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白念珠菌唑类耐药分子检测体系的建立
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作者 王梦凡 王旭 +1 位作者 刘春龙 齐崴 《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》 北大核心 2025年第4期414-422,共9页
随着免疫抑制剂与侵入性手术的应用,侵袭性真菌病的发病率逐渐上升,而由此出现的抗真菌药物大量使用也导致了真菌耐药性的增强.其中,白念珠菌(Candida albicans)对唑类药物耐药性日益明显,这对开发早期临床耐药性诊断方法提出了更大的需... 随着免疫抑制剂与侵入性手术的应用,侵袭性真菌病的发病率逐渐上升,而由此出现的抗真菌药物大量使用也导致了真菌耐药性的增强.其中,白念珠菌(Candida albicans)对唑类药物耐药性日益明显,这对开发早期临床耐药性诊断方法提出了更大的需求.相关研究显示,白念珠菌的耐药性涉及到多种机制,其中erg11基因上的热点区突变是其产生唑类耐药性的主要机制之一.本研究旨在基于多色探针熔解曲线分析技术(MMCA)建立一种针对白念珠菌唑类耐药的分子检测方法,从而对3个热点突变区内的4种主要的突变类型进行基因分型.研究纳入了11株耐药和22株敏感的白念珠菌,通过对其进行药敏检测、耐药相关基因突变类型鉴定,建立真菌耐药表型与耐药基因型之间的联系.药敏结果显示,11株耐药株和22株敏感株的最低抑菌浓度(MIC)值分别为16~64μg/mL和0.5~1.0μg/mL.耐药基因型鉴定结果显示有erg11HS1热点区突变的菌株9株,erg11HS3热点区突变的菌株2株,未能鉴定到erg11HS2热点区突变的菌株,相关突变型与耐药性之间的联系符合预期结果.在此基础上,通过设计数对特异性引物和荧光探针,并筛选最佳反应程序,建立了一种鉴定有关突变型与野生型的MMCA检测体系.对该检测体系的效果进行了评估和验证:所有4种突变型和野生型均被准确分型,两者的溶解温度差异均大于3.5℃,检出限最低可达1.9×10^(2)拷贝数/mL,扩增效率均大于90%.在33例白念珠菌的样本中,以一代测序为标准,该体系检测的一致率为93.94%(31/33),不同物种间无特异性交叉.本研究为白念珠菌病的早期唑类药物耐药性诊断提供了新方法. 展开更多
关键词 白念珠菌 耐药性 探针熔解曲线分析 突变型
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胰蛋白酶水解全酪蛋白反应过程中的色谱分析 被引量:16
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作者 齐崴 何明霞 +1 位作者 何志敏 史德青 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-5,共5页
将高效凝胶排阻色谱 (HPSEC)技术与水解度 (DH)概念相结合 ,对酪蛋白 胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行色谱分析 ,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线 ;依据蛋白质结构信息 ,结合HP... 将高效凝胶排阻色谱 (HPSEC)技术与水解度 (DH)概念相结合 ,对酪蛋白 胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行色谱分析 ,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线 ;依据蛋白质结构信息 ,结合HPSEC实验谱图 ,对胰蛋白酶作用于酪蛋白时的酶解断裂位点进行剖析 ,初步推断反应历程 ,并得到理论酶解肽段的相对分子质量分布图及酶解物中活性多肽酪蛋白磷酸肽 (CPPs)肽谱。 展开更多
关键词 胰蛋白酶 水解度 酪蛋白 色谱分析 胰蛋白酶 酶促水解 高效凝胶排阻色谱 酪蛋白磷酸肽 肽谱
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蛋白质酶促水解反应机理与动力学模型 被引量:18
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作者 齐崴 何志敏 何明霞 《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期768-773,共6页
研究蛋白质酶促水解制备生物活性多肽的反应机理与动力学行为,并建模表征不同反应机制的酶解曲线.基于对不同实验条件下反应时程特性的分析,以经典的米氏方程为理论基础,提出了同时考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活以及底物或产物抑制... 研究蛋白质酶促水解制备生物活性多肽的反应机理与动力学行为,并建模表征不同反应机制的酶解曲线.基于对不同实验条件下反应时程特性的分析,以经典的米氏方程为理论基础,提出了同时考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活以及底物或产物抑制因素的机理模型,并构建了指数形式动力学方程dh/dt=aexp(-bh),其中参数a和b对于不同反应机理具有不同的表达形式和确定的数值结果.对于牛血清白蛋白(BSA)-胰蛋白酶(trypsin)模型体系,经实验拟合平均相对误差为4.73%,并求得该体系相应热力学和动力学常数:Km=0.074 8 g/L,Ks=7.961 g/L,Kd=9.358min-1,k2=38.439 min-1,Ea=64.826 kJ/mol,Ed=80.031 kJ/mol.所建整套模型可用于蛋白质酶解反应过程的模拟、热动力学常数的计算和生物反应器的优化设计. 展开更多
关键词 牛血清白蛋白 胰蛋白酶 酶解 动力学模型 活性多肽
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酶解反应与膜分离耦合连续制备酪蛋白磷酸肽 被引量:17
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作者 齐崴 何志敏 何明霞 《化学工程》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期43-46,54,共5页
采用酶解反应与膜分离耦合新工艺连续水解全酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)。考察了超滤膜对胰蛋白酶及底物溶液的截留效果;研究了初始底物质量浓度、初始酶质量浓度、反应体积、膜渗透通量等参数对反应器性能和反应转化率的影响规律;利... 采用酶解反应与膜分离耦合新工艺连续水解全酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)。考察了超滤膜对胰蛋白酶及底物溶液的截留效果;研究了初始底物质量浓度、初始酶质量浓度、反应体积、膜渗透通量等参数对反应器性能和反应转化率的影响规律;利用高效凝胶排阻色谱系统(HPSEC)对酶解产物进行检测分析;建立了酶膜反应器连续水解动力学模型,并对间歇与连续酶解过程进行比较分析,证明反应-分离耦合技术可使酶解效率及蛋白酶利用率大幅提高,并使产物得到调控与富集,为CPPs的酶法制备提供了一种更为有效的方法。 展开更多
关键词 酪蛋白磷酸肽 酶膜反应器 酶解 动力学模型 高效凝胶排阻色谱
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酪蛋白酶解制备酪蛋白磷酸肽研究 Ⅰ.过程分析与优化 被引量:11
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作者 齐崴 何志敏 何丽霞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第7期25-28,共4页
以 pH- stat技术跟踪间歇搅拌反应釜中酪蛋白—碱性蛋白酶抑制备酪蛋白磷酸肽 (CPPS)过程特性,利用水解度 (DH)表征其反应历程。分析了温度 (T)、 pH值、底物浓度 ([S])、酶浓度 ([E])及时间 (t)等参数对 DH的影响,并通过多元线性回... 以 pH- stat技术跟踪间歇搅拌反应釜中酪蛋白—碱性蛋白酶抑制备酪蛋白磷酸肽 (CPPS)过程特性,利用水解度 (DH)表征其反应历程。分析了温度 (T)、 pH值、底物浓度 ([S])、酶浓度 ([E])及时间 (t)等参数对 DH的影响,并通过多元线性回归求得其关联式,确定出最适酶解条件为: T=40℃, pH=10, [E]=0.2%, [S]=2.5g/L, t=30min。 展开更多
关键词 酪蛋白 碱性蛋白酶 酪蛋白磷酸肽 水解度 操作参数 酶解 功能食品 药物
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基于蛋白质结构知识解析活性多肽的酶解制备反应行为(Ⅰ)酶解反应动态特性的3-D图形表征 被引量:4
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作者 齐崴 何志敏 何明霞 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2387-2391,共5页
提出了一种基于生物信息学知识与凝胶排阻色谱技术及图形拟合处理相结合的生物大分子复杂酶解反应行为定量分析、直观表征及模拟解析的新方法.研究中以全酪蛋白胰蛋白酶为模式水解体系,根据完整的HPSEC实验谱图,经分子模拟多肽结构,获... 提出了一种基于生物信息学知识与凝胶排阻色谱技术及图形拟合处理相结合的生物大分子复杂酶解反应行为定量分析、直观表征及模拟解析的新方法.研究中以全酪蛋白胰蛋白酶为模式水解体系,根据完整的HPSEC实验谱图,经分子模拟多肽结构,获得了大量产物多肽信息;绘制了表征酶解反应动态特性的3D曲面图与21/2维伪彩色图,并对拟合曲面方程进行了数学分析,为调控酶解反应、定向和定量地高效获取目标活性多肽提供了理论依据. 展开更多
关键词 酶解 3-D图形 曲面拟合 动态表征 活性多肽 蛋白质结构 高效凝胶排阻色谱
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酪蛋白酶解制备酪蛋白磷酸肽研究 Ⅱ.产物分析及反应动力学模型 被引量:4
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作者 齐崴 何志敏 史德青 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第8期37-40,共4页
利用高效液相排阻色谱对酪蛋白──碱性蛋白酶水解产物分子量分布进行了分析。在最适酶解工艺条件下,求得各表观动力学常数:Km=0.3132g/L,Kcat=12.9248/min,Ks=9.5565g/L,Kp=0.00285g/L。建立了考虑酶一级热失活、底物反竞争性抑制... 利用高效液相排阻色谱对酪蛋白──碱性蛋白酶水解产物分子量分布进行了分析。在最适酶解工艺条件下,求得各表观动力学常数:Km=0.3132g/L,Kcat=12.9248/min,Ks=9.5565g/L,Kp=0.00285g/L。建立了考虑酶一级热失活、底物反竞争性抑制和产物竞争性抑制三方面因素共同影响的本征反应动力学模型,经实验拟合平均相对误差为6.21%。 展开更多
关键词 酪蛋白磷酸钛 碱性蛋白酶 高效液相排阻色谱 反应动力学模型 酶解
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反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物 被引量:9
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作者 齐崴 贾辰熙 +2 位作者 何志敏 乔斌 张延莹 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1244-1248,共5页
采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)与质谱(MS)联用技术对固相法化学合成七肽(H2N-PFNSLAI-COOH,M r 760.9)时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性,提出了充分利用吸附和分配双重保留机制的“早期吸附”概念,以此优化... 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)与质谱(MS)联用技术对固相法化学合成七肽(H2N-PFNSLAI-COOH,M r 760.9)时出现的消旋产物进行了分析。根据弱疏水性合成七肽粗品特性,提出了充分利用吸附和分配双重保留机制的“早期吸附”概念,以此优化色谱条件得到4个峰形良好的色谱峰;质谱分析表明:4谱峰具有相同的m/z761.5[M+H]+值,对每一消旋产物进行在线多肽测序,并利用串联质谱(MSn)谱图叠加的方法,得到b轴和y轴两套片段信息,成功确定了合成七肽的4个消旋产物。 展开更多
关键词 高效液相色谱-质谱 固相多肽合成 消旋 多肽测序
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多级质谱法测定Axinastatin 1环肽序列及其断裂机理研究 被引量:2
9
作者 齐崴 贾辰熙 +1 位作者 何志敏 乔斌 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第3期233-238,共6页
对具有抗癌活性的海洋环肽Axinastatin 1进行化学合成.采用多级质谱法对合成环肽进行序列测定.线性前体测序依据bx-yz断裂路径,在同一张MS2谱中利用b和y离子所提供序列信息的互补来实现.环肽测序依据bx→bx-1断裂路径,每一级MS由b离子的... 对具有抗癌活性的海洋环肽Axinastatin 1进行化学合成.采用多级质谱法对合成环肽进行序列测定.线性前体测序依据bx-yz断裂路径,在同一张MS2谱中利用b和y离子所提供序列信息的互补来实现.环肽测序依据bx→bx-1断裂路径,每一级MS由b离子的C端碰撞掉一个氨基酸残基直到MS6,得到2套b离子,根据它们所提供序列信息的互补可准确测定环肽序列并推断其环结构,同时观察到b离子重排现象.讨论了上述断裂与重排的路径和机理,并利用半经验量子化学PM3和AM1两种算法计算了碎片的生成焓,验证了路径的合理性.由离子b5PN的生成焓偏高和其重排间的联系尝试提出过渡结构假设. 展开更多
关键词 环肽 测序 串联质谱 断裂机理
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表面增强拉曼光谱法对食源性致病菌的鉴别 被引量:3
10
作者 齐崴 杨钰 王梦凡 《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1003-1012,共10页
表面增强拉曼光谱(SERS)以其简单、快速、高灵敏度等优点在食源性致病菌检测应用领域备受关注.本文基于SERS的指纹光谱优势,结合数学统计方法,实现了对食品中3种常见致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)的鉴别分析.研究中考察了... 表面增强拉曼光谱(SERS)以其简单、快速、高灵敏度等优点在食源性致病菌检测应用领域备受关注.本文基于SERS的指纹光谱优势,结合数学统计方法,实现了对食品中3种常见致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)的鉴别分析.研究中考察了SERS基底与细菌的不同结合方式,即带负电银纳米粒子直接与细菌混合吸附(Ag NPs^(-)-细菌)、带正电银纳米粒子直接与细菌混合吸附(Ag NPs^(+)-细菌)、在细菌表面原位生长银纳米粒子(细菌@AgNPs),以及分散溶剂对SERS光谱结果的影响.随后,基于获得的3种细菌的SERS指纹光谱,比较了多种数学统计方法的分类效果.结果表明,通过层次聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析法,均能对3种食源性致病菌进行区分,为利用SERS技术鉴别食源性致病菌提供了技术借鉴. 展开更多
关键词 表面增强拉曼光谱 食源性致病菌 统计分析 指纹光谱
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废水中聚氧乙烯类非离子表面活性剂含量的测定 被引量:1
11
作者 齐崴 《天津化工》 CAS 1995年第2期24-26,共3页
介绍用改进的硫氰酸钴分光光度法测定废水中聚氧乙烯类非离子表面活性剂的含量,讨论了不同实验条件对测定结果的影响,以及十二烷基苯磺酸阴离子(ABS)对测定的影响及消除方法。
关键词 废水 聚氧乙烯 非离子型 表面活性剂 测定
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木质纤维素新型预处理与顽抗特性 被引量:41
12
作者 崔美 黄仁亮 +3 位作者 苏荣欣 齐崴 张毅民 何志敏 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期677-687,共11页
木质纤维素是地球上最丰富的可再生生物质资源,其中纤维类多糖的酶催化降解是木质纤维素生物精炼的关键环节之一。对木质纤维素进行预处理,破坏底物的顽抗特性,是实现木质纤维素高效酶解糖化的必要途径。为此,各国学者围绕预处理技术开... 木质纤维素是地球上最丰富的可再生生物质资源,其中纤维类多糖的酶催化降解是木质纤维素生物精炼的关键环节之一。对木质纤维素进行预处理,破坏底物的顽抗特性,是实现木质纤维素高效酶解糖化的必要途径。为此,各国学者围绕预处理技术开发以及底物顽抗特性开展了大量研究,本文对近几年来在这两方面取得的最新成果进行了综述和分析。在预处理方面,重点介绍了组合预处理、低温预处理、绿色溶剂与电化学预处理4类新型预处理技术,并对预处理效果与技术优势进行了评价;在底物顽抗特性方面,综述了木质素、结晶度、酶可及度等不同顽抗特性对纤维素酶解的影响规律,重点总结了近年来顽抗特性研究方面的新方法、新认识与新理解。上述研究成果有助于了解当前木质纤维素预处理研究的导向以及明确制约纤维素酶解的关键因素,为设计和筛选适宜的预处理方式、深刻理解纤维素酶解机制提供基础和指导。 展开更多
关键词 生物质 木质纤维素 预处理 酶解 顽抗特性
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食品包装材料中有害物质迁移行为的研究进展 被引量:52
13
作者 郝倩 苏荣欣 +3 位作者 齐崴 于艳军 王利兵 何志敏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第21期279-286,共8页
食品包装材料在食品安全中发挥了重要的作用。食品包装能有效地保护食品,防止变质,但其中化学物质的迁移,又会给食品质量和安全带来负面影响。因此,对食品包装材料中化学物质的迁移进行研究显得非常必要。本文综述了近几年食品包装材料... 食品包装材料在食品安全中发挥了重要的作用。食品包装能有效地保护食品,防止变质,但其中化学物质的迁移,又会给食品质量和安全带来负面影响。因此,对食品包装材料中化学物质的迁移进行研究显得非常必要。本文综述了近几年食品包装材料中有害物质的检测分析、迁移规律以及传质模型;对主要被检物质所采用的检测方法进行了总结,并对塑料与纸基材料中物质的迁移规律和传质模型进行了对比;最后对食品包装材料未来的发展方向进行展望。 展开更多
关键词 食品包装材料 检测 迁移 数学模型
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保护剂提高β-甘露聚糖酶热稳定性的研究 被引量:18
14
作者 刘朝辉 武伟娜 +2 位作者 刘跃 齐崴 何志敏 《天津大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第1期114-118,共5页
研究了几种糖类(葡萄糖、甘露糖、果糖、蔗糖和壳聚糖)和多元醇类(乙醇、丙三醇和山梨醇)保护剂提高β-甘露聚糖酶热稳定性的作用,并考察了在特定保护剂存在时该酶的最适反应温度和失活热力学以及动力学.实验表明,蔗糖、壳聚糖和山梨醇... 研究了几种糖类(葡萄糖、甘露糖、果糖、蔗糖和壳聚糖)和多元醇类(乙醇、丙三醇和山梨醇)保护剂提高β-甘露聚糖酶热稳定性的作用,并考察了在特定保护剂存在时该酶的最适反应温度和失活热力学以及动力学.实验表明,蔗糖、壳聚糖和山梨醇在浓度均为2 g/L时能够显著提高该酶的热稳定性;通过正交实验得到了一种效果最佳的复合保护剂(蔗糖、壳聚糖、山梨醇之比为1∶2∶2);蔗糖、壳聚糖、甘油、山梨醇和复合保护剂的添加均能使β-甘露聚糖酶的最适反应温度从原来的50℃提高到60℃左右;65℃下β-甘露聚糖酶的热失活曲线遵循一级反应规律,计算得到了不同保护剂下酶失活的动力学和热力学参数值,并分析了保护剂提高β-甘露聚糖酶热稳定性的机理. 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 热稳定性 保护剂 热失活动力学 保护机理
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离子液体[BMIM]Cl预处理对微晶纤维素酶解的影响 被引量:22
15
作者 李秋瑾 殷友利 +2 位作者 苏荣欣 齐崴 何志敏 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第1期88-92,共5页
以微晶纤维素为研究对象,设计了离子液体1-丁基-3-甲基咪唑氯盐(1-butyl-3-methylimidazolium chloride,[BMIM]Cl)预处理微晶纤维素Avicel的实验方法以实现纤维素的高效酶解糖化.在[BMIM]Cl中Avicel完全溶解,经水洗沉淀得到再生纤维素,... 以微晶纤维素为研究对象,设计了离子液体1-丁基-3-甲基咪唑氯盐(1-butyl-3-methylimidazolium chloride,[BMIM]Cl)预处理微晶纤维素Avicel的实验方法以实现纤维素的高效酶解糖化.在[BMIM]Cl中Avicel完全溶解,经水洗沉淀得到再生纤维素,回收后的离子液体可重复利用.预处理后底物酶解的可溶性糖转化率在24h时高达94.65%,较之同样条件下未经预处理底物的酶解糖转化率(48.57%)有飞跃性提升.进一步考察了离子液体预处理对纤维素结构及形态的影响,结果表明:[BMIM]Cl预处理后Avicel氢键减弱;结晶度明显下降,结晶型态由纤维素I型转变为纤维素II型;由规整的平行排布转变为疏松有孔的无序形貌.正是离子液体预处理引起的纤维素微观与宏观结构性质的显著改变使得再生后纤维素酶解的可溶性糖转化率大幅提高. 展开更多
关键词 纤维素 离子液体 预处理 酶解
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生物质制备5-羟甲基糠醛的研究进展 被引量:18
16
作者 姜楠 齐崴 +2 位作者 黄仁亮 苏荣欣 何志敏 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1937-1945,共9页
5-羟甲基糠醛(HMF)是一种重要的平台化合物,具有广阔的应用前景。目前很多研究者已对如何提高HMF的产率和降低HMF的制备成本开展了多方面研究。本文综述了2006—2010年HMF的主要制备方法及研究特色,并对原料(单糖、多糖)、催化剂(固体... 5-羟甲基糠醛(HMF)是一种重要的平台化合物,具有广阔的应用前景。目前很多研究者已对如何提高HMF的产率和降低HMF的制备成本开展了多方面研究。本文综述了2006—2010年HMF的主要制备方法及研究特色,并对原料(单糖、多糖)、催化剂(固体酸、均相催化剂)、溶剂体系(单相体系、双相体系)及其它辅助条件(微波加热法、添加调节剂法)进行了系统总结与全面分析;同时,介绍了HMF的重要衍生物及其应用;最后指出了目前研究中存在的突出问题,并对其中的主要研究方向进行了归纳。 展开更多
关键词 5-羟甲基糠醛 生物质 原料 溶剂体系 催化剂
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β-甘露聚糖酶发酵液絮凝条件的统计学筛选与响应面优化 被引量:21
17
作者 韩健 刘朝辉 +1 位作者 齐崴 何志敏 《生物加工过程》 CAS CSCD 2007年第2期29-35,共7页
采用Plackett-Burman(PB)和中心复合设计(Central Composite Design)对影响地衣芽孢杆菌TJ-101发酵生产β-甘露聚糖酶粗发酵液絮凝操作的8个条件进行筛选优化。PB实验设计与统计学分析表明:加水量、阳离子聚丙烯酰胺(C-PAM)和阴离子聚... 采用Plackett-Burman(PB)和中心复合设计(Central Composite Design)对影响地衣芽孢杆菌TJ-101发酵生产β-甘露聚糖酶粗发酵液絮凝操作的8个条件进行筛选优化。PB实验设计与统计学分析表明:加水量、阳离子聚丙烯酰胺(C-PAM)和阴离子聚丙烯酰胺(A-PAM)的体积分数是影响酶活收率的3个关键因素。以酶活收率为响应目标,对3因素进行中心复合设计,并经响应面法优化分析得到影响酶活收率的二阶模型,确定了β-甘露聚糖酶发酵液絮凝实验的最优操作条件为:加水量体积分数240.55%,C-PAM体积分数14.13%,A-PAM体积分数16.97%,絮凝后发酵液的酶活收率达70.42%。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 絮凝 PLACKETT-BURMAN设计 中心复合设计 响应面 优化
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木瓜蛋白酶交联聚体的制备及性质 被引量:13
18
作者 王梦凡 齐崴 +1 位作者 苏荣欣 何志敏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1774-1779,共6页
采用交联酶聚体(CLEAs)技术制得了木瓜蛋白酶CLEAs,优化了制备条件.以纯乙醇为蛋白沉淀剂,质量分数40%戊二醛为交联剂,于4℃下对酶沉淀聚体交联16h;所得木瓜蛋白酶CLEAs的最适pH为6.0(游离酶最适pH=7.0),最适温度范围由游离酶的80℃拓宽... 采用交联酶聚体(CLEAs)技术制得了木瓜蛋白酶CLEAs,优化了制备条件.以纯乙醇为蛋白沉淀剂,质量分数40%戊二醛为交联剂,于4℃下对酶沉淀聚体交联16h;所得木瓜蛋白酶CLEAs的最适pH为6.0(游离酶最适pH=7.0),最适温度范围由游离酶的80℃拓宽为50~80℃,热稳定性和溶液稳定性亦明显提高;微观形貌分析证明木瓜蛋白酶CLEAs优良的催化效能及稳定性来自于CLEAs单元所具有的高比表面积及单元内部多点共价固定的结合方式. 展开更多
关键词 交联酶聚体 固定化 木瓜蛋白酶 稳定性 形貌 集簇
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中性β-甘露聚糖酶分批发酵动力学研究 被引量:13
19
作者 刘朝辉 陈云 +2 位作者 齐崴 王康 何志敏 《化学工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期66-70,共5页
以魔芋粉为碳源,研究了10 L自控发酵罐中枯草芽孢杆菌TJ-200603分批发酵产中性β-甘露聚糖酶的过程动力学。实验数据表明,菌体生长呈现典型S型曲线,而酶的合成与菌体生长同步进行,属于生长耦联型。基于这些过程曲线的变化规律,构建了β... 以魔芋粉为碳源,研究了10 L自控发酵罐中枯草芽孢杆菌TJ-200603分批发酵产中性β-甘露聚糖酶的过程动力学。实验数据表明,菌体生长呈现典型S型曲线,而酶的合成与菌体生长同步进行,属于生长耦联型。基于这些过程曲线的变化规律,构建了β-甘露聚糖酶分批发酵过程的动力学模型。并经非线性拟合和优化,获得了最佳的模型参数值,最终确定了能够较好表征实际发酵过程中菌体细胞生长、产物β-甘露聚糖酶合成以及基质总糖消耗的3个动力学方程。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 发酵动力学 非线性拟合
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木质纤维素甲酸预处理及其组分分离 被引量:13
20
作者 黄仁亮 苏荣欣 +2 位作者 齐崴 张名佳 何志敏 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1103-1107,共5页
以玉米芯为研究对象,提出了常压中温条件下甲酸预处理木质纤维素组分分离的工艺.在该体系中半纤维素迅速发生水解,大部分木质素被溶解,而纤维素基本不发生水解,经固液分离和甲酸回收实现了玉米芯全组分分离.考察了预处理温度、时间和甲... 以玉米芯为研究对象,提出了常压中温条件下甲酸预处理木质纤维素组分分离的工艺.在该体系中半纤维素迅速发生水解,大部分木质素被溶解,而纤维素基本不发生水解,经固液分离和甲酸回收实现了玉米芯全组分分离.考察了预处理温度、时间和甲酸浓度对玉米芯各组分分离效果及水解产物(可溶性糖)含量的影响规律,结果表明,随着反应的进行,甲酸溶液中可溶性糖和木质素量先迅速增大,随后趋于平衡;在50~75℃间对各组分分离的影响不明显.综合考虑分离效果和成本,选择最佳反应温度为60℃,处理时间为3h,甲酸浓度为88%(ω).在该条件下,纤维素、半纤维素和木质素回收率分别可达91.4%,88.5%和63.7%. 展开更多
关键词 木质纤维素 甲酸 预处理 组分分离
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