目的利用高分辨质谱鉴定银丹心脑通软胶囊的化学成分,与网络药理学研究结合,探讨银丹心脑通软胶囊“心脑同治”的活性成分及其潜在分子作用机制。方法基于UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS鉴定出的银丹心脑通软胶囊化学成分;通过TC...目的利用高分辨质谱鉴定银丹心脑通软胶囊的化学成分,与网络药理学研究结合,探讨银丹心脑通软胶囊“心脑同治”的活性成分及其潜在分子作用机制。方法基于UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS鉴定出的银丹心脑通软胶囊化学成分;通过TCMSP和SwissADME数据库,以口服利用度≥30%、类药性≥0.18和胃肠道吸收得分为“High”、类药性至少通过3个“Yes”来筛选活性成分,再检索活性成分的潜在作用靶点;通过OMIM、DisGeNET、GeneCards、TTD和PharmGKB数据库获取与心脑血管疾病相关靶基因。使用Venny软件获得两者的交集靶点,采用Cytoscape3.9.1分析软件结合STRING数据库对交集靶点进行蛋白互作网络分析和“药物-活性成分-靶点-疾病”网络构建,确定核心成分与靶点。利用DAVID数据库对银丹心脑通软胶囊治疗心脑血管疾病的潜在靶基因进行基因本体(GO)分析及京都基因与基因组百科全书富集分析(KEGG)预测其作用机制。最后将度值排名前5的靶点与主要活性成分进行分子对接模拟以验证网络药理学结果。结果通过UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS技术鉴定出银丹心脑通软胶囊中82个化学成分,主要包括黄酮类、有机酸类、菲醌类和二萜内酯类化合物;经TCMSP、SwissADME数据库筛选得到活性成分34个,如槲皮素、异樱花亭、二氢丹参酮I等,相对应的靶点389个,进一步筛选出治疗心脑血管疾病相关的潜在靶基因249个。GO和KEGG富集分析显示,银丹心脑通软胶囊的活性成分可能主要通过脂质与动脉粥样硬化通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化、AGE-RAGE、IL-17、PI3K-Akt、HIF-1、TNF等通路来发挥治疗心脑血管疾病的作用。分子对接证实STAT3、HSP90AA1等与二氢丹参酮I、山柰酚、木犀草素等具有较高的亲和力。结论本研究初步预测了银丹心脑通软胶囊“心脑同治”其作用机制与动脉粥样硬化、炎症因子、细胞凋亡和氧化应激等方面有关,为后续作用机制的深度分析及临床应用提供科学依据。展开更多
目的 利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry, UHPLC-Q-Exactive Plus HRMS)分析润燥...目的 利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry, UHPLC-Q-Exactive Plus HRMS)分析润燥止痒胶囊中的化学成分。方法 精密称定并制备润燥止痒胶囊溶液,采用Hypersil GOLD C18色谱柱(100 mm×2.1μm, 1.9μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱(流速为0.3 mL/min,柱温40℃,进样量为1μL);采用电喷雾离子源在正、负离子模式下扫描采集数据,使用Compound Discoverer 3.1和Xcalibur 4.1软件处理数据,将各化合物的质谱信息与文献和PubChem数据库进行比对,识别润燥止痒胶囊中的化学成分。结果 润燥止痒胶囊中共鉴定出化学成分57个,包括黄酮类18个、生物碱类12个、有机酸类3个、有机酸衍生物1个、苷类3个、环烯醚萜苷类6个、蒽醌类5个、苯丙素类7个及酚类2个。结论 UHPLC-Q-Exactive Plus HRMS技术可鉴定润燥止痒胶囊中的化学成分。展开更多
为了从金钱菇中快速分离出降血压肽,利用超声细胞破碎法提取金钱菇蛋白,采用透析、超滤的方法对提取物进行纯化,以固定化金属亲和磁性脂质体(metal affinity-immobilied magnetic liposome,MA-IML)作为吸附介质,以金钱菇提取物为吸附对...为了从金钱菇中快速分离出降血压肽,利用超声细胞破碎法提取金钱菇蛋白,采用透析、超滤的方法对提取物进行纯化,以固定化金属亲和磁性脂质体(metal affinity-immobilied magnetic liposome,MA-IML)作为吸附介质,以金钱菇提取物为吸附对象,吸附分离其中的降血压肽,并解析其结构,利用分子对接分析其结合血管紧张素I转化酶(angiotensin-I converting enzyme,ACE)的能力。结果表明:对金钱菇提取液用透析、超滤的方法进行纯化后,蛋白含量由37.67%提高至51.18%,多糖含量由26.80%降低至6.90%,ACE抑制率由61.83%提高至79.77%,纯化后更有利于分离降血压肽;用MA-IML粒子吸附分离出金钱菇纯化液中的降血压活性组分,经反相高效液相色谱法分析其为单一组分,该组分为五肽,其氨基酸序列为苯丙氨酸-丙氨酸-色氨酸-丙氨酸-酪氨酸(Phe-Ala-Trp-Ala-Tyr,FAWAY),IC50为179μmol/L。分子对接模拟表明,FAWAY能与ACE自发发生结合并形成稳定的构象。该研究制备的MA-IML可作为从金钱菇中分离降血压肽的有效工具。展开更多
文摘目的利用高分辨质谱鉴定银丹心脑通软胶囊的化学成分,与网络药理学研究结合,探讨银丹心脑通软胶囊“心脑同治”的活性成分及其潜在分子作用机制。方法基于UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS鉴定出的银丹心脑通软胶囊化学成分;通过TCMSP和SwissADME数据库,以口服利用度≥30%、类药性≥0.18和胃肠道吸收得分为“High”、类药性至少通过3个“Yes”来筛选活性成分,再检索活性成分的潜在作用靶点;通过OMIM、DisGeNET、GeneCards、TTD和PharmGKB数据库获取与心脑血管疾病相关靶基因。使用Venny软件获得两者的交集靶点,采用Cytoscape3.9.1分析软件结合STRING数据库对交集靶点进行蛋白互作网络分析和“药物-活性成分-靶点-疾病”网络构建,确定核心成分与靶点。利用DAVID数据库对银丹心脑通软胶囊治疗心脑血管疾病的潜在靶基因进行基因本体(GO)分析及京都基因与基因组百科全书富集分析(KEGG)预测其作用机制。最后将度值排名前5的靶点与主要活性成分进行分子对接模拟以验证网络药理学结果。结果通过UHPLC Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS技术鉴定出银丹心脑通软胶囊中82个化学成分,主要包括黄酮类、有机酸类、菲醌类和二萜内酯类化合物;经TCMSP、SwissADME数据库筛选得到活性成分34个,如槲皮素、异樱花亭、二氢丹参酮I等,相对应的靶点389个,进一步筛选出治疗心脑血管疾病相关的潜在靶基因249个。GO和KEGG富集分析显示,银丹心脑通软胶囊的活性成分可能主要通过脂质与动脉粥样硬化通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化、AGE-RAGE、IL-17、PI3K-Akt、HIF-1、TNF等通路来发挥治疗心脑血管疾病的作用。分子对接证实STAT3、HSP90AA1等与二氢丹参酮I、山柰酚、木犀草素等具有较高的亲和力。结论本研究初步预测了银丹心脑通软胶囊“心脑同治”其作用机制与动脉粥样硬化、炎症因子、细胞凋亡和氧化应激等方面有关,为后续作用机制的深度分析及临床应用提供科学依据。
文摘目的探讨课题组前期从艾迪注射液(Aidi injection,AD)中筛选出的12个Q-markers(6个抗肿瘤,6个心脏毒性保护)是否对AD原方的2种治疗作用具有代表性。方法基于前期工作基础,将这2种作用的Q-markers分别按照AD原方相同的浓度配制成不同的抗肿瘤Q-markers组合物和不同的心脏毒性保护作用Q-markers组合物,对比AD原方,在Huh7、HUVEC和H9c2细胞上,采用常规CCK8法分别评价组合物的抗肿瘤作用,以及组合物的心脏毒性保护作用。同时采用UHPLC-Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS进行细胞代谢组学研究,分析细胞代谢谱,结合PLS-DA模型计算分析平均距离值,评价抗肿瘤Q-markers组合物与AD原方的相似性,结合PLS-DA模型计算分析相对平均距离值,评价心脏毒性保护作用Q-markers组合物与AD原方的相似性。结果CCK8和细胞代谢组学实验结果趋势基本一致,显示5个抗肿瘤Q-markers组合物(斑蝥素、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、黄芪皂苷Ⅱ和人参皂苷Rg2)优于6个抗肿瘤Q-markers组合物和AD原方,5个心脏毒性保护作用Q-markers组合物(刺五加苷E、紫丁香苷、人参皂苷Rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和壬二酸)优于6个Q-markers组合物和AD原方。结论斑蝥素、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、黄芪皂苷Ⅱ和人参皂苷Rg2可作为AD抗肿瘤作用的潜在Q-markers,刺五加苷E、紫丁香苷、人参皂苷Rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和壬二酸可作为AD心脏毒性保护作用的潜在Q-markers,它们具有同等或优于原方的抗肿瘤和心脏毒性保护作用效果。
