鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)是一种高致病性病原,对鲤科鱼类造成巨大危害,被世界动物卫生组织列为必须通报疫病。2002年,鲤春病毒血症(spring viremia of carp,SVC)在中国首次检出后,迅速在全国蔓延,给我国鲤...鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)是一种高致病性病原,对鲤科鱼类造成巨大危害,被世界动物卫生组织列为必须通报疫病。2002年,鲤春病毒血症(spring viremia of carp,SVC)在中国首次检出后,迅速在全国蔓延,给我国鲤鱼养殖业造成巨大威胁。因此,我国农业农村部将其列为二类动物疫病。迄今为止,早期、快速、准确的诊断仍然是控制其传播和流行的重要手段。本研究基于CRISPR/Cas13a系统结合重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA),通过对GenBank上登录的SVCV全基因序列比对,针对SVCV聚合酶L基因高度保守的区域设计了一组RAA扩增引物和相应crRNA;建立了一种可用于SVCV现场快速检测的RAA-CRISPR/Cas13a的方法,可以覆盖SVCV的4种不同基因型(Ia、Ib、Ic和Id)。按照世界动物卫生组织推荐的检测方法验证程序,经实验验证该检测方法有较好的重复性,最低检出限为115 copies/μL,与其他病原之间不发生交叉反应。通过对实验室分离保存的60份来自进出境水生动物疫病监测、国内重大水生动物疫病监测以及攻毒实验的样本进行检测,RAA-CRISPR/Cas13a检测结果与实时荧光定量PCR、套式RT-PCR和病毒分离培养结果完全一致,诊断灵敏度和诊断特异性均达到100%。采用本研究建立的方法在4个不同实验室开展比对,在相同条件下对20份样本进行检测,4个实验室的检测结果一致。结果表明,本研究建立的方法重现性良好,为首次采用CRISPR-Cas13a系统进行SVCV检测的研究,对SVCV快速诊断和防控具有重要现实意义。展开更多
目的探讨密歇根大学手概况问卷调查表(Michigan Hand Outcomes Questionnaire,MHQ)在手外科的应用效果并,为临床上使用该患者主观自评量表提供参考。方法查阅近年国内外MHQ应用的相关文献,总结分析MHQ在手外伤、周围神经卡压性疾病和关...目的探讨密歇根大学手概况问卷调查表(Michigan Hand Outcomes Questionnaire,MHQ)在手外科的应用效果并,为临床上使用该患者主观自评量表提供参考。方法查阅近年国内外MHQ应用的相关文献,总结分析MHQ在手外伤、周围神经卡压性疾病和关节炎等方面的应用。结果文献显示MHQ具有较好的信度、效度及敏感度,不但可以对手功能进行整体评估,而且可以利用某一子量表对某一方面进行单独评估。结论目前MHQ在国外已成为手外科常用的主观自评量表之一,但国内应用较少,相信随着对患者主观自评的重视,其研究和应用会越来越多。展开更多
为确定患病半滑舌鳎的病原,从其体内分离到3株革兰氏阴性菌,将其分别命名为ST-1、ST-3和ST-6,进行细菌理化特性、药敏试验、16S rDNA测序以及组织病理学观察等方面的研究,并建立了外膜蛋白(OMP)基因的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法...为确定患病半滑舌鳎的病原,从其体内分离到3株革兰氏阴性菌,将其分别命名为ST-1、ST-3和ST-6,进行细菌理化特性、药敏试验、16S rDNA测序以及组织病理学观察等方面的研究,并建立了外膜蛋白(OMP)基因的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。结果显示,3株分离菌株的理化特性符合创伤弧菌特征,16S rDNA与创伤弧菌标准菌株ATCC29307序列相似性达99%以上,系统发育树分析显示,3株分离株与创伤弧菌自然聚为一支,最终鉴定为创伤弧菌;药敏试验显示,3株菌对头孢克肟、头孢哌酮、链霉素、亚胺培南和氟苯尼考等药物高度敏感。人工回归感染试验表明,分离株具有致病性,且半滑舌鳎、斑马鱼的临床症状与自然患病鱼症状相似;组织病理学观察显示,鳃丝上皮细胞增生,鳃小片肿胀黏连、颗粒细胞和黏液细胞增多,肝脏中央静脉淤血,肾脏出血、坏死,肠道黏膜固有层萎缩、黏液细胞增多等。进一步建立OMP基因的荧光定量PCR方法,结果显示,标准曲线的相关系数为0.995,检测下限为1.88×10~2 CFU/mL。以上结果可为半滑舌鳎弧菌病的致病机理、分子诊断和防治提供科学参考。展开更多
文摘鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)是一种高致病性病原,对鲤科鱼类造成巨大危害,被世界动物卫生组织列为必须通报疫病。2002年,鲤春病毒血症(spring viremia of carp,SVC)在中国首次检出后,迅速在全国蔓延,给我国鲤鱼养殖业造成巨大威胁。因此,我国农业农村部将其列为二类动物疫病。迄今为止,早期、快速、准确的诊断仍然是控制其传播和流行的重要手段。本研究基于CRISPR/Cas13a系统结合重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA),通过对GenBank上登录的SVCV全基因序列比对,针对SVCV聚合酶L基因高度保守的区域设计了一组RAA扩增引物和相应crRNA;建立了一种可用于SVCV现场快速检测的RAA-CRISPR/Cas13a的方法,可以覆盖SVCV的4种不同基因型(Ia、Ib、Ic和Id)。按照世界动物卫生组织推荐的检测方法验证程序,经实验验证该检测方法有较好的重复性,最低检出限为115 copies/μL,与其他病原之间不发生交叉反应。通过对实验室分离保存的60份来自进出境水生动物疫病监测、国内重大水生动物疫病监测以及攻毒实验的样本进行检测,RAA-CRISPR/Cas13a检测结果与实时荧光定量PCR、套式RT-PCR和病毒分离培养结果完全一致,诊断灵敏度和诊断特异性均达到100%。采用本研究建立的方法在4个不同实验室开展比对,在相同条件下对20份样本进行检测,4个实验室的检测结果一致。结果表明,本研究建立的方法重现性良好,为首次采用CRISPR-Cas13a系统进行SVCV检测的研究,对SVCV快速诊断和防控具有重要现实意义。
文摘目的探讨密歇根大学手概况问卷调查表(Michigan Hand Outcomes Questionnaire,MHQ)在手外科的应用效果并,为临床上使用该患者主观自评量表提供参考。方法查阅近年国内外MHQ应用的相关文献,总结分析MHQ在手外伤、周围神经卡压性疾病和关节炎等方面的应用。结果文献显示MHQ具有较好的信度、效度及敏感度,不但可以对手功能进行整体评估,而且可以利用某一子量表对某一方面进行单独评估。结论目前MHQ在国外已成为手外科常用的主观自评量表之一,但国内应用较少,相信随着对患者主观自评的重视,其研究和应用会越来越多。
