus herb)、荷叶(Nelumbinis folium)、连翘(Forsythin suspensa)、金银花(Lonicera japonica Thunb.)、杜仲(Eucommia ulmoides)、蒲公英(Taraxacum mongolicum)、五味子(Schisandra chinensis)、鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)、金钱草(Dichondra micrantha Urban.)10味中草药对LMBV进行了体外抗病毒实验,并挑选抗LMBV效果较好的鸡骨草单独或与贝莱斯芽孢杆菌GY65联合进行了鱼体实验。结果显示:(1)鸡骨草表现出对LMBV较好的阻断、杀灭作用。(2)GY65发酵鸡骨草水提液后可提高其总黄酮含量14.10%、总酚含量5.64%。(3)攻毒第7天,GY65发酵鸡骨草水提液组(ZG)鳜死亡率最低(20.83%),显著低于对照组(37.5%)。(4)组织学分析表明,鸡骨草水提液及其发酵物可有效减轻LMBV对鳜肠道和肝脏损伤,并上调补体成分3(C3)、免疫球蛋白M(IgM)、白介素8(IL-8)的含量。研究表明,鸡骨草水提液具有较强的抗LMBV作用,经贝莱斯芽孢杆菌GY65发酵后效果更佳。 展开更多

关键词 鸡骨草(Abrus herb) 大口黑鲈虹彩病毒 鳜(Siniperca chuatsi) 芽孢杆菌 抗病毒作用 发酵物

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高寒高海拔地区智慧矿山建设的技术发展趋势展望

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作者 周冠南 范佳新 +5 位作者 张德峰 李凤龙 范春晖 李美洲 赵鑫 郭鹏豪 《露天采矿技术》 2026年第1期25-31,共7页

高寒高海拔地区矿产资源开发面临海拔高、气温低、氧气稀薄、昼夜温差大等极端挑战,传统采矿模式难以满足安全、高效、绿色发展的要求。系统梳理了高寒高海拔智慧矿山建设的技术发展现状与趋势,重点分析了无人化智能装备、智能感知与通... 高寒高海拔地区矿产资源开发面临海拔高、气温低、氧气稀薄、昼夜温差大等极端挑战,传统采矿模式难以满足安全、高效、绿色发展的要求。系统梳理了高寒高海拔智慧矿山建设的技术发展现状与趋势,重点分析了无人化智能装备、智能感知与通信网络、云端智能调度与控制及绿色低碳与生态保护等关键技术。研究表明,我国已形成具有高原特色的智能化技术体系,玉龙铜矿、普朗铜矿、西藏巨龙铜矿等项目实现了无人驾驶、智能采选、纯电驱动等技术的规模化应用,显著提升了安全水平、生产效率与环保效益。未来,高寒高海拔智慧矿山将向技术创新引领系统升级、应用场景持续拓展深化、绿色低碳与生态协同三大方向发展,通过5G-A/6G、AI算法优化及高寒高海拔专用设备研发,推动矿业向更高效、更安全、更绿色的方向发展,为全球矿业可持续发展提供中国智慧与中国方案。 展开更多

关键词 高寒高海拔 智慧矿山 无人驾驶 绿色开采 技术发展

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鱼源无乳链球菌整合性接合元件ICESag1535的生物信息特征,剪切、环化活性与流行现状

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作者 车行 卢燕播 +5 位作者 王承德 罗敏意 黎果 张德峰 林蠡 赵丽娟 《水产学报》 北大核心 2025年第5期158-168,共11页

[目的]揭示水生动物源链球菌ICEs分子生物学特点、水平转移能力、ICEs流行现状,预测ICEs水平扩散的受体范围及对病原菌致病的影响。[方法]在NCBI数据库中检索ICEs特征元件,使用生物信息学方法对基因组进行分析,并鉴定ICE的结构特征、主... [目的]揭示水生动物源链球菌ICEs分子生物学特点、水平转移能力、ICEs流行现状,预测ICEs水平扩散的受体范围及对病原菌致病的影响。[方法]在NCBI数据库中检索ICEs特征元件,使用生物信息学方法对基因组进行分析,并鉴定ICE的结构特征、主要元件功能,利用分子生物学技术验证ICE在微生物间的水平转移能力并调查流行情况。[结果]筛选出尼罗罗非鱼无乳链球菌WC1535基因组中存在一个完整的ICE位于mutT基因内,命名为ICESag1535 mutT(简称ICESag1535)。ICESag1535全长约74.1 kb,编码73个蛋白基因,核心转移元件由ConjTn5252超家族的25个移动基因组成,属于类ICESa2603型ICEs。ICESag1535核心区包含5个外源基因插入热点区(HS),可变区(VR)含有7个转座插入元件(IS),形成3个复合型转座子,HS和VR可划分为7个主要功能区,分别与ICE的稳定、接合偶联、物质跨膜运输、应激调控、细菌素合成与输出、接合拓展和宿主黏附等功能相关。ICESag1535的3'-末端是同向串联的3个结构相似的位点特异性丝氨酸重组酶(TSPSI),对TSPSI进行聚类分析发现,尼罗罗非鱼、美洲牛蛙和尖吻鲈分离菌株编码的TSPSI几乎完全相同,都位于类ICESa2603型ICEs内,病原菌分布覆盖北半球水域。对不同来源ICEs同源性分析,发现人、猪、鱼分离菌株携带的类ICESa2603型ICEs,其接合模式皆为ConjTn5252型,可跨种扩散。调查类ICESa2603型ICEs的流行情况,2014—2016年分离的链球菌中携带比例为78.8%,而2020—2021年分离菌株的携带率为96.3%,呈上升趋势。验证ICESag1535的水平转移能力,检测到ICESag1535从WC1535基因组自我剪切,形成环化中间体,然后插入在人链球菌Sag158基因组mutT内,鉴定了转移过程中attL、attR、attB、oriT的位点特征;ICE整合入Sag158后,在TSPSI与attR位点之间检测到IS30插入元件。[结论]本研究鉴定的ICESag1535是具备自我切除和环化活性的完整ICE,可跨种扩散;可变区多个复合转座子,赋予ICE形成多重水平转移机制的能力,增加流行多样性;缘于IS的募集特性使ICE呈开放【目的】揭示水生动物源链球菌ICEs分子生物学特点、水平转移能力、ICEs流行现状,预测ICEs水平扩散的受体范围及对病原菌致病的影响。【方法】在NCBI数据库中检索ICEs特征元件,使用生物信息学方法对基因组进行分析,并鉴定ICE的结构特征、主要元件功能,利用分子生物学技术验证ICE在微生物间的水平转移能力并调查流行情况。【结果】筛选出尼罗罗非鱼无乳链球菌WC1535基因组中存在一个完整的ICE位于mutT基因内,命名为ICESag1535mutT(简称ICESag1535)。ICESag1535全长约74.1 kb,编码73个蛋白基因,核心转移元件由Conj Tn5252超家族的25个移动基因组成,属于类ICESa2603型ICEs。ICESag1535核心区包含5个外源基因插入热点区(HS),可变区(VR)含有7个转座插入元件(IS),形成3个复合型转座子,HS和VR可划分为7个主要功能区,分别与ICE的稳定、接合偶联、物质跨膜运输、应激调控、细菌素合成与输出、接合拓展和宿主黏附等功能相关。ICESag1535的3′-末端是同向串联的3个结构相似的位点特异性丝氨酸重组酶(TSPSI),对TSPSI进行聚类分析发现,尼罗罗非鱼、美洲牛蛙和尖吻鲈分离菌株编码的TSPSI几乎完全相同,都位于类ICESa2603型ICEs内,病原菌分布覆盖北半球水域。对不同来源ICEs同源性分析,发现人、猪、鱼分离菌株携带的类ICESa2603型ICEs,其接合模式皆为Conj Tn5252型,可跨种扩散。调查类ICESa2603型ICEs的流行情况,2014—2016年分离的链球菌中携带比例为78.8%,而2020—2021年分离菌株的携带率为96.3%,呈上升趋势。验证ICESag1535的水平转移能力,检测到ICESag1535从WC1535基因组自我剪切,形成环化中间体,然后插入在人链球菌Sag158基因组mutT内,鉴定了转移过程中attL、attR、attB、oriT的位点特征;ICE整合入Sag158后,在TSPSI与attR位点之间检测到IS30插入元件。【结论】本研究鉴定的ICESag1535是具备自我切除和环化活性的完整ICE,可跨种扩散;可变区多个复合转座子,赋予ICE形成多重水平转移机制的能力,增加流行多样性;缘于IS的募集特性使ICE呈开放式进化特点,赋予宿主微生物不断增强的适应能力和扩散性致病能力。本研究内容对微生物安全、生物进化与遗传资源研究具有重要意义。 展开更多

关键词 尼罗罗非鱼 无乳链球菌 ICE_Sag1535_mutT Conj_(Tn5252) 三串联位点特异性丝氨酸重组酶 水平基因转移 跨种扩散 开放式进化

原文传递

中国七种水生动物源无乳链球菌的分子特征及其对斑马鱼的致病性 被引量：13

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作者 张德锋 可小丽 +4 位作者 刘志刚 王世锋 袁伟 石存斌 卢迈新 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1788-1797,共10页

为了解中国水生动物源无乳链球菌的分子流行特征,揭示其传播和流行规律,本实验对分离得到并鉴定的10株7种水生动物源无乳链球菌通过分子血清型、多位点序列分型(MLST)分型、毒力基因型和前噬菌体分型等方法进行分子分型;其次,通过斑马... 为了解中国水生动物源无乳链球菌的分子流行特征,揭示其传播和流行规律,本实验对分离得到并鉴定的10株7种水生动物源无乳链球菌通过分子血清型、多位点序列分型(MLST)分型、毒力基因型和前噬菌体分型等方法进行分子分型;其次,通过斑马鱼评价7种水生动物源无乳链球菌的致病性。分子血清型分析结果表明,10株无乳链球菌可分为3种血清型,即Ⅰa、Ⅰb和Ⅲ型;MLST分型结果表明,Ⅰa型无乳链球菌均为ST7型,Ⅰb无乳链球菌均是ST261型,只有Ⅲ型无乳链球菌是ST739型。进一步分型结果表明,10株无乳链球菌可分为3种毒力基因型和4种前噬菌体基因型。根据4种分型结果可知,10株水生动物源无乳链球菌可分为4种类型,其中虎纹蛙源无乳链球菌具有独立的分子血清型、MLST型、毒力基因型和前噬菌体基因型,即Ⅲ-ST739-V1-P3;罗非鱼源无乳链球菌的基因型有3种,即Ⅰa-ST7-V2-P1、Ⅰa-ST7-V2-P2和Ⅰa-ST7-V3-P4;红尾皇冠鱼、鳙和罗非鱼源无乳链球菌的基因型相同:Ⅰa-ST7-V2-P2;卵形鲳鲹、宝石鲈和罗非鱼源无乳链球菌具有相同的基因型:Ⅰa-ST7-V2-P1;鲮和罗非鱼源无乳链球菌的基因型相同,即Ⅰb-ST261-V3-P4。致病性研究表明,7种水生动物源无乳链球菌对斑马鱼均有强致病性。研究表明,两栖类虎纹蛙源无乳链球菌和鱼源无乳链球菌的基因型明显不同,它们之间遗传变异较大,因此,无乳链球菌在两栖类和鱼类之间相互传播的可能性较小。鱼源无乳链球菌有3种基因型,且这3种基因型均在罗非鱼中流行,这表明无乳链球菌在鱼类中相互传播的可能性较大,尤其是在罗非鱼与其他鱼类之间。 展开更多

关键词 斑马鱼 无乳链球菌 流行病学 分子血清型 MLST 毒力基因

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4种中草药单体对嗜热四膜虫生长和凋亡的影响 被引量：5

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作者 潘厚军 康佳磊 +6 位作者 张德锋 常藕琴 任燕 王亚军 蒋俊贤 王琳 石存斌 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期66-73,共8页

利用Hoechst 33258荧光染色、活细胞计数、CCK-8细胞活力测定、抗氧化酶活力测定等技术,研究了青蒿素、大黄素、芦荟大黄素、小檗碱(又名黄连素)等4种中草药单体对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)生长和凋亡的影响,为应用嗜热四膜... 利用Hoechst 33258荧光染色、活细胞计数、CCK-8细胞活力测定、抗氧化酶活力测定等技术,研究了青蒿素、大黄素、芦荟大黄素、小檗碱(又名黄连素)等4种中草药单体对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)生长和凋亡的影响,为应用嗜热四膜虫筛选抗鱼寄生虫中草药提供参考。结果表明,采用Hoechst荧光染色,4种单体在高浓度(20~200 mg·L^(−1))作用下均可使嗜热四膜虫凋亡,显著着色发亮。4种单体对嗜热四膜虫的半抑制浓度(IC50)和95%置信区间(95%confidence interval,95%CI),用细胞计数法测定依次为21.23(16.71~28.23)mg·L^(−1)、3.77(1.91~5.54)mg·L^(−1)、1.70(0.18~3.82)mg·L^(−1)和44.56(29.82~98.66)mg·L^(−1),CCK-8细胞活力测定法依次为20.03(13.02~28.45)mg·L^(−1)、6.07(4.39~7.65)mg·L^(−1)、3.67(2.61~4.72)mg·L^(−1)和107.39(66.78~267.17)mg·L^(−1),CCK-8法与细胞计数法所呈现的趋势较为一致。在单体质量浓度为1.25~50.0 mg·L^(−1),随着药物浓度的增加,过氧化氢酶(CAT)活力有升高趋势,而丙二醛(MDA)呈下降趋势,超氧化物歧化酶(SOD)活力先升高后降低。上述结果表明,4种中草药单体对嗜热四膜虫的生长和凋亡有剂量效应关系,凋亡的产生可能与细胞氧化应激状态改变有关。 展开更多

关键词 中草药单体 嗜热四膜虫 细胞凋亡 半抑制浓度 氧化应激

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斑点叉尾鮰败血症3种病原多重PCR检测方法的建立 被引量：3

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作者 刘礼辉 张德锋 +3 位作者 李宁求 付小哲 林强 石存斌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第11期39-46,54,共9页

【目的】建立可同时快速检测斑点叉尾鮰败血症3种病原(嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鮰爱德华菌)的多重PCR检测方法。【方法】根据嗜水气单胞菌溶血素基因(Hly)、维氏气单胞菌脱氧核糖核酸酶Ⅰ基因(DNaseⅠ)以及鮰爱德华菌溶血活化基因(... 【目的】建立可同时快速检测斑点叉尾鮰败血症3种病原(嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鮰爱德华菌)的多重PCR检测方法。【方法】根据嗜水气单胞菌溶血素基因(Hly)、维氏气单胞菌脱氧核糖核酸酶Ⅰ基因(DNaseⅠ)以及鮰爱德华菌溶血活化基因(Eha)的保守序列,设计3对特异性引物,优化并建立斑点叉尾鮰败血症3种主要病原菌的多重PCR方法,对其特异性和灵敏度进行考察,并将其用于临床样品的检测。【结果】建立的多重PCR方法,当Hly基因、DNaseⅠ基因以及Eha基因的引物浓度分别为1.0,1.0和0.5μmol/L,退火温度为59.5℃时,各目的片段均可较好地扩增。特异性试验结果表明,建立的多重PCR方法可从嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鮰爱德华菌分别扩增出1091,262和450bp的目的片段,从多种细菌DNA的混合种也可扩增出上述目的片段,而对其他对照组的扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,建立的多重PCR最低可分别检测出200CFU/mL的嗜水气单胞菌、300CFU/mL的维氏气单胞菌和200CFU/mL的鮰爱德华菌;对临床样本的检出率为100%,与传统生物学检测结果的符合率为100%。【结论】建立的多重PCR检测方法特异、灵敏、快速,可单独或同时检测斑点叉尾鮰败血症嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鮰爱德华菌3种主要病原菌,也可以用于其他水生动物上嗜水气单胞菌、维氏气单胞菌和鮰爱德华菌的检测。 展开更多

关键词 斑点叉尾鮰 败血症 嗜水气单胞菌 维氏气单胞菌 鮰爱德华菌 多重PCR

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高饱和比低硅酸率配料方案提升熟料质量的实践

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作者 张德峰 《新世纪水泥导报》 2025年第2期11-15,共5页

为了探讨采用高饱和比低硅酸率配料方案提升熟料质量的实践规律,对水泥行业传统配料方案的不足进行分析,对高饱和比低硅酸率配料方案的理论依据与设计思路进行研究,并结合实际案例详细评估该方案的实施效果。研究结果表明,高饱和比低硅... 为了探讨采用高饱和比低硅酸率配料方案提升熟料质量的实践规律,对水泥行业传统配料方案的不足进行分析,对高饱和比低硅酸率配料方案的理论依据与设计思路进行研究,并结合实际案例详细评估该方案的实施效果。研究结果表明,高饱和比低硅酸率配料方案显著改善了熟料的煅烧性能和物理特性,与原配料方案相比,熟料3 d强度提升5 MPa,28 d强度提升3 MPa,f-CaO合格率提升到90%以上。 展开更多

关键词 水泥生产 熟料质量 配料方案 高饱和比 低硅酸率

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体系对抗条件下雷达装备多粒度建模方法研究

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作者 王振兴 张德锋 +1 位作者 郭金良 刘敏 《计算机与数字工程》 2025年第11期3078-3084,共7页

雷达对抗体系仿真试验需要对装备进行建模,然后借助全数字仿真试验平台开展大样本试验以检验装备作战效能。论文关注于雷达装备多粒度仿真建模和模型应用问题,从雷达对抗全数字仿真平台系统架构、数学仿真试验方法入手,设计了多粒度仿... 雷达对抗体系仿真试验需要对装备进行建模,然后借助全数字仿真试验平台开展大样本试验以检验装备作战效能。论文关注于雷达装备多粒度仿真建模和模型应用问题,从雷达对抗全数字仿真平台系统架构、数学仿真试验方法入手,设计了多粒度仿真模型结构,并分别针对信号级和功能级核心算法模型进行详细设计。论文设计的仿真模型架构可为雷达装备全数字仿真模型提供依据,为仿真平台开发提供参考。 展开更多

关键词 体系对抗 雷达装备 多粒度 建模方法

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型钢混凝土柱设计方法与施工工艺研究 被引量：8

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作者 杨毅超 顾征宇 +3 位作者 潘钻峰 张德锋 朱亚智 王超维 《建筑施工》 2020年第1期41-44,共4页

为探索型钢混凝土柱的设计方法与施工工艺,分别对轴心受压、偏心受压的正截面承载力和斜截面承载力进行分析,给出了建议的承载力计算公式,并绘制了实用的简化型钢混凝土柱表供设计使用;对型钢混凝土柱的保护层厚度、最小配箍率、轴压比... 为探索型钢混凝土柱的设计方法与施工工艺,分别对轴心受压、偏心受压的正截面承载力和斜截面承载力进行分析,给出了建议的承载力计算公式,并绘制了实用的简化型钢混凝土柱表供设计使用;对型钢混凝土柱的保护层厚度、最小配箍率、轴压比进行了研究,从构造要求上对型钢混凝土柱的抗震性能进行控制;同时,总结了型钢混凝土柱的关键施工工艺,并对施工中可能遇到的钢筋冲突问题给出了建议。 展开更多

关键词 型钢混凝土柱 设计方法 施工工艺 承载力

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乡村振兴战略背景下农民专业合作社“农民本位”的制度回归 被引量：9

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作者 张德峰 谭赛 《新视野》 CSSCI 北大核心 2023年第3期93-102,共10页

在合作制的根本要求及农村地区内源性发展的现实需要下,农民专业合作社以“服务农民社员”为根本宗旨,该宗旨决定了合作社的制度构建应最大限度地维护农民社员权益,以农民社员为本位。但目前,农民社员在农民专业合作社中正面临农治虚化... 在合作制的根本要求及农村地区内源性发展的现实需要下,农民专业合作社以“服务农民社员”为根本宗旨,该宗旨决定了合作社的制度构建应最大限度地维护农民社员权益,以农民社员为本位。但目前,农民社员在农民专业合作社中正面临农治虚化、农享偏离、农育不足的现实困境。从立法层面看,加强对附加表决权授予及行使的规制、强调基本分配原则并规定相应法律责任、明确社员受教育与培训权并保障经费来源是破解上述困境、使农民专业合作社制度回归农民本位的有效之法。 展开更多

关键词 乡村振兴 农民本位 农民专业合作社法 合作制

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乡村振兴战略背景下农民专业合作社社员资格立法之检视 被引量：4

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作者 张德峰 谭赛 《中南大学学报（社会科学版）》 CSSCI 北大核心 2022年第2期106-115,共10页

合作社社员资格指个体取得社员身份须满足的条件,包括积极资格与消极资格两种。从应然角度看,积极资格包括个体应具有对合作社的利用需求、具备互助合作的基本能力,消极资格包括个体不得损害合作社及其社员利益、不得损害第三人利益和... 合作社社员资格指个体取得社员身份须满足的条件,包括积极资格与消极资格两种。从应然角度看,积极资格包括个体应具有对合作社的利用需求、具备互助合作的基本能力,消极资格包括个体不得损害合作社及其社员利益、不得损害第三人利益和社会公共利益。现行农民专业合作社立法在社员资格设置的内容与方式上均存在不足。为助推农民专业合作社健康发展,助力乡村振兴战略实施,有必要改进现行立法:在社员资格的设置内容上,明确社员利用农民专业合作社服务的具体形式、改变对“农民”的认定方式、放开对自然人社员民事行为能力条件和国籍条件的限制以及增设“不得损害第三人利益和社会公共利益”为消极资格的内容;在社员资格的设置方式上,明确社员资格主要由农民专业合作社及其社员设置。 展开更多

关键词 乡村振兴战略 合作社 社员资格 农民专业合作社法

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制导雷达对抗信号级仿真环境构建方法探讨 被引量：1

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作者 王振兴 张德锋 +1 位作者 刘敏 郭金良 《航天电子对抗》 2024年第4期15-19,共5页

信号级全数字仿真是开展制导雷达干扰对抗效能检验的重要方法,针对制导雷达对抗信号级背靠背全数字仿真试验环境构建问题,从全数字仿真平台架构和试验方法入手,探讨了制导雷达对抗仿真模型体系和仿真模型框架,并对信号级仿真时序和仿真... 信号级全数字仿真是开展制导雷达干扰对抗效能检验的重要方法,针对制导雷达对抗信号级背靠背全数字仿真试验环境构建问题,从全数字仿真平台架构和试验方法入手,探讨了制导雷达对抗仿真模型体系和仿真模型框架,并对信号级仿真时序和仿真模型交互接口进行了初步的研究。 展开更多

关键词 制导雷达 信号级 背靠背 全数字仿真

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吉富尼罗罗非鱼Ikaros基因5′调控区的克隆、序列分析及抗无乳链球菌相关SNP位点筛选 被引量：5

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作者 陈昆平 卢迈新 +5 位作者 刘志刚 高风英 曹建萌 张德锋 李庆勇 胡欣欣 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期237-250,共14页

为获得尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)抗链球菌病相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)标记,本研究通过染色体步移法克隆了尼罗罗非鱼Ikaros基因5′调控区序列,长度为4178 bp,并使用生物信息学软件对Ikaros基... 为获得尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)抗链球菌病相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)标记,本研究通过染色体步移法克隆了尼罗罗非鱼Ikaros基因5′调控区序列,长度为4178 bp,并使用生物信息学软件对Ikaros基因的启动子和转录调控元件进行预测和分析。利用PCR产物直接测序法从亲本(P0)尼罗罗非鱼Ikaros基因5′调控区中筛查到5个SNPs,分别为SNP1(g.562,G>A)、SNP2(g.217,G>T)、SNP3(g.–53,C>T)、SNP4(g.–220,T>C)和SNP5(g.–579,T>C)。利用Snapshot技术对子一代(F1)尼罗罗非鱼易感群体和抗病群体进行相应SNPs的基因分型,分析两个群体遗传多样性参数,结果显示多态信息含量(polymorphism information content,PIC)值在0.0872~0.3747之间,表明Ikaros基因5′调控区中所有SNPs的多态性均较低。Ikaros基因5′调控区SNPs与抗链球菌病性状关联分析结果表明,SNP2、SNP3、SNP4和SNP5的基因型频率和等位基因频率在易感群体和抗病群体中存在显著差异(P<0.05)。连锁不平衡分析结果显示Ikaros基因5′调控区SNPs可形成1个单倍块和5种单倍型,其中GGCTT单倍型与抗病性显著相关(P<0.05),GGTCT和GTCCC单倍型与易感性显著相关(P<0.05)。此外,还发现SNP2和SNP5处于完全连锁状态(r^2=1,LOD=57.25,D′=1),可作为罗非鱼抗链球菌病遗传育种的标签SNP。综上所述,在Ikaros基因5?调控区筛选到4个抗链球菌病相关SNPs和1个单倍型(GGCTT),均可作为尼罗罗非鱼分子育种的候选分子标记。 展开更多

关键词 尼罗罗非鱼 Ikaros基因5′调控区 单核苷酸多态性 无乳链球菌

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不同水温下无乳链球菌在尼罗罗非鱼体内的动态分布及其消除规律 被引量：4

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作者 郭富强 张德锋 +3 位作者 曹建萌 刘志刚 可小丽 卢迈新 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第6期81-88,共8页

本研究以腹腔注射无乳链球菌(Streptococcusagalactiae,WC1535菌株)后的尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus,GIFTstrain)为研究对象,研究不同水温下无乳链球菌在尼罗罗非鱼体内的动态分布及消除规律。首先,分析25℃、29℃和33℃3个实验组... 本研究以腹腔注射无乳链球菌(Streptococcusagalactiae,WC1535菌株)后的尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus,GIFTstrain)为研究对象,研究不同水温下无乳链球菌在尼罗罗非鱼体内的动态分布及消除规律。首先,分析25℃、29℃和33℃3个实验组罗非鱼的感染累积死亡率;其次,对3个实验组罗非鱼进行无乳链球菌的体外分离、培养和计数;然后,分析感染后不同实验组罗非鱼脑、肝脏、脾脏和肾脏组织中无乳链球菌的浓度。结果显示,随着水温的升高罗非鱼的累积死亡率也随之升高,25℃、29℃和33℃组的累积死亡率分别为6.67%、25.56%和78.90%。菌落统计结果显示,随着水温的升高,无乳链球菌在罗非鱼体内的增殖速度加快,同时,单位质量组织(脑、肝脏、脾脏和肾脏)中无乳链球菌的最大载菌量也随之升高。本研究还发现,无乳链球菌在罗非鱼脾脏中的浓度最高,在肾脏中的存活时间最长。综上可知,尼罗罗非鱼感染无乳链球菌后,体内各组织中链球菌的增殖、消除速度均与水温密切相关。本研究为研究无乳链球菌的致病机制奠定基础,也为通过合理调控水温及施药等措施防治尼罗罗非鱼链球菌病的暴发提供科学依据。 展开更多

关键词 温度 尼罗罗非鱼 无乳链球菌 动态分布 消除规律

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论公共卫生法治建设的基本原则

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作者 敖双红 段涵 张德峰 《郑州轻工业大学学报（社会科学版）》 2021年第4期31-38,共8页

在我国《基本医疗卫生与健康促进法》的颁布与实施和新冠肺炎疫情防控取得阶段性成果之后,可以预见,我国的公共卫生法治建设必将会得到更高程度的重视。公共卫生法治建设应遵循保障公民健康、预防为主和政府主导三项基本原则,这些原则... 在我国《基本医疗卫生与健康促进法》的颁布与实施和新冠肺炎疫情防控取得阶段性成果之后,可以预见,我国的公共卫生法治建设必将会得到更高程度的重视。公共卫生法治建设应遵循保障公民健康、预防为主和政府主导三项基本原则,这些原则能够为我国公共卫生法治建设提供价值引领、思想指导和行动指南,推动我国公共卫生事业发展,最终提高全民整体健康水平。 展开更多

关键词 公共卫生 公民健康 预防为主 政府主导

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罗非鱼无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗制备及其免疫效果的研究 被引量：2

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作者 袁玉梅 石存斌 +5 位作者 陶家发 张德锋 孙承文 巩华 黄志斌 赖迎迢 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期9-18,共10页

为研制比无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)单个蛋白抗原免疫效果更佳的多蛋白重组罗非鱼(Oreochromis sp.)链球菌病口服疫苗,该研究利用同源重组法构建表达无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白的pNZ8148-sippgk质粒,通过电转化乳酸乳球菌(La... 为研制比无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)单个蛋白抗原免疫效果更佳的多蛋白重组罗非鱼(Oreochromis sp.)链球菌病口服疫苗,该研究利用同源重组法构建表达无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白的pNZ8148-sippgk质粒,通过电转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000中获得L.lactis NZ9000 pNZ8148-sip-pgk重组乳酸菌,使用nisin诱导表达并进行Western blot鉴定,制备Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗,通过不同免疫次数隔周免疫的方式灌胃罗非鱼。ELISA检测免疫后的血清抗体水平,在灌胃免疫结束后的第18天通过腹腔注射无乳链球菌攻毒获得相对免疫保护率。结果显示,构建的重组乳酸菌诱导表达的蛋白大小为92 kD,与目的蛋白大小一致。与2次免疫比较,3次免疫该融合蛋白乳酸菌疫苗能显著提高罗非鱼的血清抗体水平和对无乳链球菌的免疫保护效果。3次免疫Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌疫苗的血清水平显著高于单一蛋白组和PBS组,其相对免疫保护率最高(45.56%)。 展开更多

关键词 罗非鱼 无乳链球菌 乳酸菌疫苗 融合蛋白 免疫

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维氏气单胞菌弱毒株FS12001及其疫苗对异育银鲫的免疫效果 被引量：1

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作者 王艳娇 张德锋 +7 位作者 任燕 王庆 王英英 李莹莹 潘厚军 石存斌 莫绪兵 尹纪元 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期202-214,共13页

为探究由维氏气单胞菌(Av)弱毒株FS12001制备的疫苗免疫效果,将Av弱毒株FS12001制备活疫苗、灭活疫苗、ISA763A-灭活疫苗和蜂胶-灭活疫苗,腹腔注射免疫异育银鲫,同时设ISA763A佐剂、蜂胶佐剂及0.65%NaCl作为对照组。于免疫后1、3、5、7... 为探究由维氏气单胞菌(Av)弱毒株FS12001制备的疫苗免疫效果,将Av弱毒株FS12001制备活疫苗、灭活疫苗、ISA763A-灭活疫苗和蜂胶-灭活疫苗,腹腔注射免疫异育银鲫,同时设ISA763A佐剂、蜂胶佐剂及0.65%NaCl作为对照组。于免疫后1、3、5、7和14 d经实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脾脏组织中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量;于免疫后7、14、21、28、42和48 d尾静脉采血分离血清,检测IgM抗体水平,测定SOD和LZM酶活性;于免疫28 d后用2株Av强毒株分别攻毒各组实验鱼,连续观察记录7 d,计算各免疫组的相对保护率。结果显示,各免疫组脾脏组织中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量高于对照组,且ISA763A-灭活疫苗组和蜂胶-灭活疫苗组的表达量显著高于其他各实验组。各疫苗免疫组血清特异性抗体水平均显著高于0.65%NaCl对照组和佐剂对照组。各疫苗免疫组的LZM活性均在28 d最高,灭活疫苗组、ISA763A-灭活疫苗组及蜂胶-灭活疫苗组SOD活性均在7 d最高。菌株AVCA07攻毒后,活疫苗组、灭活疫苗组、ISA763A-灭活疫苗组和蜂胶-灭活疫苗组的RPS分别为63%、56%、100%和56%;菌株YC170511攻毒后,以上4个免疫组RPS分别为59%、55%、93%和72%。研究表明,用弱毒株FS12001制备疫苗,注射免疫异育银鲫后均可增加脾脏中IgM、IL-1β及LZM的基因表达量,提高血清抗体水平,增强SOD和LZM酶活性,增强其抵抗Av感染的能力。 展开更多

关键词 异育银鲫 维氏气单胞菌 弱毒株 疫苗 免疫效果

原文传递

光电成像导引头机理和数据融合建模方法 被引量：1

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作者 肖文健 王彦斌 +3 位作者 周含冰 张德锋 蒋成龙 周旋风 《航空兵器》 CSCD 北大核心 2024年第3期101-108,共8页

全数字仿真在光电成像制导武器设计研制、试验鉴定乃至作战训练中都扮演着十分重要的角色。为了解决当前光电成像制导武器全数字仿真试验中缺少导引头数学模型的难题,本文依据数字孪生思想,提出了一种机理与数据融合的光电成像导引头建... 全数字仿真在光电成像制导武器设计研制、试验鉴定乃至作战训练中都扮演着十分重要的角色。为了解决当前光电成像制导武器全数字仿真试验中缺少导引头数学模型的难题,本文依据数字孪生思想,提出了一种机理与数据融合的光电成像导引头建模方法。以典型红外成像导引头为例,基于红外探测识别的基本原理构建了其探测识别过程的机理模型,然后基于红外成像导引头在不同工作场景下的实测数据集,构建了其制导指令数据模型,最后基于该“机理+数据”融合模型,开展了针对固定目标和运动目标两种典型作战场景不同干扰条件下的全数字仿真试验。试验结果表明,机理和数据融合模型能够比较真实地反映红外成像导引头在复杂对抗场景下的性能特征。 展开更多

关键词 光电成像制导 导引头 机理模型 数据模型 融合模型 全数字仿真 制导武器

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系统收敛时间和攻击角度控制的滑模导引律 被引量：1

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作者 张宽桥 张德锋 +1 位作者 王振兴 刘敏 《弹道学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期18-25,共8页

针对打击机动目标带攻击角度约束的导引律设计问题,采用滑模控制理论、任意收敛时间控制方法和干扰观测器,设计了一种攻击角度和收敛时间控制的导引律。根据弹目相对运动关系,将目标机动和建模误差等视为干扰,构建了考虑攻击角度约束的... 针对打击机动目标带攻击角度约束的导引律设计问题,采用滑模控制理论、任意收敛时间控制方法和干扰观测器,设计了一种攻击角度和收敛时间控制的导引律。根据弹目相对运动关系,将目标机动和建模误差等视为干扰,构建了考虑攻击角度约束的制导系统状态方程。分析了任意收敛时间控制方法在干扰情况下的性能,采用滑模控制和干扰观测器对任意收敛时间控制方法进行改进,提升鲁棒性。将该方法用于滑模面和趋近律设计中,采用干扰观测器对系统扰动进行估计,基于滑模控制理论,结合制导控制系统状态方程,推导出了收敛时间和攻击角度可控的滑模导引律。相比有限时间收敛导引律,该导引律的收敛时间和攻击角度可直接设定,无需根据制导参数计算。设置不同的目标机动方式以及不同的攻击角度和收敛时间,进行了多场景的数值仿真。结果表明,所提导引律能够有效实现攻击角度和收敛时间控制,并精确命中目标,同时相比现有导引律其制导性能更佳。 展开更多

关键词 导弹 导引律 攻击角度约束 收敛时间控制 滑模控制 任意时间收敛

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技术董事、技术资源配置与公司成长--基于生命周期的动态研究 被引量：5

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作者 张德锋 王伟 《中国科技论坛》 CSSCI 北大核心 2021年第2期58-68,共11页

本文选取上市公司为样本,以生命周期为研究视角,探索技术董事、技术资源配置对公司成长的动态效应,以厘清技术董事、技术资源与公司成长之间的内在影响机理。研究发现,技术资源配置是技术董事与公司成长之间的部分中介变量,成熟期最明显... 本文选取上市公司为样本,以生命周期为研究视角,探索技术董事、技术资源配置对公司成长的动态效应,以厘清技术董事、技术资源与公司成长之间的内在影响机理。研究发现,技术资源配置是技术董事与公司成长之间的部分中介变量,成熟期最明显,成长期次之,衰退期最弱。立足于创新驱动与转型升级的现实环境,本文结论为公司创新能力提升、技术董事治理及持续发展提供一定参考借鉴。 展开更多

关键词 技术董事 技术资源配置 公司成长 生命周期

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