目的研究胆南星Arisaema Cum Bile多糖组分拮抗高热惊厥模型大鼠神经炎症作用的可能机制。方法采用水提醇沉法制备胆南星多糖,并通过色谱、光谱等方法对其进行结构表征分析;通过ip脂多糖联合热水浴建立高热惊厥模型,随机分为对照组、模...目的研究胆南星Arisaema Cum Bile多糖组分拮抗高热惊厥模型大鼠神经炎症作用的可能机制。方法采用水提醇沉法制备胆南星多糖,并通过色谱、光谱等方法对其进行结构表征分析;通过ip脂多糖联合热水浴建立高热惊厥模型,随机分为对照组、模型组、丙戊酸钠(200 mg/kg)组和胆南星高、低剂量(200、100 mg/kg)组,每组10只。记录每组大鼠惊厥潜伏期,惊厥持续时间和惊厥级别,并于末次造模2 h后测量大鼠肛温;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色评估海马组织神经元病理变化;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6及海马组织中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、NOD样受体热蛋白结构域3(NOD like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)水平;采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对大鼠的血清进行代谢组学分析。结果分离制备得到的胆南星多糖中总糖、蛋白质和糖醛酸质量分数分别为79.4%、2.96%和2.35%;气相色谱-质谱联用技术(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)测定胆南星多糖主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比分别为0.030∶0.260∶0.115∶0.741∶0.088;傅里叶变换红外光谱仪(Fouriertransform infrared spectrometer,FT-IR)光谱表明多糖含有吡喃环;与模型组比较,胆南星多糖高剂量组大鼠肛温降低(P<0.01)且胆南星多糖高、低剂量组均可显著延长惊厥潜伏期(P<0.01),缩短惊厥持续时间(P<0.01);对海马神经元细胞具有保护作用,升高海马组织GABA含量,同时降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6与海马组织中Glu、NLRP3及HMGB1含量(P<0.05、0.01);代谢组学结果表明,胆南星多糖可显著回调16种生物标志物的表达,共涉及花生四烯酸代谢、氨基酸代谢及嘧啶代谢等6条代谢通路径。结论胆南星多糖组分对高热惊厥大鼠表现出显著的拮抗作用,其作用机制可能与解热、保护海马神经元、抑制脑内炎症发生及调节代谢紊乱有关。展开更多
文摘目的研究胆南星Arisaema Cum Bile多糖组分拮抗高热惊厥模型大鼠神经炎症作用的可能机制。方法采用水提醇沉法制备胆南星多糖,并通过色谱、光谱等方法对其进行结构表征分析;通过ip脂多糖联合热水浴建立高热惊厥模型,随机分为对照组、模型组、丙戊酸钠(200 mg/kg)组和胆南星高、低剂量(200、100 mg/kg)组,每组10只。记录每组大鼠惊厥潜伏期,惊厥持续时间和惊厥级别,并于末次造模2 h后测量大鼠肛温;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色评估海马组织神经元病理变化;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6及海马组织中γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、NOD样受体热蛋白结构域3(NOD like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)水平;采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对大鼠的血清进行代谢组学分析。结果分离制备得到的胆南星多糖中总糖、蛋白质和糖醛酸质量分数分别为79.4%、2.96%和2.35%;气相色谱-质谱联用技术(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)测定胆南星多糖主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比分别为0.030∶0.260∶0.115∶0.741∶0.088;傅里叶变换红外光谱仪(Fouriertransform infrared spectrometer,FT-IR)光谱表明多糖含有吡喃环;与模型组比较,胆南星多糖高剂量组大鼠肛温降低(P<0.01)且胆南星多糖高、低剂量组均可显著延长惊厥潜伏期(P<0.01),缩短惊厥持续时间(P<0.01);对海马神经元细胞具有保护作用,升高海马组织GABA含量,同时降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6与海马组织中Glu、NLRP3及HMGB1含量(P<0.05、0.01);代谢组学结果表明,胆南星多糖可显著回调16种生物标志物的表达,共涉及花生四烯酸代谢、氨基酸代谢及嘧啶代谢等6条代谢通路径。结论胆南星多糖组分对高热惊厥大鼠表现出显著的拮抗作用,其作用机制可能与解热、保护海马神经元、抑制脑内炎症发生及调节代谢紊乱有关。
