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水禽细小病毒LAMP及其可视化通用检测方法的建立
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作者 戴银 周慧琴 +9 位作者 谷思琴 胡晓苗 王洁茹 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 赵瑞宏 周学利 侯宏艳 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期63-68,共6页
为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测... 为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测方法,并对2种方法的特异性和灵敏性进行检测。采用常规PCR、LAMP和LAMP-HNB对10份水禽临床样品进行检测,以评估2种方法的实用性。结果显示,LAMP方法的最佳反应温度为65℃、反应时间为60 min。2种方法仅能扩增GPV和MDPV,而对其他5种常见水禽病毒的检测结果均为阴性,最低检出浓度均为1×10-5ng/μL。2种方法与常规PCR的检测结果一致,符合率达100%。结果表明,建立的LAMP方法和LAMP-HNB可视化方法具有灵敏性好、特异性高、仪器要求低和可视化等优点,可为水禽细小病毒的现场快速检测提供技术支撑。 展开更多
关键词 鹅细小病毒(GPV) 番鸭细小病毒(MDPV) NS基因 环介导等温扩增(LAMP) 可视化
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信阳地区散养土鸡禽白血病病毒和马立克病病毒混合感染的分子生物学诊断
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作者 李迎晓 尹磊 +4 位作者 赵瑜 董建国 何书海 曲哲会 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期844-854,共11页
[目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增... [目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增,并对J亚群ALV(ALV-J)gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序,使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。[结果]送检发病鸡腺胃、脾脏肿大,肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性,分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示,扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号:KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号:DQ174459)高度相似,相似性分别为94.6%和99.9%,初步确定分离株为ALV-J和MDV,并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%~94.6%;HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%~99.9%。氨基酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%~91.4%,HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%~99.7%。系统进化树结果显示,HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近,处于同一进化分支;HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支,与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示,HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变;HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变,且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸,与MDV-1型强毒株的特征相符合。[结论]本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染,结果为当地土鸡ALV-J与MDV协同致病机制研究以及混合感染的疫情防控提供重要参考。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(ALV) 马立克病病毒(MDV) GP85基因 MEQ基因 混合感染
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从“被动延续”到“主动衔接”:儿童青少年罕见病延续治疗的临床实践与思考
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作者 常国营 杨帆 +2 位作者 殷蕾 袁加俊 王秀敏 《临床儿科杂志》 北大核心 2025年第10期723-726,共4页
罕见病儿童青少年患者的延续性治疗是全球公共卫生的重要挑战。我国罕见病管理面临医疗体系割裂与政策衔接不足的困境,儿童向成人过渡期存在显著诊疗断层,导致患者无法持续接受有效治疗,生存质量降低;而患者失访率攀升也不利于我国罕见... 罕见病儿童青少年患者的延续性治疗是全球公共卫生的重要挑战。我国罕见病管理面临医疗体系割裂与政策衔接不足的困境,儿童向成人过渡期存在显著诊疗断层,导致患者无法持续接受有效治疗,生存质量降低;而患者失访率攀升也不利于我国罕见病诊疗研究的发展。罕见病诊疗从儿童向成人的过渡,既面临科学层面的问题,也面临机制和体系的挑战。文章基于国内专科医院创新实践及国际经验,系统剖析罕见病延续性治疗的核心障碍与转型路径。本文提出通过政策、技术与临床实践的多维协同,构建覆盖“筛查-干预-康复-随访”的终身管理体系,推动我国罕见病诊疗从“被动延续”向“主动衔接”的战略转型。 展开更多
关键词 罕见病 儿童青少年 过渡期 延续性治疗
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发酵床垫料组成对青脚麻鸡生长性能、消化酶活性、血清生化及免疫指标的影响
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作者 李军 尹磊 +7 位作者 杨莹 胡建新 汤莉 秦清明 梁成成 吴海港 赵梦婷 段文淼 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3047-3058,共12页
【目的】探讨发酵床垫料组成对青脚麻鸡生长性能、消化酶活性、血清生化指标和免疫指标的影响。【方法】选择400羽健康、体重接近的1日龄青脚麻鸡(公母各半),随机分为4组,分别为对照组(水泥地面饲养,不额外添加垫料,仅有饲养过程产生的... 【目的】探讨发酵床垫料组成对青脚麻鸡生长性能、消化酶活性、血清生化指标和免疫指标的影响。【方法】选择400羽健康、体重接近的1日龄青脚麻鸡(公母各半),随机分为4组,分别为对照组(水泥地面饲养,不额外添加垫料,仅有饲养过程产生的鸡粪)、A组(垫料为小麦秸秆)、B组(垫料为河沙)和C组(垫料为小麦秸秆、河沙体积比1∶1混合),各组均不清粪,每7 d喷洒一次活化稀释后的菌液(菌液∶水=1∶20)并翻堆。预饲期7 d,正试期21 d。试验期间,定期观测垫料温度和pH。试验结束时,采用四分法收集各组垫料测定发酵床垫料的有机质、总氮含量和碳氮比(C/N);从每个重复中随机选取2只鸡采血、屠宰,采集血清、胰腺和十二指肠测定青脚麻鸡的血清生化指标和消化酶活性。【结果】各组垫料pH随着肉仔鸡饲养时间的延长,总体呈上升趋势,最终均稳定在7.88~8.03之间,各试验组pH全期相对高于对照组;各试验组垫料温度高于对照组,A组垫料温度最高,升温更快;与对照组相比,A组垫料的含水量显著提高(P<0.05),B和C组垫料含水量和有机质含量显著降低(P<0.05),各试验组垫料总氮含量显著降低(P<0.05),C/N显著提高(P<0.05)。与对照组相比,A、B和C组鸡终末体重和平均日增重显著提高(P<0.05),平均日采食量和料重比差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,各试验组鸡胰腺胰蛋白酶和脂肪酶活性显著升高(P<0.05),B组鸡胰腺α-淀粉酶和十二指肠脂肪酶活性显著升高(P<0.05),C组鸡十二指肠脂肪酶活性和α-淀粉酶活性显著升高(P<0.05)。与对照组相比,B组鸡血清中总蛋白(TP)含量显著增加(P<0.05),C组TP、白蛋白(ALB)和葡萄糖(GLU)含量显著升高(P<0.05),各试验组尿素氮(BUN)含量显著降低(P<0.05);C组鸡血清中TP含量显著高于B组(P<0.05),ALB含量显著高于A和B组(P<0.05);与对照组相比,C组鸡血清中IgA、IgM和IgG含量显著升高(P<0.05)。【结论】以河沙和秸秆制作发酵床垫料可以在一定程度上提高青脚麻鸡的生长性能和肠道消化酶活性,促进机体代谢,增强其免疫功能,其中小麦秸秆与河沙按体积比1∶1混合制作垫料饲养效果更佳。 展开更多
关键词 发酵床垫料 青脚麻鸡 生长性能 消化酶活性 血清生化指标 免疫指标
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非洲猪瘟基因Ⅰ/Ⅱ型重组病毒疫苗研究进展
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作者 戈胜强 吕艳 +10 位作者 左媛媛 于家荣 殷磊 韩秀琚 王筱真 刘珊 郑辉 王晓华 李金明 魏荣 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第3期72-76,共5页
非洲猪瘟病毒(ASFV)重组事件在临床中并不是偶然现象,它是造成ASFV遗传多样性的原因之一,但是以基因Ⅰ型和基因Ⅱ型为母本病毒,发生“嵌合式重组”尚属首次发现。目前,对于中国、越南和俄罗斯报道的重组毒均已开展过攻毒试验,证实重组... 非洲猪瘟病毒(ASFV)重组事件在临床中并不是偶然现象,它是造成ASFV遗传多样性的原因之一,但是以基因Ⅰ型和基因Ⅱ型为母本病毒,发生“嵌合式重组”尚属首次发现。目前,对于中国、越南和俄罗斯报道的重组毒均已开展过攻毒试验,证实重组毒致病力较强且同居感染能力较强。同时中国和越南实验室均对重组毒进行了在研/在售疫苗的攻毒保护评价,证实基因Ⅱ型弱毒疫苗不能抵御重组毒攻击,这对ASFV重组病毒疫苗研究提出了新的挑战。本文通过总结已发表的ASFV重组毒动物实验数据,进一步分析该病毒感染特点,总结该病毒疫苗研究进展,以期为国内相关研究和防控措施制定提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 重组病毒 疫苗研发
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徽州民俗“轩辕车会”传承的创新性发展路径——基于传承人口述史视角分析
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作者 尹雷 余涛 +2 位作者 孙继龙 王运良 李勇 《安徽师范大学学报(自然科学版)》 2025年第2期182-187,共6页
为更好地厘清徽州民俗“轩辕车会”的传承脉落,本文采用文献资料、田野调查和口述史等研究方法,基于传承人口述史视角对徽州民俗“轩辕车会”传承现状及困境进行研究。研究认为:新时代文化特征对“轩辕车会”的传承方式产生较大影响;“... 为更好地厘清徽州民俗“轩辕车会”的传承脉落,本文采用文献资料、田野调查和口述史等研究方法,基于传承人口述史视角对徽州民俗“轩辕车会”传承现状及困境进行研究。研究认为:新时代文化特征对“轩辕车会”的传承方式产生较大影响;“轩辕车会”传播途径主要包括民间口传记忆、演出、培训、学校等;在传承过程中存在原貌及特征改变、经费不足、传承人断层严重等问题。据此,应该加强对轩辕车会的文化保护、政策扶持与新媒体的结合,本真与创新的融合。塑造民俗品牌文化,提升传承人文化素养,保护传承人生存空间和代际梯队建设,才能促进民俗“轩辕车会”的有效传承与创新发展。 展开更多
关键词 徽州民俗 轩辕车会 传承困境 创新性发展
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基于改进特征交叉算法的风电机组齿轮箱状态监测
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作者 刘长良 田雯雯 +2 位作者 张书瑶 尹磊 刘帅 《动力工程学报》 北大核心 2025年第7期1072-1081,1090,共11页
针对风电机组监控与数据采集(SCADA)数据间存在的非线性关联问题,引入特征交叉机制并进行改进,将其应用于风电机组齿轮箱状态监测领域。首先,提出一种两阶段交叉特征选择方法,该方法综合考虑了变量间的因果性、相关性及数据分布差异,以... 针对风电机组监控与数据采集(SCADA)数据间存在的非线性关联问题,引入特征交叉机制并进行改进,将其应用于风电机组齿轮箱状态监测领域。首先,提出一种两阶段交叉特征选择方法,该方法综合考虑了变量间的因果性、相关性及数据分布差异,以筛选具有强隐藏关联且低冗余度的特征进行交叉;其次,对因子分解机进行改进,仅将交叉特征组内的基准变量与其余变量进行交叉,在生成合理交叉特征的同时显著缩短了生成时间;最后,将改进特征交叉算法用于某风电场齿轮箱状态监测任务中。结果表明:所提方法与五种模型相结合均能取得优异效果,显著提升了模型监测性能。 展开更多
关键词 非线性 特征交叉 转移熵 因子分解机 状态监测
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信阳市罗山县鸡滑液囊支原体PCR检测及VlhA基因序列分析
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作者 李迎晓 尹磊 +2 位作者 胡玉曼 赵瑜 焦凤超 《家禽科学》 2025年第2期19-25,共7页
为了解信阳市罗山县MS流行状况和流行株的分子特征,本研究应用PCR方法对罗山县部分蛋鸡养殖场进行鸡滑液囊支原体病原检测,并对阳性样品VlhA基因进行序列分析。结果表明,从48份样品检测出3份MS阳性样品;VlhA基因序列分析表明,3个流行株... 为了解信阳市罗山县MS流行状况和流行株的分子特征,本研究应用PCR方法对罗山县部分蛋鸡养殖场进行鸡滑液囊支原体病原检测,并对阳性样品VlhA基因进行序列分析。结果表明,从48份样品检测出3份MS阳性样品;VlhA基因序列分析表明,3个流行株与国内流行的K基因型MS参考株具有高度相似性;VlhA基因推导氨基酸序列分析表明,3个流行株与国内流行的MS具有高度同源性;氨基酸变异位点分析发现,H2 MS阳性样品在第43、45位出现突变与缺失。研究结果为罗山地区MS流行病学研究提供了一定的参考。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 PCR检测 VlhA基因 序列分析能
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针对性康复及听觉辨别训练对功能性构音障碍儿童言语清晰度的影响 被引量:4
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作者 徐丽丽 尹蕾 尚红燕 《中国听力语言康复科学杂志》 2025年第2期136-139,共4页
目的 观察针对性康复训练及听觉辨别训练对功能性构音障碍(functional articulation disorder,FAD)儿童言语清晰度的影响。方法 选取202例功能性构音障碍儿童,随机分为对照组(102例)与研究组(100例),对照组进行常规语言训练,研究组进行... 目的 观察针对性康复训练及听觉辨别训练对功能性构音障碍(functional articulation disorder,FAD)儿童言语清晰度的影响。方法 选取202例功能性构音障碍儿童,随机分为对照组(102例)与研究组(100例),对照组进行常规语言训练,研究组进行针对性康复训练及听觉辨别训练,对比干预结果。结果 研究组构音障碍改善情况明显优于对照组(P<0.05),治疗后,两组患儿声学指标明显提升,且研究组高于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿口部运动功能评分明显提升,且研究组构音清晰度及唇部、舌部、下颌运功功能高于对照组(P<0.05)。结论 针对性康复训练及听觉辨别训练可提高构音障碍儿童的言语清晰度,改善构音障碍情况。 展开更多
关键词 针对性康复训练 听觉辨别训练 功能性构音障碍儿童 言语清晰度
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2020年湖南省居民脑卒中高危人群危险因素暴露情况分析 被引量:1
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作者 李程凌 殷黎 +3 位作者 殷蕾 张译匀 熊文婧 让蔚清 《实用预防医学》 2025年第6期646-651,共6页
目的分析湖南省脑卒中高危人群危险因素的暴露水平及其分布特征,为脑卒中高危人群干预管理提供科学依据。方法依托2020年脑卒中高危人群筛查与干预项目,在湖南省10个市州14家项目执行医院,用整群抽样的方法对40岁及以上常住居民进行问... 目的分析湖南省脑卒中高危人群危险因素的暴露水平及其分布特征,为脑卒中高危人群干预管理提供科学依据。方法依托2020年脑卒中高危人群筛查与干预项目,在湖南省10个市州14家项目执行医院,用整群抽样的方法对40岁及以上常住居民进行问卷调查、体格检查和实验室检查。采用χ^(2)检验、logistic回归进行比较分析。结果2020年累计完成调查49587人,筛出脑卒中高危人群12327人,检出率为24.86%,其中男性(31.82%)高于女性(19.77%)(χ^(2)=968.638,P<0.001),且在不同年龄、婚姻状态、教育情况、职业和收入间存在差异。脑卒中高危人群中危险因素的暴露率前4位分别是高血压(81.43%)、血脂异常(73.77%)、缺乏运动(49.15%)、糖尿病(43.80%)。高血压、血脂异常、缺乏运动、糖尿病、吸烟史的累积暴露率为82.17%。除吸烟史男性暴露率(59.92%)高于女性(2.58%)外,其余危险因素暴露率均为女性高于男性。高血压暴露率随着年龄的升高而增加,80岁及以上高血压(90.43%)、缺乏运动(65.87%)暴露率最高,40~49岁血脂异常暴露率最高(78.61%),60~69岁糖尿病暴露率最高(49.00%)。结论湖南省脑卒中的防治形势仍然严峻,脑卒中高危因素以高血压病、血脂异常、缺乏运动和糖尿病为主,应加大对这些危险因素的干预和管理,进一步提高脑卒中防治的能力和水平。 展开更多
关键词 脑卒中 高危人群 危险因素 筛查
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1株多重耐药鸡源印第安纳沙门菌特性与全基因组测序分析
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作者 沈学怀 赵瑞宏 +8 位作者 尹磊 侯宏艳 戴银 胡晓苗 殷冬冬 王洁茹 潘孝成 周学利 刘永杰 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第4期60-70,共11页
鸡源沙门菌不仅会引起鸡的感染发病,还会威胁食品和公共卫生安全。本研究从安徽肥东地区1只疑似沙门菌感染病鸡组织中分离出1株沙门菌,命名为SM24,评价该菌株的生长曲线,测定菌株致病性和半数致死量(LD50),用Kirby-Bauer法对分离株进行... 鸡源沙门菌不仅会引起鸡的感染发病,还会威胁食品和公共卫生安全。本研究从安徽肥东地区1只疑似沙门菌感染病鸡组织中分离出1株沙门菌,命名为SM24,评价该菌株的生长曲线,测定菌株致病性和半数致死量(LD50),用Kirby-Bauer法对分离株进行耐药性测试;通过全基因组测序构建分离株基因图谱,分析其携带的毒力和耐药基因特征。结果:分离株在LB培养基中生长良好;对SPF雏鸡具有明显的致病性,LD50为8.50×10^(5) CFU;SM24为多重耐药菌株,对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、四环素类、磺胺类以及新霉素、庆大霉素、阿奇霉素和氨曲南等16种抗生素表现耐药,对大观霉素、阿米卡星、氯霉素、氟苯尼考、亚胺培南和多黏菌素B敏感;全基因组测序分析表明,SM24为印第安纳血清型沙门菌(Salmonella Indiana),序列型为ST17,基因组大小为4865511 bp,GC含量为51.96%,携带一个IncHI2质粒,大小为165044 bp;SM24菌株基因组中携带280个毒力相关基因和144个耐药基因,其中整合移动元件(IME)位点和质粒上存在12个耐药基因;SM24菌株与国内报道的鸡源印第安纳沙门菌的遗传距离较远。综上,本研究分离鉴定到1株鸡源印第安纳沙门菌株,具有较强的毒力和多重耐药性,同时解析了菌株的全基因组特征,为深入研究印第安纳沙门菌的致病和耐药机制提供参考。 展开更多
关键词 鸡源印第安纳沙门菌 致病性 耐药性 毒力基因 耐药基因 全基因组测序
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非洲猪瘟病毒感染诱导猪体内细胞因子表达变化的研究进展
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作者 殷磊 李志娟 +5 位作者 左媛媛 戈胜强 李桂梅 初薛霏 李金明 王志亮 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期119-126,共8页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、高度致死性传染病,已对全球养猪业造成巨大经济损失。由于目前市场上仍没有安全有效的疫苗和治疗药物,深入研究该病的发病机制和宿主的免疫应答对其防控具有重要意义。细胞因子作... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、高度致死性传染病,已对全球养猪业造成巨大经济损失。由于目前市场上仍没有安全有效的疫苗和治疗药物,深入研究该病的发病机制和宿主的免疫应答对其防控具有重要意义。细胞因子作为免疫调节的关键介质,其动态变化不仅能反映机体的免疫状态,更可为揭示病毒与宿主免疫系统的相互作用机制提供重要线索。本文对猪感染ASFV后细胞因子变化趋势的研究进展进行了综述,系统分析了ASFV感染与细胞因子变化趋势的关系,以期为深入探究猪感染ASFV后体内免疫应答相关机制提供新的研究思路和理论依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(ASFV) 细胞因子 白细胞介素 干扰素
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禽腺病毒血清4型感染LMH细胞的环状RNA表达分析
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作者 殷冬冬 朱梦琪 +7 位作者 兰梦蝶 朱星星 尹磊 沈学怀 王洁茹 赵瑞宏 戴银 潘孝成 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期219-224,共6页
为分析禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染鸡肝癌细胞(LMH)后环状RNA(circRNA)的表达谱变化,进一步研究circRNA在FAdV-4感染过程中的调控作用,以FAdV-4感染的LMH和未感染细胞为对象进行转录组测序,对差异表达circRNA进行GO功能和KEGG信号通路... 为分析禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染鸡肝癌细胞(LMH)后环状RNA(circRNA)的表达谱变化,进一步研究circRNA在FAdV-4感染过程中的调控作用,以FAdV-4感染的LMH和未感染细胞为对象进行转录组测序,对差异表达circRNA进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对随机挑选的5个circRNA进行验证。结果表明,感染组和未感染组的circRNA分布于绝大多数染色体上,且长度主要集中在300~1000 bp。差异表达分析筛选出72个circRNA,32个circRNA表达水平显著上调,40个circRNA表达水平下调。GO功能分析,差异circRNA来源基因主要富集在细胞过程、代谢过程、催化活性和核酸结合转录因子活性等进程。KEGG通路分析显示,差异表达circRNA主要富集在Notch信号通路、RNA降解和MAPK信号通路。qRT-PCR结果表明,被验证的5个circRNA表达水平与测序结果趋势一致,进一步验证了测序结果的可靠性。本研究对FAdV-4感染LMH细胞的circRNA表达谱进行分析,并筛选出差异表达的circRNA,为探究circRNA在FAdV-4感染过程中的功能及宿主与FAdV-4互作机制提供数据支持。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 LMH细胞 转录组测序 环状RNA 差异表达
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新型鹅星状病毒AH-2021株的分离鉴定及其VP27-VP34蛋白多克隆抗体的制备
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作者 殷冬冬 朱星星 +7 位作者 兰梦蝶 彭梦玲 尹磊 戴银 沈学怀 王洁茹 赵瑞宏 潘孝成 《华北农学报》 北大核心 2025年第2期210-217,共8页
为分析安徽六安地区新型鹅星状病毒(GAstV)的变异情况并表达其VP27-VP34蛋白,从六安某养殖场采集鹅痛风病料,经RT-PCR检测为阳性后,首先对鹅胚传代培养分离病毒,其次对分离毒株进行动物回归试验、全基因组扩增测序及遗传进化分析;随后,... 为分析安徽六安地区新型鹅星状病毒(GAstV)的变异情况并表达其VP27-VP34蛋白,从六安某养殖场采集鹅痛风病料,经RT-PCR检测为阳性后,首先对鹅胚传代培养分离病毒,其次对分离毒株进行动物回归试验、全基因组扩增测序及遗传进化分析;随后,将分离株的VP27-VP34序列克隆至pCold-TF载体进行诱导表达,并将纯化后的重组蛋白免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备多克隆抗体。通过间接免疫荧光(IFA)检测多克隆抗体特异性,利用琼脂扩散法检测血清抗体效价。结果表明,从临床病料样本中分离到1株鹅星状病毒,命名为AH-2021株。动物回归试验可见雏鹅心脏、肝脏表面尿酸盐沉积明显,肾脏发白、肿胀。遗传进化结果显示,AH-2021株属于GAstV-1,与GenBank中的其他GAstV-1相似性为98.0%~99.0%。重组表达载体pCold-TF-VP27-VP34经IPTG诱导获得了目的蛋白,SDS-PAGE显示,重组蛋白分子质量约为110 ku,主要以上清形式存在。IFA试验结果显示,制备的多克隆抗体能够特异性识别新型鹅星状病毒,琼脂扩散结果显示,抗体效价可达1∶16。综上所述,从临床痛风雏鹅中分离鉴定到1株新型鹅星状病毒AH-2021株,动物回归试验表明,新型鹅星状病毒是导致雏鹅痛风的病原,制备了VP27-VP34融合蛋白的多克隆抗体。 展开更多
关键词 新型鹅星状病毒 VP27-VP34融合蛋白 分离鉴定 原核表达 多克隆抗体
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抗猪流行性腹泻病毒药物研究进展
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作者 郝小龙 曾晓雨 +7 位作者 武卓雅 刘亚云 戴银 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 王洁茹 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第6期83-86,共4页
猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护... 猪流行性腹泻病是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以急性水样腹泻、呕吐、脱水为主要症状的一种急性肠道传染病。仔猪最易感,死亡率可高达100%,严重影响养猪业健康发展。RNA病毒变异性高导致现有疫苗无法对PEDV流行毒株提供有效免疫保护,导致防控困难。开发新型抗PEDV药物成为当前研究的重要方向。本文综述讨论了病毒和宿主靶向PEDV药物的抗病毒疗效和机制,以期为PEDV的临床用药提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 药物 病毒靶向 宿主靶向 临床应用
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四逆散及其药食同源替代方对四氯化碳损伤HepG2细胞的保护作用
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作者 吴杰 王婉琦 +7 位作者 任志斌 尹雷 仲米存 王召君 陈秋铭 陈洁 曾茂茂 何志勇 《食品工业科技》 北大核心 2025年第21期405-415,共11页
中医理论驱动的天然药物研究与开发是治疗肝损伤的可行方法,然而依据中药复方开发具有护肝功能的食品研究较少。本文基于网络药理学,使用栀子、桑叶、金银花等药食同源材料替换经典护肝方四逆散(SNS)中的中药原料柴胡,得到栀子替代方(Z... 中医理论驱动的天然药物研究与开发是治疗肝损伤的可行方法,然而依据中药复方开发具有护肝功能的食品研究较少。本文基于网络药理学,使用栀子、桑叶、金银花等药食同源材料替换经典护肝方四逆散(SNS)中的中药原料柴胡,得到栀子替代方(ZZT)、桑叶替代方(SYT)和金银花替代方(RDT),进一步研究了不同浓度(100和200μg/mL)的替代方对0.6%四氯化碳(CCl_(4))溶液处理24 h的HepG2细胞的影响。结果表明:四逆散及其替代方干预均可显著(P<0.05)降低细胞丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的升高,最高可分别降低至模型组的26.57%(SNS)、68.98%(RDT)和34.00%(RDT),同时,可显著(P<0.05)提升其超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)水平,最高分别可达到模型组的223.76%(SNS)、120.74%(RDT)和182.67%(RDT)。基因和蛋白表达分析发现,四逆散及其替代方干预后可显著(P<0.05)上调细胞的Nrf2、HO-1、Keap1、AKT等基因的表达水平,最高分别可达模型组的820.48%(SYT)、246.31%(RDT)、270.15%(SYT)、222.44%(SYT),四逆散及其替代方的干预可引起细胞Keap1、Nrf2、HO-1、AKT(ZZT除外)、Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05),Caspase-3、Bax蛋白表达下调(P<0.05),同时可以显著(P<0.01)降低细胞的凋亡率。这些结果表明,四逆散及其替代方可通过控制氧化应激与细胞凋亡抵抗CCl_(4)对细胞的毒性作用,性味归经理论及网络药理学分析可以用于指导功能性食品的开发。 展开更多
关键词 四逆散 药食同源材料 HEPG2 四氯化碳肝损伤 抗氧化
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基于海马体MRI影像组学模型预测2型糖尿病患者认知功能障碍的价值
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作者 尹磊 许志高 +1 位作者 曹米兰 王强 《磁共振成像》 北大核心 2025年第5期80-87,共8页
目的建立基于海马MRI影像组学的预测模型,以评估2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的认知功能水平属于认知正常(cognitive normal,CN)、轻度认知障碍(mildly cognitively impaired,MCI)还是痴呆(dementia,Dem)。材料与方法... 目的建立基于海马MRI影像组学的预测模型,以评估2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的认知功能水平属于认知正常(cognitive normal,CN)、轻度认知障碍(mildly cognitively impaired,MCI)还是痴呆(dementia,Dem)。材料与方法回顾性纳入140例T2DM患者的临床资料和MRI影像资料,根据蒙特利尔认知评估量表北京版(Montreal Cognitive Assessment Beijing version,MoCA-B)评分分为CN组、MCI组及Dem组,按照7∶3的比例随机分配至训练集(n=98)和测试集(n=42)以验证模型性能。使用联影智能平台(u AI Research Portal,uRP)勾画左右海马体感兴趣区(region of interest,ROI),提取影像组学特征,用方差阈值法和特征权重评估算法(Relief)进行特征降维,将其MRI影像组学特征使用十二个分类器构建机器学习(machine learning,ML)模型,并采用混淆矩阵评估分类模型性能。在训练数据中探讨最优截止点和调整参数,并在试验数据中对模型进行进一步评价。通过比较各分类器曲线下面积(area under the curve,AUC)确定最佳算法。结果从海马MRI的2313个原始组学特征中通过K-best选择方法确定了10个关键特征,进一步应用Select KBest,最终识别出2个最优特征。在CN组、MCI组、Dem组中使用十二个分类器进行训练时,二次判别分析(quadratic discriminant analysis,QDA)算法在分类器中表现最佳,训练集各组的AUC分别为0.869、0.854和0.893;测试集各组的AUC分别为0.819、0.779和0.811。结论基于海马MRI的QDA模型对T2DM患者认知功能障碍及其严重程度具有预测价值。 展开更多
关键词 2型糖尿病 认知功能障碍 磁共振成像 影像组学 海马体 预测
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六神曲可溶性多糖抗氧化活性及近红外光谱快速定量分析
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作者 栗嘉淇 刘威 +4 位作者 郑威 尹磊 孔兵 朱月健 许枬 《饲料研究》 北大核心 2025年第9期97-104,共8页
试验旨在探索六神曲可溶性多糖的抗氧化活性,建立快速定量分析方法,为六神曲质量控制与健脾作用机制提供参考。采用体外自由基清除试验和体内抗氧化活性测试,评价六神曲可溶性多糖的抗氧化活性。采用近红外光谱技术结合最小偏二乘法(PL... 试验旨在探索六神曲可溶性多糖的抗氧化活性,建立快速定量分析方法,为六神曲质量控制与健脾作用机制提供参考。采用体外自由基清除试验和体内抗氧化活性测试,评价六神曲可溶性多糖的抗氧化活性。采用近红外光谱技术结合最小偏二乘法(PLS),通过对63批六神曲样品的分析,建立了可溶性多糖含量的快速分析模型,并以12批样品进行模型的外部验证。结果显示,六神曲可溶性多糖能够有效清除2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS)、羟基自由基和超氧阴离子自由基,提高Fe3+总还原能力。六神曲可溶性多糖能够回调脾虚小鼠血清中丙二醛(MDA)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。近红外定量模型的相关系数为0.9927,校正集均方根误差(RMSEC)为0.298,验证集均方根误差(RMSEP)为0.184,验证集样品的平均相对偏差小于2%。研究表明,六神曲可溶性多糖具有良好的抗氧化活性和健脾作用,所建立的近红外定量模型预测准确性良好,可用于六神曲可溶性多糖含量的快速测定。 展开更多
关键词 六神曲 可溶性多糖 抗氧化 近红外光谱 快速含量测定
原文传递
NaN_(5)/GO复合含能材料的制备及其性能
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作者 尹磊 秦凯毅 +1 位作者 陆明 林秋汉 《含能材料》 北大核心 2025年第5期497-504,共8页
五唑钠(NaN_(5))是一种具有高能量密度、较快能量释放速率的高能含氮化合物,其燃烧会产生大量的气体,但其燃烧速率慢、敏感性高、难以自持燃烧。为此,研究提出了基于NaN_(5)和氧化石墨烯(GO)、聚多巴胺(PDA)配位络合物策略,采用溶剂挥... 五唑钠(NaN_(5))是一种具有高能量密度、较快能量释放速率的高能含氮化合物,其燃烧会产生大量的气体,但其燃烧速率慢、敏感性高、难以自持燃烧。为此,研究提出了基于NaN_(5)和氧化石墨烯(GO)、聚多巴胺(PDA)配位络合物策略,采用溶剂挥发和共沉淀法获得一系列NaN_(5)复合含能材料。通过扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS)确定含能材料的形貌和结构,通过同步热分析(TG-DSC)和反应动力学模拟讨论了材料的热分解性能和机理,通过热丝点火确定NaN_(5)的燃烧爆炸性能。结果表明,NaN_(5)-3%GO-1%PDA的结构从立方晶体优化为多孔褶皱层状,材料之间紧密结合;NaN_(5)-3%GO-1%PDA与NaN_(5)的热分解相比,逐级分解温差缩小了61.1℃,活化能降低30.7 kJ·mol^(-1),爆轰增长时间从33.33μs缩减到16.67μs,证明了NaN_(5)-3%GO-1%PDA具备更快的能量释放速率。 展开更多
关键词 五唑 GO 共沉淀法 点火 动力学
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六神曲低聚糖的制备及其肠道保护作用
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作者 孔兵 尹磊 +4 位作者 郑威 刘威 栗嘉淇 朱月健 许枬 《饲料工业》 北大核心 2025年第9期76-86,共11页
试验旨在研究六神曲低聚糖制备工艺及其肠道保护作用。以低聚糖得率为指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法优化最佳提取工艺,结合树脂法纯化低聚糖。以三氟醋酸水解法,分析其单糖组成。采用体内外试验结合的方法,考察六神... 试验旨在研究六神曲低聚糖制备工艺及其肠道保护作用。以低聚糖得率为指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法优化最佳提取工艺,结合树脂法纯化低聚糖。以三氟醋酸水解法,分析其单糖组成。采用体内外试验结合的方法,考察六神曲低聚糖对自由基的清除作用、对双歧杆菌(Bifidobacterium)F-35增殖作用,以及对阿司匹林所致胃肠损伤小鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量的影响。结果表明:(1)在90℃条件下,用料液比1∶18 g/mL的80%乙醇提取对六神曲提取1.6 h,提取液采用XAD-2树脂与WA30树脂联合除杂。所得六神曲低聚糖纯度可达82.72%,单糖组成以木糖、阿拉伯糖与葡萄糖为主。(2)该低聚糖能有效清除超氧阴离子、羟自由基和2,2,5,5-四甲基-4-苯基-3-咪唑-1-氧自由基(PTIO),可促进B.bifidum F-35的增殖,且能回调阿司匹林所致胃肠损伤小鼠的体重降低和血清TNF-α水平,改善空肠和回肠中MDA含量和SOD活性。由此可见,醇提取与树脂纯化法结合可有效获得六神曲低聚糖,其具有抗氧化、抗炎、促进益生菌生长等保护肠道健康作用。 展开更多
关键词 六神曲 低聚糖 制备工艺 肠道保护 双歧杆菌
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