为建立一种基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)的高特异性、高灵敏度,且可绝对定量检测流产衣原体(Chlamydia abortus,C.abortus)的方法,针对流产衣原体ompA基因设计特异性引物和探针,建立并优化ddPCR反应条件,并对该方法...为建立一种基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)的高特异性、高灵敏度,且可绝对定量检测流产衣原体(Chlamydia abortus,C.abortus)的方法,针对流产衣原体ompA基因设计特异性引物和探针,建立并优化ddPCR反应条件,并对该方法的特异性、灵敏度以及重复性进行评估。结果显示,所建立ddPCR方法的最低检测限为1.76 copies/μL,灵敏度高;与贝氏柯克斯体、牛分枝杆菌、动物布鲁氏菌、李氏杆菌、金黄色葡萄球菌、鹦鹉热衣原体均无交叉反应,特异性强;组内和组间重复试验变异系数均小于10%,重复性好。用建立的ddPCR方法检测20份疑似感染临床样品,发现其检出率高于荧光PCR方法。结果表明,本研究建立的ddPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为流产衣原体感染的快速诊断和精准防控提供了有效手段,具有广泛的应用前景。展开更多
文摘目的:探讨心脏生物标志物N-末端B型脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)和高敏肌钙蛋白T(high-sensitivity cardiac troponin T,hs-cTnT)在急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者长期死亡风险预测中的价值,并构建和验证相关预测模型。方法:本研究为单中心回顾性研究,连续入选2022年1—12月在南京医科大学第一附属医院接受取栓治疗AIS患者,随访2年。通过Cox回归和LASSO回归筛选全因死亡相关因素,构建3种预测模型,分别为基础模型、模型1(基础模型+NT-proBNP)和模型2(基础模型+hs-cTnT),并比较不同模型的预测能力。结果:最终纳入230例患者,按3∶2比例随机分为训练集(n=146)和测试集(n=84)。随访期间共发生83例全因死亡事件,死亡率为37.2%。多因素Cox回归显示,NTproBNP每升高1 000 pg/mL,2年全因死亡风险增加27%(HR=1.27,95%CI:1.15~1.40,P <0.001);而ln(hs-cTnT)升高与死亡风险无显著关联(HR=1.11,95%CI:0.89~1.38,P=0.372)。通过Cox回归和LASSO回归最终筛选出以下与全因死亡风险相关的变量:既往房颤、术后美国国立卫生院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分、基线血红蛋白、白细胞计数以及随机血糖,并基于此构建基础模型。基础模型训练集和测试集的受试者工作特征曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.816和0.778。模型1的训练集和测试集的AUC分别为0.866和0.799,提高了对全因死亡风险的预测能力。模型2的训练集和测试集的AUC分别为0.811和0.788,对全因死亡风险的预测能力提升不明显。结论:NT-proBNP是AIS患者全因死亡的独立预测因子,可提高基于传统临床指标模型的死亡风险预测能力,辅助AIS患者的个体化管理。
