脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)因其安全性高、稳定性好及核酸封装效率优异等特点,成为极具前景的基因递送载体。当前临床基因治疗主要依赖侵入性给药方式,因此开发顺应性强、非侵入性的给药途径(如口服给药)至关重要。然而口...脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)因其安全性高、稳定性好及核酸封装效率优异等特点,成为极具前景的基因递送载体。当前临床基因治疗主要依赖侵入性给药方式,因此开发顺应性强、非侵入性的给药途径(如口服给药)至关重要。然而口服基因递送载体面临着核酸药物在胃肠道酸性环境(pH 1.5~4.5)易降解的难题。为此,本研究基于大肠杆菌的细菌外膜囊泡(bacterial outer membrane vesicles,OMV)和阳离子脂质肽(RLS)构建了含胆固醇(cholesterol)的杂化系统(a cholesterol-enriched hybrid system based on an amphiphilic cationic lipopeptide and Escherichia coli outer membrane vesicles,RLSC/OMVC),该体系在中性和酸性条件下均展现出高效基因递送能力,并具有优良的体外生物相容性。研究分别表征了不含胆固醇与含胆固醇制剂(RLS、RLSC、OMV和OMVC)的物理化学特性,并通过体外细胞转染,表明RLSC/OMVC在酸性条件(pH 4.5)下的基因递送效率较Lipofectamine2000显著提升(约3倍)。进一步通过透射电镜观察、粒径/电位分析和凝胶电泳实验揭示了OMV及胆固醇协同脂质肽保护质粒pDNA(plasmid DNA)免受酸性降解的作用机制。本研究构建的大肠杆菌外囊泡融合型脂质肽RLSC/OMVC系统,兼具耐酸性、高效基因递送及优良生物相容性,为口服基因治疗提供创新策略。展开更多
文摘脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)因其安全性高、稳定性好及核酸封装效率优异等特点,成为极具前景的基因递送载体。当前临床基因治疗主要依赖侵入性给药方式,因此开发顺应性强、非侵入性的给药途径(如口服给药)至关重要。然而口服基因递送载体面临着核酸药物在胃肠道酸性环境(pH 1.5~4.5)易降解的难题。为此,本研究基于大肠杆菌的细菌外膜囊泡(bacterial outer membrane vesicles,OMV)和阳离子脂质肽(RLS)构建了含胆固醇(cholesterol)的杂化系统(a cholesterol-enriched hybrid system based on an amphiphilic cationic lipopeptide and Escherichia coli outer membrane vesicles,RLSC/OMVC),该体系在中性和酸性条件下均展现出高效基因递送能力,并具有优良的体外生物相容性。研究分别表征了不含胆固醇与含胆固醇制剂(RLS、RLSC、OMV和OMVC)的物理化学特性,并通过体外细胞转染,表明RLSC/OMVC在酸性条件(pH 4.5)下的基因递送效率较Lipofectamine2000显著提升(约3倍)。进一步通过透射电镜观察、粒径/电位分析和凝胶电泳实验揭示了OMV及胆固醇协同脂质肽保护质粒pDNA(plasmid DNA)免受酸性降解的作用机制。本研究构建的大肠杆菌外囊泡融合型脂质肽RLSC/OMVC系统,兼具耐酸性、高效基因递送及优良生物相容性,为口服基因治疗提供创新策略。
