[目的]探究CCCH型锌指蛋白13(ZC3H13)在甲状腺癌(TC)发生发展的作用及可能机制。[方法]收集57例TC组织和对应癌旁组织、TC细胞(TPC-1,KTC-1,WRO)和正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,Western Blot检测各组织、细胞中ZC3H13蛋白表达。选择TPC-...[目的]探究CCCH型锌指蛋白13(ZC3H13)在甲状腺癌(TC)发生发展的作用及可能机制。[方法]收集57例TC组织和对应癌旁组织、TC细胞(TPC-1,KTC-1,WRO)和正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,Western Blot检测各组织、细胞中ZC3H13蛋白表达。选择TPC-1细胞随机分为control组、ZC3H13组(过表达ZC3H13)和NC组,CCK-8、Transwell、划痕实验检测各组细胞增殖、侵袭、转移水平,Western Blot检测Ras、细胞外信号调节激酶(ERK)、Snail、金属基质蛋白酶2(MMP-2)、胞质紧密黏连蛋白1(Zo-1)蛋白表达。[结果]TPC-1细胞TC组织ZC3H13蛋白表达低于癌旁组织(0.17±0.02 vs 0.99±0.01),TPC-1、KTC-1、WRO细胞ZC3H13蛋白表达低于Nthy-ori 3-1细胞(P<0.05);Western Blot检测ZC3H13组细胞ZC3H13蛋白表达高于control组和NC组(1.73±0.11 vs 1.05±0.18,1.11±0.23,P<0.05);ZC3H13组细胞增殖水平(0.91±0.11 vs 1.46±0.13,1.52±0.14)、侵袭数(74.64±12.18 vs 105.31±15.72,108.74±16.34)个、迁移率(19.42±2.13 vs 54.27±7.32,51.81±9.31)%均低于control组和NC组(P<0.05);与control组和NC组比较,ZC3H13组细胞MMP-2、Zo-1蛋白表达升高,K-Ras、p-ERK、Snail蛋白表达降低(P<0.05)。[结论]ZC3H13在TC组织及细胞中低表达,上调ZC3H13表达可抑制TPC-1细胞增殖、侵袭、转移能力,这可能是通过抑制Ras-ERK信号通路(0.65±0.12 vs 0.35±0.16)实现的。展开更多
[目的]探究PGAM5对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖能力的影响及可能机制。[方法]通过免疫组化与蛋白免疫印迹实验分析甲状腺乳头状癌与癌旁组织中PGAM5的表达。将人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞随机分为si NC组、si PGAM5组、740Y-P组和LY29...[目的]探究PGAM5对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖能力的影响及可能机制。[方法]通过免疫组化与蛋白免疫印迹实验分析甲状腺乳头状癌与癌旁组织中PGAM5的表达。将人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞随机分为si NC组、si PGAM5组、740Y-P组和LY294002组,荧光实时定量PCR验证其转染效率,CCK-8、克隆形成实验检测各组细胞活力、克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹检测PI3K/AKT通路蛋白表达。[结果]PGAM5在甲状腺乳头状癌组织中表达上调(0.23±0.07 vs 0.81±0.16;P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与si NC组比较,si PGAM5组的PGAM5 mRNA相对表达量降低(0.75±0.15 vs 0.19±0.04;P<0.05);与si NC组比较,si PGAM5组、LY294002组细胞的增殖能力降低、克隆形成数量减少、细胞凋亡率增加、PI3K和AKT蛋白表达降低(0.68±0.07 vs 0.23±0.06 vs 0.28±0.05;0.55±0.15 vs 0.17±0.05 vs 0.19±0.06;P<0.05)。与si PGAM5组比较,740Y-P组细胞增殖能力提高、克隆形成数量增加、细胞凋亡率降低、PI3K和AKT蛋白表达增加(0.23±0.06 vs 0.87±0.09;0.17±0.05 vs 0.83±0.17;P<0.05)。[结论]PGAM5在甲状腺乳头状癌组织中表达上调。下调PGAM5可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖活性和克隆形成能力,促进甲状腺乳头状癌细胞凋亡,这可能是通过调控PI3K/AKT通路发挥作用。展开更多
文摘[目的]探究CCCH型锌指蛋白13(ZC3H13)在甲状腺癌(TC)发生发展的作用及可能机制。[方法]收集57例TC组织和对应癌旁组织、TC细胞(TPC-1,KTC-1,WRO)和正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,Western Blot检测各组织、细胞中ZC3H13蛋白表达。选择TPC-1细胞随机分为control组、ZC3H13组(过表达ZC3H13)和NC组,CCK-8、Transwell、划痕实验检测各组细胞增殖、侵袭、转移水平,Western Blot检测Ras、细胞外信号调节激酶(ERK)、Snail、金属基质蛋白酶2(MMP-2)、胞质紧密黏连蛋白1(Zo-1)蛋白表达。[结果]TPC-1细胞TC组织ZC3H13蛋白表达低于癌旁组织(0.17±0.02 vs 0.99±0.01),TPC-1、KTC-1、WRO细胞ZC3H13蛋白表达低于Nthy-ori 3-1细胞(P<0.05);Western Blot检测ZC3H13组细胞ZC3H13蛋白表达高于control组和NC组(1.73±0.11 vs 1.05±0.18,1.11±0.23,P<0.05);ZC3H13组细胞增殖水平(0.91±0.11 vs 1.46±0.13,1.52±0.14)、侵袭数(74.64±12.18 vs 105.31±15.72,108.74±16.34)个、迁移率(19.42±2.13 vs 54.27±7.32,51.81±9.31)%均低于control组和NC组(P<0.05);与control组和NC组比较,ZC3H13组细胞MMP-2、Zo-1蛋白表达升高,K-Ras、p-ERK、Snail蛋白表达降低(P<0.05)。[结论]ZC3H13在TC组织及细胞中低表达,上调ZC3H13表达可抑制TPC-1细胞增殖、侵袭、转移能力,这可能是通过抑制Ras-ERK信号通路(0.65±0.12 vs 0.35±0.16)实现的。
文摘[目的]探究PGAM5对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖能力的影响及可能机制。[方法]通过免疫组化与蛋白免疫印迹实验分析甲状腺乳头状癌与癌旁组织中PGAM5的表达。将人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞随机分为si NC组、si PGAM5组、740Y-P组和LY294002组,荧光实时定量PCR验证其转染效率,CCK-8、克隆形成实验检测各组细胞活力、克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹检测PI3K/AKT通路蛋白表达。[结果]PGAM5在甲状腺乳头状癌组织中表达上调(0.23±0.07 vs 0.81±0.16;P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与si NC组比较,si PGAM5组的PGAM5 mRNA相对表达量降低(0.75±0.15 vs 0.19±0.04;P<0.05);与si NC组比较,si PGAM5组、LY294002组细胞的增殖能力降低、克隆形成数量减少、细胞凋亡率增加、PI3K和AKT蛋白表达降低(0.68±0.07 vs 0.23±0.06 vs 0.28±0.05;0.55±0.15 vs 0.17±0.05 vs 0.19±0.06;P<0.05)。与si PGAM5组比较,740Y-P组细胞增殖能力提高、克隆形成数量增加、细胞凋亡率降低、PI3K和AKT蛋白表达增加(0.23±0.06 vs 0.87±0.09;0.17±0.05 vs 0.83±0.17;P<0.05)。[结论]PGAM5在甲状腺乳头状癌组织中表达上调。下调PGAM5可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖活性和克隆形成能力,促进甲状腺乳头状癌细胞凋亡,这可能是通过调控PI3K/AKT通路发挥作用。
