基于转录组数据的玉米小斑病菌EST-SSR分子标记开发及多态性分析

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作者 徐超 李迪 +5 位作者 杨艳艳 马旭阳 马庆周 郭雅双 施艳 张猛 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期33-44,共12页

【目的】基于玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)转录组数据鉴定简单重复序列(SSR)位点,开发可用于该植物病原真菌种内遗传变异分析的全新DNA分子标记。【方法】使用MISA软件对玉米小斑病菌去冗余的unigenes进行SSR标记检索与分析,采用Prim... 【目的】基于玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)转录组数据鉴定简单重复序列(SSR)位点,开发可用于该植物病原真菌种内遗传变异分析的全新DNA分子标记。【方法】使用MISA软件对玉米小斑病菌去冗余的unigenes进行SSR标记检索与分析,采用Primer 3.0设计SSR引物,通过本地BLASTN比对以及原始测序数据的mapping筛选具有潜在扩增多态性的SSR引物,并通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳验证所筛选引物的有效性、多态性和通用性。【结果】在14549条玉米小斑病菌unigenes序列中共检索到5767个SSR位点,发生频率和分布频率分别为23.52%和39.64%,平均分布距离为4.94 kb。其中,单核苷酸重复类型最丰富,占总SSR位点总数的40.70%,二核苷酸(28.18%)和三核苷酸重复类型(26.69%)次之。A/T、AC/GT、C/G和AG/CT是其优势重复基序,共占SSR位点总数的67.05%。SSR基序的重复次数主要在5~14次之间,以10次重复最多(占25.92%),其中,绝大部分为单核苷酸。SSR序列长度的分布范围为10~84 bp,以长度为10 bp的SSR位点数量最多,占SSR位点总数的23.32%,序列长度≥20 bp(高多态性)的SSR共有1309条,占总数的22.70%。进一步通过生物信息学手段和PCR产物电泳检测从100对随机抽选的引物中筛选得到29对扩增性好且多态性较高的SSR引物。【结论】玉米小斑病菌转录组含丰富的SSR位点,具有开发多态性引物的潜力;本次筛选得到的SSR引物可用于后续玉米小斑病菌的种群变异及遗传图谱等研究。 展开更多

关键词 玉米小斑病 玉蜀黍平脐蠕孢 转录组 EST-SSR 多态性

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紫荆枝枯病及叶斑病病原菌种类鉴定

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作者 孙修远 高文凯 +3 位作者 徐超 马庆周 张猛 郭雅双 《北方园艺》 北大核心 2025年第13期121-131,共11页

以2022—2023年间从田间采集紫荆枝枯及叶斑症状的病害样品为试材,采用组织分离的方法,从样品中分离、纯化病原菌株,结合形态学观察和多基因系统发育分析的方法对分离菌株进行准确鉴定,并对其进行致病性测定,研究了紫荆枝枯病和叶斑病... 以2022—2023年间从田间采集紫荆枝枯及叶斑症状的病害样品为试材,采用组织分离的方法,从样品中分离、纯化病原菌株,结合形态学观察和多基因系统发育分析的方法对分离菌株进行准确鉴定,并对其进行致病性测定,研究了紫荆枝枯病和叶斑病病原种类及危害特点,以期为紫荆枝枯病和叶斑病的诊断和防控提供参考依据。结果表明:12个分离物分为2类菌落形态。基于ITS、CAL、TEF1、TUB和HIS基因序列联合构建的系统发育分析,显示来源于紫荆枝枯症状的所有分离物与榆树间座壳菌Diaporthe eres(D.eres)聚为一个进化支,支持率为100%;来源于紫荆叶斑症状的分离物,一株与D.eres聚为一个进化支,一株与山核桃间座壳菌Diaporthe caryae(D.caryae)聚为一个进化支,支持率为100%。同时,根据柯赫氏法则对分离菌株进行致病力测定,表明紫荆枝条及叶片均可发病,二次分离得到的分离物其形态学特征与接种菌株保持一致。经形态学、分子生物学鉴定及柯赫氏法则验证,确定了紫荆枝枯病病原菌为D.eres,紫荆叶斑病病原菌为D.eres和D.caryae。 展开更多

关键词 紫荆枝枯病 紫荆叶斑病 间座壳属真菌 多基因系统发育分析 形态学

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麦根腐平脐蠕孢BsbHLH1基因功能研究

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作者 姚萌 马庆周 +6 位作者 李田田 李长水 马旭阳 郭雅双 徐超 耿月华 张猛 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第3期463-473,共11页

【目的】探究麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)的致病分子机制,为该菌引起的小麦病害防控提供理论依据。【方法】利用基因敲除和回补技术对麦根腐平脐蠕孢中一个含有bHLH结构域的转录因子BsbHLH1进行研究。【结果】发现缺失突变体... 【目的】探究麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)的致病分子机制,为该菌引起的小麦病害防控提供理论依据。【方法】利用基因敲除和回补技术对麦根腐平脐蠕孢中一个含有bHLH结构域的转录因子BsbHLH1进行研究。【结果】发现缺失突变体ΔBsbHLH1的生长速率、分生孢子形态大小与野生型和回补菌株相比没有明显差异,但其产孢量却显著增加。利用荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)对突变体ΔBsbHLH1和野生型中与产孢相关的基因BsStuA、BsMedA、BsWetA和BsVosA进行检测,发现BsStuA、BsMedA和BsWetA 3个产孢基因皆显著上调表达,而负调控产孢基因BsVosA显著下调表达。该结果进一步表明基因BsbHLH1负调控麦根腐平脐蠕孢分生孢子的产生。此外,与野生型和回补菌株相比,突变体对H_(2)O_(2)、KCl和山梨糖醇胁迫的耐受性和致病力均没有明显差异。【结论】转录因子BsbHLH1参与负调控麦根腐平脐蠕孢分生孢子的产生,但不参与调控该菌的生长,胁迫应答及对寄主植物的致病力。 展开更多

关键词 麦根腐平脐蠕孢 bHLH结构域 基因敲除 分生孢子 致病力

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玉兰枝枯病病原菌分离鉴定与致病性测定

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作者 谢雨絮 黄超林 +6 位作者 高文凯 孙修远 任帆星 杜国兴 耿月华 郭雅双 张猛 《植物病理学报》 北大核心 2025年第5期1170-1174,共5页

玉兰(Magnolia denudata Desr.)隶属于木兰科(Magnoliaceae)木兰属,别名望春花、辛夷、木兰,因其观赏价值较高而被广泛种植,是一类闻名中外的园林、庭院绿化树种[1]。然而,因栽植和管理不当,玉兰上的真菌病害也随着栽培面积的大幅增加... 玉兰(Magnolia denudata Desr.)隶属于木兰科(Magnoliaceae)木兰属,别名望春花、辛夷、木兰,因其观赏价值较高而被广泛种植,是一类闻名中外的园林、庭院绿化树种[1]。然而,因栽植和管理不当,玉兰上的真菌病害也随着栽培面积的大幅增加而愈发严重,极大地影响玉兰树健康生长和景观效果[2]。目前国内针对玉兰病害的研究主要集中在叶部病害的症状描述和发病规律调查,涉及的病害主要包括细极链格孢玉兰专化型(Alternaria tenuissima f.sp.magnoliicola)引起的玉兰黑斑病[1]、玉兰炭疽菌(Colletotrchum magnoliae)引起的炭疽病、玉兰壳二孢菌(Ascochyta magnoliae)引起的壳二孢褐斑病[3]以及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)引起的细菌性黑斑病等[4],但关于玉兰枝干病害的病原鉴定和致病性测定方面的报道较少。 展开更多

关键词 木兰属 木兰科 园林绿化树种 分离鉴定

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新农科背景下高校“植病流行学”课程的教学改革探索 被引量：1

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作者 郭雅双 耿月华 +1 位作者 徐超 张猛 《教育教学论坛》 2022年第36期74-77,共4页

“植病流行学”是针对植物保护专业高年级本科生的专业提高课程,既包含基础知识理论,又紧密联系农业生产实际,是一门极具价值的综合学科。近年来,本教研团队通过对“植病流行学”课程教学的不断探索和实践,在教学内容、教学方法、教学... “植病流行学”是针对植物保护专业高年级本科生的专业提高课程,既包含基础知识理论,又紧密联系农业生产实际,是一门极具价值的综合学科。近年来,本教研团队通过对“植病流行学”课程教学的不断探索和实践,在教学内容、教学方法、教学实践及教师队伍建设等方面取得一些进展和体会,以期能够为国内植保专业“植病流行学”课程教学提供新的参考和借鉴,进一步提升学生的问题解决能力和创新实践能力,为植物保护专业培养更多创新型人才奠定良好基础。在今后的“植病流行学”课程教学中,还需不断探索和思考,以学生为中心,激发学习热情,提高学习能动性,为培养更多新时代背景下国家需要的创新型农学人才而不懈努力。 展开更多

关键词 流行学 植物病理学 教学改革

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中美现代农业模式的比较分析

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作者 耿月华 郭雅双 +2 位作者 臧睿 刘龙 张猛 《山西农经》 2024年第20期135-137,共3页

介绍了中美两国的农业发展背景,比较了两国的现代农业模式,探讨其在农业生产方式、农产品市场发展情况、农业可持续性发展等方面的异同,总结了两国在农业发展方面面临的共性问题并提出了相关建议。通过分析,可以深入了解中美两国现代农... 介绍了中美两国的农业发展背景,比较了两国的现代农业模式,探讨其在农业生产方式、农产品市场发展情况、农业可持续性发展等方面的异同,总结了两国在农业发展方面面临的共性问题并提出了相关建议。通过分析,可以深入了解中美两国现代农业的差异和相似之处,为现代农业发展提供借鉴和启示。 展开更多

关键词 现代农业 可持续性农业 环境保护

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草莓多主棒孢霉小柱孢酮脱水酶基因CcSCD1的功能研究 被引量：6

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作者 薛彩英 武海燕 +6 位作者 侯梦圆 马庆周 郭雅双 耿月华 臧睿 张猛 徐超 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期25-36,共12页

多主棒孢霉(Corynespora cassiicola)是世界范围内重要的植物病原真菌,其引起的草莓棒孢霉叶斑病对草莓产业的健康发展具有潜在威胁。小柱孢酮脱水酶(scytalone dehydratase,SCD)是真菌多聚二羟萘类(DHN)黑色素生物合成途径中的关键酶,... 多主棒孢霉(Corynespora cassiicola)是世界范围内重要的植物病原真菌,其引起的草莓棒孢霉叶斑病对草莓产业的健康发展具有潜在威胁。小柱孢酮脱水酶(scytalone dehydratase,SCD)是真菌多聚二羟萘类(DHN)黑色素生物合成途径中的关键酶,在植物病原菌致病过程中发挥重要作用。本研究通过同源重组的方法获得了草莓多主棒孢霉小柱孢酮脱水酶基因(CcSCD1)的敲除突变体,并进行了回补和RT-PCR验证。与野生型相比,敲除突变体△CcSCD1-2表现为菌落无色素沉积、菌丝稀疏、产孢量显著下降、分生孢子无色较小以及致病力明显减弱。结果表明,CcSCD1参与调控多主棒孢霉的黑色素生物合成、营养生长、分生孢子产量及致病力。 展开更多

关键词 多主棒孢霉 DHN途径 小柱孢酮脱水酶基因 致病力

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多主棒孢CcCas2基因纯合敲除突变体构建及致病功能 被引量：3

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作者 侯梦圆 武海燕 +5 位作者 何雨芯 郭雅双 耿月华 臧睿 张猛 徐超 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1701-1717,共17页

多主棒孢引起的棒孢叶斑病为我国黄瓜生产上重要的新兴流行病害。多主棒孢寄主广泛,其cassiicolin(Cas)毒素是多主棒孢侵染橡胶早期的关键致病因子,但在黄瓜/多主棒孢病害系统中的毒力功能目前尚不明确。本研究从来自黄瓜多主棒孢HG3菌... 多主棒孢引起的棒孢叶斑病为我国黄瓜生产上重要的新兴流行病害。多主棒孢寄主广泛,其cassiicolin(Cas)毒素是多主棒孢侵染橡胶早期的关键致病因子,但在黄瓜/多主棒孢病害系统中的毒力功能目前尚不明确。本研究从来自黄瓜多主棒孢HG3菌株的基因组序列中鉴定到单拷贝的Cas2亚型基因,命名为CcCas2。在敲除该基因的过程中,发现CcCas2缺失突变体均为杂合,荧光染色试验进一步证实多主棒孢是多核真菌。对杂合突变体进行潮霉素筛选并单孢纯化,获得了纯合的CcCas2缺失突变体菌株(检出率≥20%)。致病力测定显示,CcCas2纯合突变体和野生型菌株接种黄瓜叶片4 d后的发病程度相当。通过转录组数据、RT-PCR和qRT-PCR分析均发现CcCas2在转录水平上受到了强烈地抑制。本研究明确了多主棒孢CcCas2基因由于在转录水平受到抑制而对黄瓜没有毒力;所提出的多主棒孢纯合突变体高效获取方法为该菌进一步的功能基因研究奠定了基础。 展开更多

关键词 多主棒孢 效应蛋白 多核丝状真菌 杂合敲除突变体 基因表达

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河南省樱花枝枯病病原菌鉴定及其生物学特性 被引量：3

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作者 高文凯 秦士娇 +7 位作者 谢雨絮 曹家源 侯康乐 徐义力 马庆周 徐超 郭雅双 张猛 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1263-1267,共5页

0 引言樱花(Prunus serrulata),隶属于蔷薇科(Rosaceae)樱亚属,种类丰富且具有较高的观赏价值,是我国重要的观花树种[1]。近年来,随着我国樱花栽培面积大幅增加,其上的真菌病害也愈发严重,极大影响樱花的观赏价值。然而国内关于樱花真... 0 引言樱花(Prunus serrulata),隶属于蔷薇科(Rosaceae)樱亚属,种类丰富且具有较高的观赏价值,是我国重要的观花树种[1]。近年来,随着我国樱花栽培面积大幅增加,其上的真菌病害也愈发严重,极大影响樱花的观赏价值。然而国内关于樱花真菌病害报道较少,目前已报道的有危害叶片的褐斑病和危害主干中部以下及根部的根癌病[2-3]。 展开更多

关键词 病原菌鉴定 根癌病 真菌病害 枝枯病 樱花 观花树种 褐斑病 生物学特性

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高标准农田建设中的标准化需求 被引量：2

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作者 黄超林 赵云龙 +3 位作者 蒋青青 刘永 吕晓旭 郭雅双 《中国标准化》 2024年第10期79-84,共6页

本文通过对我国高标准农田七个建设区域的高标准农田标准建设工作现状调研,分析各区高标准农田标准建设中存在的问题,提出高标准农田标准体系建设思路及模板。从高标准农田基础、规划、建设、验收、管理、评价与分级及安全生产七大类以... 本文通过对我国高标准农田七个建设区域的高标准农田标准建设工作现状调研,分析各区高标准农田标准建设中存在的问题,提出高标准农田标准体系建设思路及模板。从高标准农田基础、规划、建设、验收、管理、评价与分级及安全生产七大类以及术语、编码规则、信息采集、可行性研究、初步设计、工程概算、建设通则、基础建设、海绵农田、验收通则、整体验收、专项验收、管理通则、日常管理、科技管理、污染管理、总体评价、土壤评价、水资源评价、智慧农田评价与分级、无废农田评价与分级、安全生产通则、安全设施建设、安全生产、安全经营、安全教育二十六个维度建立高标准农田标准体系,为各个建设区域提供统一规范的参考依据。 展开更多

关键词 高标准农田 标准需求 标准体系

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河南省桃树流胶病菌的鉴定及其真菌病毒检测

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作者 王彦芬 高许鹏 +5 位作者 陈泽源 翟凤艳 周锋 郭雅双 张猛 余昊 《植物保护》 2026年第1期67-78,共12页

为明确河南省桃树流胶病的病原菌组成及其真菌病毒资源,本研究对河南省6个桃园进行病害调查,采用组织分离法获得31个病原菌分离株,经致病力测定和形态学、分子生物学鉴定,确定其分属于4个种:葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea、色二孢D... 为明确河南省桃树流胶病的病原菌组成及其真菌病毒资源,本研究对河南省6个桃园进行病害调查,采用组织分离法获得31个病原菌分离株,经致病力测定和形态学、分子生物学鉴定,确定其分属于4个种:葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea、色二孢Diplodia seriata、可可毛色二孢Lasiodiplodia theobromae和柑橘毛色二孢L.citricola,其中L.citricola为中国桃树新记录种,且B.dothidea为优势病原菌。利用dsRNA和RT-PCR对病原菌携带的真菌病毒进行检测,其中dsRNA检测发现,11个B.dothidea菌株携带0.5~5 kb的dsRNA片段,RT-PCR鉴定出双分体病毒(BdPV1)、多聚真菌病毒(BdRV1)及产黄青霉病毒(BdCV1)。值得注意的是,BdRV1可显著降低寄主真菌的致病力,表明其具有作为桃树流胶病生防制剂的开发潜力。本研究为桃树流胶病的病原学研究和生物防治提供了重要理论基础和资源储备。 展开更多

关键词 桃树流胶病 葡萄座腔菌 鉴定 真菌病毒

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