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戈壁异常球菌Dgl5蛋白生物学功能研究 被引量:6
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作者 张亨 刘盈盈 +2 位作者 陈云 平淑珍 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期177-184,共8页
LEA5C(Group 5C Late Embryogenesis Abundant)家族蛋白参与非生物胁迫反应并以分子伴侣的形式保护细胞内生物大分子不受损伤。分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0具有极端的电离辐射、氧化、干燥等抗性。功... LEA5C(Group 5C Late Embryogenesis Abundant)家族蛋白参与非生物胁迫反应并以分子伴侣的形式保护细胞内生物大分子不受损伤。分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0具有极端的电离辐射、氧化、干燥等抗性。功能基因组注释表明Dgo_CA1605编码蛋白属于LEA5C家族,命名为Dgl5,对Dgl5生理功能展开研究。采用同源重组的方法构建Dgl5重组表达菌株。非生物胁迫实验结果表明,Dgl5能够显著增强表达菌株BL21盐胁迫抗性,最大限度地保护宿主菌免受反复冻融的损伤;体外生理生化实验结果表明在反复冻融条件下,Dgl5能够有效保护苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)酶学活性。因此推测,在冷冻、高盐胁迫条件下,Dgl5蛋白通过保护细胞体内相关酶类的活性,增强宿主菌抵抗外界复杂多变的极端环境。? 展开更多
关键词 LEA5C 戈壁异常球菌 非生物胁迫 分子伴侣
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Lon1蛋白酶参与耐辐射异常球菌高温胁迫及细胞分裂的功能研究 被引量:3
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作者 赵明明 唐殷 +6 位作者 郭磊周 韩佳慧 葛佳茗 孟勇 平淑珍 周正富 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期149-158,共10页
Lon是一类广泛存在于生物体内的蛋白水解酶,其通过水解受损及无用蛋白,防止蛋白聚集造成的细胞伤害,在胞内氨基酸周转再利用中发挥重要作用。极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans R1)的超强非生物胁迫耐受性与其拥有功能... Lon是一类广泛存在于生物体内的蛋白水解酶,其通过水解受损及无用蛋白,防止蛋白聚集造成的细胞伤害,在胞内氨基酸周转再利用中发挥重要作用。极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans R1)的超强非生物胁迫耐受性与其拥有功能强大的胞内蛋白质稳态系统密切相关。而Lon作为蛋白水解系统的重要组成部分,在耐辐射异常球菌中的功能分析还未见具体报导。因此本研究以耐辐射异常球菌Lon1蛋白酶为研究对象,分析其逆境胁迫下的功能。结果显示lon1基因的转录受高温诱导,48℃高温胁迫蛋白组学分析显示,lon1的缺失使多个分子伴侣蛋白、参与膜功能和转运蛋白以及与DNA修复、转录调控、能量代谢等相关的蛋白表达量发生显著上调;lon1的缺失使5个参与细胞形态建成的蛋白表达量显著下调,电镜结果证实lon1缺失使细菌分裂异常,形成巨型细胞,细胞膜发生严重的损伤;非生物胁迫冲击实验发现,lon1的缺失使耐辐射异常球菌对0.2 mol/L NaCl以及48℃高温敏感。研究表明Lon1蛋白酶主要参与耐辐射异常球菌的细胞形态建成,并在适应高温等胁迫中发挥功能。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 LON 非生物胁迫 蛋白质组
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DrwH类信号肽序列对其抗氧化功能的影响 被引量:2
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作者 郭磊周 韩佳慧 +6 位作者 唐殷 李江 黄程 代其林 王劲 平淑珍 江世杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期125-132,共8页
耐辐射异常球菌疏水性LEA5C家族蛋白DrwH参与细胞耐受氧化和盐胁迫过程。前期研究发现,DrwH蛋白N端存在19个氨基酸组成的类信号肽序列,为探索该序列对DrwH发挥抗氧化功能的影响,本研究通过对DrwH蛋白进行分段截短,构建含有不同区段的重... 耐辐射异常球菌疏水性LEA5C家族蛋白DrwH参与细胞耐受氧化和盐胁迫过程。前期研究发现,DrwH蛋白N端存在19个氨基酸组成的类信号肽序列,为探索该序列对DrwH发挥抗氧化功能的影响,本研究通过对DrwH蛋白进行分段截短,构建含有不同区段的重组大肠杆菌菌株,比较分析重组菌株在正常培养和氧化胁迫下的生长能力。结果表明,含有类信号肽序列的融合蛋白过量表达不仅抑制了大肠杆菌的生长,而且使DrwH蛋白失去抗氧化能力。荧光定量PCR显示经IPTG诱导后,含类信号肽全长蛋白DrwH和结构域蛋白WHy在转录水平大量累积,蛋白在过量积累条件下发挥其生物学功能。由此表明,类信号肽对全长蛋白DrwH表达及其发挥抗氧化功能具有重要影响。 展开更多
关键词 耐辐射异常球菌 DrwH蛋白 WHy结构域 类信号肽 抗氧化
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戈壁异常球菌角蛋白酶基因的克隆及功能研究 被引量:2
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作者 耿秀秀 周正富 +2 位作者 刘盈盈 平淑珍 王劲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期65-70,共6页
旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础。从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker。构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进... 旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础。从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker。构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进行体外诱导表达纯化,通过对羽毛水解活性的测定探究粗酶液的最适温度和pH。结果显示,Dgker蛋白N端前50个氨基酸对蛋白的表达纯化有很大影响。Dgker的重组菌株3d完全分解羽毛,在奶粉平板上重组菌株粗酶液比空载菌株粗酶液降解圈更显著。Dgker适应的温度和pH较为广泛其中最适温度是60℃、最适pH是5.0。Dgker能降解羽毛在以后的工业生产及处理废弃羽毛有极大的应用空间。 展开更多
关键词 角蛋白 戈壁异常球菌 角蛋白酶 酶活
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细菌周质分子伴侣LolA研究进展 被引量:1
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作者 贺小丽 郭磊周 +5 位作者 韩佳慧 唐殷 袁媛 代其林 平淑珍 江世杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期275-283,共9页
细菌脂蛋白是一种脂质修饰的膜蛋白,参与细胞膜合成等多种重要生理过程。脂蛋白形成过程依赖于Lol转运系统,该蛋白最先在细胞质中以前体的形式合成,然后在细胞膜上被加工为成熟脂蛋白,锚定于细菌外膜周质侧。Lol系统由LolA-E五种蛋白组... 细菌脂蛋白是一种脂质修饰的膜蛋白,参与细胞膜合成等多种重要生理过程。脂蛋白形成过程依赖于Lol转运系统,该蛋白最先在细胞质中以前体的形式合成,然后在细胞膜上被加工为成熟脂蛋白,锚定于细菌外膜周质侧。Lol系统由LolA-E五种蛋白组成,其中脂蛋白在周质空间中依赖伴侣蛋白LolA进行转运,LolA将脂蛋白以"mouth to mouth"的方式从LolCDE转运至LolB,进而完成脂蛋白定位。重点对周质分子伴侣LolA结构、参与的转运体系及其生物学功能进行综述,旨在通过对脂蛋白转运分子机制的理解为感染性疾病的治疗提供更多的药物靶点。 展开更多
关键词 脂蛋白 Lol转运系统 周质分子伴侣LolA 生物学功能
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Identification of the nitrogen-fixing Pseudomonas stutzeri major flagellar gene regulator FleQ and its role in biofilm formation and root colonization 被引量:1
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作者 MA Yao ZHANG Qiu-lei +6 位作者 YANG Zhi-min LI Yun YAN Yong-liang ping shu-zhen ZHANG Li-wen LIN Min LU Wei 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第2期339-348,共10页
Flagellar biosynthesis and motility are subject to a four-tiered transcriptional regulatory circuit in Pseudomonas,and the master regulator FleQ appears to be the highest-level regulator in this hierarchical regulator... Flagellar biosynthesis and motility are subject to a four-tiered transcriptional regulatory circuit in Pseudomonas,and the master regulator FleQ appears to be the highest-level regulator in this hierarchical regulatory cascade.Pseudomonas stutzeri A1501 is motile by a polar flagellum;however,the motility and regulatory mechanisms involved in this process are unknown.Here,we searched the A1501 genome for flagella and motility genes and found that approximately 50 genes,which were distributed in three non-contiguous chromosomal regions,contribute to the formation,regulation and function of the flagella.The non-polar mutation of fleQ impaired flagellar biosynthesis,motility and root colonization but enhanced biofilm formation.FleQ positively regulates the expression of flagellar class Ⅱ-Ⅳ genes,suggesting a regulatory cascade that is coordinated similar to that of the well-known P.aeruginosa.Based on our results,we propose that flagellar genes in P.stutzeri A1501 are regulated in a cascade regulated by FleQ and that flagellum-driven motility properties may be necessary for competitive rhizosphere colonization. 展开更多
关键词 FleQ Pseudomonas stutzeri flagellar biosynthesis biofilm formation root colonization
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