猪支原体肺炎弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果评估 被引量：5

1

作者 彭涛 马梓承 +4 位作者 王宏宇 孟凡亮 刘照虎 肖一红 刘思当 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期284-289,共6页

为研究猪支原体肺炎(MPS)弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果,本研究选取40头10日龄猪肺炎支原体(Mph)阴性仔猪,随机平均分为4组。A组肌肉注射灭活疫苗;B组喷鼻弱毒活疫苗;C组肌注灭活疫苗同时喷鼻弱毒活疫苗;D组为空白对照。疫苗... 为研究猪支原体肺炎(MPS)弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果,本研究选取40头10日龄猪肺炎支原体(Mph)阴性仔猪,随机平均分为4组。A组肌肉注射灭活疫苗;B组喷鼻弱毒活疫苗;C组肌注灭活疫苗同时喷鼻弱毒活疫苗;D组为空白对照。疫苗免疫后每天观察猪群的整体状态,于免疫后3 d、30 d、90 d、180 d,分别采集鼻腔棉拭子和血液样品,进行应激相关指标以及相关疾病的抗体检测,并于免疫后180 d进行MPS病原检测。仔猪屠宰时称重,采集其完整肺脏,计算其平均增重并进行肺脏病变评分。结果显示:C组猪生长状况最好,猪群支原体感染率低、抗体水平高、平均增重高并且肺脏病变程度低,表明采用MPS灭活疫苗和弱毒活疫苗联合的免疫效果更好,并且未引起严重的应激反应。本研究对MPS疫苗的合理应用提供了实验依据。 展开更多

关键词 猪支原体肺炎 疫苗联合免疫 病原检测 抗体检测 病变评分

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外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究 被引量：15

2

作者 孟凡亮 郭太平 +4 位作者 高建荣 仰杰 高硕 叶亚兰 颜刚林 《临床肺科杂志》 2019年第8期1438-1441,共4页

目的探讨外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、D-二聚体、hs-CRP与COPD急性加重和合并呼吸衰竭的相关性。方法收集我院2017年10月至2018年5月COPD急性加重期住院患者40例纳入AECOPD组,并按有无合并呼吸衰竭分为单纯AECOPD组(20例)和AEC... 目的探讨外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、D-二聚体、hs-CRP与COPD急性加重和合并呼吸衰竭的相关性。方法收集我院2017年10月至2018年5月COPD急性加重期住院患者40例纳入AECOPD组,并按有无合并呼吸衰竭分为单纯AECOPD组(20例)和AECOPD合并呼衰组(20例),收集同期门诊随诊的COPD稳定期患者30例纳入SCOPD组,收集同期健康体检者40例纳入健康对照组,分别检测AECOPD组、SCOPD组、健康对照组患者的外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP含量,分析上述三组患者外周血各指标之间的差异、单纯AECOPD组与AECOPD合并呼吸衰竭组之间外周血各指标的差异及相关性。结果AECOPD组外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP均高于SCOPD组和健康对照组,SCOPD组外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP均高于健康对照组,AECOPD合并呼吸衰竭组外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP均高于单纯AECOPD组,AECOPD组外周血NLR与D-二聚体、hs-CRP均呈正相关(P<0.01)、D-二聚体与hs-CRP呈正相关(P<0.01)。结论外周血NLR、D-二聚体、hs-CRP与COPD急性加重和并发呼吸衰竭密切相关,可作为反映COPD病情变化的参考指标。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 超敏C反应蛋白 D-二聚体 中性粒细胞/淋巴细胞比值

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肺炎支原体热休克蛋白HSP70的表达、纯化及其免疫原性分析 被引量：5

3

作者 郭志丽 刘立雍 +6 位作者 韩娜 孟凡亮 刘桧 何利华 龚杰 张建中 赵飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第10期1168-1172,共5页

目的构建肺炎支原体(MP)热休克蛋白HSP70重组原核表达质粒,纯化并鉴定其免疫原性。方法以肺炎支原体ATCC 29342为模板,利用搭桥PCR扩增HSP70全序列,胶回收纯化后测序验证。使用BamH1和Xho1双酶切PCR产物,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-HSP... 目的构建肺炎支原体(MP)热休克蛋白HSP70重组原核表达质粒,纯化并鉴定其免疫原性。方法以肺炎支原体ATCC 29342为模板,利用搭桥PCR扩增HSP70全序列,胶回收纯化后测序验证。使用BamH1和Xho1双酶切PCR产物,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-HSP70,转入大肠埃希菌BL21中,经IPTG诱导目的蛋白表达,对表达产物进行12.5%SDS-PAGE和质谱鉴定。利用AKTA explore 100蛋白纯化仪纯化重组HSP70,以此为抗原与MP感染者血清进行Western blot,检测其免疫反应性。结果搭桥PCR成功完成HSP70基因A1728G突变,重组质粒pGEX-4T-1-HSP70构建正确,转化BL21后经IPTG诱导表达分子质量单位92 ku含GST标签的重组HSP70,纯化蛋白经Western blot检测能与感染Ⅰ型和Ⅱ型MP菌株患儿血清发生特异性反应。结论获得重组HSP70完整蛋白,纯化产物具有免疫反应性,为制备高效防治肺炎支原体感染的基因工程疫苗及研究HSP70蛋白的免疫学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 肺炎支原体 热休克蛋白70 原核表达 免疫印迹

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CCL25和LTBP2在非小细胞肺癌患者血清中的表达及在疾病诊断中的应用价值 被引量：15

4

作者 叶亚兰 孟凡亮 仰杰 《临床肺科杂志》 2022年第9期1403-1406,1410,共5页

目的探讨CCL25和LTBP2在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达及在疾病诊断中的应用价值。方法收集2018年9月至2021年9月本院收治的129例NSCLC患者作为观察组,另将同期129例健康体检者纳入对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清CCL25和LTBP... 目的探讨CCL25和LTBP2在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达及在疾病诊断中的应用价值。方法收集2018年9月至2021年9月本院收治的129例NSCLC患者作为观察组,另将同期129例健康体检者纳入对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清CCL25和LTBP2水平,比较两组血清CCL25和LTBP2水平差异性,分析血清CCL25和LTBP2水平与NSCLC患者病理特征的关系及对NSCLC的诊断价值。结果观察组患者血清CCL25和LTBP2水平均明显高于对照组(P<0.05)。不同年龄、性别、病理类型的NSCLC患者血清CCL25和LTBP2水平间无显著性差异(P>0.05),但不同TNM分期、分化程度及是否发生淋巴结转移的NSCLC患者血清CCL25和LTBP2水平间存在显著性差异(P<0.05)。CCL25和LTBP2联合诊断NSCLC的曲线下面积为0.85,检测灵敏度为0.80,特异度为0.83。结论非小细胞肺癌患者血清中CCL25和LTBP2水平明显升高,二者可能是潜在的非小细胞肺癌诊断标志物。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 CCL25 LTBP2 诊断

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2016～2017年山东省三种亚型猪流感血清学调查 被引量：4

5

作者 肖一红 王玉超 +7 位作者 彭涛 孙法超 古金元 马梓承 王宏宇 孟凡亮 李宝全 刘思当 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第5期97-100,共4页

猪流感是一种人畜共患传染病,猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)在全世界各国的猪群中普遍存在。为了解山东省猪群中SIV的感染情况,2016年6月至2017年12月在山东省各地共采集7000份血清,采用HI抗体检测方法,分别用类禽型猪H1N1(EA ... 猪流感是一种人畜共患传染病,猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)在全世界各国的猪群中普遍存在。为了解山东省猪群中SIV的感染情况,2016年6月至2017年12月在山东省各地共采集7000份血清,采用HI抗体检测方法,分别用类禽型猪H1N1(EA H1N1)、2009甲型H1N1(2009/H1N1)和H3N2亚型抗原为标准抗原进行检测。结果显示,SIV抗体总阳性率为63.79%,其中EA H1N1抗体阳性率为56.31%,2009/H1N1抗体阳性率为24.61%,H3N2亚型抗体阳性率为1.61%。本研究结果表明2016~2017年山东省SIV感染比较普遍,类禽型猪H1N1抗体阳性率最高,2009甲型H1N1,H3N2抗体阳性率较低。 展开更多

关键词 猪流感 血清学 血凝抑制

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解脲脲原体和微小脲原体相对定量荧光PCR方法的建立及应用 被引量：2

6

作者 孟凡亮 李晶 +3 位作者 龚杰 何利华 张建中 赵飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第12期1422-1426,共5页

目的建立一种含内参基因的解脲脲原体(Uu)和微小脲原体(Up)相对定量的荧光PCR分型方法,克服标本采样差异对检测结果的影响,了解患者脲原体感染的生物分群及病原载量。方法设计Uu和Up检测与分型引物探针,使用人β-globin(BG)作为相对定... 目的建立一种含内参基因的解脲脲原体(Uu)和微小脲原体(Up)相对定量的荧光PCR分型方法,克服标本采样差异对检测结果的影响,了解患者脲原体感染的生物分群及病原载量。方法设计Uu和Up检测与分型引物探针,使用人β-globin(BG)作为相对定量内参引物探针,建立Uu、Up和BG的三重荧光PCR方法,使用核酸标准品建立标准曲线,计算宿主细胞中Uu或Up的相对含量,并确定体系Uu和Up检测下限。使用20株Uu,30株Up临床分离株以及22种生殖道常见病原体进行体系灵敏度和特异性验证,并对68例脲原体阳性生殖道标本进行分型和相对定量分析。结果建立的荧光PCR方法对Uu和Up的检测限均为10拷贝,20株Uu和30株Up临床分离株均可正确分型,对22种生殖道道常见微生物无交叉反应。68份脲原体阳性临床标本Uu阳性率为35.3%(24/68),Up阳性率58.8%(40/68),Uu+Up阳性率为5.9%(4/68),分型结果与文献报道的方法一致性为97.1%。标本定量检测显示,Uu阳性标本的中位数为4076拷贝/103细胞,Up阳性标本的中位数为2092拷贝/103细胞。结论建立荧光PCR分型方法可快速完成Uu和Up分型,获得致病型脲原体诊断结果,并通过相对定量反映宿主细胞粘附的病原体量,克服采样差异对检测结果的影响,更客观地反映脲原体载量和致病力。 展开更多

关键词 解脲脲原体 微小脲原体 内参 定量PCR 基因分型

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含内参基因的高灵敏度生殖支原体双重荧光PCR方法的建立 被引量：2

7

作者 李晶 冉梦龙 +5 位作者 龚杰 刘立雍 何利华 孟凡亮 张建中 赵飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期714-718,共5页

目的建立一种含有人源性内参基因的高灵敏度双重荧光PCR方法,以期用于生殖支原体感染的快速检测。方法根据生殖支原体MgPar重复序列中保守区域设计并合成特异性扩增引物和探针,添加人β-globin基因检测引物探针作为体系检测内参,建立并... 目的建立一种含有人源性内参基因的高灵敏度双重荧光PCR方法,以期用于生殖支原体感染的快速检测。方法根据生殖支原体MgPar重复序列中保守区域设计并合成特异性扩增引物和探针,添加人β-globin基因检测引物探针作为体系检测内参,建立并优化荧光PCR方法,使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价;用该方法检测62份临床标本,并与Mg-Pa荧光PCR结果相比较。结果建立的基于重复序列的荧光PCR方法对生殖支原体的检测限为0.5拷贝,Mg-Pa荧光PCR的检测限提高了一个数量级。该方法扩增16种其他支原体和常见生殖道致病菌均为阴性,特异度为100%。62份临床标本β-globin基因扩增均阳性,生殖支原体检测阳性率为3.2%(2/62)。结论建立的带内参检测生殖支原体的双重荧光PCR方法快速、灵敏、特异,并通过对标本进行质控,减少了假阴性结果的产生,提升了检测的准确性,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 生殖支原体 实时荧光PCR 内参 人β-globin基因

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脂质体作为免疫增强剂在动物疾病防治方面的应用现状 被引量：3

8

作者 王宏宇 古金元 +7 位作者 彭涛 王玉超 孟凡亮 刘照虎 马梓承 孙文博 肖一红 刘思当 《动物医学进展》 北大核心 2019年第5期106-109,共4页

脂质体作为药物递送系统,能够定向地将药物送至靶位,并能保持药物的活性避免其被降解;作为免疫调节剂,可以同时增强体液和细胞介导的免疫应答反应,能显著增强疫苗效果。论文通过总结近几年的有关文献,对脂质体作为药物递送系统和免疫调... 脂质体作为药物递送系统,能够定向地将药物送至靶位,并能保持药物的活性避免其被降解;作为免疫调节剂,可以同时增强体液和细胞介导的免疫应答反应,能显著增强疫苗效果。论文通过总结近几年的有关文献,对脂质体作为药物递送系统和免疫调节剂在疾病治疗中的关键作用进行分析,对其作用机制及应用现状加以归纳总结,并探讨了现存问题以及未来展望。 展开更多

关键词 脂质体 药物递送系统 免疫调节剂

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山东省部分地区猪伪狂犬病病毒分离鉴定及其gE基因遗传变异分析 被引量：13

9

作者 古金元 马梓承 +4 位作者 彭涛 刘照虎 孟凡亮 王玉超 刘思当 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期21-24,30,共5页

自2011年下半年以来全国多个省份使用Bartha-K61疫苗(gE/gI双缺失)免疫的猪场陆续出现了母猪繁殖障碍、仔猪神经症状及死亡、伪狂犬gE抗体阴性猪群突然转阳的问题。同时有的猪场内出现犬、猫、鼠等死亡的现象,经检测都是由变异伪狂犬病... 自2011年下半年以来全国多个省份使用Bartha-K61疫苗(gE/gI双缺失)免疫的猪场陆续出现了母猪繁殖障碍、仔猪神经症状及死亡、伪狂犬gE抗体阴性猪群突然转阳的问题。同时有的猪场内出现犬、猫、鼠等死亡的现象,经检测都是由变异伪狂犬病病毒(vPRV)引起。为了解山东省猪伪狂犬病病毒(PRV)近期流行特征,本试验对2017年上半年来自山东省不同地区的12份伪狂犬疑似病料进行了PRV的分离鉴定,并对分离株的gE基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果表明,共分离到9株PRV,其核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%～99.4%和97.2%～99.1%,与参考毒株其核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%～99.8%和96.8%～99.2%,并且9株分离株与国内报道的PRV变异株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均高于欧美毒株。gE基因的遗传进化树分析表明,本试验中9株分离株相互之间遗传距离较近,与国内PRV变异株处在同一分支,而与欧美毒株遗传距离较远。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 变异毒株 GE基因 遗传变异分析

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基于颜色判定的环介导等温扩增检测人型支原体的研究 被引量：4

10

作者 龚杰 冉梦龙 +4 位作者 吴伟伟 刘立雍 何利华 孟凡亮 赵飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期584-587,591,共5页

目的建立一种基于颜色判定的快速、灵敏、简便的人型支原体环介导等温扩增(LAMP)方法。方法使用PrimerExplorer V5软件设计针对人型支原体MHO_2540基因保守区域的4条特异等温扩增引物,用羟基萘酚蓝(HNB)作为结果判读指示剂并优化体系中d... 目的建立一种基于颜色判定的快速、灵敏、简便的人型支原体环介导等温扩增(LAMP)方法。方法使用PrimerExplorer V5软件设计针对人型支原体MHO_2540基因保守区域的4条特异等温扩增引物,用羟基萘酚蓝(HNB)作为结果判读指示剂并优化体系中dNTPs、MgSO_4浓度,建立人型支原体LAMP检测方法,进行灵敏度、特异度等的检测并与普通PCR比较。结果LAMP对标准浓度人型支原体核酸的检测限约为10^(2 )CFU,与普通PCR相同,但比实时荧光定量PCR差一个数量级。人型支原体阳性临床标本拷贝数>10^(3 )CFU者LAMP阳性率100%,与普通PCR检出率(100%)一致,拷贝数10~1~10^(3 )CFU的弱阳性标本LAMP检出率为63.6%(14/22),普通PCR检出率为31.8%(7/22),差异有统计学意义(χ~2=4.46,P<0.05)。结论LAMP检测人型支原体敏感、特异且操作简便,可在基层推广应用。 展开更多

关键词 人型支原体 环介导等温扩增技术 临床标本 分子诊断

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山东省部分地区猪伪狂犬病病毒分离鉴定及TK基因遗传变异分析 被引量：4

11

作者 古金元 刘照虎 +5 位作者 马梓承 李焱 孟凡亮 王宏宇 肖一红 刘思当 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第5期69-74,共6页

为了解当前山东省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)流行特点,本研究对2018年来自山东省不同地区的10份伪狂犬疑似病料进行PRV的分离鉴定,并对分离株的TK基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果表明,共分离到7株PRV,其TK基因核... 为了解当前山东省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)流行特点,本研究对2018年来自山东省不同地区的10份伪狂犬疑似病料进行PRV的分离鉴定,并对分离株的TK基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果表明,共分离到7株PRV,其TK基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为99.1%~99.8%和98.7%~99.4%,与参考毒株TK基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.8%~99.9%和97.2%~99.7%,而且7株分离株与国内报道的PRV变异株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均高于欧美毒株。对TK基因的核苷酸序列分析发现,与欧美参考株相比,分离株和国内变异株在其碱基第644-645位由AC突变为GT,导致其氨基酸第215位由苏氨酸(T)突变为缬氨酸(V)。TK基因的遗传进化树分析结果表明,本研究中7株分离株分别与国内之前报道的JS-2012、HeN1、TJ以及ZMD2012等变异株位于两个相对独立的分支上,亲缘关系较近,而都与NIA3、Becker等欧美毒株以及疫苗株Kaplan(Bartha-K61株)的遗传距离较远。结果表明,本研究所得7株分离株均应属于PRV变异毒株。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 变异毒株 TK基因 遗传变异分析

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妇产科住院医师规范化培训中妇科学双语教学情况的调查研究

12

作者 孟凡良 李婵媛 龚时鹏 《妇产与遗传（电子版）》 2019年第1期25-28,共4页

目的调查南方医科大学南方医院妇产科规培医师的双语教学及学习现状,为下一步开展双语乃至全英教学提供依据。方法首先确定调查问卷的内容,包括年级、普通英语水平、专业英语熟练程度、交流能力以及对双语教学的接受方式等,然后选取在... 目的调查南方医科大学南方医院妇产科规培医师的双语教学及学习现状,为下一步开展双语乃至全英教学提供依据。方法首先确定调查问卷的内容,包括年级、普通英语水平、专业英语熟练程度、交流能力以及对双语教学的接受方式等,然后选取在南方医科大学南方医院妇产科轮转的共37名1~3年级规培医师,通过现场填写问卷的形式进行调查。结果94.6%的受调查对象通过大学英语六级考试,91.9%和94.6%受调查者对专业英语能够做到一般熟悉和交流。100%受调查者认为双语教学是必要的,并且希望通过小组学习或者现场教学的方式来提高妇科专业英语能力。结论实施双语教学是提高住院医师培训质量和国际交流能力的重要方法之一,应循序渐进开展与推进,并不断创新教学方法。 展开更多

关键词 妇科学 双语教学 住院医师

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山东省部分地区猪伪狂犬病病毒分离株gC抗原基因的变异分析 被引量：4

13

作者 古金元 李焱 +4 位作者 马梓承 刘照虎 孟凡亮 王宏宇 刘思当 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期702-706,共5页

为了解当前山东省猪伪狂犬病病毒(PRV)流行特点及病毒gC抗原基因的变异情况,本研究对2018年来自山东省不同地区的23份猪伪狂犬病疑似病料进行PRV的分离鉴定,并对分离株的gC抗原基因进行扩增及序列分析。结果表明,共分离到9株PRV;gC基因... 为了解当前山东省猪伪狂犬病病毒(PRV)流行特点及病毒gC抗原基因的变异情况,本研究对2018年来自山东省不同地区的23份猪伪狂犬病疑似病料进行PRV的分离鉴定,并对分离株的gC抗原基因进行扩增及序列分析。结果表明,共分离到9株PRV;gC基因同源性比对结果显示,分离株与2012年之后国内PRV变异株的核苷酸及氨基酸序列的同源性均高于欧美毒株;遗传进化树及推导氨基酸序列分析结果显示,分离株与国内2012年后分离到的变异毒株同属于GenotypeⅡ;因此,推测目前山东省流行的PRV以变异毒株为主。9株分离株与Bartha-K61疫苗株相比,糖基化蛋白gC在潜在抗原位点和O-糖基化位点的重要位置(aa23~aa453)发生改变,这或许会影响分离株的抗原性,从而有助于其逃避宿主免疫防御,最终造成疫苗诱导产生的中和抗体不能有效地中和目前流行的变异PRV。本研究为变异PRV的防控及相关疫苗研制提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 gC抗原基因 序列分析 变异毒株

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关于某动力舱段壳体色差问题的分析与处理

14

作者 孟凡亮 严侃 《机械工程与自动化》 2023年第2期135-137,142,共4页

动力舱段壳体是某产品的关键零件之一,在科研试制阶段部分壳体阳极氧化后存在明显色差问题,严重影响该型产品的研制进度。针对动力舱段壳体阳极氧化色差问题,根据解剖试验结果和对铸锭加工过程的影响因素进行排查,最终确定故障原因并提... 动力舱段壳体是某产品的关键零件之一,在科研试制阶段部分壳体阳极氧化后存在明显色差问题,严重影响该型产品的研制进度。针对动力舱段壳体阳极氧化色差问题,根据解剖试验结果和对铸锭加工过程的影响因素进行排查,最终确定故障原因并提出了改进措施。经验证措施有效,成功解决了动力舱段壳体阳极氧化色差问题。 展开更多

关键词 动力舱壳体 色差 阳极氧化

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山东部分地区猪瘟病毒分离鉴定及E2基因遗传进化分析 被引量：3

15

作者 焦秋林 姜子昕 +5 位作者 孟凡亮 曹龙龙 李焱 杨玉栋 佟泽 刘思当 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1665-1670,共6页

2019年1月山东省莱芜某猪场保育猪在免疫猪瘟(classicai swine fever,CSF)疫苗后发病,病死率高达60%。对病猪进行实验室综合诊断,确诊为猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)感染,经检测分离毒株(Laiwu2019)存在变异。为进一步... 2019年1月山东省莱芜某猪场保育猪在免疫猪瘟(classicai swine fever,CSF)疫苗后发病,病死率高达60%。对病猪进行实验室综合诊断,确诊为猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)感染,经检测分离毒株(Laiwu2019)存在变异。为进一步了解山东地区CSFV遗传进化情况,2019年上半年从山东部分地区收集23份CSF疑似病料,确定17份阳性并成功分离到14株CSFV,对分离毒株的E2基因进行遗传进化分析。结果表明,分离的15株CSFV间的核苷酸与推导氨基酸的同源性分别为97.0%~99.9%和97.1%~100.0%,与参考株间的同源性分别为81.9%~97.4%和88.7%~99.7%。通过与Shimen株糖基化位点分析,分离株仅在"986NYAK-NYTK989"处发生突变。分离毒株与Shimen株抗原表位分析比较,15株分离株在抗原表位"717TTWKEYSH724"发生了"K720R"的突变,在"771LLFDGTNP778"处发生了"N777S"的突变,LaiWu2019同时发生了"G775T"的突变;在抗原表位"829TAVSPTTLR837"处,SDCP-19株发生了"S832C"的突变。通过遗传进化树分析,分离株位于相对独立一支,与近几年2.1d亚型变异株遗传关系最近,属于变异毒株。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 变异毒株 E2基因 遗传变异分析

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金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法新进展 被引量：14

16

作者 王铜 陶晓霞 +3 位作者 孟凡亮 张建中 闫笑梅 王国庆 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第12期1475-1480,共6页

金黄色葡萄球菌肠毒索(Staphylococcus aureus enterotoxins,SEs)引起的食物中毒是全球性的食品安全问题之一。快速、准确的SEs检测,对于诊断及有效控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。本文针对近年SEs检测的分子生物学方... 金黄色葡萄球菌肠毒索(Staphylococcus aureus enterotoxins,SEs)引起的食物中毒是全球性的食品安全问题之一。快速、准确的SEs检测,对于诊断及有效控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。本文针对近年SEs检测的分子生物学方法、免疫学方法、质谱分析技术和生物传感器检测等方面的最新进展进行简要介绍。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素 检测 食物中毒 综述

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肺炎支原体多位点SNP基因分型方法的建立与应用 被引量：1

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作者 刘立雍 龚杰 +4 位作者 徐娟 何利华 孟凡亮 张建中 赵飞 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第4期382-386,391,共6页

目的基因分型技术是研究肺炎支原体(MP)抗原变异和流行暴发的重要手段,本研究拟建立一种适用于我国MP菌株的新型多位点SNP基因分型技术(以下称新SNP分型法)。方法对69株MP全基因组序列使用SNP stats软件获取全部SNP位点。使用连续体外传... 目的基因分型技术是研究肺炎支原体(MP)抗原变异和流行暴发的重要手段,本研究拟建立一种适用于我国MP菌株的新型多位点SNP基因分型技术(以下称新SNP分型法)。方法对69株MP全基因组序列使用SNP stats软件获取全部SNP位点。使用连续体外传代10代的18株MP菌株对初筛的34个SNP位点进行稳定性验证,使用40株MP临床株进行SNP位点区分能力验证,建立多位点SNP分型方法。选取160株MP国内菌株进行SNP分型、传统两种基因分型、MLVA分型以及现有4种SNP分型方法的比较。结果最终选取的6个SNP位点组合可将MP分成SNP-00~SNP-64共65种基因型,其中SNP奇数型对应传统type1基因型MP,SNP偶数型对应传统type2基因型MP。160株国内MP菌株经本研究建立的SNP分型方法分为14个基因型,其分型结果与type1和type 2两种基因型一致性为100%(160/160)。MLVA方法分为4种基因型,传统SNP分型方法(以下称SNP分型法)分为3种基因型。其中35例聚集性病例分离株经新SNP分型法分为SNP-03和SNP-15两种基因型,其余3种方法无法区分。结论本研究建立的并报SNP分型方法能兼容传统两种基因型分型,并且增加了基因型区分能力,对国内MP的分型能力优于现有的多种基因分型技术,可用于我国MP的抗原变迁及区域性流行预警监测以及局部MP爆发的溯源研究。 展开更多

关键词 肺炎支原体 基因分型 SNP

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ST6型金黄色葡萄球菌食物中毒菌株的毒力因子分析 被引量：8

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作者 王多 陶晓霞 +5 位作者 王文周 王铜 孟凡亮 张建中 高鸿霞 闫笑梅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第1期64-70,75,共8页

目的检测食物中毒优势型ST6型菌株的毒力基因特征,为食品安全风险评估、食源性病原菌的监测和致病性研究提供依据。方法选取深圳地区7次食物中毒收集的32株ST6型菌株进行全基因组测序,利用VFDB数据库进行毒力因子分析,并通过序列比对进... 目的检测食物中毒优势型ST6型菌株的毒力基因特征,为食品安全风险评估、食源性病原菌的监测和致病性研究提供依据。方法选取深圳地区7次食物中毒收集的32株ST6型菌株进行全基因组测序,利用VFDB数据库进行毒力因子分析,并通过序列比对进行SEA亚型分析。结果第1-4起食物中毒ST6菌株携带的毒力因子谱完全相同;第5-7起食物中毒中,同一起食物中毒的暴发菌株携带的毒力因子一致,而非暴发菌株与暴发菌株携带的毒力因子不完全一致。在32株ST6型菌中,与粘附、酶和Ⅶ型分泌系统相关的毒力基因具有较高的携带率,α-溶血素(hly/hla)、β-溶血素(hlb)、δ-溶血素(hld)、γ-溶血素基因(hlgA、hlgB、hlgC)、肠毒素A基因(sea)和表皮剥脱毒素A基因(eta)的携带率均为100%,双组分白细胞毒素LukDE基因(lukD和lukE)的携带率为96.8%。所有菌株携带的肠毒素A均为SEA1亚型。结论32株ST6型食物中毒相关菌株携带多个毒力因子基因,以cna、sea、eta、lukD、lukE毒力基因携带率较高,编码的毒力因子可能对ST6型菌株的致病性产生影响。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 毒力因子 基因组分析

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2017年山东省新生入学及教职工结核病筛查现况调查 被引量：11

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作者 魏倩 王仕昌 +7 位作者 王美花 李源 付春芳 刘学法 孟凡亮 杨效玺 蔺跃付 陈鸣 《预防医学论坛》 2020年第12期903-907,911,共6页

目的了解山东省新生入学及教职工结核病筛查情况,为学校结核病健康体检有效实施提供参考依据。方法采用"全省学校结核病筛查调查表",对2017年学校开展新生入学和教职工结核病筛查的数据进行逐级收集,使用描述性统计分析方法... 目的了解山东省新生入学及教职工结核病筛查情况,为学校结核病健康体检有效实施提供参考依据。方法采用"全省学校结核病筛查调查表",对2017年学校开展新生入学和教职工结核病筛查的数据进行逐级收集,使用描述性统计分析方法分析。结果全省17市所辖县(市、区)参与调查的比例为94.89%(130/137),学校参与调查的比例为90.64%(29 963/33 058),入学新生参与调查的比例为80.54%(4 001 501/4 968 559),教职工参与调查的比例为68.70%(958 547/1 395 222)。幼儿园、小学及非寄宿制初中生PPD试验筛查率为16.78%(405 591/2 417 026),高中和寄宿制初中生PPD试验筛查为34.34%(377 104/1 098 130),大学生胸部X线筛查为69.47%(337 856/486 345)。全省新生入学PPD试验强阳性率3.53%(30 426/862 593),强阳性者胸部X光片应检率为87.74%(26 695/30 426)。全省教职工胸部X线筛查率为30.54%(292 759/958 547)。大学教职工胸部X线筛查率64.11%(67 561/105 384)最高,初中教职工为33.87%(68 913/203 481),高中教职工为26.84%(36 855/137 313),幼儿园23.95%(48 776/203 632)和小学22.88%(70 654/308 737)较低,差异有统计学意义(P<0.01)。通过体检发现学生肺结核患者数占全省年度报告学生肺结核患者数的5.27%(64/1 214),发现大学生肺结核患者最多,其次是高中生。教职工中幼儿园教职工发现肺结核病患者最多。结论山东省2017年新生入学和教职工结核病筛查率不高,筛查质量有待提高。 展开更多

关键词 入学新生 教职工 结核病筛查

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弹射座椅模拟器液压系统建模与仿真 被引量：2

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作者 张祝新 刘琛华 +2 位作者 孟凡亮 王立新 刘谦 《液压与气动》 北大核心 2020年第6期171-178,共8页

为实现弹射座椅模拟器在弹射过程中保持匀速运动,提出一种用调速阀保证弹射速度恒定的液压弹射方案。介绍了该液压弹射系统的工作原理,建立了系统的数学模型,并运用AMESim软件对系统进行建模与仿真。仿真结果表明,调速阀能保证弹射速度... 为实现弹射座椅模拟器在弹射过程中保持匀速运动,提出一种用调速阀保证弹射速度恒定的液压弹射方案。介绍了该液压弹射系统的工作原理,建立了系统的数学模型,并运用AMESim软件对系统进行建模与仿真。仿真结果表明,调速阀能保证弹射速度恒定,验证了所提方案的合理性;在调速阀的作用下,改变蓄能器供油压力和负载对弹射过程中的匀速运动没有影响,改变调速阀的出油口直径会明显改变弹射速度,调速阀出油口直径越大弹射速度越大。 展开更多

关键词 弹射座椅模拟器 液压系统 调速阀 AMESIM仿真

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