文摘目的建立冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液中乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)残留量高效液相色谱(highperformance liquid chromatography,HPLC)检测方法,并对建立的方法进行验证及初步应用,以确保EDTA-2Na含量在安全浓度范围内。方法色谱条件为:采用反相色谱柱,流动相为水相-有机相,水相为0.1%磷酸溶液,有机相为100%甲醇,流速为1.0 mL/min,检测波长为242 nm,进样体积为20μL,柱温为25℃。对建立的方法进行系统适用性、定量限(limit of quantitation,LOQ)、专属性、线性与范围、准确度、重复性及中间精密度验证。用该方法检测3批冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液中的残余EDTA-2Na含量。结果该方法检测EDTA-2Na的LOQ为0.4900μg/mL;空白溶液、样品溶液对EDTA-2Na均无干扰,目标峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5;EDTA-2Na在0.4900~9.8000μg/mL浓度范围内呈良好的线性;EDTA-2Na在50%、100%、150%限度样品加标溶液的回收率在94%~113%之间;6份重复性溶液中,EDTA-2Na回收率在100%~102%之间,回收率相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1%;不同人员共12份中间精密度溶液测得结果的回收率RSD为2%。3批供试品均未检出EDTA-2Na。结论建立的HPLC法系统适用性、专属性、线性、准确度、重复性、中间精密度良好,适用于冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液中EDTA-2Na残留量的检测。