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HCV感染相关的肝细胞性肝癌中精氨酸酶Ⅱ的表达 被引量:1
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作者 曹文俊 Bill Sun +4 位作者 徐锋 连兆瑞 Marcy Clayton mark feitelson 樊绮诗 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期965-968,共4页
目的通过对丙型肝炎病毒-原发性肝细胞肝癌(HCV-HCC)组织及细胞中精氨酸酶Ⅱ(Arg-Ⅱ)的表达进行分析,并以RNA干扰技术阻断其在细胞内的表达,初步研究Arg-Ⅱ表达在HCV-HCC发病中的意义。方法首先以基因转染技术分别将HCV基因组和... 目的通过对丙型肝炎病毒-原发性肝细胞肝癌(HCV-HCC)组织及细胞中精氨酸酶Ⅱ(Arg-Ⅱ)的表达进行分析,并以RNA干扰技术阻断其在细胞内的表达,初步研究Arg-Ⅱ表达在HCV-HCC发病中的意义。方法首先以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7细胞中,以逆转录-实时荧光PCR检测HCV基因组的转录并作细胞生长曲线测定,以Western blotting技术研究HCV基因组转染对细胞内Arg-Ⅱ表达的影响,以免疫组化技术分析HCV-HCC组织中Arg-Ⅱ的表达水平,运用RNA干扰技术对Arg-Ⅱ作初步的功能分析。结果以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7,成功建立了HuH7-HCV和HuH7-vector两个细胞系,逆转录-实时荧光PCR检测表明HuH7-HCV细胞的HCV转录水平为0.5~5拷贝/细胞。Western blotting结果显示,与对照细胞相比,HuH-7-HCV细胞的Arg-Ⅱ含量升高3.9倍。免疫组化技术分析HCV-HCC组织标本中Arg-Ⅱ的表达,结果呈强阳性,而对照标本中基本不表达。采用RNA干扰方法阻断HuH7-HCV细胞的Arg-Ⅱ表达,发现细胞增殖被明显抑制。结论Arg-Ⅱ在HCV阳性肝细胞系中及HCV-HCC组织中异常表达并可能参与HCV-HCC的发病机制。 展开更多
关键词 精氨酸酶Ⅱ 原发性肝细胞肝癌 丙型肝炎病毒 SIRNA
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精氨酸酶I在HCV转染肝癌细胞增殖中的作用 被引量:3
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作者 曹文俊 Bill Sun +3 位作者 连兆瑞 Marcy Clayton mark feitelson 樊绮诗 《诊断学理论与实践》 2007年第4期319-322,共4页
目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因组转染的肝癌细胞中精氨酸酶Ⅰ的表达及其意义,探究其在HCV-肝细胞肝癌(HCC)发病中的作用。方法:以转染HCV基因组的人肝癌细胞系(Huh7)为研究对象,采用蛋白印迹技术研究HCV基因组转染... 目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因组转染的肝癌细胞中精氨酸酶Ⅰ的表达及其意义,探究其在HCV-肝细胞肝癌(HCC)发病中的作用。方法:以转染HCV基因组的人肝癌细胞系(Huh7)为研究对象,采用蛋白印迹技术研究HCV基因组转染对细胞内精氨酸酶Ⅰ表达的影响;运用小干扰RNA(siRNA)技术抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,并探讨其对细胞生长的影响及作用机制。结果:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝癌细胞系(Huh7-HCV)中的表达上调,且与对照细胞相比,Huh7-HCV细胞的精氨酸酶Ⅰ含量升高4.3倍。运用siRNA抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,可明显抑制细胞生长并导致其死亡,且可使细胞周期发生明显改变。结论:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝细胞Huh7中表达上调,可能对促进Huh7-HCV细胞生长具重要意义。 展开更多
关键词 精氨酸酶Ⅰ 丙型肝炎病毒 肝细胞肝癌 小干扰RNA
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感染土拨鼠乙肝病毒的小鼠非瘤组织与肝细胞癌的差异表达基因 被引量:2
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作者 曹晓燕 刘杰 +5 位作者 连兆瑞 Marcy Clayton 胡加露 朱明华 樊代明 mark feitelson 《陕西肿瘤医学》 2001年第2期75-77,共3页
目的 确定土拨鼠HBV引发的肝癌组织和非癌组织中差异表达的基因。方法 通过抑制消减杂交法克隆土拨鼠HBV引发的肝癌组织和非癌组织中差异表达的基因 ;对差异表达基因进行DNA序列测定后于GeneBank内分析其同源性 ;应用原位杂交确定差... 目的 确定土拨鼠HBV引发的肝癌组织和非癌组织中差异表达的基因。方法 通过抑制消减杂交法克隆土拨鼠HBV引发的肝癌组织和非癌组织中差异表达的基因 ;对差异表达基因进行DNA序列测定后于GeneBank内分析其同源性 ;应用原位杂交确定差异基因在肝癌组织和非癌组织中的特异性表达。结果 通过抑制消减杂交共得到了 14条肿瘤组织差异表达的基因片段。其中 ,肿瘤组织和非瘤组织共有的 8条基因与GeneBank中的已知基因同源 ,肿瘤组织来源的 5条基因和非瘤组织来源的 1条基因在GeneBank中未找到同源基因。原位杂交差异基因在肝癌组织和非癌组织中均为特异性表达。结论 通过抑制消减杂交获得了 14条肝癌组织和非癌组织差异表达的基因 。 展开更多
关键词 肝癌 乙肝病毒 抑制消减杂交 肝细胞癌 差异表达基因 动物实验
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Differentially expressed genes in hepatocellular carcinoma induced by woodchuck hepatitis B virus in mice 被引量:11
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作者 mark feitelson 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第4期575-578,共4页
INTRODUCTIONHepatocellular carcinoma(HCC)is one of the major causes of death in the word.The mechanism of carcinogenesis is unknown,although it is widely accepted that HBV and HCV are clsely related to liver cancer[1-... INTRODUCTIONHepatocellular carcinoma(HCC)is one of the major causes of death in the word.The mechanism of carcinogenesis is unknown,although it is widely accepted that HBV and HCV are clsely related to liver cancer[1-5[1-5].Previously,a variety of studies have described the differences in gene expression which distinguished tumor from nontumor[6-11].Cloning of the genes,especially the genes associated with HBV and HCV,is still very important to account for the development of liver cancer. 展开更多
关键词 Animals Carcinoma Hepatocellular Cloning Molecular DNA Complementary Databases Nucleic Acid Gene Expression Regulation Neoplastic Gene Expression Regulation Viral Hepatitis B Hepatitis B Virus Woodchuck Humans MICE Polymerase Chain Reaction Research Support Non-U.S. Gov't
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乙型肝炎病毒X抗原转导细胞差示表达全长基因C2的克隆及初步功能研究 被引量:11
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作者 刘杰 连兆瑞 +7 位作者 潘静波 胡家露 朱明华 窦科峰 丁杰 吴开春 樊代明 mark feitelson 《中华医学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期456-460,共5页
目的 克隆乙型肝炎病毒X抗原 (HBxAg)相关肝癌差示表达基因并做功能研究。方法  (1)用逆转录病毒方法建立表达HBxAg细胞模型。 (2 )用抑制差减杂交做基因差示表达分析。 (3)做RNA印迹分析 (NorthernBlot)及原位分子杂交筛选基因探针。... 目的 克隆乙型肝炎病毒X抗原 (HBxAg)相关肝癌差示表达基因并做功能研究。方法  (1)用逆转录病毒方法建立表达HBxAg细胞模型。 (2 )用抑制差减杂交做基因差示表达分析。 (3)做RNA印迹分析 (NorthernBlot)及原位分子杂交筛选基因探针。 (4 )用 5′和 3′迅速末端扩增法 (RACEPCR)进行全长基因序列扩增 ,并进行体外蛋白翻译及制备抗体 ,做蛋白质印迹 (WesternBlot)分析。(5 )进行该基因细胞内转导 ,进行功能研究。结果 共得到 10个cDNA探针 ,其中 8个因HBX表达上调 ,2个表达下降。经筛选及全长基因扩增 ,得到 1个全长为 1.35kb、编码 113个氨基酸的全长基因C2 ,和蛋白翻译起始因子 (Suil)同源 ,其表达被HBX抑制。初步功能研究显示 ,此基因对细胞生长具有抑制作用 ,并且正常肝组织中其mRNA信号明显高于肝癌组织。结论 我们不仅克隆出HBX相关基因C2并进行了功能研究 ,还首次提出DNA病毒 (HBV) 展开更多
关键词 肝肿瘤 互补DNA 乙型肝炎病毒X抗原
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蛋白翻译起始因子C2在肝癌、胃癌中的表达与分布 被引量:1
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作者 张庆 刘杰 +6 位作者 张力 李青 李勤 王新 乔泰东 樊代明 mark feitelson 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期266-270,共5页
目的 研究C2基因在肝细胞癌 (HCC)、胃癌中的表达、分布及意义。方法 利用免疫组化法检测C2蛋白在 6 0例HCC、5 8例胃癌组织中的表达 ,Westernblot法检测C2蛋白在 10例HCC及其癌旁组织中的表达。结果  6 0例HCC及 4 2例癌旁组织中 ,C... 目的 研究C2基因在肝细胞癌 (HCC)、胃癌中的表达、分布及意义。方法 利用免疫组化法检测C2蛋白在 6 0例HCC、5 8例胃癌组织中的表达 ,Westernblot法检测C2蛋白在 10例HCC及其癌旁组织中的表达。结果  6 0例HCC及 4 2例癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率分别为 2 7.3% (17/ 6 0例 )和83.3% (35 / 4 2例 ) ,C2蛋白在HCC癌组织中表达明显低于其癌旁组织 (P <0 .0 0 1) ;C2的表达与病人年龄、HBsAg及AFP有明显关系 (P <0 .0 5 )。Westernblot结果与免疫组化一致。在HBXAg阳性的 4 9例HCC中 ,C2蛋白阳性率为 2 0 .4 % ,在HBXAg阴性的 11例HCC中 ,C2蛋白阳性率为6 3.6 %。C2在HBXAg阳性的HCC中的表达明显低于HBXAg阴性者 (P <0 .0 5 )。 5 8例原发性胃癌及 4 4例癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率分别占 4 1.4 % (2 4 / 5 8例 )和 77.3% (34/ 4 4例 )。C2蛋白在胃癌组织中表达明显低于其癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,且与胃癌组织的分化程度、浆膜浸润、肿瘤大小有明显的关系 (P <0 .0 5 )。结论 C2基因表达下调可能与HCC、胃癌的发生、发展有关。HBXAg对C2的抑制作用可能与HCC的发生 ,发展有关。 展开更多
关键词 蛋白翻译起始因子C2 肝癌 胃癌 HBXAG C2基因
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