慢性缺氧对大鼠骨骼肌胰岛素受体的影响及其在增强葡萄糖摄取能力中的作用 被引量：10

1

作者 黄缄 范有明 +3 位作者 高钰琪 黄庆愿 罗德成 孙秉庸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-11,共3页

目的　从组织胰岛素受体变化及其对组织葡萄糖摄取能力的影响方面探讨缺氧习服的机制。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,3 0d后取动脉血 ,测定血气、血浆胰岛素、血糖等 ,取双后肢骨骼肌测定在有或无胰岛素刺激下的葡萄糖摄取... 目的　从组织胰岛素受体变化及其对组织葡萄糖摄取能力的影响方面探讨缺氧习服的机制。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,3 0d后取动脉血 ,测定血气、血浆胰岛素、血糖等 ,取双后肢骨骼肌测定在有或无胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率 ,通过Scatchard分析胰岛素受体结合位点密度数及其亲和力。以平原大鼠为对照。结果　缺氧组大鼠血糖、血胰岛素以及骨骼肌中胰岛素受体高、低亲和力两种结合位点的密度 ,均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。有或无胰岛素刺激时的葡萄糖摄取率及其增量值 ,在缺氧组均非常显著地高于对照组 (P <0 0 1)。胰岛素受体的解离常数在缺氧与对照组之间没有显著性差异。结论　经 3 0d低压缺氧后 ,大鼠骨骼肌胰岛素受体密度显著增加 ,对胰岛素反应能力增强 ,是组织葡萄糖摄取方面对胰岛素信号反应能力增强的机制之一。 展开更多

关键词 缺氧 胰岛素受体 葡萄糖摄取 骨骼肌

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大鼠缺氧习服后骨骼肌葡萄糖摄取的特点 被引量：10

2

作者 黄缄 高钰琪 +2 位作者 张国斌 陈健 孙秉庸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期5-7,共3页

目的　探讨机体习服于缺氧环境后组织葡萄糖摄取的变化特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 3 0d后 ,取动脉血 ,测定血气、血糖、血常规等 ,取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率 ,并分离细胞内、外膜进行葡萄糖... 目的　探讨机体习服于缺氧环境后组织葡萄糖摄取的变化特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 3 0d后 ,取动脉血 ,测定血气、血糖、血常规等 ,取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率 ,并分离细胞内、外膜进行葡萄糖结合实验测定葡萄糖结合位点数及其亲和力 ,各指标以平原大鼠进行对照。结果　缺氧组大鼠血糖显著高于对照组 (P <0 0 5 )。骨骼肌中葡萄糖水平、葡萄糖摄取率、内外膜葡萄糖结合位点数均非常显著地高于对照组 (P <0 0 1)。结论　细胞对葡萄糖的摄取能力增强是机体习服于缺氧环境后优先利用葡萄糖的重要机制之一。 展开更多

关键词 缺氧 葡萄糖摄取 习服 葡萄糖

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缺氧习服大鼠骨骼肌葡萄糖转运体特点的研究 被引量：8

3

作者 黄缄 黄庆愿 +3 位作者 高钰琪 陈健 范有明 廖卫公 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1607-1610,共4页

目的　探讨缺氧习服后组织葡萄糖转运体的变化特点及葡萄糖摄取变化机制。方法　将缺氧组大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,3 0d后取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率 ,并分离细胞膜、细胞内质膜 ,用同位素标记的葡萄糖进... 目的　探讨缺氧习服后组织葡萄糖转运体的变化特点及葡萄糖摄取变化机制。方法　将缺氧组大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,3 0d后取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率 ,并分离细胞膜、细胞内质膜 ,用同位素标记的葡萄糖进行Scatchard分析测定葡萄糖转运体密度及其亲和力 ,通过免疫印迹测定葡萄糖转运体 1、4的表达。对照组大鼠在平原进行 ,其它操作及条件与缺氧组相同。结果　缺氧组大鼠骨骼肌葡萄糖含量增加、葡萄糖摄取率增强 ,骨骼肌细胞膜、细胞内质膜上葡萄糖转运体密度均非常显著地高于对照组。葡萄糖转运体 1、4在细胞膜、细胞内质膜上的表达量较对照组显著增加。缺氧组葡萄糖转运体 4mRNA显著高于对照组 ,葡萄糖转运体 1mRNA水平变化不显著。结论　表达增强 ,细胞膜与细胞内质膜上转运体密度均增加是缺氧习服后大鼠骨骼肌葡萄糖转运体的变化特点 ,是缺氧习服后骨骼肌葡萄糖摄取能力增强的重要原因之一。 展开更多

关键词 缺氧 葡萄糖转运体 习服 葡萄糖

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缺氧习服过程中大鼠骨骼肌能量代谢特点研究 被引量：3

4

作者 黄缄 黄庆愿 +4 位作者 陈建 廖卫公 范有明 高钰琪 孙秉庸 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第12期1845-1847,共3页

目的　探讨缺氧习服过程中组织物质代谢特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,分别于 5、15、30d后取动脉血 ,测定血气、血糖等 ,取双后肢骨骼肌用3 H 脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ,... 目的　探讨缺氧习服过程中组织物质代谢特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,分别于 5、15、30d后取动脉血 ,测定血气、血糖等 ,取双后肢骨骼肌用3 H 脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ,用酶法测定ATP、磷酸肌酸、乳酸水平 ,并以平原动物作为对照组进行对比分析。结果　ATP含量平原组与缺氧组之间以及各缺氧组之间没有统计学差异 (P >0 .0 5 )。磷酸肌酸含量缺氧 5d组显著低于平原对照组 ,缺氧 15、30d组骨骼肌组织磷酸肌酸含量回复至平原水平。缺氧 5d组糖原含量降低 (P <0 .0 1) ,缺氧 15、30d组回升 ,但仍低于平原对照组 (P <0 .0 1)。缺氧 5d组骨骼肌葡萄糖没有显著降低 (P >0 .0 5 ) ,缺氧 15、30d组葡萄糖含量高于平原对照组、缺氧 5d组 (P <0 .0 1) ,缺氧 30d组较缺氧 15d组进一步增加 (P <0 .0 5 )。缺氧 5d组血糖降低 (P <0 .0 1) ,缺氧 15、30d组增高并高于平原对照组 (P <0 .0 5 )。骨骼肌乳酸的含量先增加后回降 ,其在缺氧 15d组骨骼肌中的含量显著低于缺氧 5d组 (P <0 .0 1) ,缺氧 30d组显著低于缺氧 5d组 (P <0 .0 1)。结论　在缺氧习服之后 ,骨骼肌组织能量产生维持在稳定的水平 ,但是组织物质代谢发生调整 ,对葡萄糖利用能力增强。 展开更多

关键词 缺氧 能量代谢 习服 ATP葡萄糖

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培养心肌细胞缺氧时胞红蛋白表达变化特点 被引量：3

5

作者 黄缄 高文祥 +2 位作者 廖卫公 陈建 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1935-1938,共4页

目的探讨心肌细胞缺氧后胞红蛋白表达变化的特点与规律。方法利用酶消化法及差速贴壁法分离培养新生2—3d大鼠的心肌细胞，分为4组：对照组，缺氧4、12、24h组。对照组置常规培养箱（5％CO，、95％空气，37℃）中培养，缺氧组置缺氧培... 目的探讨心肌细胞缺氧后胞红蛋白表达变化的特点与规律。方法利用酶消化法及差速贴壁法分离培养新生2—3d大鼠的心肌细胞，分为4组：对照组，缺氧4、12、24h组。对照组置常规培养箱（5％CO，、95％空气，37℃）中培养，缺氧组置缺氧培养箱中培养（2％O2，5％CO2，93％N2，37℃），于不同时间（4、12、24h）后，取心肌细胞进行免疫组化染色和免疫印迹分析蛋白水平的分布与表达的变化，用逆转录PCR法分析胞红蛋白mRNA水平的变化。结果免疫组织化学染色显示胞红蛋白主要分布于细胞质，缺氧各组胞红蛋白染色强度均高于常氧组（对照组）。免疫印迹灰度分析结果显示，缺氧4h组胞红蛋白表达量高于常氧组，但差异无统计学意义（P〉0．05），而缺氧12、24h组胞红蛋白表达高于常氧组，差异有统计学意义（P〈0．05）。缺氧4、12、24h组胞红蛋白mRNA水平均高于常氧组（P〈0．05），缺氧12、24h组较缺氧4h组更进一步增高（P〈0．05）。结论胞红蛋白分布于心肌细胞的细胞质。培养心肌细胞缺氧4h后胞红蛋白转录增强，缺氧12h后蛋白水平增强。胞红蛋白表达增加可能是心肌细胞对缺氧的一种代偿反应。 展开更多

关键词 胞红蛋白/组红蛋白 缺氧 心肌细胞

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缺氧习服大鼠骨骼肌葡萄糖代谢特点研究 被引量：2

6

作者 黄缄 廖卫公 +4 位作者 陈建 范有明 黄庆愿 高钰琪 孙秉庸 《西南国防医药》 CAS 2004年第5期465-467,共3页

目的 :探讨缺氧习服后组织物质代谢特点。方法 :将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,30d后取动脉血 ,测定血气、血糖等 ;取双后肢骨骼肌用3 H 脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ;用酶法测定ATP、磷... 目的 :探讨缺氧习服后组织物质代谢特点。方法 :将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 ,30d后取动脉血 ,测定血气、血糖等 ;取双后肢骨骼肌用3 H 脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ;用酶法测定ATP、磷酸肌酸、乳酸水平 ,并以平原动物作为对照组进行对比分析。结果 :与对照组相比 ,缺氧组血糖、骨骼肌葡萄糖摄取率、葡萄糖含量显著增加 ,而糖原显著降低 ,骨骼肌ATP、磷酸肌酸、乳酸在缺氧组与对照组之间没有显著性差异。结论 :经过缺氧习服之后 ,组织能量代谢能达到平衡状态 。 展开更多

关键词 缺氧习服 大鼠 骨骼肌 葡萄糖代谢 高原缺氧 习服适应机制

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黑箱法在病理生理学教学中的运用 被引量：2

7

作者 黄缄 袁志兵 《医学教育探索》 2010年第5期596-598,共3页

黑箱法(Black-box method)是控制论中重要的方法之一,而大部分病理生理学课程内容是通过不断"建黑箱——解黑箱"进行研究而总结出来的科研成果。学员对病理生理学课程内容的学习也是一个从"黑箱"向"灰箱"... 黑箱法(Black-box method)是控制论中重要的方法之一,而大部分病理生理学课程内容是通过不断"建黑箱——解黑箱"进行研究而总结出来的科研成果。学员对病理生理学课程内容的学习也是一个从"黑箱"向"灰箱"、"白箱"转变的过程,因此在病理生理学理论与实验教学过程中,积极运用"黑箱法",精心设计黑箱,引导学员解黑箱,提高学员学习病理生理学的兴趣,培养学员分析问题、解决问题的能力,提高教学效果。 展开更多

关键词 病理生理学 黑箱 教学

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大鼠大脑皮层葡萄糖代谢的缺氧习服适应性特点研究

8

作者 黄缄 高钰琪 +2 位作者 张国斌 曹利飞 孙秉庸 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期334-336,共3页

目的分析脑组织中葡萄糖代谢的缺氧习服适应性特点。方法将大鼠置模拟海拔5000m低压舱内,30d后取动脉血,测定血气、血糖等,取大脑皮层用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量,用酶法测定三磷酸腺苷(ATP)、磷酸肌酸、乳酸水平,并和对照组... 目的分析脑组织中葡萄糖代谢的缺氧习服适应性特点。方法将大鼠置模拟海拔5000m低压舱内,30d后取动脉血,测定血气、血糖等,取大脑皮层用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量,用酶法测定三磷酸腺苷(ATP)、磷酸肌酸、乳酸水平,并和对照组比较。结果与对照组相比,缺氧组血糖、大脑皮层葡萄糖含量显著增加,而糖原显著降低,大脑皮层ATP、磷酸肌酸、乳酸在缺氧组与对照组之间差异无显著性。结论经过缺氧习服适应后,组织能量代谢能达到平衡状态,葡萄糖利用加强。 展开更多

关键词 缺氧 能量代谢 习服 三磷酸腺苷

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缺氧习服大鼠骨骼肌葡萄糖代谢特点研究

9

作者 黄缄 廖卫公 +4 位作者 陈建 范有明 黄庆愿 高钰琪 孙秉庸 《青海医学院学报》 CAS 2004年第4期275-275,共1页

目的　探讨缺氧习服后组织物质代谢特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0米低压舱内 ,30天后取动脉血 ,测定血气、血糖等值 ,取双后肢骨骼肌用3H -脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ,用酶法测定ATP... 目的　探讨缺氧习服后组织物质代谢特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0米低压舱内 ,30天后取动脉血 ,测定血气、血糖等值 ,取双后肢骨骼肌用3H -脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ,用酶法测定ATP、磷酸肌酸、乳酸水平 ,并以平原动物作为对照组进行对比分析。结果　与对照组相比 ,缺氧组血糖、骨骼肌葡萄糖摄取率、葡萄糖含量显著增加 ,而糖原显著降低 ,骨骼肌ATP、磷酸肌酸、乳酸在缺氧组与对照组之间没有显著性差异。结论　经过缺氧习服之后 ,组织能量代谢能达到平衡状态 。 展开更多

关键词 大鼠 骨骼肌 葡萄糖代谢 缺氧 能量代谢 习服 ATP葡萄糖

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Bloodletting: a medical resource since the stone age

10

作者 黄缄 廖卫公 +5 位作者 陈建 范有明 黄庆愿 高钰琪 孙秉庸 GustavoZubieta-Calleja 《青海医学院学报》 CAS 2004年第4期273-275,共3页

关键词 海拔 妇女 红细胞压积 性激素 体格检查 生物医学

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高原习服的评价标准与方法研究 被引量：52

11

作者 高钰琪 罗德成 +3 位作者 牛文忠 黄缄 黄庆愿 刘福玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1453-1454,共2页

目的　研究制定适合我军高原部队使用的评价高原习服的国家军用标准和方法。方法　遵照国家军用标准制定规范 ,系统回顾总结多年来的研究成果 ,广泛征求高原医学有关专家的意见 ,针对部队的实际情况 ,本着科学、简便、易行的原则 ,制定... 目的　研究制定适合我军高原部队使用的评价高原习服的国家军用标准和方法。方法　遵照国家军用标准制定规范 ,系统回顾总结多年来的研究成果 ,广泛征求高原医学有关专家的意见 ,针对部队的实际情况 ,本着科学、简便、易行的原则 ,制定出本标准。结果　将高原习服分为初步习服、基本习服和完全习服 ,其判断指标和依据为习服时间、基础生理指标 (呼吸次数、血压、脉率、红细胞计数、血红蛋白 )和体能评价指标 (VO2 max和 1 0 0 0m跑成绩 )。结论　制定了对我军高原部队有实际指导意义的评价高原习服的标准和方法 。 展开更多

关键词 高原习服 习服评价 军用标准

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高原军事医学基础研究进展 被引量：21

12

作者 高钰琪 黄缄 +1 位作者 黄庆愿 高文祥 《西南国防医药》 CAS 2003年第5期561-564,共4页

关键词 高原地区 军事医学 基础研究 缺氧 急性高原病

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低压缺氧延迟预适应对小鼠海马神经元的保护作用研究 被引量：7

13

作者 范有明 高钰琪 +2 位作者 刘福玉 黄缄 廖卫公 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期93-97,共5页

目的:了解低压缺氧预处理是否能够诱导小鼠海马神经元产生延迟预适应,增强神经元耐缺氧能力。方法:将近交系Babl/c小鼠放入减压舱,模拟海拔7000m高度减压2.5h/d,连续3d。第3次减压毕36h后,观察严重低压缺氧(12000m4h)、严重缺血(双侧颈... 目的:了解低压缺氧预处理是否能够诱导小鼠海马神经元产生延迟预适应,增强神经元耐缺氧能力。方法:将近交系Babl/c小鼠放入减压舱,模拟海拔7000m高度减压2.5h/d,连续3d。第3次减压毕36h后,观察严重低压缺氧(12000m4h)、严重缺血(双侧颈总动脉阻塞18min)、缺血合并低压缺氧(结扎右侧颈总动脉后,低压缺氧8000m4h)对低压缺氧预处理及正常对照小鼠海马神经元的损伤情况。结果:7000m2.5h低压缺氧预处理对小鼠海马神经元无显著损伤,能够诱导其产生延迟预适应,显著增强海马神经元耐受严重低压缺氧、严重缺血、缺血合并低压缺氧损伤的能力。结论:本研究所采用的低压缺氧预处理方法能够诱导海马神经元产生延迟预适应,增强其抗缺血缺氧能力。 展开更多

关键词 缺氧 缺氧预处理 小鼠 神经元 海马 保护作用

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缺氧对人肺腺癌细胞浸润迁移能力及MMP-2、TIMP-2表达的影响 被引量：6

14

作者 胡振红 黄缄 +3 位作者 李清泉 杨炯 钟立厚 曾群丽 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期270-273,共4页

背景与目的已有的研究表明实体肿瘤组织内部存在一定程度缺氧,而栓塞缺氧治疗可抑制肿瘤细胞生长,但其中缺氧程度的把握是关键。本研究旨在探讨不同程度缺氧对人肺腺癌细胞浸润、迁移特性的影响及其机制。方法将人肺腺癌细胞株暴露于常... 背景与目的已有的研究表明实体肿瘤组织内部存在一定程度缺氧,而栓塞缺氧治疗可抑制肿瘤细胞生长,但其中缺氧程度的把握是关键。本研究旨在探讨不同程度缺氧对人肺腺癌细胞浸润、迁移特性的影响及其机制。方法将人肺腺癌细胞株暴露于常氧(空气,5%CO2)、缺氧(1%O2,5%CO2,94%N2)或无氧(95%N2,5%CO2)环境48h后,分别用划痕法和羊膜-内皮细胞模型测定各组细胞的迁移和浸润能力。将处理的细胞接种于裸鼠皮下,观察其生长情况及转移特点。同时检测了细胞培养基中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)在不同程度缺氧后的水平。结果与常氧组相比,缺氧组细胞迁移、浸润能力显著增高(P<0.05)。缺氧组淋巴结转移率、肺转移率以及培养基中MMP-2水平均显著高于常氧组(P<0.05或P<0.01),TIMP-2显著低于常氧组(P<0.05)。无氧组成瘤率较常氧组显著降低(P<0.01),MMP-2、TIMP-2水平均显著低于常氧组(P<0.01)。结论适度缺氧可以刺激肺腺癌细胞分泌MMP-2并抑制TIMP-2表达,进而增强癌细胞迁移力、浸润力。但是严重缺氧可损伤癌细胞,癌细胞MMP-2、TIMP-2分泌下降,生长增殖能力、迁移力、浸润力下降。 展开更多

关键词 缺氧 肺腺癌 转移 浸润 金属蛋白酶

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低氧调节大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体非协同性表达 被引量：4

15

作者 高文祥 黄缄 +4 位作者 高钰琪 谭小玲 刘福玉 蔡明春 陈建 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期223-225,共3页

目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,S... 目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4,ST4)和呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR),用Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白的表达。结果慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体ST3和RCR显著低于对照组(P<0.05)。慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体复合体Ⅰ30×103亚基、复合体Ⅱ70×103亚基、复合体Ⅴα亚基蛋白表达量显著低对照组(P<0.05)。2组线粒体ST4和复合体Ⅲ核心亚基2蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。结论低氧可调节大鼠骨骼机线粒体复合体蛋白非协同性表达,导致线粒体氧化磷酸化功能下降。 展开更多

关键词 低氧 线粒体 骨骼肌 呼吸链复合体 WESTERN BLOT

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炎症反应与高原病 被引量：49

16

作者 高钰琪 黄缄 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期215-219,共5页

我国是世界上高原面积最大、平均海拔最高、居住人口最多的国家,高原国防和经济地位十分重要,但是高原环境十分恶劣,严重威胁进入高原环境人员的身心健康。高原环境对机体不利的主要自然因素是低压低氧、寒冷、干燥以及强紫外线等。这... 我国是世界上高原面积最大、平均海拔最高、居住人口最多的国家,高原国防和经济地位十分重要,但是高原环境十分恶劣,严重威胁进入高原环境人员的身心健康。高原环境对机体不利的主要自然因素是低压低氧、寒冷、干燥以及强紫外线等。这些环境因素对机体产生广泛影响,一是引起高原特发性疾病——高原病,二是引起脑、体作业能力降低,三是影响生殖、发育、衰老以及多种伤病的发生、发展。 展开更多

关键词 炎症反应 高原病 缺氧

原文传递

人HIF-1α基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量：4

17

作者 蒋春华 高钰琪 +3 位作者 黄庆愿 黄缄 贺伟峰 段小军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期2040-2043,共4页

目的构建人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体,并观察其对HepG2细胞的转染情况。方法采用基因工程技术,经过亚克隆将人HIF-1α基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,经脂质体转染HEK... 目的构建人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体,并观察其对HepG2细胞的转染情况。方法采用基因工程技术,经过亚克隆将人HIF-1α基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,经脂质体转染HEK293细胞,进行重组腺病毒的包装、扩增。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HepG2细胞感染效率的监测。结果酶切鉴定及PCR结果证明重组腺病毒载体成功,人HIF-1α重组腺病毒滴度达1.15×1010pfu/ml,阴性对照腺病毒的滴度为8×1010pfu/ml,并对HepG2细胞具有很强的感染力。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含人HIF-1α基因的重组腺病毒载体。 展开更多

关键词 腺病毒 HIF-1Α基因 同源重组

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低压缺氧延迟预适应小鼠海马差异表达基因的筛选及鉴定研究 被引量：3

18

作者 范有明 高钰琪 +2 位作者 黄缄 廖卫公 蔡明春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期342-346,共5页

目的:探索低压缺氧延迟预适应小鼠海马差异表达基因。方法:将近交系Babl/c小鼠放入减压舱,模拟海拔7000m高度减压2·5h/d,连续3d。第3次减压毕36h后,提取海马总RNA,SMARTPCR合成cDNA,经抑制消减杂交,建立消减cDNA文库。随机挑取文... 目的:探索低压缺氧延迟预适应小鼠海马差异表达基因。方法:将近交系Babl/c小鼠放入减压舱,模拟海拔7000m高度减压2·5h/d,连续3d。第3次减压毕36h后,提取海马总RNA,SMARTPCR合成cDNA,经抑制消减杂交,建立消减cDNA文库。随机挑取文库单克隆,用反向Northern杂交,分别对来自于正、反向文库的452个和74个克隆进行了筛选。结果:用消减探针筛选时,217个基因片段的杂交信号在延迟预适应海马增加2倍以上,85个基因片段的杂交信号则降低66%以下。用未消减探针筛选时,135个基因片段的杂交信号在延迟预适应海马增加2倍以上,44个基因片段的杂交信号则降低66%以下。对部分基因片段测序显示,小鼠线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1、线粒体NADH脱氢酶亚单位1和6、小鼠DSS1和克隆号为IMAGE:3582855的基因在延迟预适应海马表达增加。克隆号为IMAGE:3593193的基因、与成年雄性小鼠嗅脑的一个cDNA高度相似的基因及与小鼠bladder RCB-0544MBT-2cDNA高度相似的基因在延迟预适应海马表达降低。结论:小鼠海马低压缺氧延迟预适应多种基因表达发生改变,它们可能是产生低压缺氧延迟预适应的重要机制之一。 展开更多

关键词 缺氧 预处理 基因表达 小鼠 海马 抑制消减杂交

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寒冷缺氧降低大鼠脾脏T淋巴细胞的增殖反应 被引量：6

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作者 黄庆愿 黄缄 +3 位作者 蔡明春 蒋春华 刘福玉 高钰琪 《局解手术学杂志》 2007年第5期305-307,共3页

目的观察缺氧和寒冷对大鼠脾脏T淋巴细胞功能的影响及其与腺苷脱胺酶之间的关系,探讨冬季急进高原时机体免疫功能改变的规律和机制。方法大鼠分别在常温常氧、寒冷常氧、常温缺氧以及寒冷缺氧环境中生活3 d,用3H-TdR掺入法检测脾脏T淋... 目的观察缺氧和寒冷对大鼠脾脏T淋巴细胞功能的影响及其与腺苷脱胺酶之间的关系,探讨冬季急进高原时机体免疫功能改变的规律和机制。方法大鼠分别在常温常氧、寒冷常氧、常温缺氧以及寒冷缺氧环境中生活3 d,用3H-TdR掺入法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能,用比色法测定脾脏T淋巴细胞腺苷脱胺酶活性。结果与常温常压对照组比较,单纯寒冷或单纯缺氧均可引起脾脏T淋巴细胞在刀豆素A刺激下的刺激指数显著降低,但缺氧复合寒冷大鼠脾脏T淋巴细胞的刺激指数并未进一步降低,而是接近单纯缺氧大鼠。单纯缺氧和单纯寒冷并不改变大鼠脾脏T淋巴细胞上的腺苷脱胺酶活性,而缺氧复合寒冷则使其显著降低。结论缺氧和寒冷均可抑制脾脏T淋巴细胞的功能,但两者对脾脏T淋巴细胞功能的影响可能并无叠加效应;腺苷脱氨酶活性的改变可能参与寒冷缺氧大鼠脾脏T淋巴细胞功能的降低。 展开更多

关键词 缺氧 寒冷 T淋巴细胞 腺苷脱氨酶

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缺氧对大鼠脑星形胶质细胞释放NO、PGI_2、TXA_2、ET-1的影响 被引量：3

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作者 范有明 高钰琪 +1 位作者 刘福玉 黄缄 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-4,共4页

目的　观察缺氧和 (或 )谷氨酸对星形胶质细胞释放一氧化氮 (NO)、前列腺环素 (PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )及内皮素 1(ET 1)的影响。方法　新生Wistar大鼠大脑皮层星形胶质细胞原代、传代培养后 ,分为 4组 :对照组 (C组 ) ,谷氨酸组 (G... 目的　观察缺氧和 (或 )谷氨酸对星形胶质细胞释放一氧化氮 (NO)、前列腺环素 (PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )及内皮素 1(ET 1)的影响。方法　新生Wistar大鼠大脑皮层星形胶质细胞原代、传代培养后 ,分为 4组 :对照组 (C组 ) ,谷氨酸组 (G组 ) ,缺氧组 (H组 )和缺氧 +谷氨酸组 (H +G组 )。每组包括 5个时相点 :0、3、6、12、2 4h(以缺氧后开始记时 )。G和H +G组加入 10 0 μmol/L的L 谷氨酸。H和H +G组用 95 %N2 /5 %CO2 缺氧。到规定时间后 ,测培养上清中NO、6 酮 前列腺素F1α、TXB2 、ET 1的含量。结果　①培养上清中NO的含量 ,缺氧组、谷氨酸组及缺氧 +谷氨酸组显著高于对照组 ,各组随时向延长 ( 2 4h内 ) ,培养上清中NO的含量上升。培养上清中NO升高的幅度 ,谷氨酸组、缺氧组、缺氧 +谷氨酸组依次显著升高。②对照组及谷氨酸组星形胶质细胞PGI2 的释放量无显著差异。缺氧组及缺氧 +谷氧酸组星形胶质细胞PGI2 的释放量显著高于对照组及谷氨酸组 ,且时间延长越长 ,增加越多 ( 2 4h内 )。缺氧 +谷氧酸组PGI2 增高的幅度显著高于缺氧组。③缺氧和 /或谷氨酸对各组各时相点星形胶质细胞释放TXA2 及ET 1无显著影响。结论　缺氧引起星形胶质细胞释放NO、PGI2 增多 。 展开更多

关键词 缺氧 星形胶质细胞 前列环素 一氧化氮

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