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牛多杀性巴氏杆菌OmpA抗原间接ELISA方法的建立 被引量:2
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作者 王润清 孙航 +4 位作者 孙雨 李歌 李琦 侯晓林 阚威 《中国动物检疫》 2025年第2期87-94,共8页
为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化... 为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞株中,经扩大培养成功诱导表达出了纯度较高的包涵体OmpA蛋白,将OmpA重组蛋白作为诊断抗原,经反应条件优化建立了间接ELISA抗体检测方法。经试验验证,该方法对其他相关的牛类病原无交叉反应,阳性血清稀释度为1:256时仍呈阳性,组内与组间变异系数均低于10%。结果表明,该方法特异性与敏感性较好,且具有良好的重复性与稳定性。本研究为进一步开发成熟的牛多杀性巴氏杆菌抗体检测试剂盒奠定基础。 展开更多
关键词 牛多杀性巴氏杆菌 OmpA蛋白 原核表达 蛋白纯化 ELISA
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多杀性巴氏杆菌OmpH蛋白间接ELISA方法的建立
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作者 王润清 孙航 +4 位作者 阚威 李歌 李琦 侯晓林 孙雨 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第4期492-499,共8页
本试验在大肠杆菌原核表达系统中诱导出了多杀性巴氏杆菌OmpH抗原,建立了一种牛多杀性巴氏杆菌抗体ELISA检测方法。本试验分析了OmpH序列的信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连... 本试验在大肠杆菌原核表达系统中诱导出了多杀性巴氏杆菌OmpH抗原,建立了一种牛多杀性巴氏杆菌抗体ELISA检测方法。本试验分析了OmpH序列的信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接pET32a载体上,并构建相应的重组质粒pET32a-OmpH,将重组质粒转化进大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞株中,扩大培养并成功诱导表达出了纯度较高的包涵体OmpH蛋白,大小约为57 kDa,蛋白纯度约为94%,且OmpH重组蛋白与其他疫病抗体无非特异性交叉。将纯化后的pET32a-OmpH重组蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,该方法特异性强,对其他牛类病原无交叉反应,且其组内与组间变异系数均低于10%,具有良好的稳定性与重复性。本研究为进一步开发成熟的多杀性巴氏杆菌抗体检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 OmpH蛋白 原核表达 蛋白纯化 ELISA
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Thermal-hydraulic design and transient analysis of passive cooling system for CPR1000 spent fuel storage pool
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作者 li ge Hai-Tao Wang +7 位作者 Guo-liang Zhang Jun-li Gou Jian-Qiang Shan Bin Zhang Bo Zhang Tian-Yu Lu Zi-Jiang Yang Yuan Yuan 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期156-165,共10页
This paper proposes a design of passive cooling system for CPR1000 spent fuel pool(SFP). Our design can effectively manage the SFP temperature not to exceed80 C. Then the transient analysis of the CPR1000 SFP with des... This paper proposes a design of passive cooling system for CPR1000 spent fuel pool(SFP). Our design can effectively manage the SFP temperature not to exceed80 C. Then the transient analysis of the CPR1000 SFP with designed passive cooling system is carried out in station blackout(SBO) accident by the best-estimate thermal-hydraulic system code RELAP5. The simulation results show that to maintain the temperature of CPR1000 SFP under 80 C, the numbers of the SFP and air cooling heat exchangers tubes are 6627 and 19 086, respectively.The height difference between the bottom of the air cooling heat exchanger and the top of the SFP heat exchanger is3.8 m. The number of SFP heat exchanger tubes decreases as the height difference increases, while the number of the air cooling heat exchanger tubes increases. The transient analysis results show that after the SBO accident, a stable natural cooling circulation is established. The surface temperature of CPR1000 SFP increases continually until 80 C, which indicates that the design of the passive air cooling system for CPR1000 SFP is capable of removing the decay heat to maintain the temperature of the SFP around 80 C after losing the heat sink. 展开更多
关键词 热工水力设计 瞬态分析 冷却系统 乏燃料 储存
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PVA/WPU/SA凝胶球的制备及其对低温生活污水脱氮性能的影响
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作者 张洛红 李鸽 +2 位作者 席世波 杨倩 黄耀文 《西安工程大学学报》 2026年第1期53-62,共10页
为提升活性污泥在低温下的脱氮效果,采用加热共混法将聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、水性聚氨酯乳液(waterborne polyurethane,WPU)和海藻酸钠(sodium alginate,SA)混合,再通过化学交联法在硼酸体系中凝胶成球,增强低温生活污水的... 为提升活性污泥在低温下的脱氮效果,采用加热共混法将聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、水性聚氨酯乳液(waterborne polyurethane,WPU)和海藻酸钠(sodium alginate,SA)混合,再通过化学交联法在硼酸体系中凝胶成球,增强低温生活污水的脱氮效果。通过序批式反应器(sequencing batch reactor,SBR)原位富集微生物,分析传统活性污泥法(SBR-R1)、商用K3载体(SBR-R2)与凝胶球载体(SBR-R3)增强系统在常温(17~22℃)和低温(15℃、12℃)下的脱氮效果。结果表明:10%PVA/6%WPU/0.5%SA复合载体孔径10~20μm,压缩1 mm后形变恢复率99.908%,具有良好的传质性和稳定性。15℃低温时,3组反应器总氮(TN)平均去除率分别为45.79%、52.75%和62.14%,添加凝胶球载体脱氮效果最佳,其增强作用是K3载体的2.35倍。12℃低温时,SBR-R3仍保持最佳脱氮效果,其TN平均去除率为53.83%。低温下,Proteobacteria、Patescibacteria、Bacteroidota为优势菌门,温度从15℃降至12℃,体积微小的Patescibacteria与其菌属norank_Saccharimonadales基于趋避策略在凝胶球载体中显著富集。 展开更多
关键词 低温脱氮 聚乙烯醇 水性聚氨酯 生活污水 序批式反应器
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定 被引量:5
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作者 王清龙 王瑞宁 +6 位作者 王勋 李青梅 李鸽 张真真 杨苏珍 郭军庆 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2023年第3期127-134,共8页
为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;... 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;利用镍亲和层析和凝胶过滤层析从转染细胞培养上清中纯化gE表达蛋白;以SDS-PAGE和Western blot鉴定gE重组蛋白,利用PRV阳性血清以ELISA分析gE重组蛋白的抗原活性,通过去糖基化酶PNGase F鉴定其糖基化修饰及其对抗原活性的影响。Dot blot结果显示,gE重组蛋白通过自身信号肽实现在细胞培养上清的分泌表达,其表达量在转染96 h达到峰值。SDS-PAGE和Western blot结果显示,从细胞培养上清中纯化获得gE重组蛋白纯度约为90%,经去糖基化酶PNGase F处理的gE重组蛋白分子质量显著降低。间接ELISA结果显示,gE重组蛋白检测PRV阳性血清的抗体效价为1∶12800;PRV阳性血清对gE蛋白的检出限为31.25 ng/mL,其抗原活性是原核表达的4倍。对临床血清的检测结果显示,基于gE重组蛋白的ELISA与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率为96.5%。综上,在真核细胞中分泌表达了具有高表达量、高纯度、高活性和糖基化修饰的gE重组蛋白,在PRV感染鉴别检测中具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 分泌表达 糖基化修饰 抗原活性
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Development and application of chiral separation technology based on chiral metal-organic frameworks
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作者 gege Zhu li ge +4 位作者 Xinyu li Bing Niu Qin Chen Dan Zhong Xiaodong Sun 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 2025年第7期1409-1426,共18页
Chirality is not only a natural phenomenon but also a bridge between chemistry and life sciences.An effective way to obtain a single enantiomer is through racemates resolution.Recent literature shows that chiral metal... Chirality is not only a natural phenomenon but also a bridge between chemistry and life sciences.An effective way to obtain a single enantiomer is through racemates resolution.Recent literature shows that chiral metal-organic frameworks(CMOFs)have many applications in various fields because of their diverse topologies and functionalities.This review outlines the design idea and summarizes the latest synthesis strategies and applications of CMOFs.It highlights key advances and issues in the separation domain.In conclusion,the review provides perspectives on the challenges and prospective advancements of CMOFs materials and CMOFs-based separation technologies. 展开更多
关键词 Chiral metal-organic frameworks Enantiomer separation Chromatographic technology Membrane separation
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领导绩效期望对员工工作结果的影响研究:基于资源保存理论视角 被引量:2
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作者 袁艺玮 李戈 +2 位作者 刘军 朱征 张生太 《管理工程学报》 北大核心 2026年第1期161-174,共14页
领导绩效期望是塑造员工工作态度和行为的重要因素。然而目前关于领导绩效期望的作用路径与影响效果尚未达成一致。本研究基于资源保存理论和认知评价视角,从资源生成和损失视角构建了领导绩效期望影响员工工作结果(即情绪耗竭和工作努... 领导绩效期望是塑造员工工作态度和行为的重要因素。然而目前关于领导绩效期望的作用路径与影响效果尚未达成一致。本研究基于资源保存理论和认知评价视角,从资源生成和损失视角构建了领导绩效期望影响员工工作结果(即情绪耗竭和工作努力)的双路径模型,并从认知评价视角考察了员工调节焦点的调节效应。本研究开展了一项三阶段问卷调研和一项基于情境的实验研究对理论模型进行检验,结果表明领导绩效期望一方面能够提升员工自我能力感知,进而降低情绪耗竭、提升工作努力;另一方面会增强员工绩效压力,在激发工作努力的同时引发较高程度的情绪耗竭。员工促进焦点能够调节领导绩效期望与能力感知之间的关系,并进一步调节能力感知在领导绩效期望与情绪耗竭和工作努力之间的中介效应。本研究有助于更为全面地理解领导绩效期望对员工工作结果的影响及其作用机制,为组织管理中有效调整领导绩效期望、发挥其积极效应提供了理论参考。 展开更多
关键词 领导绩效期望 能力感知 绩效压力 情绪耗竭 工作努力
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不同蛋白质水平的颗粒化全混合日粮对湖羊生长性能及肠道菌群的影响
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作者 帕提古丽·阿布都克依木 樊琛 +8 位作者 何海迎 解凤梅 李格 胡波 郭佳霖 周杨 艾买提·买买提 依明·苏来曼 杨会国 《动物营养学报》 北大核心 2026年第2期1225-1235,共11页
本试验旨在研究相同代谢能水平下不同蛋白质水平的颗粒化全混合日粮(PTMR)对湖羊生长性能及肠道菌群的影响。本试验采用单因素试验设计,选取体重[(27.09±1.83)kg]相近且健康的4月龄湖羊公羔90只,随机分为3组,每组3个栏舍(重复),每... 本试验旨在研究相同代谢能水平下不同蛋白质水平的颗粒化全混合日粮(PTMR)对湖羊生长性能及肠道菌群的影响。本试验采用单因素试验设计,选取体重[(27.09±1.83)kg]相近且健康的4月龄湖羊公羔90只,随机分为3组,每组3个栏舍(重复),每个栏舍饲喂10只湖羊。3组分别饲喂蛋白质水平为11.0%(试验Ⅰ组)、13.0%(试验Ⅱ组)和15.0%(试验Ⅲ组)且代谢能水平均为9.4 MJ/kg的颗粒化全混合日粮。试验期共75 d,其中预试期15 d,正试期60 d。结果表明:1)试验Ⅱ、Ⅲ组湖羊的末重和平均日增重显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。2)对肠道菌群的Alpha多样性分析显示,各组间Chao1、Ace、Simpson和Shannon指数均无显著差异(P>0.05);Beta多样性分析显示,试验Ⅱ、Ⅲ组的肠道菌群结构相似,二者与试验Ⅰ组存在差异。在门水平上,试验Ⅲ组厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度高于试验Ⅰ和Ⅱ组;试验Ⅱ组拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度高于试验Ⅰ和Ⅲ组;而试验Ⅰ组螺旋体门(Spirochaetota)与变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度则高于试验Ⅱ和Ⅲ组。在属水平上,试验Ⅰ组密螺旋体属(Treponema)的相对丰度高于试验Ⅱ和Ⅲ组;试验Ⅱ组UCG-005、理研菌科RC9肠道群(Rikenellaceae_RC9_gut_group)的相对丰度则高于试验Ⅰ和Ⅲ组。LEfSe分析结果显示,试验Ⅰ组中布劳特氏菌属(Blautia)显著富集(P<0.05),试验Ⅱ组中理研菌科(Rikenellaceae)、理研菌科RC9肠道群、未分类的理研菌科RC9肠道群(unclassified_Rikenellaceae_RC9_gut_group)显著富集(P<0.05),试验Ⅲ组中丹毒梭菌科(Erysipelatoclostridiaceae)显著富集(P<0.05)。在功能预测方面,3组湖羊肠道菌群功能未发生改变。综上所述,在9.4 MJ/kg代谢能水平下,湖羊颗粒化全混合日粮的适宜蛋白质水平为13.0%,该蛋白质水平的颗粒化全混合日粮通过优化肠道菌群结构,在保证较好生长性能的同时,更能有效地促进有益菌、抑制潜在致病菌,从而维持湖羊肠道健康。 展开更多
关键词 蛋白质水平 湖羊 生长性能 肠道菌群
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核因子E2相关因子2介导的氧化应激在腹膜透析相关性腹膜纤维化中的研究进展
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作者 李鸽 梁栋 +1 位作者 刘云启 王雅宁 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2026年第2期212-218,共7页
腹膜纤维化(PF)是腹膜透析患者超滤衰竭的重要原因,氧化应激(OS)在PF中发挥重要作用。核因子E2相关因子2(Nrf2)作为维持细胞氧化还原稳态的关键转录因子,参与调节了腹膜间皮细胞转分化、新生血管生成、炎症反应等多种过程。文章主要围绕... 腹膜纤维化(PF)是腹膜透析患者超滤衰竭的重要原因,氧化应激(OS)在PF中发挥重要作用。核因子E2相关因子2(Nrf2)作为维持细胞氧化还原稳态的关键转录因子,参与调节了腹膜间皮细胞转分化、新生血管生成、炎症反应等多种过程。文章主要围绕Nrf2通过调节OS调控PF的具体机制,如抑制OS介导的EMT、抑制OS相关的炎症反应、抑制OS介导的新生血管生成、抑制OS相关线粒体稳态失衡以及靶向Nrf2的潜力与挑战等方面进行综述。 展开更多
关键词 腹膜纤维化 腹膜透析 核因子E2相关因子2 氧化应激
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 王瑞宁 王勋 +4 位作者 李鸽 李青梅 李存法 杨苏珍 郭军庆 《河南农业科学》 北大核心 2024年第12期167-173,共7页
为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以... 为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示,获得2株(2B5和8F7)稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000;单克隆抗体亚型鉴定结果表明,2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型,轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示,2株单克隆抗体仅与PRV反应,不与其他常见病毒发生反应;SDS-PAGE结果显示,纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果,筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带,表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上,成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体,为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
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复配天然防腐剂对贝莱斯芽孢杆菌和鲍曼不动杆菌的抑菌机制及其稳定性研究
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作者 彭灿灿 郭耀豪 +5 位作者 胡宇倩 李格 周毅 宋晟 朱礼 周波 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第7期149-157,共9页
该文对复配天然防腐剂抑制贝莱斯芽孢杆菌、鲍曼不动杆菌的机制及稳定性进行了研究。通过测定细胞膜渗透性和通透性、细胞壁完整性及抗氧化酶活力变化,结合扫描电镜观察菌体结构,并考察温度、pH和盐质量浓度对防腐剂稳定性的影响。结果... 该文对复配天然防腐剂抑制贝莱斯芽孢杆菌、鲍曼不动杆菌的机制及稳定性进行了研究。通过测定细胞膜渗透性和通透性、细胞壁完整性及抗氧化酶活力变化,结合扫描电镜观察菌体结构,并考察温度、pH和盐质量浓度对防腐剂稳定性的影响。结果表明,复配天然防腐剂通过破坏细胞膜通透性和细胞壁完整性,进而导致蛋白质和核酸大量外泄。代谢调控方面,处理4 h后,2种菌较未添加防腐剂组的过氧化氢酶活力分别下降了38.95%和26.69%,超氧化物歧化酶活力分别提高了35.27%和20.59%,引发氧化应激失衡。扫描电镜显示菌体表面形成孔洞且内容物外泄,损伤程度高于化学防腐剂组。防腐剂稳定性实验表明,-20~80℃时热稳定性良好,100℃处理30 min后抑菌活性仍保持83%以上;当pH值为3~5和7时抑菌活性无显著影响(P>0.05);盐质量浓度≤4 mg/mL时抑菌活性也无显著影响(P>0.05)。综上可知,复配天然防腐剂通过破坏菌体结构和干扰代谢实现高效抑菌,且耐高温、耐酸,为酱腌芥菜天然防腐技术开发提供理论依据。 展开更多
关键词 防腐剂 酱腌芥菜 贝莱斯芽孢杆菌 鲍曼不动杆菌 抑菌机制 稳定性研究
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农业数字化赋能农业新质生产力发展的效应与机制
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作者 贾云飞 王亦凡 +3 位作者 朱盼盼 李个 闫亚军 张改平 《地域研究与开发》 北大核心 2026年第2期153-162,173,共11页
利用2012—2024年31个省份的面板数据,采用双向固定效应模型、中介效应模型和门槛效应模型,系统探究农业数字化对农业新质生产力的影响机制。结果表明:农业数字化对农业新质生产力具有显著正向促进作用;其赋能方式主要是通过“农业数字... 利用2012—2024年31个省份的面板数据,采用双向固定效应模型、中介效应模型和门槛效应模型,系统探究农业数字化对农业新质生产力的影响机制。结果表明:农业数字化对农业新质生产力具有显著正向促进作用;其赋能方式主要是通过“农业数字化—科技创新水平—农业新质生产力”这一中介传导路径实现的。同时,农业数字化赋能农业新质生产力发展存在门槛效应,且呈现出明显的地区异质性和区域异质性。因此,应当加大数字化基础设施建设,完善农业科技创新体系,充分释放农业数字化的赋能效用,进而破除区域要素流动壁垒,推动农业资源要素优化重组,为农业新质生产力高质量发展提供支撑。 展开更多
关键词 农业数字化 农业新质生产力 内生增长理论 中介效应模型 门槛回归模型
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突发性耳聋的免疫炎症机制与靶向治疗新进展
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作者 李格 张文景 张玉波 《中华耳科学杂志》 北大核心 2026年第3期227-233,共7页
突发性感音神经性耳聋(sudden sensorineural hearing loss,SSNHL)又称突发性耳聋,是指72 h内发生的原因不明的感音神经性耳聋,至少相邻两个频率听力下降≥20 dB HL,该病的年发病率近年来有上升趋势,主要影响中年人群。目前,临床上治疗S... 突发性感音神经性耳聋(sudden sensorineural hearing loss,SSNHL)又称突发性耳聋,是指72 h内发生的原因不明的感音神经性耳聋,至少相邻两个频率听力下降≥20 dB HL,该病的年发病率近年来有上升趋势,主要影响中年人群。目前,临床上治疗SSNHL的首选治疗方案为全身应用皮质类固醇治疗,但是在实际治疗过程中,约30%~50%患者反应不佳,且部分患者使用皮质类固醇药物有很大的不良反应,因此探索新的治疗手段尤为重要。全身免疫紊乱通过循环炎症因子、自身抗体及免疫细胞浸润等途径影响内耳局部微环境,破坏其免疫豁免状态,最终导致常以单侧为表现的听力损失。自身抗体沉积、T细胞亚群失调及巨噬细胞过度活化等异常免疫反应,进一步加重内耳组织损伤。同时,外周血中的中性粒细胞与淋巴细胞比值、血小板与淋巴细胞比值等及内耳局部的HSP70、prestin等生物标志物与病情相关。临床上,目前基于免疫炎症机制的靶向治疗已经取得较好的进展,如靶向NLRP3通路、JNK信号通路及抗氧化应激等。此外,还有针对细胞保护、功能修复的小分子药物及基因治疗等新兴研究为SSNHL的治疗提供保障。但是,当前研究仍面临多重挑战,例如现有治疗方案疗效有限、生物标志物谱系异质性显著、血-迷路屏障导致的药物递送障碍,以及病因学的高度异质性等问题。未来研究需在发病机制深度解析、精准生物标志物筛选、高效药物递送系统开发等关键领域实现突破,从而推动SSNHL临床诊疗水平的系统性提升。 展开更多
关键词 突发性耳聋 免疫炎症 靶向治疗
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UL50D地下铲运机纵向动力学建模与控制
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作者 刘潇璇 方存光 +1 位作者 周秋忠 李鸽 《一重技术》 2026年第1期37-42,共6页
为实现地下铲运机的纵向控制,建立了包含传动系统、行驶系统及制动系统的纵向动力学模型。通过Simulink仿真数据与实车道路试验结果的对比,验证了所建模型的可靠性。在此基础上,设计了一种以油门开度和制动踏板行程为控制输入的纵向行... 为实现地下铲运机的纵向控制,建立了包含传动系统、行驶系统及制动系统的纵向动力学模型。通过Simulink仿真数据与实车道路试验结果的对比,验证了所建模型的可靠性。在此基础上,设计了一种以油门开度和制动踏板行程为控制输入的纵向行驶PI控制器。利用该动力学模型仿真获取车速响应,并采用PI算法对目标车速进行跟踪控制。通过数值分析车速跟踪精度,验证了所提控制算法的可行性。本研究可为地下铲运机自主行驶控制系统的设计与开发提供理论参考。 展开更多
关键词 地下铲运机 传动系统 制动系统 速度跟踪 PI算法
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新型复配天然防腐剂在酱腌芥菜中的应用研究
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作者 朱礼 彭灿灿 +8 位作者 王琪 胡宇倩 李格 张荣显 吴高芬 李子君 宋晟 余林宇 李慧敏 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第3期291-299,共9页
针对低盐酱腌芥菜因盐分降低引发的腐败微生物增殖、传统化学防腐剂安全性不足等问题,该研究旨在开发新型复配天然防腐剂以替代传统化学防腐剂。研究通过最小抑菌浓度和最小杀菌浓度试验筛选出高效天然防腐剂;采用棋盘法分析二元复配体... 针对低盐酱腌芥菜因盐分降低引发的腐败微生物增殖、传统化学防腐剂安全性不足等问题,该研究旨在开发新型复配天然防腐剂以替代传统化学防腐剂。研究通过最小抑菌浓度和最小杀菌浓度试验筛选出高效天然防腐剂;采用棋盘法分析二元复配体系的协同效应,并结合单因素试验与响应面法优化确定最佳配比;最终通过加速贮藏试验验证其防腐效果。结果显示,4种天然防腐剂对酱腌芥菜主要腐败菌的抑菌效果显著优于化学防腐剂;其中壳聚糖与SymboleAp-聚赖氨酸对混合腐败菌呈现协同作用(分级抑菌浓度指数=0.5),联合抑菌浓度较单一组分分别降低75%和94%。响应面优化获得最佳配方为SymboleAp-聚赖氨酸180μg/mL、乳酸链球菌素102μg/mL、壳聚糖121μg/mL、肉桂醛100μg/mL,此条件下酱腌芥菜菌落总数降至533 CFU/mL。感官评价与微生物指标(大肠菌群、菌落总数)验证表明,该复配体系在维持酱腌芥菜色泽、香气、质地等感官品质及抑制微生物增殖方面均优于化学防腐剂组。综上,该复配天然防腐剂为酱腌芥菜的科学研究与工业化生产开辟了新思路,有助于推动安全、高效防腐技术在该领域的应用。 展开更多
关键词 酱腌芥菜 防腐剂 响应面优化 防腐效果
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靶向Tim-3哺乳动物细胞抗体库的构建、筛选及抗体功能研究
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作者 杜琳 李国贤 +5 位作者 杜春晓 陈隽睿 李宇翔 王智鼎 李葛 韩根成 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期52-59,共8页
目的T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)在天然免疫应答及适应性免疫应答调控中起关键作用,被视为新的免疫治疗靶点。本研究旨在实验室原有靶向人Tim-3的鼠源抗体基础上,借助计算机辅助分子设计,构建靶向人Tim-3的哺乳动物细胞抗体库,并筛... 目的T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)在天然免疫应答及适应性免疫应答调控中起关键作用,被视为新的免疫治疗靶点。本研究旨在实验室原有靶向人Tim-3的鼠源抗体基础上,借助计算机辅助分子设计,构建靶向人Tim-3的哺乳动物细胞抗体库,并筛选出功能改进的抗体。方法整合计算机辅助分子模型构建平台与哺乳动物细胞抗体库技术,对Tim-3母本序列进行设计优化;通过Overlap PCR、载体的酶切、酶连与转化等分子生物学技术,得到靶向Tim-3哺乳动物抗体库的质粒库;通过测序比对获得全新序列抗体,利用ELISA技术进行筛选,获得表达量高、亲和力高的抗体;进一步通过体外功能实验(实时定量PCR、CCK-8)验证优化抗体的功能。结果以实验室前期制备的抗人Tim-3鼠源抗体为母本,利用计算机辅助设计平台,在Tim-3轻链与重链分别设计引入5个关键氨基酸替换;通过Overlap PCR分别获得3个含有突变碱基的轻链(L-1、L-2、L-3)和重链(H-1、H-2、H-3),连接载体后转化入TOP10电转感受态细胞,成功构建富含序列多样性的抗体分子质粒库。对新抗体进行序列的分析比对,筛选并纯化得到亲和力高于母本的抗体,命名为1号抗体。实时定量PCR检测表明,1号抗体阻断巨噬细胞系RAW264.7细胞和小胶质细胞系BV2细胞后,β干扰素(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6的基因转录水平明显上调;阻断Jurkat^(Tim-3-high)细胞后,IL-2、IFN-γ的基因转录水平明显上调,且1号抗体的阻断作用大于母本Tim-3抗体。CCK-8法检测证明了1号抗体促进Jurkat^(Tim-3-high)细胞的增殖,且1号抗体的促进作用大于母本Tim-3抗体。结论通过计算机辅助分子设计平台和哺乳动物抗体库技术,得到亲和力高于母本抗体、且能够提高人和小鼠细胞系多种细胞因子表达的全新序列的Tim-3人源抗体。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3) 哺乳动物细胞抗体库 计算机辅助分子设计
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Mesothelin对乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学行为的影响 被引量:1
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作者 李宇翔 李葛 +4 位作者 高振芳 侯春梅 韩根成 孙慧燕 王立生 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第10期1032-1039,共8页
目的探讨间皮素(Mesothelin)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法免疫化学染色检测TNBC组织、癌旁组织及乳腺癌细胞系中Mesothelin的表达。将过表达Mesothelin慢病毒质粒(Mesothelin组)及对照Scramble质粒(... 目的探讨间皮素(Mesothelin)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法免疫化学染色检测TNBC组织、癌旁组织及乳腺癌细胞系中Mesothelin的表达。将过表达Mesothelin慢病毒质粒(Mesothelin组)及对照Scramble质粒(Scramble组)转染TNBC细胞系MDA-MB-231细胞,未感染细胞作为Control组。流式细胞术检测病毒感染效率;实时荧光定量PCR、流式细胞术及Western blot检测Mesothelin表达;CCK-8检测细胞增殖情况;利用Annexin V-APC/PI检测细胞凋亡;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果Mesothelin在TNBC肿瘤组织中表达高于癌旁组织(P<0.05),在乳腺癌细胞系中有表达。流式细胞术验证发现慢病毒感染效率达到90%以上。与Scramble组相比,Mesothelin组Mesothelin mRNA和蛋白表达水平升高,细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,Bax、E-cadherin蛋白表达减少,Bcl-2、Ncadherin和Vimentin蛋白表达增加,细胞的迁移及侵袭能力增强(P<0.05)。结论Mesothelin能够促进乳腺癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加细胞的迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动 间皮素
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基于AHP-云模型的装配式建筑EPC项目风险评价研究
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作者 李鸽 欧阳辰秉 《工程管理学报》 2026年第1期40-44,共5页
针对装配式建筑EPC项目风险评价中的模糊性、随机性与不确定性特征,提出了一种基于层次分析法—云模型的风险评价方法。从环境、设计、施工、采购与合同5个维度构建了多层次风险评价指标体系;运用层次分析法进行指标权重计算,通过构造... 针对装配式建筑EPC项目风险评价中的模糊性、随机性与不确定性特征,提出了一种基于层次分析法—云模型的风险评价方法。从环境、设计、施工、采购与合同5个维度构建了多层次风险评价指标体系;运用层次分析法进行指标权重计算,通过构造判断矩阵和一致性检验确保了权重赋值的科学性;引入云模型理论,通过计算项目的数字特征和构建综合评价云,实现了风险评价的定量化与可视化。并选取湖南省人民医院装配式建筑EPC项目进行实证分析,评价结果表明该项目整体风险等级处于较低风险,且与项目实际风险状况相吻合,验证了该方法的可靠性。该方法不仅为装配式建筑项目风险评价提供了技术路径,也为装配式建筑EPC项目的科学决策和有效管理提供了有力支持,对项目管理水平具有重要的实践指导价值。 展开更多
关键词 装配式建筑 云模型 层次分析法 风险评价
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文化自信导向下的校本课程开发与实施--以“孔孟之乡石刻文化课程”为例
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作者 李鸽 《上海课程教学研究》 2026年第1期5-10,16,共7页
在全面深化课程改革的背景下,如何通过校本课程培育学生的文化自信,成为学校课程建设亟须回应的问题。以山东省济宁市任城实验小学“孔孟之乡石刻文化课程”为例,系统梳理文化自信导向下校本课程的开发价值基础、目标建构路径、内容组... 在全面深化课程改革的背景下,如何通过校本课程培育学生的文化自信,成为学校课程建设亟须回应的问题。以山东省济宁市任城实验小学“孔孟之乡石刻文化课程”为例,系统梳理文化自信导向下校本课程的开发价值基础、目标建构路径、内容组织方式、实施形态与评价机制。研究表明,依托具有鲜明在地特征的地域文化资源开展校本课程建设,有助于将中华优秀传统文化转化为学生可感、可学、可表达的学习经验,推动学生在持续实践中形成稳定的文化理解与文化认同。以期为中小学开发文化类校本课程提供参考。 展开更多
关键词 文化自信 校本课程 课程开发 石刻文化
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鄂北短时强降水特征及双偏振雷达预警指标
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作者 贺晓露 秦幼文 +2 位作者 李格 郝元甲 杨涛 《沙漠与绿洲气象》 2026年第1期100-106,共7页
利用湖北省随州市逐小时降水以及双偏振雷达观测资料,统计分析2019—2023年短时强降水的分布和双偏振雷达参数特征。结果表明:(1)短时强降水集中在6-8月,6—7月频次较多;日变化特征呈三峰型分布,最多出现在5—8时,其次是22时—次日1时,... 利用湖北省随州市逐小时降水以及双偏振雷达观测资料,统计分析2019—2023年短时强降水的分布和双偏振雷达参数特征。结果表明:(1)短时强降水集中在6-8月,6—7月频次较多;日变化特征呈三峰型分布,最多出现在5—8时,其次是22时—次日1时,第三是13—18时。南部较中北部更易出现短时强降水,随县南部是短时强降水高发区。(2)组合反射率因子(CR)、垂直液态水含量(VIL)、2.5 km以下水平反射率因子(Z_(H))、差分传播相移率(K_(DP))、差分反射率因子Z_(DR)和回波顶高(ET)与雨强呈正相关。雨强越大,回波强度越强,低层液态粒子浓度越大,回波顶高越高,粒子直径越大。相关系数和最大回波高度与雨强相关性不明显。(3)粒子直径在20~30 mm·h^(-1)和30~40 mm·h^(-1)无明显差异,在40 mm·h^(-1)以上有明显增大。K_(DP)中位数和平均值在≥50 mm·h^(-1)有跃增现象,表明低层液态粒子浓度有明显增大。(4)CR、ET、VIL以及低层Z_(H)、Z_(DR)、K_(DP)预警阈值增幅在20~30 mm·h^(-1)和30~40 mm·h^(-1)不明显,在40 mm·h^(-1)以上较明显。 展开更多
关键词 短时强降水 分布特征 偏振参量 预警阈值
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