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过表达ace-miR-14-y对中华蜜蜂工蜂幼虫靶基因表达及个体和肠道重量的影响 被引量:1
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作者 徐国钧 刘小玉 +7 位作者 刘治滩 任亚萍 康婧 宓诗雨 胡艳雯 刘彩珍 陈大福 郭睿 《应用昆虫学报》 北大核心 2025年第1期114-122,共9页
【目的】探究过表达ace-miR-14-y对中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫靶基因表达及个体和肠道重量的影响,进而揭示ace-miR-14-y的潜在调控作用。【方法】使用茎环RT-PCR和Sanger测序验证ace-miR-14-y的表达和序列。采用相关软件预测... 【目的】探究过表达ace-miR-14-y对中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫靶基因表达及个体和肠道重量的影响,进而揭示ace-miR-14-y的潜在调控作用。【方法】使用茎环RT-PCR和Sanger测序验证ace-miR-14-y的表达和序列。采用相关软件预测和分析ace-miR-14-y的靶基因。通过饲喂模拟物(Mimic)进行幼虫肠道中ace-miR-14-y的过表达。利用RT-qPCR检测ace-miR-14-y的过表达效果及过表达ace-miR-14-y后靶基因的相对表达量。使用电子天平对幼虫个体和肠道进行称重。【结果】ace-miR-14-y在工蜂幼虫肠道中存在和表达;ace-miR-14-y共靶向265个基因,涉及33个GO条目与180条KEGG通路;mimic-miR-14组ace-miR-14-y的表达量显著高于mimic-NC组(P<0.05);过表达ace-miR-14-y后,靶基因Wg和AP-1的表达量均显著下调(P<0.05),幼虫个体和肠道的重量均极显著上升(P<0.01)。【结论】过表达ace-miR-14-y显著影响中华蜜蜂工蜂幼虫肠道中靶基因Wg和AP-1的表达及幼虫个体和肠道的重量,ace-miR-14-y通过调节Wg和AP-1表达发挥潜在的调控作用。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 幼虫 ace-miR-14-y 过表达 靶基因
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中华蜜蜂14-3-3ζ基因的克隆、分子特征及时空表达谱分析
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作者 陈颖 康婧 +8 位作者 臧贺 王勇杰 张凯遥 叶道有 冯睿蓉 陈大福 徐国钧 郭睿 邱剑丰 《昆虫学报》 北大核心 2025年第8期1031-1039,共9页
【目的】本研究旨在丰富中华蜜蜂Apis cerana cerana 14-3-3ζ基因的基本信息,为其进一步的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增14-3-3ζ基因的编码序列(coding sequence,CDS),再进行TA克隆和Sanger测序;使用相关软件预测14-3-... 【目的】本研究旨在丰富中华蜜蜂Apis cerana cerana 14-3-3ζ基因的基本信息,为其进一步的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增14-3-3ζ基因的编码序列(coding sequence,CDS),再进行TA克隆和Sanger测序;使用相关软件预测14-3-3ζ的理化性质和分子特征,并对14-3-3ζ进行系统进化分析;利用RT-qPCR检测14-3-3ζ基因在中华蜜蜂不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、中肠、脂肪体、咽下腺、脑、表皮和毒腺)及蜜蜂球囊菌Ascospaera apis接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量。【结果】成功克隆到中华蜜蜂14-3-3ζ基因的CDS,含744个核苷酸,编码247个氨基酸,中华蜜蜂14-3-3ζ的分子量约为28.0 kD,含26个磷酸化位点、4个结构域和1个保守基序,不含跨膜结构域与信号肽;中华蜜蜂、西方蜜蜂Ap.mellifera、黑大蜜蜂Ap.laboriosa、小蜜蜂Ap.florea、芦蜂Ceratina calcarata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、地熊蜂B.terrestris、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、壁蜂Osmia lignaria和东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa 14-3-3ζ均包含4个相同的保守基序和1个相同的结构域(14-3-3_1),中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ在系统进化树上聚为一支。14-3-3ζ基因在中华蜜蜂卵中的表达量显著高于3日龄幼虫、1和2日龄预蛹及4日龄蛹中的表达量,在中华蜜蜂各日龄工蜂成虫体内的表达量无显著差异;14-3-3ζ基因的表达量在中华蜜蜂刚出房工蜂成虫毒腺中最高,且显著高于触角、中肠、咽下腺、脑、表皮和脂肪体中的表达量;蜜蜂球囊菌接种中华蜜蜂工蜂3日龄幼虫后,14-3-3ζ基因在中华蜜蜂工蜂4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量与对照组比显著下调。【结论】中华蜜蜂14-3-3ζ基因在工蜂的毒腺和卵中特异性高量表达,幼虫肠道中14-3-3ζ基因的表达在蜜蜂球囊菌侵染过程中被激活,14-3-3ζ是一种潜在的亲水性、非跨膜和胞内蛋白,中华蜜蜂与上述其他10种蜂的14-3-3ζ较为保守,中华蜜蜂和西方蜜蜂的14-3-3ζ之间亲缘关系最近。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 14-3-3 分子特征 表达模式 蜜蜂球囊菌
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意大利蜜蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达微小RNA及其靶基因分析 被引量:14
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作者 郭睿 杜宇 +9 位作者 周倪红 刘思亚 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 王海朋 耿四海 周丁丁 陈大福 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期49-60,共12页
【目的】蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称球囊菌)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫肠道的致死性真菌病原。微小RNA(microRNA,mi RNA)是一种在转录后水平对m RNA进行负调控的关键调控因子。本研究旨在对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简... 【目的】蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis(简称球囊菌)是一种特异性侵染蜜蜂幼虫肠道的致死性真菌病原。微小RNA(microRNA,mi RNA)是一种在转录后水平对m RNA进行负调控的关键调控因子。本研究旨在对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的差异表达mi RNAs(DEmiRNAs)及其靶基因进行深入分析,为揭示DEmiRNAs在胁迫应答中的作用提供重要信息。【方法】利用small RNA-seq(s RNA-seq)技术对正常及球囊菌侵染的意蜂6日龄幼虫肠道(分别表示为Am CK和Am T)进行测序,通过相关生物信息学软件对DEmiRNAs进行预测和分析。利用TargetFinder软件预测DEmiRNAs的靶基因,然后利用Blast软件对靶基因进行GO和KEGG数据库的功能注释。通过Cytoscape软件构建DEmiRNAs与其靶m RNAs的调控网络。通过茎环实时荧光定量PCR(stem-loop RT-qPCR)验证测序数据的可靠性。【结果】Am CK和Am T的测序分别得到9 230 496和10 823 667条有效序列标签; Am CK vs Am T比较组中包含15个上调和6个下调mi RNAs,分别结合3 503和3 252个靶基因,它们可分别注释到40和39个GO terms以及104和99条代谢通路;进一步分析发现调控网络中的17个DEmiRNAs靶向结合116个与丝氨酸蛋白酶相关的m RNAs,14个DEmiRNAs靶向结合54个与泛素介导的蛋白水解相关的m RNAs。Stem-loop RT-qPCR验证结果显示随机选择的4个DEmiRNAs (mi R-251-x,mi R-9277-y,mi R-1672-x和mi R-4968-y)的表达量变化趋势与测序结果一致,表明测序数据真实可信。【结论】本研究率先对意蜂幼虫肠道在球囊菌胁迫后期的DEmiRNAs及其靶基因进行预测与分析,提供了mi RNAs的表达谱和差异表达信息。ame-miR-927b,mi R-429-y和mi R-8440-y等DEmiRNAs可能参与对丝氨酸蛋白酶的调控和对泛素介导的蛋白水解的调控,DEmiRNAs与靶基因之间存在复杂的调控网络关系。DEmiRNAs可参与到意蜂幼虫肠道与球囊菌间的互作。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 蜜蜂球囊菌 胁迫应答 微小RNA 免疫防御 靶基因
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意大利蜜蜂工蜂中肠的环状RNA及其调控网络分析 被引量:11
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作者 熊翠玲 陈华枝 +9 位作者 陈大福 郑燕珍 付中民 徐国钧 杜宇 王海朋 耿四海 周丁丁 刘思亚 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1363-1375,共13页
【目的】环状RNA(circRNA)在可变剪接、转录调控和来源基因的表达调控等方面具有重要功能。本研究旨在分析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂中肠circRNA的数量、种类、结构特征和作用,并通过构建和分析circRNA的调控网络探索circ... 【目的】环状RNA(circRNA)在可变剪接、转录调控和来源基因的表达调控等方面具有重要功能。本研究旨在分析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂中肠circRNA的数量、种类、结构特征和作用,并通过构建和分析circRNA的调控网络探索circRNA的调控功能。【方法】在实验室条件下人工饲养意大利蜜蜂工蜂,利用circRNA-seq技术对意大利蜜蜂7和10日龄成年工蜂中肠样品进行深度测序。利用find_circ软件从质控后的数据中预测circRNA。通过BLAST比对GO和KEGG数据库,对circRNA的来源基因进行功能和代谢通路注释。利用TargetFinder软件预测circRNA靶向结合的miRNA及miRNA靶向结合的mRNA,通过Cytoscape v.3.2.1软件对circRNA-miRNA和circRNA-miRNA-mRNA调控网络进行构建及可视化。通过设计背靠背引物和线性扩增引物RT-PCR对预测出的circRNA进行验证。【结果】意大利蜜蜂工蜂中肠样品的测序平均得到136 463 071条clean reads,去除rRNA后各样品的anchor reads均在136 779 122条及以上。共预测出10 833个circRNA,长度主要介于15~1 000 nt;上述circRNA的类型丰富,其中已注释的外显子circRNA数量最多,分布在西方蜜蜂1号染色体的circRNA数量最多,其次为8号染色体。CircRNA的来源基因可注释到包括结合、细胞进程和细胞在内的45个GO条目,以及包括内吞作用、内质网蛋白加工及核糖体在内的121条KEGG代谢通路,表明circRNA在意大利蜜蜂工蜂中肠的生长、发育、新陈代谢和细胞生命活动等生物学过程中发挥重要作用。进一步构建circRNA-miRNA和circRNA-miRNA-mRNA调控网络,分析结果显示部分circRNA可能作为竞争性内源RNA吸附结合microRNA,从而调控基因的表达水平。最后,对随机选择的3个circRNA的RT-PCR结果验证了其真实存在。【结论】本研究对意大利蜜蜂工蜂中肠中的circRNA进行预测、分析及鉴定。研究结果提供了中肠circRNA的数量、种类、结构特征、作用和调控网络的信息,揭示了circRNA可能通过作用于来源基因和作为竞争性内源RNA在意大利蜜蜂工蜂中肠的生长发育和免疫防御中发挥作用,为深入研究circRNA在意大利蜜蜂中肠发育及胁迫响应过程中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 中肠 生物信息学 环状RNA 调控网络
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基于波导不变量的深海船舶噪声特征研究 被引量:6
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作者 唐帅 笪良龙 +1 位作者 徐国军 崔宝龙 《船舶力学》 EI CSCD 北大核心 2018年第7期888-895,共8页
深海环境复杂多样,船舶噪声信号特征受环境影响较大,不利于目标位置及运动态势判断。文章在深海声道形成条件及其声场传播规律研究基础上,基于波导不变量理论,对典型深海环境不同位置船舶噪声距离-频率干涉条纹特征进行理论分析和仿真... 深海环境复杂多样,船舶噪声信号特征受环境影响较大,不利于目标位置及运动态势判断。文章在深海声道形成条件及其声场传播规律研究基础上,基于波导不变量理论,对典型深海环境不同位置船舶噪声距离-频率干涉条纹特征进行理论分析和仿真验证。理论分析和仿真结果表明,深海声道会聚区及反射会聚区船舶噪声信号存在干涉条纹特征,且对应的波导不变量β值不同,故两者干涉条纹特征不同。文中提出了利用深海船舶目标噪声的干涉条纹特征,对不同位置深海船舶目标及其运动态势进行判断的方法,仿真结果和试验数据表明,该判断方法可行有效。 展开更多
关键词 船舶噪声 波导不变量 会聚区 船舶运动态势 干涉条纹
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感染意大利蜜蜂工蜂的东方蜜蜂微孢子虫及其纯化孢子的高表达基因分析 被引量:8
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作者 熊翠玲 耿四海 +7 位作者 周丁丁 石彩云 郭意龙 陈大福 郑燕珍 徐国钧 张曦 郭睿 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2019年第2期6-13,共8页
为探究东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)在侵染意大利蜜蜂(Aips mellifera ligustica)过程的基因表达谱及高表基因(highly expressed gene,HEG)的功能,本研究利用RNA-seq技术对N.ceranae感染的意蜂工蜂7和10 d工蜂中肠(NcT1和NcT2)及... 为探究东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)在侵染意大利蜜蜂(Aips mellifera ligustica)过程的基因表达谱及高表基因(highly expressed gene,HEG)的功能,本研究利用RNA-seq技术对N.ceranae感染的意蜂工蜂7和10 d工蜂中肠(NcT1和NcT2)及其纯化孢子(NcCK)进行高通量测序。根据FPKM值≧15的标准筛选出各组的HEG并进行Venn分析,进而通过GO分类和KEGG代谢通路富集分析对各组的共有HEG进行功能注释。测序得到的原始读段经严格质控后分别得到5 816 465、28 501 225和210 824 312条高质量的有效读段,分别从NcT1、NcT2和NcCK中筛选出1 263、1 233和1 511个HEG,其中有1 079个基因在各组均高量表达,分别有15和7个基因仅在NcT1和NcT2中高量表达。GO分类结果显示,共有HEG涉及9个生物学进程相关条目,10个细胞组分相关条目,以及5个分子功能相关条目。KEGG代谢通路富集分析结果表明,共有HEG富集在218条代谢通路,富集基因数最多的是核糖体、Epstein-Barr病毒感染、细胞周期、内质网蛋白加工和真菌核糖体生物合成。深入分析结果显示分别有5和5个共有HEG富集在MAPK和cAMP信号通路,表明此2条信号通路及富集的HEG可能在N.ceranae的环境应激和侵染过程中发挥重要作用。研究结果提供了N.ceranae感染意蜂工蜂过程中的基因表达谱,揭示了HEG的作用,为深入解析N.ceranae的侵染机制打下了初步基础。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 中肠 转录组 东方蜜蜂微孢子虫 高表达基因
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企业间知识转移、知识库开发与突变式创新绩效 被引量:13
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作者 徐国军 杨建君 《软科学》 CSSCI 北大核心 2019年第3期40-44,共5页
聚焦中国企业的创新活动,研究了企业间知识转移对知识接收企业突变式创新绩效的影响。同时,探索企业知识库的中介作用,并引入企业间竞争作为调节变量,构建了理论模型。之后,运用251家企业的调研数据进行模型验证。研究结果表明:企业间... 聚焦中国企业的创新活动,研究了企业间知识转移对知识接收企业突变式创新绩效的影响。同时,探索企业知识库的中介作用,并引入企业间竞争作为调节变量,构建了理论模型。之后,运用251家企业的调研数据进行模型验证。研究结果表明:企业间知识转移有助于知识接收企业突变式创新绩效的提高。企业间知识转移既有助于知识接收企业知识宽度的提升,也有助于知识深度的提升。知识接收企业知识宽度在企业间知识转移和突变式创新绩效之间起中介作用。企业间竞争在企业间知识转移与知识接收企业知识宽度间起着负向调节作用。 展开更多
关键词 企业间知识转移 知识宽度 知识深度 突变式创新绩效
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大众旅游新时代旅游公路服务设施理论与设计方法 被引量:20
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作者 杨星 许国俊 +2 位作者 肖继铭 杨洪福 杨智生 《交通运输研究》 2020年第4期60-68,85,共10页
在系统梳理国内外关于公路服务设施,尤其是旅游公路服务设施研究成果的基础上,结合目前国内交旅融合进程中旅游公路服务设施初期探索成果及存在的主要问题,从旅游公路服务设施的基本定义及内涵入手,基于行为心理、出行需求、社会价值等... 在系统梳理国内外关于公路服务设施,尤其是旅游公路服务设施研究成果的基础上,结合目前国内交旅融合进程中旅游公路服务设施初期探索成果及存在的主要问题,从旅游公路服务设施的基本定义及内涵入手,基于行为心理、出行需求、社会价值等视角,提出旅游公路服务设施的主要形成机理和类型划分。将高速公路旅游服务设施创新性地划分为两种主要类型,并针对每种类型服务设施的交旅融合设计思路、设计要点和方法进行详细阐述。在已有普通旅游公路服务设施研究成果的基础上,根据新时期旅游公路出行特点及需求补充了观景港湾停车带和露营地,使其更系统、更全面,同时还提出了普通旅游公路服务设施在整体空间布局、合理规模及空间设置形式等方面的具体设计要求。 展开更多
关键词 旅游公路 服务设施 交旅融合 服务区 观景台
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特殊环境下的小力矩测试方法研究 被引量:1
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作者 钱华 陈辰 +3 位作者 李志鹏 徐国君 郑文鹏 毛巍凌 《微特电机》 2021年第7期62-64,共3页
通过对现有各种环境条件下测试方法的对比,现有测试方法对电机小力矩运行状态的测试误差较大,研究了一种在高低温、真空等特殊环境条件下,能提高小力矩测试精度的电机带载特性测试方法。
关键词 微电机 高低温 真空 小力矩 带载性能测试
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新型冠状病毒感染病区的建设与管理刍议
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作者 黄伟 李艳霞 +5 位作者 李楠 刘永宁 徐国君 张永利 尚东 徐英辉 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期215-217,共3页
本文从病房建设与管理的角度讨论了在抗击高传染性新型冠状病毒疾病(COVID-19)斗争中,如何针对疾病的侵袭特征和患者人群的共同特点,在科室硬件建设、外部联络、建章立制、患者服务、后勤保障等方面有目标、有重点地进行针对性解决,从... 本文从病房建设与管理的角度讨论了在抗击高传染性新型冠状病毒疾病(COVID-19)斗争中,如何针对疾病的侵袭特征和患者人群的共同特点,在科室硬件建设、外部联络、建章立制、患者服务、后勤保障等方面有目标、有重点地进行针对性解决,从而实现提高收治率、治愈率,降低感染率和病死率的“两提高、两降低”目标,最大程度地提升医疗质量,并为应对未来潜在的特大传染性疾病或灾害性事件做好充分的准备. 展开更多
关键词 新型冠状病毒疾病(COVID-19) 建设 管理 规范
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呼叫铃联合输液多组登记表在急诊输液室中的应用与效果评价
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作者 王慧 郭慧芳 +3 位作者 林冬梅 李玖明 徐国君 周玲 《中国医药指南》 2020年第19期292-295,共4页
目的评价呼叫铃联合输液多组登记表在急诊输液室的应用效果。方法 2019年4月便利抽样法选取大连医科大学附属第一医院急诊输液室患者303例为研究对象,按照计算机数字随机分为改良组和对照组,各观察1周。改良组采用在输液椅扶手上安装一... 目的评价呼叫铃联合输液多组登记表在急诊输液室的应用效果。方法 2019年4月便利抽样法选取大连医科大学附属第一医院急诊输液室患者303例为研究对象,按照计算机数字随机分为改良组和对照组,各观察1周。改良组采用在输液椅扶手上安装一键式呼叫铃再联合输液多组登记表的方法共163例患者,对照组采用患者自主呼喊护士的传统方法共140例患者,比较两组患者问卷调查对护士的总满意率、护士为批量相当的输液患者更换输液袋时的往返次数、耗时和护士人力经济成本,以及2019年与2017年护士因应答延迟导致的远期护理服务效果不满状况。结果改良组患者总满意度、每更换输液袋的往返次数、耗时以及护士人力经济成本与观察组相比,分别为[95.4%(156/163)VS 87.8%(123/140),χ~2=40.40,P=0.000]、[(2±1)次VS(3±1)次,Z=7.598,P=0.000]、[(7.32±1.69)s VS (39.85±10.93)s,t=23.492,P=0.000]、[(135.52±0.51)元VS (247±2.36)元,t=347.721,P=0.000],两组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);护士因应答延迟导致远期护理服务效果不满状况中的拔针延迟致回血过长、输液渗漏致疼痛延时、误拔针致重新穿刺、管路不通致患者焦虑、药液袋滴空致患者恐慌等分别为:[0.03%(12/46137)VS 0.16%(53/33101),χ~2=42.211,P=0.000];[0.01%(6/46137)VS0.13%(44/33101),χ~2=42.889,P=0.000];[0.00%(2/46137)VS 0.04%(12/33101),χ~2=11.110,P=0.001];[0.02%(8/46137)VS0.08%(25/33101),χ~2=15.660,P=0.000];[0.03%(12/46137)VS 0.09%(30/33101),χ~2=15.175,P=0.000],2组比较差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论此方法能保证患者静脉输液安全,提高患者对护理服务的总满意率;优化护士工作流程,提高护士工作效率,降低护士工作强度,节省人力经济成本。 展开更多
关键词 设备设计 呼叫铃 登记表 输注
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蜜蜂球囊菌菌丝和孢子的比较转录组分析 被引量:4
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作者 蒋海宾 杜宇 +8 位作者 范小雪 王杰 祝智威 范元婵 熊翠玲 付中民 徐国钧 陈大福 郭睿 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1177-1185,共9页
为探究实验室条件下纯培养的蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)菌丝(AaM)和孢子(AaM)的共有基因、特有基因以及差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)与真菌的生长、发育、生殖和致病性的相关性,利用RNA-seq技术和生物信息学方法... 为探究实验室条件下纯培养的蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)菌丝(AaM)和孢子(AaM)的共有基因、特有基因以及差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)与真菌的生长、发育、生殖和致病性的相关性,利用RNA-seq技术和生物信息学方法对AaM和AaS进行比较转录组分析,并结合实时荧光定量PCR验证转录组数据的可靠性.分析结果显示AaM和AaS的共有基因为7362个,涉及44个功能条目和122条通路;二者的特有基因分别为195和278个.AaM vs AaS比较组含有977个上调基因和687个下调基因,分别涉及32和32个功能条目;此外,上述DEG还涉及糖酵解/糖异生、次级代谢物的生物合成等113条通路.基于比较转录组分析发现球囊菌菌丝和孢子的共有基因、特有基因和DEG可能通过调节细胞活动、代谢进程、内吞作用以及MAPK信号通路等关键途径参与球囊菌的生长、发育和生殖过程. 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 菌丝 孢子 信号通路 差异表达基因
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复律宁颗粒治疗气阴两虚型房颤的临床观察 被引量:4
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作者 刘珂珂 李绵绵 +9 位作者 吴琼 程琳 陶进孺 胡春蕊 张娜 许国军 李广浩 沈琳 邓兵 汤诺 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2148-2151,共4页
目的观察复律宁颗粒治疗气阴两虚型房颤的疗效及安全性,评估中医加载治疗的优势和特点。方法纳入80例辨证为气阴两虚证的心房颤动患者,以1∶1分配原则随机分入复律宁颗粒+西药观察组(观察组)以及安慰剂模拟+西药观察组(对照组),每日2次... 目的观察复律宁颗粒治疗气阴两虚型房颤的疗效及安全性,评估中医加载治疗的优势和特点。方法纳入80例辨证为气阴两虚证的心房颤动患者,以1∶1分配原则随机分入复律宁颗粒+西药观察组(观察组)以及安慰剂模拟+西药观察组(对照组),每日2次,每次1包,两组疗程均为4周,评价内容包括治疗前后中医症候、心悸发作频率、累计发作时间、24 h心电图(Holter)、血清N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、安全性指标。结果观察组中医症候总疗效为84.9%,显著优于对照组(57.1%,P﹤0.05),其中在心悸、自汗、盗汗、口干、疲乏程度改善上观察组优于对照组(P﹤0.05)。观察组患者临床症状改善总有效率78.8%,显著优于对照组(51.4%,P﹤0.05),其中观察组患者心悸发作频率、持续时间显著减少(P﹤0.05)。两组在治疗前后对于NT-proBNP的改变均不明显,且组间无明显差异(P>0.05)。两组治疗过程中均未出现明显不良反应。结论复律宁颗粒治疗气阴两虚型房颤安全有效,其能有效改善患者中医症候,且能降低房颤发作频率、持续时间、降低心室率。 展开更多
关键词 复律宁颗粒 心房颤动 气阴两虚 临床疗效
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快离子导体LiTi2(PO4)3在LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2正极材料表面的原位反应包覆及其电化学性能 被引量:4
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作者 丁国彧 高远 +8 位作者 李亚辉 朱振 王秋琳 景鑫国 严奉乾 徐国军 岳之浩 李晓敏 孙福根 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2307-2314,共8页
通过原位反应法,利用富镍层状金属氧化物LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2(LNCM811)正极材料表面残余的氢氧化锂和碳酸锂,与C8H20O4Ti和(NH4)H2PO4反应,在LNCM811表面原位生成快离子导体LiTi2(PO4)3(LTP)包覆层。这种原位反应的包覆方法有利于移除LN... 通过原位反应法,利用富镍层状金属氧化物LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2(LNCM811)正极材料表面残余的氢氧化锂和碳酸锂,与C8H20O4Ti和(NH4)H2PO4反应,在LNCM811表面原位生成快离子导体LiTi2(PO4)3(LTP)包覆层。这种原位反应的包覆方法有利于移除LNCM811表面有害的残留物氢氧化锂和碳酸锂。而且,获得的LTP均匀包覆层不仅可以有效地抑制LNCM811表面和电解液的直接接触及其副反应,还可以确保充放电循环过程中LNCM811正极材料的快速Li+传导。因此,在LTP包覆层的多重作用下,LTP包覆的LNCM811正极材料具有优异的循环稳定性和倍率性能:在0.2C时,首次放电比容量高达200.6 mAh·g^-1,200圈后的可逆容量依然有155.7 mAh·g^-1;在2C和5C的高电流密度下,200圈后的可逆容量仍然有126.4和111.9 mAh·g^-1。 展开更多
关键词 储能技术 锂离子电池 正极材料 LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2 LiTi2(PO4)3包覆 快离子导体
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意大利蜜蜂细胞内吞相关基因与全长转录本鉴定 被引量:4
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作者 范小雪 王思懿 +9 位作者 朱乐冉 荆欣 郭思佳 牛庆生 蒋海宾 徐细建 陈大福 付中民 徐国钧 郭睿 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期825-834,共10页
【目的】利用已获得的纳米孔(Nanopore)长读段测序数据对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的细胞内吞相关基因和全长转录本进行鉴定、分析和验证,为深入开展相关研究提供参考和依据。【方法】通过Blast工具将意大利蜜蜂全长转录本比... 【目的】利用已获得的纳米孔(Nanopore)长读段测序数据对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的细胞内吞相关基因和全长转录本进行鉴定、分析和验证,为深入开展相关研究提供参考和依据。【方法】通过Blast工具将意大利蜜蜂全长转录本比对Nr和KEGG数据库以筛选出细胞内吞相关基因和全长转录本。采用gffcompare软件将全长转录本与西方蜜蜂Apis mellifera参考基因组(Amel_HAv3.1)上注释的转录本进行比较以优化已注释基因的结构。使用Astalavista软件鉴定细胞内吞相关基因的可变剪接(Alternative splicing,AS)事件类型,利用IGV浏览器对剪切体结构进行可视化,通过PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline进行可变多聚腺苷酸化(Alternative polyadenylation,APA)位点预测和分析,并通过MEME软件鉴定APA位点上游的基序(motif)。【结果】共鉴定到意大利蜜蜂细胞内吞相关的170个基因与991条转录本。共优化了89个细胞内吞相关基因的结构,其中5′端延长的基因有36个,3′端延长的基因有35个,5′端和3′端同时延长的基因有18个。鉴定到细胞内吞相关的28个基因的666次AS事件,其中最丰富的AS类型是3′端可变剪接(Alternative3’splice site,A3SS)。PCR结果证实了涉及整合素β-nu样异构体基因、Ras样GTP结合蛋白基因和rab11家族相互作用蛋白4基因的2种类型的4次AS事件真实性。共鉴定到120个细胞内吞相关的基因含有1个及以上的APA位点,并在APA位点上游鉴定到多个motif,一致性序列为NBMNHHHBMNSNNCBNVSNNNNNNNNNNNVNNNN。【结论】鉴定到意大利蜜蜂细胞内吞相关的170个基因及991条全长转录本,发现细胞内吞相关基因发生大量的AS事件并含有丰富的APA位点,优化了西方蜜蜂参考基因组上注释的细胞内吞相关基因的结构。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 细胞内吞 纳米孔测序 全长转录本 可变剪切
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基于第三代纳米孔测序技术的东方蜜蜂微孢子虫全长转录组构建及注释 被引量:17
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作者 陈华枝 杜宇 +10 位作者 范小雪 祝智威 蒋海宾 王杰 范元婵 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1461-1472,共12页
【目的】本研究旨在利用Oxford Nanopore测序技术组装和注释东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的高质量全长转录组。【方法】采用Nanopore PromethION系统对东方蜜蜂微孢子虫的纯净孢子进行转录组测序。通过识别每条clean read两端引物鉴... 【目的】本研究旨在利用Oxford Nanopore测序技术组装和注释东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的高质量全长转录组。【方法】采用Nanopore PromethION系统对东方蜜蜂微孢子虫的纯净孢子进行转录组测序。通过识别每条clean read两端引物鉴定全长转录本序列。利用Blast工具将全长转录本比对Nr,Swiss-Prot,KOG,eggNOG,Pfam,GO和KEGG数据库,获得相应注释信息。分别利用蛋白结构域分析方法CPC,CNCI,CPAT和Pfam对长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)进行预测,获得高可信度lncRNA。利用CPM(counts per million)法计算每一条全长转录本的表达量。【结果】利用Nanopore PromethION系统对东方蜜蜂微孢子虫转录组测序共测得6988795条raw reads,经质控获得6953469条clean reads,其中包含5143999条全长转录本。共鉴定到10243条非冗余全长转录本,N50和平均读长分别为1042 bp和894 bp,最大读长为4855 bp。有9342,4038,4283,2569,4859和3450条全长转录本分别注释到Nr,KOG,eggNOG,Pfam,GO和KEGG数据库。注释到东方蜜蜂微孢子虫、蜜蜂微孢子虫Nosema apis和家蚕微孢子虫Nosema bombycis的全长转录本数量最多。共鉴定到87条高可信度lncRNA,包含49条正义链lncRNA(sense lncRNA)、25条反义链lncRNA(anti-sense lncRNA)和13条基因间区lncRNA。本研究的测序量足以检测到全部表达的全长转录本,全长转录本的表达量(CPM)范围在0.1到10000以上。【结论】本研究构建和注释了东方蜜蜂微孢子虫的高质量全长转录组数据,可为病原的比较转录组分析、转录本的可变剪接和可变腺苷酸化分析、简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)位点挖掘、基因结构优化以及基因全长序列克隆及功能研究提供关键基础。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 全长转录组 长链非编码RNA 第三代测序技术 纳米孔测序
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基于蜜蜂球囊菌纳米孔测序数据的基因非翻译区延长、SSR位点发掘及未注释基因和转录本鉴定 被引量:14
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作者 杜宇 付中民 +11 位作者 祝智威 王杰 冯睿蓉 王秀娜 蒋海宾 范元婵 范小雪 熊翠玲 郑燕珍 徐国钧 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1345-1357,共13页
【目的】利用已获得的纳米孔长读段测序数据完善现有的蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis参考基因组注释信息,并对未注释的新基因和新转录本进行鉴定和功能注释。【方法】基于已获得的纳米孔长读段测序数据,采用gffcompare软件将蜜蜂球囊菌全... 【目的】利用已获得的纳米孔长读段测序数据完善现有的蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis参考基因组注释信息,并对未注释的新基因和新转录本进行鉴定和功能注释。【方法】基于已获得的纳米孔长读段测序数据,采用gffcompare软件将蜜蜂球囊菌全长转录本与参考基因组注释的转录本进行比较,进而对参考基因组注释基因的非翻译区(untranslated region,UTR)进行延长。利用TransDecoder软件对蜜蜂球囊菌基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)及相应的氨基酸序列进行预测。通过MISA软件发掘长度在500 bp以上的全长转录本的SSR位点。通过Blast工具将鉴定到的新基因和新转录本比对Nr,KOG,eggNOG,Swiss-Prot,Pfam,GO和KEGG数据库进行功能注释。【结果】共对蜜蜂球囊菌的9481个基因进行了UTR延长,其中5′UTR和3′UTR延长的基因分别有4744和4737个。共预测出10492个完整ORF,其中编码长度分布在0~100和100~200个氨基酸的ORF最多,分别占ORF总数的38.96%和36.90%。共鉴定到5286个SSR,其中单核苷酸重复、二核苷酸重复、三核苷酸重复、四核苷酸重复、五核苷酸重复和六核苷酸重复的SSR分别为1870,826,2398,138,43和11个。共鉴定到1558个新基因,其中有1556,731,330,592,1177,709和589个新基因可分别被注释到Nr,Swiss-Prot,Pfam,KOG,eggNOG,GO和KEGG数据库。此外,还鉴定到14403条新转录本,其中有14376,8524,7276,7405,12035,7891和6855条新转录本可分别被注释到上述7个数据库。【结论】本研究利用已获得的纳米孔长读段测序数据对蜜蜂球囊菌的完整ORF进行了预测,对参考基因组的已注释基因进行了UTR延长,对未注释的SSR位点进行了发掘,此外还鉴定到大量未注释的新基因和新转录本,并对它们进行了功能注释。研究结果较好地完善了现有的蜜蜂球囊菌的基因组注释,为其组学和分子生物学研究的深入开展提供了基础。 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 长读段测序技术 全长转录组 基因组 蜜蜂 白垩病
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基于弥散张量纤维束成像探讨皮质脊髓束损伤对脑卒中运动功能障碍的评估价值 被引量:14
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作者 高鑫洁 唐朝正 +6 位作者 徐国军 余秋蓉 杨浩 贾杰 孙莉敏 尹大志 范明霞 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第12期1432-1437,共6页
目的采用弥散张量纤维束成像技术(DTT)研究脑卒中皮质脊髓束(CST)损伤程度与运动功能障碍的关系。方法 2012年3月至2013年6月,采集15例慢性期左侧皮质下脑卒中患者(脑卒中组)和15例年龄、性别匹配的健康志愿者(健康对照组)的弥散张量成... 目的采用弥散张量纤维束成像技术(DTT)研究脑卒中皮质脊髓束(CST)损伤程度与运动功能障碍的关系。方法 2012年3月至2013年6月,采集15例慢性期左侧皮质下脑卒中患者(脑卒中组)和15例年龄、性别匹配的健康志愿者(健康对照组)的弥散张量成像(DTI)数据,运用DTT技术追踪CST,以健康对照组CST模板定量评估脑卒中病灶引起的CST损伤程度,并进一步与Fugl-Meyer评定量表(FMA)作相关性分析。结果脑卒中组的CST损伤值范围为0.00%~29.6%。脑卒中组CST损伤值与腕(r=-0.660, P=0.007)、手(r=-0.813, P <0.001)和腕+手(r=-0.795, P <0.001) FMA评分呈强负相关;与上肢(r=-0.614, P=0.015)和上肢+下肢(r=-0.563, P=0.029) FMA评分呈较强负相关;与下肢FMA评分无显著相关性(r=-0.270,P=0.331)。脑卒中病灶体积大小与各运动功能评分均无明显相关性(P> 0.05)。结论病灶对CST的直接累及程度与脑卒中运动功能损害程度密切相关。DTT定量计算CST损伤值可作为评估脑卒中患者上肢,尤其是手腕部运动功能障碍的一个潜在重要参考指标。 展开更多
关键词 脑卒中 弥散张量成像 皮质脊髓束 上肢 功能障碍
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意大利蜜蜂幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫胁迫的高表达基因分析 被引量:1
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作者 黄枳腱 陈华枝 +8 位作者 郭意龙 周丁丁 万洁琦 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 郭睿 陈大福 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2019年第3期87-94,共8页
为探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的高表达基因(HEG)的作用,利用RNA-seq技术对正常的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4CK、Am5CK和Am6CK)及N.ceranae胁迫的意蜂4、5和6日龄幼... 为探究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)幼虫响应东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)胁迫的高表达基因(HEG)的作用,利用RNA-seq技术对正常的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4CK、Am5CK和Am6CK)及N.ceranae胁迫的意蜂4、5和6日龄幼虫(Am4T、Am5T和Am6T)进行测序。共得到268765544条原始读段,经过滤得到的有效读段数为266318442条,各样品的Q30均在92.42%及以上。根据FPKM值≥15的标准从上述6个样品中分别筛选出2460、2692、2908、2367、2549和2270个HEG。Venn分析结果显示,去除与对照组共有的HEG,Am4T、Am5T和Am6T的共有HEG数为3个,特有HEG数分别为373、210和79个。GO分类结果显示,Am4T、Am5T和Am6T的特有HEG分别能够注释26、27和16个GO条目,注释基因数最多的分别是代谢进程、结合和结合。KEGG分析结果显示这些特有HEG可分别富集在145、138和68条代谢通路,富集基因数最多的分别是过氧化物酶体、碳代谢和内质网蛋白加工。进一步分析结果表明N.ceranae胁迫可导致宿主的部分物质代谢、能量代谢和免疫代谢通路水平提高。从6个样品的共有HEG中随机选取10个进行RT-PCR验证,均能成功扩增出目的条带,说明本研究中的HEG真实存在。研究结果揭示了意蜂幼虫响应N.ceranae胁迫的HEG表达谱及作用,为深入解析宿主的胁迫应答机制提供了重要信息。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 幼虫 东方蜜蜂微孢子虫 转录组 高表达基因 胁迫应答
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东方蜜蜂微孢子虫基因的可变剪接及可变腺苷酸化解析 被引量:27
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作者 陈华枝 范小雪 +11 位作者 范元婵 王杰 祝智威 蒋海宾 张文德 隆琦 熊翠玲 郑燕珍 付中民 徐国钧 陈大福 郭睿 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期161-173,共13页
本研究旨在基于已获得的第三代纳米孔全长转录组数据对东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae基因的可变剪接(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行分析。通过Astalavista软件鉴定东方蜜蜂微孢... 本研究旨在基于已获得的第三代纳米孔全长转录组数据对东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae基因的可变剪接(alternative splicing,AS)和可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)进行分析。通过Astalavista软件鉴定东方蜜蜂微孢子虫基因的AS事件类型。采用TAPISpipeline对东方蜜蜂微孢子虫基因的APA位点进行鉴定。利用MEME软件分析所有全长转录本的poly (A)剪接位点上游50bp的序列特征并鉴定motif。共鉴定出发生于5个基因的5次AS事件,包括1次可变供体位点(alternative donor site,ADS)和4次内含子保留(intron retention,IR)。鉴定出233个基因发生APA,其中含有1个poly (A)剪接位点的基因数量最多(143,61.37%)。序列特征分析结果显示,东方蜜蜂微孢子虫全长转录本的3’ UTR的上下游表现出明显的碱基倾向性,U在3’ UTR的上游富集,而A在3’ UTR的下游富集。此外,在东方蜜蜂微孢子虫全长转录本的poly (A)剪接位点上游鉴定到3个motif(AAUAAA、UGAUGC和GCGACG)。研究结果揭示了东方蜜蜂微孢子虫转录组的复杂性,完善了现有的参考基因组和转录组注释,也为深入探究不同剪接异构体的分子功能提供了基础。此外,本研究为其他真菌的AS和APA研究提供了有益的思路和方法借鉴。 展开更多
关键词 第三代测序技术 全长转录组 东方蜜蜂微孢子虫 可变剪接 可变腺苷酸化
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