1例劳力型热射病合并多器官功能衰竭患者的多学科诊疗救治策略

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作者 郭禹 高琴 +5 位作者 付莎莎 杨万杰 马龙艳 邵红霞 张凯茹 于洪志 《天津医药》 2026年第1期97-103,共7页

劳力型热射病好发于高温高湿环境下进行高强度训练或从事重体力劳动的人群。该文回顾性分析1例劳力型热射病合并多器官功能障碍综合征患者经由重症监护病房组织,在神经内科、肾内科、呼吸内科、消化内科、心血管内科等多学科诊疗(MDT)下... 劳力型热射病好发于高温高湿环境下进行高强度训练或从事重体力劳动的人群。该文回顾性分析1例劳力型热射病合并多器官功能障碍综合征患者经由重症监护病房组织,在神经内科、肾内科、呼吸内科、消化内科、心血管内科等多学科诊疗(MDT)下,患者经快速降温、镇静、连续性血液净化、改善循环、补充凝血因子、控制颅内压、气管插管呼吸机辅助通气、抗感染等治疗1个月后好转出院。出院后2周进行门诊随访指导用药及生活方式等自护内容,1个月后复查各项因热射病所致异常的实验室指标均恢复正常。通过运用MDT救治策略,能够有效改善劳力型热射病合并多器官功能衰竭患者的预后。 展开更多

关键词 中暑 多器官功能衰竭 横纹肌溶解 连续性肾替代疗法 多学科诊疗

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4株无血凝抑制活性的抗H6禽流感病毒HA单克隆抗体生物学特性研究

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作者 曹旭东 桑建君 +9 位作者 孟宪臣 姜文杰 赵喆泓 谢泉 李拓凡 邵红霞 钱琨 秦爱建 叶建强 万志敏 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第5期136-142,共7页

为研制抗H6禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体,本研究利用小鼠适应毒株E-Teal/417(MA E-Teal/417)H6禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,利用小鼠杂交瘤细胞技术,经间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制(HI)试验等方法筛选和亚克隆,获得4株没有HI效价的单... 为研制抗H6禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体,本研究利用小鼠适应毒株E-Teal/417(MA E-Teal/417)H6禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,利用小鼠杂交瘤细胞技术,经间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制(HI)试验等方法筛选和亚克隆,获得4株没有HI效价的单克隆抗体,分别命名为1D4、4A7、4G2和5E9。IFA结果表明,4株单克隆抗体均能识别转染pDP2002-HA(MA E-Teal/417)质粒的293T细胞中表达的HA蛋白。Western blot试验表明,单克隆抗体4G2和5E9能识别感染MAE-Teal/417病毒的MDCK细胞中表达的HA蛋白。中和试验结果发现,单克隆抗体1D4、4A7和4G2具有一定的体外中和活性,抑制MAE-Teal/417在MDCK细胞中感染和复制。小鼠保护性试验进一步表明,单克隆抗体4A7能提供良好的被动免疫抵抗致死性MAE-Teal/417感染。以上获得的无血凝抑制活性、但具有一定中和活性的抗HA单克隆抗体为H6禽流感病毒HA蛋白新型中和表位解析、疫苗设计及诊断技术开发等提供生物材料。 展开更多

关键词 H6亚型禽流感病毒 HA蛋白 单克隆抗体 无HI 中和活性 保护性

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基于重组酶聚合酶扩增快速检测鸡传染性支气管炎病毒的胶体金试纸条

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作者 郭鹏宇 汤也 +8 位作者 马丽华 孟宪臣 赵喆泓 谢泉 李拓凡 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第12期6299-6307,共9页

鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染引起的鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病。为建立一种适合现场化检测IBV的方法,本研究靶向IBV的保守基因M设计引物及探针,结合RPA与胶体金技术,创制了一种能在1 h内出结... 鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染引起的鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病。为建立一种适合现场化检测IBV的方法,本研究靶向IBV的保守基因M设计引物及探针,结合RPA与胶体金技术,创制了一种能在1 h内出结果的检测IBV的RPA-胶体金试纸条方法。特异性检测证明,该RPA-试纸条方法仅能检测出IBV,而不与禽流感病毒(AIV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒(ALV)和鹅星状病毒(GAstV)等反应。灵敏度检测证明,该RPA-试纸条方法的最低检测限为8.26 TCID_(50)·mL^(-1)。对31份临床样本的比对检测表明,本RPA-试纸条方法、qPCR以及常规PCR的检测阳性率分别为74.2%、64.5%与54.8%。综上,本研究建立的RPA-试纸条快速检测IBV的方法特异性强、敏感性高、操作便捷,为IBV高效诊断及其免疫防控提供了新方法。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M基因 RPA 胶体金试纸条

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表达J亚群禽白血病病毒Env蛋白的重组血清4型禽腺病毒的构建

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作者 徐超 谢泉 +6 位作者 武佳妍 王胜男 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 李拓凡 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期66-73,共8页

旨在为解决国内禽白血病净化周期长以及净化鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染频发等问题提供新型抗ALV-J策略。本研究利用前期构建好的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)纤突蛋白Fiber-2融合的重组FAdV-4为载体,并使... 旨在为解决国内禽白血病净化周期长以及净化鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染频发等问题提供新型抗ALV-J策略。本研究利用前期构建好的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)纤突蛋白Fiber-2融合的重组FAdV-4为载体,并使用CRISPR/Cas9和Cre-LoxP技术构建表达ALV-J囊膜蛋白(Env)的重组FAdV-4,通过间接免疫荧光试验和Western blot验证重组病毒表达的Env蛋白,测定重组病毒在鸡肝癌细胞系(LMH)细胞中的增殖特性。结果:成功拯救了能表达ALV-J Env蛋白的重组病毒FAdV-4-ALV-J-env,该重组病毒在LMH细胞中的复制效率远低于野生型FAdV-4。本研究构建的重组病毒FAdV-4-ALV-J-env为ALV-J和FAdV-4感染的联防联控提供了二联候选疫苗株。 展开更多

关键词 J亚群禽白血病病毒 Env蛋白 血清4型禽腺病毒 重组病毒

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表达新城疫基因Ⅶ型F蛋白重组火鸡疱疹病毒的构建及免疫保护评价

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作者 沈沁儒 申可 +2 位作者 邵红霞 秦爱建 钱琨 《中国家禽》 北大核心 2025年第9期45-57,共13页

为构建以火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)为载体的表达基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组疫苗,研究将密码子优化的基因Ⅶ型NDV F基因插入转移载体质粒pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt后,通过CRISPR/Cas9技术,将F基因插入HVT Fc126疫... 为构建以火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)为载体的表达基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)F蛋白的重组疫苗,研究将密码子优化的基因Ⅶ型NDV F基因插入转移载体质粒pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt后,通过CRISPR/Cas9技术,将F基因插入HVT Fc126疫苗株的US2区,获得重组疫苗rHVT-Fopt。将重组疫苗接种1日龄SPF鸡,28 d后攻毒以评价该重组疫苗的免疫保护效果。结果显示:构建的转移载体质粒pT-sgA-eGFP-SV40-Fopt在CEF细胞中表达良好;该重组疫苗具有良好的遗传稳定性且与HVT Fc126株的复制能力无显著差异;F基因在各主要脏器中均有表达且能诱导较高水平的体液免疫,对NDV F48E8强毒株的攻击能产生100%的免疫保护效力。研究表明,重组疫苗rHVT-Fopt可以作为针对鸡新城疫的候选新型疫苗株。 展开更多

关键词 重组火鸡疱疹病毒 新城疫病毒 基因编辑 F蛋白 免疫保护

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1例老年抑郁患者有机磷和抗凝血鼠药中毒的MDT救治策略

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作者 付莎莎 贾月 +5 位作者 邵红霞 郭禹 马龙艳 韩同 孙浩 于洪志 《天津医药》 2025年第9期1000-1004,共5页

有机磷农药(OP)是全球使用最广泛、用药量最大的杀虫剂之一,急性有机磷农药中毒(AOPP)为临床常见疾病,我国每年发生的中毒病例中AOPP占20%~50%,病死率达3%~40%。溴鼠灵(BDF)属于长效抗凝血杀鼠剂,通过抑制维生素K环氧还原酶,干扰凝血因... 有机磷农药(OP)是全球使用最广泛、用药量最大的杀虫剂之一,急性有机磷农药中毒(AOPP)为临床常见疾病,我国每年发生的中毒病例中AOPP占20%~50%,病死率达3%~40%。溴鼠灵(BDF)属于长效抗凝血杀鼠剂,通过抑制维生素K环氧还原酶,干扰凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成,导致凝血功能障碍。介绍1例敌敌畏与溴鼠灵复合中毒患者的多学科诊疗(MDT)过程,探讨了有机磷中毒及抗凝血杀鼠剂复合中毒患者的血液净化、凝血异常处理、继发感染、阿托品化、意识改变等关键问题,为临床医生的及早诊治提供参考。 展开更多

关键词 有机磷中毒 血液凝固障碍 意识障碍 同时感染 杀鼠剂中毒 阿托品化 多学科诊疗

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吸入抗结核药物治疗肺结核的研究进展 被引量：4

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作者 叶静 于洪志 +1 位作者 邵红霞 武俊平 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第9期998-1001,共4页

吸入抗结核药物治疗支气管结核已取得较好的效果。但雾化药物微粒直径过大,药物分布不均匀使其不能用于肺组织结核的患者。近年随着药物载体研究的深入,以吸入的方式到达肺组织的剂型不断被成功研发,其具有良好的安全性和有效性。该文... 吸入抗结核药物治疗支气管结核已取得较好的效果。但雾化药物微粒直径过大,药物分布不均匀使其不能用于肺组织结核的患者。近年随着药物载体研究的深入,以吸入的方式到达肺组织的剂型不断被成功研发,其具有良好的安全性和有效性。该文就吸入抗结核药物治疗肺组织结核的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 结核 肺 抗结核药 吸入 载药技术

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血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 被引量：3

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作者 路浩 张伟 +8 位作者 王伟康 梁广成 王萍 张建军 郑文铝 邵红霞 秦爱建 邹海涛 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2018年第4期16-20,共5页

研究首先对血清8型禽腺病毒(FAd V-8)的纤突蛋白基因F进行了克隆并分别构建了原核表达载体和真核表达载体,经测序验证后分别命名为p GEX-6P-1-F和pc DNA3.1-F。将原核表达质粒pGEX-6P-1-F转化BL21,经IPTG诱导,获得了FAd V-8 F蛋白的GST-... 研究首先对血清8型禽腺病毒(FAd V-8)的纤突蛋白基因F进行了克隆并分别构建了原核表达载体和真核表达载体,经测序验证后分别命名为p GEX-6P-1-F和pc DNA3.1-F。将原核表达质粒pGEX-6P-1-F转化BL21,经IPTG诱导,获得了FAd V-8 F蛋白的GST-F可溶性融合表达产物。将纯化的GST-F蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体。Western blot结果证明,制备的抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体能特异性地识别转染pc DNA3.1-F或感染FAd V-8病毒细胞中57 ku大小的蛋白条带。间接免疫荧光试验同样证明,抗FAd V-8的F蛋白的多克隆抗体具有良好的反应性及特异性。研究结果为进一步建立FAd V-8快速血清学诊断方法、亚单位疫苗研制及探究纤突蛋白F在病毒感染致病中作用奠定了基础。 展开更多

关键词 血清8型禽腺病毒 纤突蛋白 克隆表达 多克隆抗体

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鸡CTLA-4蛋白在昆虫细胞中的表达及其单克隆抗体的制备

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作者 刘青 吴少鹏 +4 位作者 石彬 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2596-2604,共9页

旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CT... 旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体。通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、流式细胞术等方法分析抗CTLA-4单克隆抗体的生物学特性。结果显示:构建了在Sf9昆虫细胞中表达CTLA-4蛋白的重组杆状病毒,成功筛选出3株能稳定分泌抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,分别命名为:mAb-CTLA4-3D7、mAb-CTLA4-5A4、mAb-CTLA4-6A12。亚类鉴定表明,mAb-CTLA4-3D7为IgG2a, Lambda链;mAb-CTLA4-5A4为IgG3,Kappa链;mAb-CTLA4-6A12为IgG2a, Kappa链。3株单克隆抗体均能与转染真核表达质粒pCAGGS-CTLA-4-Flag的DF-1细胞和感染重组杆状病毒rBac-CTLA-4的Sf9昆虫细胞反应。单克隆抗体mAb-CTLA4-3D7与鸡的PBMC有较好的结合活性,且能与CD3+T淋巴细胞结合,结合率约为16%。本研究首次成功制备了抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,并分析了其反应活性及生物学特性,为免疫检查点在禽病的发病机制、信号通路、疫苗研发等研究领域提供了材料。 展开更多

关键词 鸡CTLA-4 杆状病毒 单克隆抗体 生物学特性

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拉康在何种意义上是黑格尔主义者?

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作者 斯拉沃热·齐泽克 李西祥(译) 邵红霞(译) 《郑州轻工业大学学报（社会科学版）》 2022年第6期33-39,共7页

黑格尔作为泛逻辑主义者的形象是其批评者的实在界,是一个事实上不存在的点的建构。按照我们的观点,拉康根本上就是黑格尔主义者。在拉康对黑格尔参照的三个阶段中,第三个阶段所建构的反抗符号化达成的大他者,是一种最好的反黑格尔的大... 黑格尔作为泛逻辑主义者的形象是其批评者的实在界,是一个事实上不存在的点的建构。按照我们的观点,拉康根本上就是黑格尔主义者。在拉康对黑格尔参照的三个阶段中,第三个阶段所建构的反抗符号化达成的大他者,是一种最好的反黑格尔的大他者。拉康对黑格尔参照的第三个阶段强调了作为不可能的/非可符号化的内核之实在界——死亡驱力,而死亡驱力意指着被符号化/历史化的过程所揭示和包含的非历史化的可能性,这也就是回溯性地取消的逻辑,这一逻辑在黑格尔那里已经被描述为精神的最高力量,因此,“取消”是拉康的死亡驱力的黑格尔版本。 展开更多

关键词 黑格尔 拉康 符号界 取消

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天津地区106例NTM肺病患者的菌种分布及临床特征分析 被引量：4

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作者 王妍 邵红霞 +3 位作者 张凯茹 郑兴杰 武俊平 于洪志 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第6期633-637,共5页

目的分析天津地区非结核分枝杆菌(NTM)肺病患者的菌种分布及临床特征,为天津地区NTM肺病临床诊治提供参考。方法选取NTM肺病患者106例,分析NTM菌种分布情况、不同NTM菌种感染患者合并症和临床表现分布、胸部影像学表现;比较感染胞内分... 目的分析天津地区非结核分枝杆菌(NTM)肺病患者的菌种分布及临床特征,为天津地区NTM肺病临床诊治提供参考。方法选取NTM肺病患者106例,分析NTM菌种分布情况、不同NTM菌种感染患者合并症和临床表现分布、胸部影像学表现;比较感染胞内分枝杆菌、龟脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌患者白细胞、血红蛋白、血白蛋白水平。结果106例NTM肺病患者,分布在前3位的菌种是胞内分枝杆菌(39.62%,42/106)、堪萨斯分枝杆菌(23.58%,25/106)和龟脓肿分枝杆菌(23.58%,25/106)。患者主要的合并症有肺结核、支气管扩张、慢性阻塞性肺疾病和糖尿病。就诊时临床表现以咳嗽咳痰最为常见(64.15%,68/106),其次为发热(35.85%,38/106),气短喘息(16.98%,18/106)和咯血(16.04%,17/106)等。100例患者的影像学特征表现以渗出、空洞及支气管扩张为主。胞内分枝杆菌感染患者胸腔积液比例高于龟脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌感染患者(P<0.05);堪萨斯分枝杆菌感染患者支气管扩张比例低于胞内分枝杆菌和龟脓肿分枝杆菌感染患者(P<0.01)。胞内分枝杆菌感染患者血红蛋白水平低于龟脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌感染患者(P<0.05),白蛋白水平低于龟脓肿分枝杆菌感染患者(P<0.05)。结论天津地区NTM肺病患者流行菌种以胞内、堪萨斯、龟脓肿分枝杆菌为主,临床表现多为咳嗽咳痰、发热等,影像学表现以渗出、空洞及支气管扩张为主。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 堪萨斯分枝杆菌 脓肿分枝杆菌 非结核分枝杆菌肺病 菌种鉴定 临床特征

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新型鹅星状病毒荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量：5

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作者 马水锋 徐梦璐 +5 位作者 吴少鹏 邵红霞 钱琨 万志敏 叶建强 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2022年第2期36-42,共7页

为建立一种准确快速检测新型鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的方法,研究以GAstV毒株JS20为模板,根据GAstV的ORF2基因序列设计特异性引物,在构建重组质粒pGEMT-GAstV的基础上,建立了检测GAstV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qRT-PCR... 为建立一种准确快速检测新型鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的方法,研究以GAstV毒株JS20为模板,根据GAstV的ORF2基因序列设计特异性引物,在构建重组质粒pGEMT-GAstV的基础上,建立了检测GAstV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。结果显示:阳性对照重组质粒pGEMT-GAstV在1.087×10^(1)~1.087×10^(8)拷贝/μL浓度之间与qRT-PCR的Ct值呈现良好的线性关系;该qRT-PCR对所检测的鸡星状病毒(cASTV)、禽腺病毒(FAdV)、小鹅瘟病毒(GPV)以及鸭坦布苏病毒(DTMUV)均无交叉反应;检测灵敏度为1.087×10^(1)拷贝/μL,组内和组间变异系数均小于1.6%。利用该q RT-PCR方法对在鹅胚及LMH细胞上繁殖不同代次的JS20病毒载量进行检测发现,JS20在鹅胚上的扩增效率更高,病毒载量可达10^(8)~10^(9)拷贝/mL。对江苏不同地区26份临床样品进行检测发现,该q RT-PCR方法的阳性检出率为73.08%,而普通PCR方法阳性检出率仅为42.30%。结果表明建立的新型GAstV qRT-PCR具有很好的特异性及灵敏度,且在新型GAstV定量分析及临床样品检测诊断中展示了良好的应用前景。 展开更多

关键词 新型鹅星状病毒 荧光定量PCR 特异性 灵敏度 临床诊断

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鹅星状病毒江苏分离株JSSQ遗传特征分析 被引量：4

13

作者 徐梦璐 吴少鹏 +5 位作者 马水锋 邵红霞 钱琨 万志敏 叶建强 秦爱建 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期2174-2182,共9页

【背景】自2016年以来,我国山东、安徽、江苏、广东等养鹅地区暴发了一种以痛风为主要特征的急性传染病。【目的】研究引起江苏某鹅场雏鹅痛风的鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)的基因组特征。【方法】从疑似患有痛风的雏鹅肝脏样... 【背景】自2016年以来,我国山东、安徽、江苏、广东等养鹅地区暴发了一种以痛风为主要特征的急性传染病。【目的】研究引起江苏某鹅场雏鹅痛风的鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)的基因组特征。【方法】从疑似患有痛风的雏鹅肝脏样品中分离到一株GAstV,命名为JSSQ,并对JSSQ全基因组序列及遗传特征进行分析。【结果】GAstV JSSQ株可在LMH细胞上稳定传代,无明显细胞病变;该毒株基因组全长7 175 nt,与其他已报道的鹅星状病毒参考株相似性为57.3%-99.1%。系统进化分析显示,JSSQ与参考毒株AHAU3亲缘关系最近,处于同一分支。重组分析显示,在GAstVJSSQ基因组中的第807和2818位点发生了2次重组,起源于GD AHAU2(major parent)和AHAU4(minor parent)。抗原表位分析显示,在ORF2区出现多处氨基酸突变,存在P64S、A224T、A228S、Q229P等独特突变,可引起抗原表位的变化。【结论】不同地区GAstV可能存在不同生物学特性,在防控中应予以注意。 展开更多

关键词 鹅痛风 鹅星状病毒 分离鉴定 遗传特征分析

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2021—2022年我国鸡马立克病的流行病学调查 被引量：2

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作者 丁天 吴少鹏 +8 位作者 熊敏 蒲兴 王顷森 许默儒 邵红霞 钱琨 叶建强 党海斌 秦爱建 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期344-349,共6页

为了解我国规模化养殖场中马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)的感染和免疫状态,采用四重TaqMan探针荧光定量PCR对采自我国11个省(自治区、直辖市)的19个养殖企业的94个鸡群的羽毛囊和环境样本进行MDV疫苗毒和野毒检测。结果显示... 为了解我国规模化养殖场中马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)的感染和免疫状态,采用四重TaqMan探针荧光定量PCR对采自我国11个省(自治区、直辖市)的19个养殖企业的94个鸡群的羽毛囊和环境样本进行MDV疫苗毒和野毒检测。结果显示,大部分养殖场存在野毒感染,其中山东地区样本平均阳性率较高为13.6%。不同省市白羽肉鸡、黄羽肉鸡和蛋鸡样本的野毒平均阳性率分别为8.3%、3.9%和7.2%。在不同日龄蛋鸡样本中,1~7、8~14和50~80日龄野毒阳性率较高,分别为12.6%、13.8%和14.3%。此外,单独免疫CVI988疫苗或以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体的基因工程重组疫苗(rHVT)以及同时免疫这两种疫苗,均能降低MDV野毒的阳性率,且同时免疫两种疫苗鸡群的野毒阳性率最低。对不同免疫方式下疫苗在羽毛囊中复制情况的检测结果显示,在3~4周龄时,单独免疫CVI988疫苗的平均阳性率为91.4%,单独免疫rHVT疫苗的平均阳性率为58.2%,同时免疫两种疫苗时,CVI988疫苗和rHVT疫苗的平均阳性率分别为51.8%和36.9%,提示鸡场应切实做好马立克病的防控工作。本研究丰富了对MDV感染现状的新认识,为我国未来马立克病的防控提供了指导。 展开更多

关键词 马立克病 流行病学调查 四重荧光定量PCR

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鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及其识别抗原表位的鉴定 被引量：1

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作者 汪铭锐 吴俊花 +4 位作者 王飞 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期597-606,共10页

拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂... 拟制备针对鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP2蛋白的单克隆抗体(mAb),为CIAV的诊断和病毒生物学特性研究提供有用制剂。以PCR技术扩增CIAV VP2基因并克隆到原核表达载体pET-32a中,经IPTG诱导表达。以原核表达的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术研制并筛选分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的阳性杂交瘤细胞;采用截短表达CIAV VP2基因方法鉴定mAb识别的抗原表位。结果显示:成功获得了1株能稳定分泌抗CIAV VP2蛋白mAb的杂交瘤细胞株,并命名为CIAV-VP2-4A12;亚类鉴定结果表明,该mAb重链为IgG_(1)型,轻链为kappa链;Western blot结果显示,该mAb可以识别大肠杆菌,Sf9细胞和转染pCAGGS-VP2-Flag的DF1细胞中表达的VP2蛋白。使用原核表达截短蛋白进行表位鉴定,发现该mAb识别抗原表位序列是^(155)KTVRW^(159),序列比对发现该表位在CIAV中高度保守。本研究成功制备了针对CIAV VP2蛋白的特异性mAb,并精确鉴定了其识别表位,为VP2蛋白功能的研究以及CIAV的诊断方法研发提供了有效工具。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 VP2蛋白 单克隆抗体 抗原表位

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表达鸡传染性贫血病毒VP1蛋白的新型重组血清4型禽腺病毒的构建 被引量：1

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作者 徐贞琦 蒋蕙如 +8 位作者 郭艺文 谢泉 殷楠 李拓凡 万志敏 邵红霞 秦爱建 张俊 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2024年第4期47-53,共7页

为研制新型鸡传染性贫血(CIA)高效疫苗以解决国内商品鸡群中普遍存在的鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染问题,试验利用CRISPR-Cas9技术和Cre-LoxP系统,以血清4型禽腺病毒(FAdV-4)为载体,构建表达CIAV VP1蛋白的重组FAdV-4。通过间接免疫荧光... 为研制新型鸡传染性贫血(CIA)高效疫苗以解决国内商品鸡群中普遍存在的鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染问题,试验利用CRISPR-Cas9技术和Cre-LoxP系统,以血清4型禽腺病毒(FAdV-4)为载体,构建表达CIAV VP1蛋白的重组FAdV-4。通过间接免疫荧光试验和蛋白免疫印迹试验对重组病毒进行验证,通过体外病毒生长曲线来研究其复制效率。结果显示:该重组病毒构建成功,能有效表达CIAV VP1蛋白,命名为rFAdV-4-CIAV-VP1,且发现rFAdV-4-CIAV-VP1在LMH细胞中的复制效率远低于野生型FAdV-4。研究表明构建的重组病毒rFAdV-4-CIAV-VP1为CIAV和FAdV-4的联防联控提供了二联候选疫苗株。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 VP1蛋白 CRISPR-Cas9 重组血清4型禽腺病毒 表达

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趋化因子CCL28基因的克隆表达及其多抗制备 被引量：1

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作者 陆文静 王礼学 +7 位作者 王国相 王伟康 谢泉 谢菁 邵红霞 高巍 秦爱建 叶建强 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2019年第4期44-48,54,共6页

将原核表达质粒pGEX-6P-1-CCL28转化至大肠埃希菌BL21中,经IPTG诱导,获得了GST-CCL28可溶性融合表达产物。利用纯化的GST-CCL28蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗GST-CCL28的多克隆抗体。同时将CCL28基因亚克隆进真核表达载体,经测序验证后命... 将原核表达质粒pGEX-6P-1-CCL28转化至大肠埃希菌BL21中,经IPTG诱导,获得了GST-CCL28可溶性融合表达产物。利用纯化的GST-CCL28蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗GST-CCL28的多克隆抗体。同时将CCL28基因亚克隆进真核表达载体,经测序验证后命名为pcDNA3.1-CCL28。间接免疫荧光及Western blot试验结果进一步证明,所获得的抗GST-CCL28多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-CCL28质粒的DF-1细胞内高表达的CCL28蛋白。这一研究为制备抗CCL28单克隆抗体和探究与CCL28相关的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 趋化因子CCL28 克隆表达 多克隆抗体

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基于马立克病病毒Meq蛋白单克隆抗体的免疫组化诊断方法的建立 被引量：1

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作者 王润锦 孙英杰 +5 位作者 石彬 吴少鹏 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2024年第1期70-76,共7页

为了对临床上马立克病(MD)准确诊断,研究利用杆状病毒表达系统表达马立克病病毒(MDV)强毒株Meq重组蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术研制MDV Meq蛋白特异性单克隆抗体,并以此为基础建立MD诊断方法。结果显示:试验成功制备了4株Meq蛋白特异... 为了对临床上马立克病(MD)准确诊断,研究利用杆状病毒表达系统表达马立克病病毒(MDV)强毒株Meq重组蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术研制MDV Meq蛋白特异性单克隆抗体,并以此为基础建立MD诊断方法。结果显示:试验成功制备了4株Meq蛋白特异性单克隆抗体,分别命名为MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10;Western blot结果证明这些单克隆抗体不仅能与体外表达的Meq蛋白反应,而且能识别MD肿瘤细胞系MSB-1中的Meq蛋白和MD肿瘤组织细胞中的Meq蛋白;以Meq蛋白单克隆抗体成功建立免疫组化诊断MD的方法,该方法特异性强,结果稳定,易观察判定。研究表明,试验制备了4株Meq蛋白单克隆抗体(MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10),基于此建立的免疫组化MD诊断方法为临床MD鉴别诊断提供技术支撑。 展开更多

关键词 马立克病 Meq蛋白 单克隆抗体 免疫组化 诊断

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鸡源EphrinA2基因的克隆表达及其单克隆抗体研制 被引量：1

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作者 相汝苹 姚晓慧 +5 位作者 谢泉 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 李拓凡 《中国家禽》 北大核心 2023年第9期25-30,共6页

研究旨在研制抗鸡EphrinA2蛋白的特异性单克隆抗体。试验用PCR和同源重组技术构建了鸡EphrinA2真核及原核表达载体,以纯化的EphrinA2原核表达产物免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA方法筛选出阳性细胞克隆;用SDS-... 研究旨在研制抗鸡EphrinA2蛋白的特异性单克隆抗体。试验用PCR和同源重组技术构建了鸡EphrinA2真核及原核表达载体,以纯化的EphrinA2原核表达产物免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA方法筛选出阳性细胞克隆;用SDS-PAGE、间接免疫荧光试验和Western blot验证表达产物及单抗的特性。结果显示:原核表达的重组蛋白His-EphrinA2-RBD主要位于细菌包涵体中;获得2株能稳定分泌抗EphrinA2蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为4H6和1G9;单克隆抗体4H6不仅能特异性识别真核表达载体pcDNA3.1-EphrinA2在DF-1细胞中表达的EphrinA2蛋白,而且能有效识别LMH和DF-1细胞中内源性的EphrinA2蛋白。结果表明,单克隆抗体4H6与鸡EphrinA2蛋白反应性和特异性均良好,能够应用于鸡EphrinA2相关基础研究。 展开更多

关键词 鸡源EphrinA2 蛋白表达 单克隆抗体 间接免疫荧光试验 Western blot

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抗鸡源EphA2蛋白小鼠多克隆抗体的制备及其特性研究 被引量：1

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作者 姚晓慧 李拓凡 +4 位作者 谢泉 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2020年第3期29-34,共6页

为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原... 为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原核表达载体转化BL21后经IPTG诱导以及SDS-PAGE分析发现,融合蛋白GST-EphA2-A和GST-EphA2-B均获得有效表达。以纯化的GST-EphA2-A和GST-EphA2-B蛋白免疫小鼠制备了抗鸡EphA2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot试验表明,所制备的抗鸡EphA2多克隆抗体不仅能识别转染pcDNA3.1-EphA2的DF-1及LMH细胞中表达的外源性EphA2,而且还能有效识别内源性鸡源EphA2蛋白。本研究中鸡EphA2的成功表达及其多克隆抗体研制为后续研究鸡EphA2的功能提供了分子生物学工具。 展开更多

关键词 鸡源EphA2 原核分段克隆表达 真核表达 多克隆抗体 反应性

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