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人CLEC-2胞外段CRD重组蛋白纯化与多克隆抗体的制备和活性鉴定 被引量:1
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作者 李因涛 吴维宾 +4 位作者 洪谊 王文忠 杨俊武 谢建辉 吴兴中 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1012-1018,共7页
人C型凝集素样受体(human C-type lectin-like receptor-2,hCLEC-2)是新克隆的Ⅱ型跨膜受体分子,研究表明,它在病毒感染,血小板活化、聚集,肿瘤转移和信号转导等方面发挥重要作用.通过制备针对其胞外段糖类识别结构域(CRD)的抗体来进一... 人C型凝集素样受体(human C-type lectin-like receptor-2,hCLEC-2)是新克隆的Ⅱ型跨膜受体分子,研究表明,它在病毒感染,血小板活化、聚集,肿瘤转移和信号转导等方面发挥重要作用.通过制备针对其胞外段糖类识别结构域(CRD)的抗体来进一步研究该蛋白质的生物学功能及相关信号通路.构建了pET23b-CRD重组表达质粒,将其转化到大肠杆菌BL21中,用于hCLEC-2-CRD-His融合蛋白的表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表明,融合重组蛋白成功获得了高效表达,分子质量在18ku左右.经鉴定,发现hCLEC-2-CRD-His表达于包涵体中.为获得高纯度的可溶性蛋白,将包涵体溶于6mol/L盐酸胍,并用镍柱进行纯化.纯化后的蛋白质经过透析、再折叠后作为抗原,免疫家兔制备抗血清,抗血清经蛋白G亲合层析纯化后用Western blot等方法进行鉴定,结果显示该抗体能特异性地检测到GFP-hCLEC-2和GFP-CRD.通过使用该抗体,进一步发现,在用PMA和IL-4诱导单核细胞THP-1分化的过程中,内源性hCLEC-2蛋白水平下调,初步揭示了hCLEC-2的表达和单核细胞的分化存在一定的联系.因此,该抗体的成功制备将为进一步研究CLEC-2的生物学功能提供有利的条件. 展开更多
关键词 C型凝集素样蛋白 糖类识别结构域 重组质粒 融合蛋白 多克隆抗体
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新型冠状病毒肺炎患者康复初期肺功能及心肺运动功能评价 被引量:13
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作者 耿茜 郑劲平 +6 位作者 梁晓林 钟丽萍 虞欣欣 洪谊 李少强 李时悦 高怡 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期320-324,共5页
目的评估新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)患者治愈出院后的肺功能及运动心肺功能。方法分析2020年1至3月期间我院收治的10例新冠肺炎患者康复出院后的静态肺功能及心肺运动功能,并将10例患者分为非危重组(普通型3例、重型2例)和危重组(... 目的评估新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)患者治愈出院后的肺功能及运动心肺功能。方法分析2020年1至3月期间我院收治的10例新冠肺炎患者康复出院后的静态肺功能及心肺运动功能,并将10例患者分为非危重组(普通型3例、重型2例)和危重组(危重型5例)。5例患者在出院14天时完成了肺通气功能检查;10例出院28天时进行了肺通气功能、弥散功能检查和心肺运动试验(CPET),同时以10例健康者作为对照。结果 ①新冠肺炎组全部患者肺通气功能指标用力肺活量占预计值百分比(FVC%pred)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_(1)%pred)、第一秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV_(1)/FVC)、呼气峰值流量占预计值百分比(PEF%pred)、用力呼出气量为25%-75%肺活量间的平均呼气流量占预计值百分比均在正常范围,且与正常组比较无显著差异(P>0.05);3例患者(30%)弥散功能指标中一氧化碳弥散量占预计值百分比(DLCO%pred)下降;全部患者的CPET指标中峰值摄氧量占预计值百分比(PeakVO_(2)%pred)、摄氧效率斜率、氧脉搏占预计值百分比(VO_(2)/HR%pred)下降,且与正常组比较有显著差异(P<0.05),但通气效率指标中无氧阈时的二氧化碳通气当量、二氧化碳通气当量斜率与正常组相比无显著差异(P>0.05)。②危重组患者FVC%pred、VO_(2)/HR%pred、PeakVO_(2)%pred较非危重组下降,其中FVC%pred、VO_(2)/HR%pred下降有统计学意义(P<0.05)。③ 5例新冠肺炎患者治愈出院28天时肺通气功能中FVC%pred、PEF%pred较出院14天显著改善(P<0.05)。结论新冠肺炎康复者心肺功能的主要损害为运动耐量下降;部分患者存在弥散功能降低,但随着康复时间的延长,有改善的趋势。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 肺功能 心肺运动试验 运动耐量
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输液贴在静脉采血中的应用体会 被引量:1
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作者 洪谊 《江西医药》 CAS 2019年第7期841-842,共2页
目的探讨减少和降低静脉采血后局部出血和瘀血的发生率.方法观察体检中心采血客户120例,单日采用抽血后习惯用棉签按压止血,双日采用静脉输液贴(带敷料的一条),将敷料贴至针眼处,体检客户直接用指腹按压敷料贴后拔出采血针头法(简称输... 目的探讨减少和降低静脉采血后局部出血和瘀血的发生率.方法观察体检中心采血客户120例,单日采用抽血后习惯用棉签按压止血,双日采用静脉输液贴(带敷料的一条),将敷料贴至针眼处,体检客户直接用指腹按压敷料贴后拔出采血针头法(简称输液贴压迫法)并比较.结果两组患者采血后局部出血、瘀血率比较,差异有显著性(P<0.005),输液贴压迫法明显优于传统的棉签压迫法.结论采用输液贴按压静脉采血处,能有效地减少和降低采血后局部的出血、瘀血的发生. 展开更多
关键词 静脉采血 输液贴按压法 观察
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心肺运动试验在肺部疾病中的应用及研究进展 被引量:14
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作者 洪谊 高怡 郑劲平 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期380-384,共5页
心肺运动试验(CPET)是一种可以同时观测患者心血管系统和呼吸系统对同一运动应激反应的试验。CPET特别强调心肺联合功能的测定,所以对肺血管病如肺动脉高压(PAH)、肺栓塞等疾病的诊断及预后评估方面具有独特的意义。另外,侵入性心肺运... 心肺运动试验(CPET)是一种可以同时观测患者心血管系统和呼吸系统对同一运动应激反应的试验。CPET特别强调心肺联合功能的测定,所以对肺血管病如肺动脉高压(PAH)、肺栓塞等疾病的诊断及预后评估方面具有独特的意义。另外,侵入性心肺运动试验(invasive cardiopulmonary exercise testing,iCPET)和CPET联合超声技术可以准确提供测试者运动过程中血流动力学、血气、心脏瓣膜及血流改变,为不明原因运动诱发呼吸困难的诊断提供新的方法。本文主要综述了CPET的指标解读、在肺部疾病中的临床应用及技术进展。 展开更多
关键词 心肺运动试验 不明原因 肺血管病 心血管系统 心脏瓣膜 肺部疾病 呼吸困难 肺栓塞
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