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人巨细胞病毒临床分离株感染血管内皮细胞伴肾素基因表达
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作者 程远 李多多 +6 位作者 程计林 程新 刘宝玲 王海滨 金壮 张杰林 crumpacker clyde 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2009年第4期193-198,共6页
目的探讨巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)是否感染血管内皮细胞伴肾素表达。方法(1)用107pfu(空斑形成单位)/ml CMV临床分离株BI-5和实验室型CMV AD169分别与106腹主动脉内皮细胞和人脐静脉内皮细胞共同孵育,在23小时后、第3天、第7天... 目的探讨巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)是否感染血管内皮细胞伴肾素表达。方法(1)用107pfu(空斑形成单位)/ml CMV临床分离株BI-5和实验室型CMV AD169分别与106腹主动脉内皮细胞和人脐静脉内皮细胞共同孵育,在23小时后、第3天、第7天、第10天和第14天分别收集培养上清200μl,第14天用PBS缓冲液洗细胞3次,收获细胞。每组实验均设培养液代替病毒液的无感染对照;(2)COBAS定量PCR检测培养上清中CMV DNA拷贝数;(3)PCR检测感染细胞中CMVpol基因;(4)RT-PCR、Real time RT-PCR和Western blot检测肾素在感染细胞内的表达。结果(1)BI-5和AD169感染静脉和动脉细胞后,其形态学变化相似,无细胞裂解病理效应;(2)AD169感染细胞不同时间培养上清中CMV DNA拷贝数无明显增加,BI-5呈增殖趋势;(3)BI-5感染动脉细胞CMV DNA拷贝数和肾素表达量均大于静脉细胞。结论临床分离株CMV以非裂解形式在血管内皮细胞持续存在并诱导肾素基因表达,血管内皮细胞分泌肾素可能是CMV感染引起心血管疾病的新机制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 血管内皮细胞 肾素
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巨细胞病毒临床分离株感染血管内皮细胞伴肾素基因表达
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作者 李多多 程远 +6 位作者 程计林 程新 刘宝玲 王海滨 金壮 张杰林 crumpacker clyde 《公共卫生与临床医学》 2009年第3期164-169,共6页
目的探讨巨细胞病毒（Cytomegalovirus，CMV）是否感染血管内皮细胞伴肾素表达。方法①用10^7pfu（空斑形成单位）／mLCMV临床分离株BI-5和实验室型CMVA D169分别与10^6腹主动脉内度细胞和人脐静脉内皮细胞共同孵育，在23h后、d3、d7、... 目的探讨巨细胞病毒（Cytomegalovirus，CMV）是否感染血管内皮细胞伴肾素表达。方法①用10^7pfu（空斑形成单位）／mLCMV临床分离株BI-5和实验室型CMVA D169分别与10^6腹主动脉内度细胞和人脐静脉内皮细胞共同孵育，在23h后、d3、d7、d10和d14分别收集培养上清200μL，d14用PBS缓冲液洗细胞3次，收获细胞。每组实验均设培养液代替病毒液的无感染对照；②COBAS定量PCR检测培养上清中CMV DNA拷贝数；③PCR检测感染细胞中CMVpol基因；@RT-PCR、Real time RT-PCR和Western blot检测肾素在感染细胞内的表达。结果①BI-5和AD169感染静脉和动脉细胞后，其形态学变化相似，无细胞裂解病理效应；②AD169感染细胞不同时间培养上清中CMVDNA拷贝数无明显增加，BI-5呈增殖趋势；③BI-5感染动脉细胞CMVDNA拷贝数和肾素表达量均大于静脉细胞。结论临床分离株CMV以非裂解形式在血管内皮细胞持续存在并诱导肾素基因表达，血管内皮细胞分泌肾素可能是CMV感染引起心血管疾病的新机制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 血管内皮细胞 肾素
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巨细胞病毒感染对细胞肾素基因表达的影响及其生物学意义
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作者 李多多 程远 +6 位作者 程计林 程新 刘宝玲 王海滨 金壮 张杰林 crumpacker clyde 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期832-836,共5页
目的探讨巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染肾球旁细胞肾素基因表达的变化及其意义。方法用病毒感染复数（MOI）为10、0．1和0的鼠CMV分别与鼠肾球旁细胞模型As4．1细胞共育5d作为实验组；用紫外线灭活病毒的假感染（mock感染）... 目的探讨巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染肾球旁细胞肾素基因表达的变化及其意义。方法用病毒感染复数（MOI）为10、0．1和0的鼠CMV分别与鼠肾球旁细胞模型As4．1细胞共育5d作为实验组；用紫外线灭活病毒的假感染（mock感染）对照组。RT—PCR检测感染细胞中CMV即刻早期基因1（IE1）的表达；免疫荧光观察肾素阳性细胞和肾素阳性颗粒在细胞的分布；双色免疫荧光染色观察肾素阳性颗粒是否出现在CMV阳性细胞；RT—PCR和Westernblot检测。肾素基因在感染细胞内的表达。结果CMV感染As4．1细胞后出现典型的病毒空斑；病毒感染细胞CMV IE RT—PCR产物阳性；肾素阳性细胞集中在病毒空斑周围CMV新感染细胞区，肾素阳性荧光颗粒主要以块状和环状存在于病毒感染细胞质中；双色免疫荧光染色显示肾素阳性颗粒和CMV阳性颗粒出现在同一细胞；CMV感染细胞肾素基因的表达随病毒感染量增加而增加。结论CMV感染并导致其宿主细胞肾素基因表达，可能涉及CMV加速心血管疾病发生发展的新机制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 肾球旁细胞 肾素 生物学
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