大面积深度烧伤患者Meek植皮术后皮片存活率及影响因素分析

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作者 王路旭 陈俏华 +2 位作者 韩夫 徐志刚 田晨阳 《中国美容医学》 2026年第1期18-21,共4页

目的:探究大面积深度烧伤患者Meek植皮术后皮片存活情况,分析影响皮片存活情况的危险因素。方法:选取笔者医院自2021年4月-2024年4月收治的110例行Meek植皮术的大面积重度烧伤患者(共接受Meek植皮术210次)为研究对象,分析皮片存活情况,... 目的:探究大面积深度烧伤患者Meek植皮术后皮片存活情况,分析影响皮片存活情况的危险因素。方法:选取笔者医院自2021年4月-2024年4月收治的110例行Meek植皮术的大面积重度烧伤患者(共接受Meek植皮术210次)为研究对象,分析皮片存活情况,并依此将患者分为皮片存活良好组和皮片存活不良组,比较两组一般资料、病情、手术相关资料及试验室指标。采用广义估计方程(GEE)分析重复测量数据,校正同一患者多次手术的依赖性,筛选影响Meek植皮术后皮片存活的独立危险因素。结果:210次Meek植皮术后179(85.24%)次Meek植皮术皮片存活情况良好(皮片存活良好组),31(14.76%)次Meek植皮术皮片存活情况不良(皮片存活不良组)。两组患者年龄、术前血小板计数、中性粒细胞比较差异均有统计学意义(P<0.05);GEE分析显示,年龄、术前血小板计数、中性粒细胞均是影响Meek植皮术后皮片存活情况的危险因素。结论:大面积深度烧伤患者Meek植皮术后皮片存活情况与年龄、术前血小板计数、中性粒细胞有关,临床应给予重视。 展开更多

关键词 烧伤 大面积深度烧伤 皮肤移植 MEEK植皮术 皮片存活率 影响因素

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吲哚胺2,3-双加氧酶基因修饰BMSCs在大鼠同种异体复合组织移植免疫排斥反应中的作用研究 被引量：2

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作者 韩夫 王耀军 +6 位作者 王耘川 贾艳慧 杨龙龙 贾文斌 方小兵 白晓智 胡大海 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期745-751,共7页

目的探讨吲哚胺2，3-双加氧酶（indoleamine2，3-dioxygenase，IDO）基因转染修饰大鼠BMSCs对同种异体复合组织移植免疫排斥反应的影响及其机制。方法以IDO过表达慢病毒IDO[绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）1-Lenti转染供... 目的探讨吲哚胺2，3-双加氧酶（indoleamine2，3-dioxygenase，IDO）基因转染修饰大鼠BMSCs对同种异体复合组织移植免疫排斥反应的影响及其机制。方法以IDO过表达慢病毒IDO[绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）1-Lenti转染供体4～6周龄BN大鼠来源的第3代BMSCs，筛选目的基因高表达、具有生物活性的细胞株IDO-BMSCs。行RT-PCR、Westernblot检测基因修饰前后BMSCs中IDOmRNA及蛋白表达，通过测量培养上清犬尿氨酸生成量检测IDO生物学活性。在混合淋巴细胞反应体系中以IDO-BMSCs、反应细胞（受体4～6周龄LEWIS大鼠来源外周血单个核细胞）和刺激细胞（供体BN大鼠来源外周血单个核细胞）混合培养，细胞比例分别为1：5：5、1：10：10、1：50：50及1：100：100（实验组1、2、3、4）：每个反应体系另设IDO阻断孔，加入1mmol／LIDO特异性抑制剂1-甲基色氨酸（1-methyl．tryptophan，1-MT）；以IDO-BMSCs与反应细胞（1：5）培养为阴性对照组，刺激细胞与反应细胞（1：1）培养为阳性对照组，IDO-BMSCs在RPMll640培养基中单独培养作为空白对照组。于培养5d，采用MTT法检测T淋巴细胞增殖情况。进一步制备大鼠同种异体肢体移植模型，将GFP-BMSCs（A组）、IDO-BMSCs（B组）及生理盐水（C组）分别经尾静脉输入移植模型，观察移植物存活时间及免疫排斥反应。结果基因修饰后，BMSCs中IDOmRNA及蛋白表达显著提高。IDO-BMSCs较GFP-BMSCs可明显提高培养上清中犬尿氨酸含量（P〈0．05）。加入1-MT前，实验组1、2、3的T淋巴细胞增殖率随IDO-BMSCs与反应细胞比例逐渐减少而不断增加，组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；实验组4的T淋巴细胞增殖率与阳性对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。加入1-MT后，除实验组4的T淋巴细胞增殖率与加入前比较差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余各实验组均高于加入前（P〈0．05）。体内输入后，IDO—BMSCs可在移植物内定植，抑制免疫排斥反应的发生；A、B、C组移植物存活时间分别为（11．5±0．6）、（14．5±0．8）、（9．0±0.3）d，B组存活时间明显长于A、C组，A组长于C组（P〈0．05）。结论ID0-BMSCs可促进大鼠同种异体复合组织移植物的成活，其机制与抑制T淋巴细胞增殖、促进BMSCs向移植物内定植有关。 展开更多

关键词 BMSCS 吲哚胺2 3-双加氧酶 T淋巴细胞 同种异体复合组织移植 免疫排斥反应 大鼠

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跳脱辞式在《狂人日记》中的突出运用 被引量：1

3

作者 韩夫 《杭州师范学院学报》 1986年第4期60-62,共3页

鲁迅先生的《狂人日记》是中国新文学第一篇白话短篇小说。小说通过一个被迫害者的自述和特别的格式,剖析、抨击了几千年封建“家族制度和礼教的弊害”,塑造了一个封建叛逆者“狂人”的形象,号召人们起来推翻人吃人的旧制度。它因彻底... 鲁迅先生的《狂人日记》是中国新文学第一篇白话短篇小说。小说通过一个被迫害者的自述和特别的格式,剖析、抨击了几千年封建“家族制度和礼教的弊害”,塑造了一个封建叛逆者“狂人”的形象,号召人们起来推翻人吃人的旧制度。它因彻底地反封建的战斗精神而震动了当时的文化思想界。《狂人日记》不仅是一部里程碑式的作品,而且在修辞方式上亦有其独特性,显示了鲁迅先生一般人难以与之比肩并立的敏锐观察力和卓越的创造力。他把含蓄性和明确性统一起来, 展开更多

关键词 辞式 跳脱 《狂人日记》 语言 鲁迅小说 节号 养肥 人吃人 鲁迅先生 封建叛逆

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封闭负压引流联合局部氧疗对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响 被引量：16

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作者 马平 刘洋 +2 位作者 李小强 韩夫 胡大海 《解放军医药杂志》 CAS 2017年第3期1-4,14,共5页

目的观察封闭负压引流(negative pressure wound therapy,NPWT)联合局部氧疗对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响。方法以腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病SD大鼠模型,并在其背部用蒸汽喷头制作皮肤烫伤模型。将90只糖尿病背部烫伤SD大鼠随机... 目的观察封闭负压引流(negative pressure wound therapy,NPWT)联合局部氧疗对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响。方法以腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病SD大鼠模型,并在其背部用蒸汽喷头制作皮肤烫伤模型。将90只糖尿病背部烫伤SD大鼠随机分为糖尿病烫伤对照组(A组)、NPWT治疗组(B组)和NPWT联合局部氧疗组(C组),每组30只,并给予相应处理。伤后7 d、14 d和21 d测量创面愈合率并留取标本进行常规病理检查,并以Western blotting实验检测创面组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况。结果 B组和C组在伤后7 d、14 d和21 d时创面愈合率及VEGF蛋白表达量均高于A组(P<0.01)。C组伤后7 d和14 d时创面愈合率及VEGF蛋白表达量高于B组(P<0.01)。病理检查提示C组大鼠创面炎性反应较轻,肉芽组织和上皮细胞生长速度较快。结论与单纯NPWT治疗相比,NPWT联合局部氧疗能促进创面组织内新生血管的生长,提高创面愈合效率,使创面愈合时间明显缩短。 展开更多

关键词 封闭负压引流 局部氧疗 烧伤 糖尿病 大鼠 Sprague-Dawley

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简析《祝福》中的对比手法

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作者 韩夫 《河北民族师范学院学报》 1986年第1期90-92,共3页

鲁迅先生的小说《祝福》,不仅在思想内容上真实地、具体地揭露了封建社会人吃人的本质,而且在艺术形式和写作手法上也是非同凡响、匠心独运的。其中最令人赞叹的,是对比手法的运用。为了充分表达作品的内容,鲁迅先生利用对立事物或同一... 鲁迅先生的小说《祝福》,不仅在思想内容上真实地、具体地揭露了封建社会人吃人的本质,而且在艺术形式和写作手法上也是非同凡响、匠心独运的。其中最令人赞叹的,是对比手法的运用。为了充分表达作品的内容,鲁迅先生利用对立事物或同一事物不同方面的特点,加以联系和互相比较,使“真、善、美”与“假、丑、恶”形成鲜明的对照。这样写,既突出了事物的本质,又表达了鲜明的爱憎感情,因而收到了良好的艺术效果。 展开更多

关键词 祥林嫂 对比手法 鲁四老爷 《祝福》 鲁迅先生 作品 封建社会 封建势力 人物设计 柳妈

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rh-GH在促进大鼠创面愈合中的作用研究 被引量：3

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作者 王克甲 李小强 +2 位作者 韩夫 计鹏 胡大海 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第10期1882-1886,共5页

目的:通过在大鼠背部创面周围局部注射rh-GH(重组人生长激素,Recombinant Human Growth Hormone)来调控创面局部GH(生长激素,Growth Factor)水平,观察GH在创面愈合中的作用,并对其可能机制进行进一步研究。方法:在SD大鼠背部制作创面,... 目的:通过在大鼠背部创面周围局部注射rh-GH(重组人生长激素,Recombinant Human Growth Hormone)来调控创面局部GH(生长激素,Growth Factor)水平,观察GH在创面愈合中的作用,并对其可能机制进行进一步研究。方法:在SD大鼠背部制作创面,创周定期注射不同浓度rh-GH,观察并分析创面愈合速度差异;选取rh-GH的最适浓度进行创周注射并定期取材,以Western-Blot检测创周组织中GH蛋白水平,并以RT-PCR检测创周组织中EGF(表皮生长因子,Epidermal Growth Factor)、FGF(成纤维细胞生长因子,Fibroblast Growth Factor)、VEGF(血管内皮细胞生长因子,Vascular Endothelial Growth Factor)的表达变化。结果:三个注射不同剂量rh-Gh的实验组大鼠创面平均愈合时间由快至慢依次为16.5±1.5天、17.1±2.9天、18.5±1.5天,与注射生理盐水的对照组平均愈合时间21.7±2.3天相比均明显增快,差异有统计学意义(P<0.05)。创缘组织中GH的Western-Blot结果显示对照组GH水平在创面形成初期升高,但伤后4天开始GH表达水平即逐渐下降,而rh-GH注射组的GH水平在创面形成后逐渐升高,并维持GH在高表达水平。检测创周组织中EGF、FGF、VEGF的RNA转录水平,PCR结果显示实验组各生长因子的基因转录水平在伤后2天起即明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.创伤初期创面周围组织中GH表达水平呈现一过性升高然后逐渐下降的过程;2.创面周围注射rh-GH可以提高组织中GH水平,并减少创面愈合时间;3.GH可以提高皮肤组织中EGF、FGF、VEGF水平,间接促进创面上皮化,加快创面愈合。 展开更多

关键词 创面愈合 生长激素 表皮生长因子 成纤维细胞生长因子 血管内皮细胞生长因子

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毛泽东文艺思想探讨

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作者 韩夫 《邢台师专学报》 1992年第3期22-26,共5页

关键词 毛泽东 文艺思想 文艺本质 文艺创作 文艺批评

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带髂胫束的股前外侧皮瓣游离移植修复膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损疗效观察 被引量：9

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作者 韩夫 胡大海 +4 位作者 刘洋 于洪亮 马少军 魏国兴 郑朝 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期327-330,共4页

目的观察应用带髂胫束的股前外侧皮瓣游离移植修复膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损的疗效。方法2010年6月-2014年6月，笔者单位收治膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损患者12例，其中皮肤软组织缺损范围为7cm×6cm～16cm×... 目的观察应用带髂胫束的股前外侧皮瓣游离移植修复膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损的疗效。方法2010年6月-2014年6月，笔者单位收治膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损患者12例，其中皮肤软组织缺损范围为7cm×6cm～16cm×12cm，髌韧带缺失长度为5～12cm、宽度为2．5—4．0cm。选用带髂胫束的股前外侧皮瓣游离移植修复创面，术中将切取的髂胫束两端向内折叠为呈腱状的3层结构后，再将其包绕缝合于髌韧带断端以重建髌韧带。皮瓣切取面积为9cm×8cm-18cm×14cm，髂胫束切取长度为7～14cm、宽度为8～12cm。供瓣区取自体大腿或躯干中厚皮移植修复并打包固定。术后即刻应用支具固定膝关节于伸直位6周，术后2周起患侧肢体于伸直位行负重训练，术后6周起行患侧膝关节主动屈伸活动。术前及术后12个月，采用国际膝关节文献委员会膝关节评估表对膝关节周围疼痛程度、膝关节功能进行评估；同时评价膝关节屈曲度及伸直度。术后6～12个月，采用彩色多普勒超声评价膝关节髌韧带的连续性。术后12个月内观察患者有无出现手术相关并发症。结果（1）术后皮瓣均存活良好，创面愈合良好。（2）膝关节周围疼痛平均分从术前31分提高至术后12个月的77分；膝关节功能平均分从术前14分提高至术后12个月的65分；膝关节平均屈曲度从术前89。增至术后12个月的130°，平均伸直度从术前65°改善为术后12个月的15°。术后6～12个月，彩色多普勒超声检查结果示所有患者重建髌韧带的连续性良好，未行进一步手术干预；移植部位表面感觉有不同程度恢复。术后12个月内，患者均未发生手术相关并发症。结论采用带髂胫束的股前外侧皮瓣游离移植修复膝关节周围皮肤软组织合并髌韧带缺损是一种有效、可靠的方法，能较好恢复膝关节功能和外形。 展开更多

关键词 外科皮瓣 膝损伤 修复外科手术 髂胫束 皮肤软组织缺损 髌韧带缺损

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头面颈部皮肤软组织缺损的显微外科修复 被引量：17

9

作者 郑朝 胡大海 +5 位作者 朱雄翔 韩军涛 王耀军 李娜 韩夫 徐明达 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期263-267,共5页

目的 总结探讨头面颈部皮肤软组织缺损的游离皮瓣修复方法 . 方法 2007年7月-2010年5月,笔者单位共收治此类患者31例,包括头皮缺损10例、面部皮肤软组织缺损4例、颈部皮肤软组织缺损17例.其中由外伤引起的皮肤软组织缺损20例,瘢痕挛缩... 目的 总结探讨头面颈部皮肤软组织缺损的游离皮瓣修复方法 . 方法 2007年7月-2010年5月,笔者单位共收治此类患者31例,包括头皮缺损10例、面部皮肤软组织缺损4例、颈部皮肤软组织缺损17例.其中由外伤引起的皮肤软组织缺损20例,瘢痕挛缩松解后继发缺损11例.采用游离皮瓣（背阔肌皮瓣13例、侧胸皮瓣3例、肩胛皮瓣5例、股前外侧皮瓣10例）修复创面,皮瓣面积8 cm×5 cm～25 cm × 18 cm. 结果皮瓣全部成活,创面均一次性愈合.患者平均住院时间为16.7 d.28例患者随访2个月,皮瓣外观、功能良好. 结论 以显微外科为基础的游离皮瓣移植可一次性修复头面颈部皮肤软组织缺损创面,减轻患者痛苦、缩短住院时间. 展开更多

关键词 显微外科手术 皮肤 软组织损伤 外科皮瓣

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持续负压灌洗引流在糖尿病足合并足底脓肿清创术中的应用 被引量：15

10

作者 韩军涛 王洪涛 +4 位作者 谢松涛 官浩 韩夫 李娜 胡大海 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期246-248,共3页

目的了解早期清创结合持续负压灌洗引流在糖尿病足合并足底脓肿患者保肢手术中应用的可行性。方法糖尿病足合并足底脓肿患者10例共10只患足，实施手术清创后留置胃管进行持续负压灌洗引流7～14d，停止灌洗后维持负压吸引3～5d，拔除引... 目的了解早期清创结合持续负压灌洗引流在糖尿病足合并足底脓肿患者保肢手术中应用的可行性。方法糖尿病足合并足底脓肿患者10例共10只患足，实施手术清创后留置胃管进行持续负压灌洗引流7～14d，停止灌洗后维持负压吸引3～5d，拔除引流管，术后3周左右拆线。观察创面愈合情况。结果经上述处理，患者局部炎性反应明显减轻，创面愈合，足部功能恢复良好，外形不受影响。结论清创术结合局部持续负压灌洗引流，有利于糖尿病足合并足底脓肿的治疗，可保留患肢原始长度。 展开更多

关键词 糖尿病足 脓肿 负压伤口疗法 外科手术

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43例慢性创面的外科治疗 被引量：6

11

作者 郑朝 胡大海 +11 位作者 徐明达 朱雄翔 韩军涛 董茂龙 陶克 王洪涛 谢松涛 官浩 王耀军 李娜 韩夫 陈璧 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期792-793,共2页

慢性创面泛指创面愈合过程受到各种因素的干扰，愈合过程延长并超过6～8周。引起慢性创面的原因多种多样，临床常见有褥疮、糖尿病皮肤溃疡、静脉性溃疡、烧伤或外伤后残余创面、放射性溃疡、癌性溃疡等。较大较深的慢性创面往往无法通... 慢性创面泛指创面愈合过程受到各种因素的干扰，愈合过程延长并超过6～8周。引起慢性创面的原因多种多样，临床常见有褥疮、糖尿病皮肤溃疡、静脉性溃疡、烧伤或外伤后残余创面、放射性溃疡、癌性溃疡等。较大较深的慢性创面往往无法通过换药等保守疗法获得愈合，需要外科手术治疗。自2006年12月至2008年12月，我科收治各种复杂慢性创面患者43例，采用皮肤或皮瓣移植术进行修复，临床效果满意。现报告如下。 展开更多

关键词 慢性创面 外科治疗 糖尿病皮肤溃疡 愈合过程 外科手术治疗 临床效果 静脉性溃疡 放射性溃疡

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游离肌瓣移植修复大面积烧伤后期深度创面 被引量：6

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作者 郑朝 胡大海 +5 位作者 朱雄翔 王耀军 韩夫 李娜 折涛 杨晨 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期341-343,共3页

目的探讨大面积深度烧伤后期伴骨关节外露创面的修复方法。方法2009年1月-2011年5月，往笔抒单位收治的大面积深度烧伤患者中，有5例于治疗后期伴育孽个或多个骨关节外露，无法通过游离植皮或皮瓣修复。其中5例伴单个骨关肖外露，2例伴... 目的探讨大面积深度烧伤后期伴骨关节外露创面的修复方法。方法2009年1月-2011年5月，往笔抒单位收治的大面积深度烧伤患者中，有5例于治疗后期伴育孽个或多个骨关节外露，无法通过游离植皮或皮瓣修复。其中5例伴单个骨关肖外露，2例伴2处以上骨关节及肌腱外露，创面大小为8cm×5cm～21cm×8cm。先后进行游离肌瓣复合刃厚皮（头皮）移植7例次，其中腹随肌肌瓣游离移植4例次、背阔肌肌瓣游离移植3例次。结果所有游离肌瓣及植皮均成活良好，骨关节外露创面完全修复，术后1年随访部分患者，修复部位外观良好，无溃疡、关节炎、骨髓炎等表现，关节功能正常。结论游离肌瓣复合头皮移植，能够为深度组织外露且缺乏供瓣区的患者提供有效的创面修复方法。 展开更多

关键词 烧伤 显微外科手术 创面修复 游离肌瓣

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负压创面治疗技术对糖尿病大鼠创面血管生成的影响 被引量：5

13

作者 李小强 胡大海 +6 位作者 刘洋 王耀军 韩夫 胡晓龙 李娜 张月 白晓智 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期442-447,共6页

目的观察负压创面治疗技术对糖尿病大鼠创面血管生成的影响。方法取40只sD大鼠，按65mg／kg腹腔注射20g／L链脲佐菌素诱导糖尿病模型。2周后按随机数字表法将大鼠分为对照组和负压组，每组20只，在大鼠背部正中切除2cm×2cm全层皮... 目的观察负压创面治疗技术对糖尿病大鼠创面血管生成的影响。方法取40只sD大鼠，按65mg／kg腹腔注射20g／L链脲佐菌素诱导糖尿病模型。2周后按随机数字表法将大鼠分为对照组和负压组，每组20只，在大鼠背部正中切除2cm×2cm全层皮肤制备创面。伤后即刻，对照组创面常规换药；负压组创面予以每天4h持续负压（-16．0kPa）治疗，连续7d。（1）治疗前及治疗后1、2周，分别采用血糖仪及电子秤检测2组大鼠血糖及体质量。（2）治疗前及治疗后1、3、7d，每组取5只大鼠，采用激光多普勒血流成像仪检测创面血流量。（3）治疗后3、7d，每组取5只大鼠处死后切取创面组织并分成两部分，取左侧组织行免疫组织化学染色观察血管形成情况，计算微血管密度。（4）取治疗前制备创面时切取的全层皮肤及治疗后3、7d冻存的右侧组织，治疗后1、14d同前切取创面组织，采用实时荧光定量PCR法检测组织中血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体1（Fit—1）、血管生成素1（Ang—1）、Ang-2以及酪氨酸激酶受体2（Tie-2）mRNA的表达。对数据行双因素方差分析或LSD—t检验。结果（1）2组大鼠血糖及体质量水平总体或各时相点比较无明显差异（F值分别为0．667、0．176，t值为0．311～0．707，P值均大于0．05）。（2）2组大鼠创面血流量总体比较有明显差异（F=24．66，P〈0．05）。治疗后1、3、7d，负压组创面血流量分别为（179±24）、（219±12）、（192±30）灌注单位，显著高于对照组的（127±16）、（179±8）、（144±17）灌注单位（t值分别为3．71、5．57、2．77，P〈0．05或P〈0．01）。（3）2组大鼠创面微血管密度总体比较有明最差异（F=33．25，P〈0．05）。治疗后3d，负压组创面每100倍视野下微血管密度为（80±12）个，明显高于对照组的（38±4）个（t=9．257，P〈0．05）。治疗后7d，2组大鼠创面微血管密度相近（t=1．159，P〉0．05），此时负压组血管排列规律、管腔宽畅，而对照组血管排列紊乱、管腔狭窄。（4）治疗后1、3d，负压组VEGF、Fit-1及Ang-1mRNA表达水平均明显高于对照组（t值为1．28-11．60，P值均小于0．01）；治疗后7d，负压组Ang-1mRNA表达水平（27．59±3．55）明显高于对照组（19．87±1．86，t=7．23，P〈0．001），其拮抗剂Ang-2mRNA表达水平（5．79±0．61）明显低于对照组（17．62±0．85，t=19．88，P〈0．001）。治疗后3～14d，负压组Tie-2mRNA表达水平均低于对照组（t值为8．92～15．60，P值均小于0．01）。结论负压创面治疗技术可能通过增强创面愈合后期Ang-1表达以及降低Ang-2表达，促进糖尿病大鼠创面血管形成。 展开更多

关键词 负压伤口疗法 糖尿病 血管生成素类 血管形成

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小鼠脂肪来源间充质干细胞培养上清液对热损伤引起的角质形成细胞凋亡的影响 被引量：4

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作者 贾文斌 胡大海 +6 位作者 王洪涛 陈冬冬 白晓智 李娜 韩夫 方小兵 杨龙龙 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期102-108,共7页

目的探讨小鼠脂肪来源问充质干细胞培养上清液（ADSC-CM）对热损伤引起KC（人表皮细胞株HaCaT）凋亡的影响。方法（1）取5只健康BALB／c小鼠双侧腹股沟脂肪组织，采用胶原酶消化法分离纯化脂肪来源间充质干细胞（ADSC）。取第3代细胞进... 目的探讨小鼠脂肪来源问充质干细胞培养上清液（ADSC-CM）对热损伤引起KC（人表皮细胞株HaCaT）凋亡的影响。方法（1）取5只健康BALB／c小鼠双侧腹股沟脂肪组织，采用胶原酶消化法分离纯化脂肪来源间充质干细胞（ADSC）。取第3代细胞进行形态学观察，采用流式细胞仪检测间充质十细胞表面标志物CD3l、CD34、CD45、CD90、CDl05的表达，并行成脂成骨诱导分化鉴定。（2）利用51．5℃水浴孵育HaCaT细胞35S建立KC热损伤模型，流式细胞仪检测热损伤后即刻细胞凋亡率。（3）另取热损伤后HaCaT细胞按照随机数字表法分为常规培养组、无血清培养组、50％ADSC-CM组、100％ADSC-CM组，分别以含体积分数10％FBS的DMEM培养液、无血清的DMEM培养液、含体积分数50％ADSC．CM的DMEM培养液、体积分数100％ADSC-CM培养24h。采用吖啶橙-溴化乙啶（AO—EB）染色法观察各组细胞的凋亡情况，流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。实时荧光定量RT—PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（easpase-3）的mRNA和蛋白表达水平（蛋白表达结果以灰度值比值表示）。流式细胞仪检测各组细胞周期分布。以上实验均重复测定3次。对数据行单因素方差分析和LSD．t检验。结果（1）分离培养的细胞形态规则，与Fb类似，CD3l、CD34、CD45阳性表达率低于10．0％，CD90、CDl05阳性表达率均高于90．0％，经诱导后可分化成脂肪细胞、骨细胞，鉴定为ADSC。（2）热损伤后即刻，HaCaT细胞的凋亡率为（9．8±0．4）％。（3）AO—EB染色结果显示，无血清培养组HaCaT细胞凋亡数量明显多于其他3组。无血清培养组细胞凋亡率为（8．1±1．2）％，明显高于50％ADSC-CM组的（6．0±0．8）％、常规培养组的（4．6±0．8）％和100％ADSC-CM组的（3．1±0．4）％（t值分别为3．02、4．96、6．60，P值均小于0．01）；100％ADSC-CM组细胞凋亡率接近于常规培养组（t=1．50，P〉0．05），而明显低于50％ADSC-CM组（t：10．21，P〈0．01）。（4）无血清培养组的Bcl-2mRNA表达量为0．34±0．08，显著低于常规培养组的0．98±0．04、50％ADSC-CM组的0．77±0．05和100％ADSC．CM组的1．06±0．04（t值分别为12．87、8．07、14．11，P值均小于0．01）；100％ADSC-CM组的Bel-2mRNA表达量接近于常规培养组（t=0．08，P〉0．05），且明显高于50％ADSC-CM组（t=8．08，P〈0．01）。（5）无血清培养组的caspase-3mRNA表达量为1．15±0．05，明显高于50％ADSC．CM组的0．72±0．1l、常规培养组的0．4l±0．03和100％ADSC-CM组的0．38±0．11（t值分别为6．93、13．97、22．79，P值均小于0．01）；100％ADSC-CM组的caspase-3mRNA表达量接近于常规培养组（t=0．05，P〉0．05），但明显低于50％ADSC-CM组（t=4．77，P〈0．01）。（6）无血清培养组的Bcl-2蛋白表达量为0．93±0．04，显著低丁常规培养组的1．74±0．06、50％ADSC-CM组的1．32±0．05和100％ADSC-CM组的1．90±0．04（z值分别为20．45、11．15、31．38，P值均小于0．01）；100％ADSC-CM组的Bcl-2蛋白表达量接近于常规培养组（t=1．33，P〉0．05），且明显高于50％ADSC-CM组（t=17．30，P〈0．01）。（7）无血清培养组的caspase-3蛋白表达量为0．63±0．08，明显高于50％ADSC-CM组的0．46±0．03、常规培养组的0．29±0．08和100％ADSC-CM组的0．21±0．03（t值分别为3．28、5．05、8．46，JP值均小于0．01）；100％ADSC-CM组的caspase-3蛋白表达量接近于常规培养组（t=0．08，P〉0．05），但明显低于50％ADSC-CM组（t=3．52，P〈0．05）。（8）培养24h，与无血清培养组比较，其他3组G2／M期细胞比例显著降低（t值分别为6．88、4．08、7．28，P〈0．05或P〈0．01）；与无血清培养组比较，常规培养组、100％ADSC-CM组处于s期的细胞比例明显增加（t值分别为2．67、2．40，P值均小于0．05）；各组G0／G1期细胞比例无明显变化（F=0．70，P〉0．05）。结论异种体积分数为100％的ADSC-CM可通过调节Bcl-2、caspase-3的表达来抑制热损伤引起的HaCaT细胞凋亡，缓解细胞G2／M期阻滞，加快细胞周期进程，推测异种或异体体积分数为100％的ADSC．CM在烧伤创面早期治疗方面有一定的应用潜力。 展开更多

关键词 间质干细胞 细胞凋亡 热损伤 角质形成细胞

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Smad交互蛋白1在增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响 被引量：2

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作者 方小兵 胡晓龙 +6 位作者 石继红 蔡维霞 白晓智 贾文斌 刘佳琦 韩夫 胡大海 《中华损伤与修复杂志（电子版）》 CAS 2014年第2期26-30,共5页

目的研究Smad交互蛋白1（SIP1）在人增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响。方法收集临床整形手术切取的9例患者增生性瘢痕标本及其自体正常皮肤标本。分离培养原代人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFBs）,取第3-5代细胞用于实... 目的研究Smad交互蛋白1（SIP1）在人增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响。方法收集临床整形手术切取的9例患者增生性瘢痕标本及其自体正常皮肤标本。分离培养原代人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFBs）,取第3-5代细胞用于实验。（1）免疫组织化学法检测增生性瘢痕组织标本及其自体正常皮肤组织标本中SIP1的表达情况。（2）真核表达质粒pcDNA3.1（＋）/SIP1转染HSFBs。按照随机数字表法将细胞分为6组：对照组;pcDNA3.1（＋）组（空载体组）;pcDNA3.1（＋）/SIP1组;对照＋TGF-β1组;pcDNA3.1（＋）＋TGF-β1组;pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组。于转染后第48 h和72 h分别提取细胞总RNA和细胞总蛋白。应用实时荧光定量PCR法检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及结缔组织生长因子（CTGF）的mRNA表达水平;采用Western-blotting检测α-SMA的蛋白表达水平。结果 （1）免疫组织化学染色结果显示：增生性瘢痕组织中SIP1表达明显低于自体正常皮肤组织。（2）pcDNA3.1（＋）/SIP1转染HSFBs后纤维化相关因子的表达：①α-SMA的mRNA和蛋白表达水平：与对照组和pcDNA3.1（＋）组相比,pcDNA3.1（＋）/SIP1组在mRNA和蛋白表达水平均显著下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。当细胞给予TGF-β1刺激后,各组α-SMA表达均上调,但pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组mRNA和蛋白表达水仍低于对照＋TGF-β1组,差异有统计学意义（P〈0.05）。②CTGF的mRNA表达水平：与对照组和pcDNA3.1（＋）组相比,pcDNA3.1（＋）/SIP1组在mRNA表达水平显著下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。当细胞给予TGF-β1刺激后,各组CTGF表达均显著上调,但pcDNA3.1（＋）/SIP1＋TGF-β1组mRNA表达水仍低于对照＋TGF-β1组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论与正常皮肤组织相比较,SIP1在增生性瘢痕组织中低表达。SIP1基因转染HSFBs可降低纤维化相关因子α-SMA和CTGF的表达,有利于抑制瘢痕形成和减轻挛缩。 展开更多

关键词 Smad交互蛋白1 增生性瘢痕成纤维细胞 转化生长因子Β1 Α平滑肌肌动蛋白 结缔组织生长因子

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瘢痕性秃发手术方法选择及临床疗效评估 被引量：4

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作者 张伟 韩夫 +7 位作者 计鹏 胡晓龙 赵彬 张熠杰 白晓智 苏琳琳 雷惠斌 胡大海 《中国医师杂志》 CAS 2017年第5期650-652,655,共4页

目的总结瘢痕性秃发患者手术治疗的临床经验，探讨临床手术治疗瘢痕性秃发的最佳策略。方法回顾性分析2012年1月至2016年12月间的80例瘢痕性秃发患者手术治疗的临床资料，收集患者临床一般资料，记录手术方法及相关不良事件，术后1周、1... 目的总结瘢痕性秃发患者手术治疗的临床经验，探讨临床手术治疗瘢痕性秃发的最佳策略。方法回顾性分析2012年1月至2016年12月间的80例瘢痕性秃发患者手术治疗的临床资料，收集患者临床一般资料，记录手术方法及相关不良事件，术后1周、1、3、6个月和1～2年复诊。按照非常满意、满意、不满意和无效4级标准以问卷的方式进行疗效评定。结果本组80例瘢痕性秃发患者，40例采用扩张皮瓣＋毛囊单位提取移植术（FUE），10例采用瘢痕部分切除＋FUE修复，30例直接采用FUE修复。20例一期手术完成治疗，60例均经二期治疗。一期患者术后非常满意者占70％，满意者占30％。二期患者术后非常满意者占85％，满意者占15％。结论瘢痕性秃发需要综合手术治疗，FUE是扩张器技术之后的又一利器，联合扩张器治疗大面积瘢痕性秃发的临床效果优于单一方法治疗组。 展开更多

关键词 秃发/并发症/外科学 瘢痕/并发症

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严重烧伤大鼠血清对脂肪间质干细胞生物学特性的影响 被引量：1

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作者 谢松涛 贾文斌 +7 位作者 白晓智 陶克 韩夫 方小兵 杨龙龙 蔡维霞 汤朝武 胡大海 《中华损伤与修复杂志（电子版）》 CAS 2013年第6期13-17,共5页

目的探讨严重烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响。方法取雄性SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用胶原酶消化法、分离纯化大鼠ADSCs,取第3代细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物,行成脂成骨诱导分化鉴... 目的探讨严重烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响。方法取雄性SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用胶原酶消化法、分离纯化大鼠ADSCs,取第3代细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物,行成脂成骨诱导分化鉴定;ADSCs传代后按随机数字表法分为10%胎牛血清组(正常培养组)、10%正常大鼠血清组,10%烧伤大鼠血清组,采用噻唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长曲线。通过流式细胞仪检测各组细胞的生长周期、Real-time PCR法检测各组细胞血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡相关因子Caspase-3的表达情况。结果分离培养的ADSCs传至第3代时形态规则,经流式细胞仪检测,所培养的ADSCs均表达CD29、CD90、CD105,阳性率分别为88.6%、99.7%、92.8%,而CD31、CD34、CD45阳性率分别为4.4%、4.7%、3.3%;经诱导培养后可向成骨成脂分化。MTT法检测结果显示:10%烧伤大鼠血清组细胞增殖较快,各时间点吸光度值(A值)明显高于10%胎牛血清组及10%正常大鼠血清组。流式细胞仪检测结果显示:培养1周后10%烧伤大鼠血清组、10%正常大鼠血清组、10%胎牛血清组ADSCs G1期细胞比例分别为:(72.20±5.13)%、(83.50±4.74)%、(90.20±6.37)%;S期细胞比例分别为:(21.40±2.84)%、(12.50±1.96)%和(8.60±1.31)%,10%烧伤大鼠血清组ADSCs G1期细胞比例显著低于10%正常大鼠血清组、10%胎牛血清组(t=2.39、4.86;P<0.05);10%烧伤大鼠血清组ADSCs S期细胞比例显著高于10%正常大鼠血清组、10%胎牛血清组(t=5.54,7.93;P<0.01)。Real-Time PCR检测结果显示:10%烧伤大鼠血清组VEGF的表达明显上调,Caspase-3表达显著下调与10%正常大鼠血清组、10%胎牛血清组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 10%烧伤大鼠血清可明显促进ADSCs的增殖、抑制细胞凋亡发生、促进ADSCs的分泌功能,严重烧伤后可望移植ADSCs用于细胞治疗。 展开更多

关键词 烧伤 脂肪间充质干细胞 血清 细胞治疗 生物学特性

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成年大鼠许旺细胞快速扩增的改良方法 被引量：1

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作者 王耀军 郑朝 +4 位作者 张战凤 白晓智 蔡维霞 韩夫 杨晨 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2010年第12期125-127,共3页

目的对三种来源不同的神经组织进行许旺细胞(SCs)培养,比较其纯度、增殖能力,以找到一个快速获取大量SCs的方法。方法取成年大鼠预变性坐骨神经、成年大鼠新鲜坐骨神经、新生大鼠坐骨神经,使用低浓度胰酶快速消化法结合差速贴壁法分别进... 目的对三种来源不同的神经组织进行许旺细胞(SCs)培养,比较其纯度、增殖能力,以找到一个快速获取大量SCs的方法。方法取成年大鼠预变性坐骨神经、成年大鼠新鲜坐骨神经、新生大鼠坐骨神经,使用低浓度胰酶快速消化法结合差速贴壁法分别进行SCs培养,进行形态学观察、S-100免疫细胞化学鉴定,检测并比较各组SCs纯度及增殖能力。结果各组细胞生长状态良好,S-100染色阳性,SCs纯度分别为:成年预变性组98%,成年新鲜组92%,新生大鼠组93%。各组SCs生长曲线表明预变性组细胞较新鲜组及新生组SCs增殖旺盛。结论成年大鼠预变性坐骨神经制作取材方便、细胞量充足,纯度高、细胞增殖旺盛,可以被用作细胞生物学研究及组织工程等研究。 展开更多

关键词 许旺细胞 神经生物学 动物实验 大鼠

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Sestrin的结构、功能及其作用机制研究进展

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作者 王克甲 王慧娜 +3 位作者 李小强 韩夫 刘洋 胡大海 《中国医师杂志》 CAS 2017年第12期1912-1915,共4页

Sestrins是一个应激诱导蛋白家族,在疾病或应激状态下表达升高,发挥抑炎、抗氧化、抗衰老等功能,但其具体分子机制和信号通路比较复杂.本文总结了过去几年对于sestrin的相关研究,结合它的分子结构分析其具体功能及最新研究进展.

关键词 热休克蛋白质类 应激 综述

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