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根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解代谢中agnE基因的克隆与功能鉴定 被引量:3
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作者 皮婷 姚家成 +6 位作者 黄粤 夏珍珍 梅枫 何冬兰 程国军 刘涛 李晓华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期907-914,共8页
【目的】本研究对尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnE基因进行克隆表达,并对agnE基因表达蛋白进行功能鉴定。【方法】通过PCR扩增获得agn全长基因(1029 bp),构建重组质粒pET28a-agnE,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用... 【目的】本研究对尼古丁降解菌根癌土壤杆菌SCUEC1菌株中agnE基因进行克隆表达,并对agnE基因表达蛋白进行功能鉴定。【方法】通过PCR扩增获得agn全长基因(1029 bp),构建重组质粒pET28a-agnE,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用SDS-PAGE检测重组蛋白。以2,5-二羟基吡啶作为反应底物,在检测波长320 nm下测定反应液吸光度值,进一步研究温度、pH值和金属离子对AgnE蛋白酶活性的影响。【结果】克隆得到基因agnE,构建了p ET28a-agnE重组质粒并进行了表达,AgnE蛋白分子量为42.0 kDa,表达蛋白以包涵体形式存在于细胞中。酶促反应0、5、10、20 min时反应液吸光度分别为0.6170、0.2273、0.0907、0.0667。在pH 8.0、温度20°C下,AgnE蛋白具有较高的2,5-二羟基吡啶双加氧酶活性,且Fe^(2+)对酶活性具有明显的促进作用。【结论】明确了Agn E蛋白具有2,5-二羟基吡啶双加氧酶活性。 展开更多
关键词 根癌土壤杆菌SCUEC1菌株 尼古丁降解代谢 agnE基因功能 2 5-二羟基吡啶
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尼古丁降解菌SCUEC1菌株的分离及其降解基因 被引量:10
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作者 梅枫 孔雯 +6 位作者 李阳 马婷婷 皮婷 何冬兰 程国军 刘涛 李晓华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期701-709,共9页
【目的】分离并鉴定1株具有尼古丁降解能力的细菌,研究其尼古丁降解特性并对其降解基因进行分析,为尼古丁微生物降解提供基础。【方法】从烟草种植地土壤中分离1株具有尼古丁降解能力的细菌,通过16S r RNA基因和生理生化特性对该菌株进... 【目的】分离并鉴定1株具有尼古丁降解能力的细菌,研究其尼古丁降解特性并对其降解基因进行分析,为尼古丁微生物降解提供基础。【方法】从烟草种植地土壤中分离1株具有尼古丁降解能力的细菌,通过16S r RNA基因和生理生化特性对该菌株进行鉴定,检测该菌株尼古丁降解率与生长量的关系,并进一步对该菌株进行尼古丁浓度耐受性测定,采用高通量测序技术对菌株进行全基因组测序,BLAST比对分析尼古丁降解相关基因。【结果】筛选到1株具有尼古丁降解能力的细菌,经鉴定命名为根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumerficience)SCUEC1菌株,根癌土壤杆菌SCUEC1菌株尼古丁降解率可达到94.81%,该菌株在尼古丁浓度为0.50–5.00 g/L范围内生长良好且有较高的尼古丁降解能力。对根癌土壤杆菌SCUEC1菌株全基因组序列进行BLAST比对分析,推测该菌株的尼古丁降解代谢途径与中间苍白杆菌SYJ1菌株的尼古丁降解途径相似。【结论】本研究揭示了Agrobacterium tumerficienceSCUEC1菌株具备尼古丁降解特性,初步推测出尼古丁降解相关基因和降解代谢途径,为尼古丁微生物降解提供基础。 展开更多
关键词 尼古丁 根癌土壤杆菌SCUEC1菌株 降解特性 代谢途径
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Effect of succinic acid on morphology transformation of the anhydrous magnesium carbonate particles prepared by magnesium chloride hexahydrate and urea 被引量:2
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作者 Song Liu guojun cheng Zhongfeng Tang 《Particuology》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第7期209-217,共9页
The homogeneous and controllable morphology of anhydrous magnesium carbonate(MgCO_(3))particles with excellent properties is difficult to obtain because of a variety of synthetic factors.The effect of succinic acid as... The homogeneous and controllable morphology of anhydrous magnesium carbonate(MgCO_(3))particles with excellent properties is difficult to obtain because of a variety of synthetic factors.The effect of succinic acid as a crystal modifier on the particle morphology transformation of anhydrous MgCO_(3)was investigated by the hydrothermal method.The effect of the addition of succinic acid on the particles was similar to that of temperature change.The morphology of particles with a folded diamond-like shape was gradually uniform,and the particle size was between 3.3 and 7.5μm.Anhydrous MgCO_(3)particles prepared at pH 9 could easily agglomerate,and the average particle size increased from diamond-like to cube-like as the reaction time increased.The interaction between succinic acid and magnesium ions at different concentrations was the main factor responsible for the morphological changes.The pH,temperature,and time affected the molecular motion rate and crystal growth. 展开更多
关键词 MgCO_(3) MgCl_(2)·6H_(2)O UREA Succinic acid MORPHOLOGY
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