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应用^(32)P同位素标记的PGP178质粒DNA分子探针检测携带大麦黄矮病毒(BYDV)的单头蚜虫 被引量：1
1
作者 成卓敏 周广和 +2 位作者 王立阳 P.M.WaterhouSe w.l.gerlach 《中国农业科学》 1988年第1期94-95,共2页
快速测定单头蚜虫带毒率是小麦黄矮病综合防治中起关键作用的—个难题,长期以来得不到解决,直接影响到病害流行的预测预报准确性。病毒的互补DNA(cDNA)分子探针检测技术是一种灵敏度较高,专—性较强的分子生物学方法。我们以大麦黄矮病... 快速测定单头蚜虫带毒率是小麦黄矮病综合防治中起关键作用的—个难题,长期以来得不到解决,直接影响到病害流行的预测预报准确性。病毒的互补DNA(cDNA)分子探针检测技术是一种灵敏度较高,专—性较强的分子生物学方法。我们以大麦黄矮病毒核酸为模板,以小牛胸腺DNA为引物,在反转录酶和dNTP存在下,成功地合成了cDNA的第一条链,再用缺口翻译法合成第二条链,然后采用加装BamH1人工接头的方法将双链cDNA插入到质粒戴体pUC8中,重组质粒于大肠杆菌JM-83中进行克隆,以克隆的颜色变化选择含有外源DNA的克隆,再用病毒核酸制备的探针筛选真正的病毒cDNA插入的克隆。克隆的大麦黄矮病毒基因片段被用作分子杂交探针。 展开更多
关键词 病毒核酸 分子探针 大麦黄矮病毒 单头蚜虫 BYDV
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