目的本研究旨在运用RNA测序和生物信息学等预测姜黄素对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)Hs578T细胞的抗癌机制,并通过体外实验对潜在的分子机制进行验证。方法用姜黄素处理Hs578T细胞后,采用CCK-8法检测姜黄素对细胞...目的本研究旨在运用RNA测序和生物信息学等预测姜黄素对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)Hs578T细胞的抗癌机制,并通过体外实验对潜在的分子机制进行验证。方法用姜黄素处理Hs578T细胞后,采用CCK-8法检测姜黄素对细胞增殖能力的影响,使用流式细胞术检测姜黄素对细胞凋亡和周期的影响,再使用Transwell实验检测姜黄素对细胞运动能力的影响。然后进行转录组测序、构建PPI网络和富集分析对姜黄素的抗癌机制进行预测,最后使用蛋白免疫印迹技术检测姜黄素对Hs578T细胞增殖相关蛋白的影响。结果姜黄素作用于Hs578T细胞24 h后,CCK8检测结果提示姜黄素的IC50约为20μmol/L。使用20μmol/L姜黄素刺激的Hs578T细胞为实验组,未进行姜黄素刺激的细胞为对照组。较对照组,实验组结果显示姜黄素能显著抑制Hs578T细胞的增殖能力,具有时间和浓度依赖性;显著诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期;显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,相较于对照组差异均具有统计学意义(P<0.05)。PPI网络分析的结果显示差异表达基因表达的蛋白质之间具有相互作用关系。转录组测序和生物信息学分析的结果显示,姜黄素通过参与多条信号通路发挥抗癌作用,如癌症中的信号通路、PI3K-Akt信号通路等。蛋白印迹结果显示姜黄素能在Hs578T细胞中显著抑制m TOR、p-Akt、Akt、p-S6、S6蛋白表达。结论姜黄素可能通过抑制PI3K-Akt信号通路相关蛋白的表达来发挥其抗增殖作用,为临床姜黄素治疗TNBC提供了理论依据和实验基础。展开更多
