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动物抗病毒感染基因工程育种研究进展 被引量：2
1
作者 殷震 扈荣良 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期86-92,共7页
动物抗病毒感染基因工程育种研究进展殷震，扈荣良（长春农牧大学兽医研究所长春１３００１２）动物传染病，尤其是动物病毒性传染病，严重威胁畜禽健康。一些很早发现的传染病迄今未能有效控制。随着集约化饲养和养殖条件的改变，近年... 动物抗病毒感染基因工程育种研究进展殷震，扈荣良（长春农牧大学兽医研究所长春１３００１２）动物传染病，尤其是动物病毒性传染病，严重威胁畜禽健康。一些很早发现的传染病迄今未能有效控制。随着集约化饲养和养殖条件的改变，近年来又相继发生和流行一些新的传染病。... 展开更多
关键词 动物 抗病毒基因 遗传工程 育种
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21世纪我国动物疫病防制的形势与策略 被引量：10
2
作者 殷震 《动物科学与动物医学》 1999年第5期1-3,共3页
１　疫病防制的主要成就　　我国继１９５６年宣布消灭危害十分严重的牛瘟之后，１９９６年又宣布彻底消灭牛肺疫。同时，不同程度地控制了绵羊痘、山羊传染性胸膜肺炎、牛结核病、牛羊布鲁氏菌病和气肿疽，显著地减少了炭疽和猪丹毒等... １　疫病防制的主要成就　　我国继１９５６年宣布消灭危害十分严重的牛瘟之后，１９９６年又宣布彻底消灭牛肺疫。同时，不同程度地控制了绵羊痘、山羊传染性胸膜肺炎、牛结核病、牛羊布鲁氏菌病和气肿疽，显著地减少了炭疽和猪丹毒等病的发生，降低了猪瘟和鸡新城疫的流... 展开更多
关键词 21世纪 中国 动物疫病 预防 检疫 控制
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我国动物疫病防制的形势与策略 被引量：3
3
作者 殷震 《中国牧业通讯》 2000年第3期22-22,共1页
畜禽疫病防制和研究的建议: 畜禽疫病是严重危害畜牧业发展的关键。我国畜禽疫病种类繁多,据1986～1990年全国疫病普查表明,畜禽传染病有202种之多。其中细菌性疾病111种,病毒性疾病80种,真菌性疾病11种,其中80年代发现的新病达17种之... 畜禽疫病防制和研究的建议: 畜禽疫病是严重危害畜牧业发展的关键。我国畜禽疫病种类繁多,据1986～1990年全国疫病普查表明,畜禽传染病有202种之多。其中细菌性疾病111种,病毒性疾病80种,真菌性疾病11种,其中80年代发现的新病达17种之多。建国以来已经消灭的传染病只有2种(牛瘟和牛肺疫),初步和稳定控制的有51种,而流行面广,危害严重。 展开更多
关键词 中国 动物疫病防制 形势分析 发展策略
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我国21世纪动物疫病防制的形势与策略 被引量：2
4
作者 殷震 《广西畜牧兽医》 2000年第1期8-11,30,共5页
殷　震院士，中国人民解放军军需大学（ 原农牧大学） 教授、博士生导师，校专家组组长，全军基因工程实验室主任。先后兼任国务院学位委员会学科评议组成员、国家攀登计划项目专家委员会顾问等要职，是我国著名的动物病毒学家。１９９... 殷　震院士，中国人民解放军军需大学（ 原农牧大学） 教授、博士生导师，校专家组组长，全军基因工程实验室主任。先后兼任国务院学位委员会学科评议组成员、国家攀登计划项目专家委员会顾问等要职，是我国著名的动物病毒学家。１９９５ 年当选为中国工程院院士。先后承担国家“８６３”计划课题、国家自然科学基金重大项目等１０ 多项课题，取得科研成果２０ 多项，其中７ 项获部级或国家级科技进步一、二等奖。１９９９年获中国人民解放军专业技术重大贡献奖。培养博士研究生和博士后５０ 多名，荣获全国教学成果军队级一等奖，１９９７ 年获中华农业科教奖。主编有１８０ 万字的《动物病毒学》巨著，对推动我国动物病毒学的发展作出很大的贡献，此外还主编和参编６ 部科学专著，发表论文１００ 多篇。经本刊的请求，殷院士同意转载其新作《我国２１ 世纪动物疫病防制的形势与策略》，我们对作者表示深切的谢意。 展开更多
关键词 中国 21世纪 动物疫病 防制
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生物技术及其在动物疫病防制上的应用 被引量：2
5
作者 殷震 《福建畜牧兽医》 1997年第1期1-3,共3页
关键词 动物 疾病防治 生物技术
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我国动物疫病防制的形势与策略 被引量：1
6
作者 殷震 《中国牧业通讯》 2000年第4期18-19,共2页
目前畜禽疫病防制的形势和问题: 1、随着我国集约化和规模化饲养业的发展和市场经济的建立,经营规范扩大,畜禽及其产品流通渠道增多,造成了疫病传染流行的条件。而我国动物医学基础研究比较薄弱,技术储备不足,防疫、检疫手段与发达国家... 目前畜禽疫病防制的形势和问题: 1、随着我国集约化和规模化饲养业的发展和市场经济的建立,经营规范扩大,畜禽及其产品流通渠道增多,造成了疫病传染流行的条件。而我国动物医学基础研究比较薄弱,技术储备不足,防疫、检疫手段与发达国家相比有较大差距,难以满足飞速发展的畜禽养殖业的迫切需要。对一些重大疫病的流行规律,病原体的变异及其变异规律,未能充分掌握。 展开更多
关键词 中国 动物疫病防制 动物防疫法 目标管理责任制
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联合诊断法在C-GIS带电局放定位中的应用
7
作者 殷震 陈楠 +1 位作者 王荣亮 田强 《电世界》 2014年第7期6-7,共2页
1 联合诊断法定位技术 1．1地电波（TEV）法 局部放电产生的地电波（TEV）信号的大小与局部放电的激烈程度及放电点的远近有关。通过检测局部放电产生的TEV信号，不仅可以对运行中开关柜内设备局部放电状况进行定量测试，而且可以通... 1 联合诊断法定位技术 1．1地电波（TEV）法 局部放电产生的地电波（TEV）信号的大小与局部放电的激烈程度及放电点的远近有关。通过检测局部放电产生的TEV信号，不仅可以对运行中开关柜内设备局部放电状况进行定量测试，而且可以通过测得的同一放电源到不同探测器的时间差，对局部放电点进行定位。 展开更多
关键词 高压开关柜 测试 气体绝缘材料 故障
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犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应诊断方法的建立和初步应用 被引量：40
8
作者 李金中 何洪彬 +4 位作者 夏咸柱 殷震 涂长春 金宁一 李佑民 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期180-184,共5页
根据Ｂａｒｅｔ报道的犬瘟热病毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增３２４ｂｐ基因片段的引物。将异硫氰酸胍－酚－仿一步法提取得到的细胞总ＲＮＡ进行反转录，以此产物为模板进行ＰＣＲ扩增... 根据Ｂａｒｅｔ报道的犬瘟热病毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增３２４ｂｐ基因片段的引物。将异硫氰酸胍－酚－仿一步法提取得到的细胞总ＲＮＡ进行反转录，以此产物为模板进行ＰＣＲ扩增，并对ＰＣＲ扩增条件进行了优化。经鉴定，以此对引物进行的ＰＣＲ扩增，得到了与设计片段大小和酶切位点相同的产物，且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的三种病原的核酸，这表明此方法为特异性的。对２７条（只）临床病例和３２份细胞培养物进行检查，并与电子显微镜负染检查结果进行了比较。初步应用研究的结果表明，此方法可用于犬瘟热病毒的临床诊断和实验研究。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 反转录 聚合酶链式反应 诊断
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以重组mE2蛋白为抗原建立检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的研究 被引量：46
9
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李作生 马正海 李红卫 吴健敏 吕宗吉 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期220-222,共3页
以在Ｅ．ｃｏｌｉ高效表达的猪瘟病毒Ｅ２基因主要抗原编码区（ｍＥ２）为抗原，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的兔抗猪ＩｇＧ为二抗，建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。经检测筛选出最佳反应条件为：１２μｇ／孔纯化... 以在Ｅ．ｃｏｌｉ高效表达的猪瘟病毒Ｅ２基因主要抗原编码区（ｍＥ２）为抗原，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的兔抗猪ＩｇＧ为二抗，建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。经检测筛选出最佳反应条件为：１２μｇ／孔纯化的Ｅ．ｃｏｌｉ表达的ｍＥ２重组蛋白包被酶标板，用１０％的兔血清或马血清进行封闭，以正常Ｅ．ｃｏｌｉ裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组ｍＥ２蛋白作为诊断ＨＣＶ抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 展开更多
关键词 mE2重组蛋白 猪瘟病毒 抗体 间接ELISA
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应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测Ⅱ.JEV、PPV、PRRSV、PRV单项PCR检测方法的建立 被引量：15
10
作者 孙明 李红卫 +5 位作者 高显明 涂长春 何旭玉 白晓鸿 金宁一 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期10-13,共4页
在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各... 在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各 PCR扩增产物进行了点杂交和部分测序鉴定。用单项 PCR对感染猪相关病毒的检测证实 ,本试验已经建立了有效、特异、敏感的检测 JEV、PPV、PRRSV、PRV的单项 PCR技术 ,为进一步建立多联 展开更多
关键词 JEV PPV PRRSV PRV PCR 猪 繁殖障碍 病毒 检测方法
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我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异 被引量：23
11
作者 吕宗吉 李红卫 +4 位作者 涂长春 余兴龙 吴健敏 李月红 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期313-316,共4页
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表... 采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RT-PCR 基因差异 疫苗株 流行株
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鸡卵清蛋白基因5′调控序列表达载体的构建及其在鸡原代输卵管上皮细胞及鸡成纤维细胞的表达 被引量：18
12
作者 宇丽 赵君 +6 位作者 张艳玲 刘斌 张守峰 王凤阳 赵宝全 扈荣良 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期21-24,共4页
将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表... 将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表明 ,在鸡原代输卵管上皮细胞 ,转染后 4 8h表达量最高 ,为 0 .67μg/L;而在鸡成纤维细胞 ,不论有无类固醇激素存在 ,均不表达。结果提示 ,在输卵管细胞中存在细胞特异性转录因子。 展开更多
关键词 鸡 卵清蛋白基因 调控序列 表达 载体构建
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从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒 被引量：64
13
作者 王新平 涂长春 +7 位作者 李红卫 金扩世 宣华 常国权 孙红梅 朱维正 费恩阁 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第4期341-345,共5页
根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株和猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株的核苷酸序列，设计合成了１对ＢＶＤＶ引物和３对ＨＣＶ引物。以从吉林、长春、哲盟３个地区经临床及病理学诊断为猪瘟的病料中提取的ＲＮＡ为模板，采... 根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株和猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株的核苷酸序列，设计合成了１对ＢＶＤＶ引物和３对ＨＣＶ引物。以从吉林、长春、哲盟３个地区经临床及病理学诊断为猪瘟的病料中提取的ＲＮＡ为模板，采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），分别以ＢＶＤＶ和ＨＣＶ引物进行扩增。结果，用ＢＶＤＶ引物从哲盟地区的疑似猪瘟病料中扩增出大小约４００ｂｐ的片段，而用３对ＨＣＶ引物在不同的条件下均未从该病料中扩增出相应大小的ＨＣＶ基因片段。此外，用ＨＣＶ的ＰＥ０／ＰＥ４引物从吉林、长春的病料中扩增出了ＨＣＶ的基因片段，但用ＢＶＤＶ引物从这两个地区的病料中均未扩增出ＢＶＤＶ的基因片段。从哲盟疑似猪瘟病料中扩增出的片段经克隆、序列测定及计算机分析证实，该片段的核苷酸序列和氨基酸序列与ＢＶＤＶ的同源性明显高于与ＨＣＶ的同源性。将哲盟病料接种于ＭＤＢＫ传代细胞，出现典型而规律的ＢＶＤＶ样细胞病变。由此证明。 展开更多
关键词 猪瘟 牛 腹泻病毒 聚合酶链反应
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新城疫病毒(长春株)F蛋白基因的克隆和序列分析 被引量：24
14
作者 王兴龙 金宁一 +6 位作者 丁壮 金扩世 罗坤 郭志儒 王宏伟 欧阳红生 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期109-113,共5页
新城疫病毒（ＮＤＶ）长春株在鸡胚增殖后纯化，提取ＲＮＡ，然后利用特异性引物，经ＲＴ－ＰＣＲ一次性扩增出了ＮＤＶ长春株的全长Ｆ基因。将该Ｆ基因插入ｐＫＳ（－）后，进行了序列测定。序列分析表明，该Ｆ基因核苷酸长度为１７５... 新城疫病毒（ＮＤＶ）长春株在鸡胚增殖后纯化，提取ＲＮＡ，然后利用特异性引物，经ＲＴ－ＰＣＲ一次性扩增出了ＮＤＶ长春株的全长Ｆ基因。将该Ｆ基因插入ｐＫＳ（－）后，进行了序列测定。序列分析表明，该Ｆ基因核苷酸长度为１７５８ｂｐ，编码５５３个氨基酸，序列中有６个糖基化位点，１３个半胱氨酸残基，裂解位点区（１１２～１１７）氨基酸序列为Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ，与所有弱毒株在这一区域的序列（Ｇｌｙ－Ａｒｇ／Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ／Ｓｅｒ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ）相符，证明长春株为弱毒株。同源性分析表明，长春株Ｆ基因与目前国外发表的其他ＮＤＶＦ基因相比，核苷酸序列同源性在８８％～９９％之间。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F蛋白基因 RT-PCR 序列分析
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应用DNA疫苗制备猪瘟病毒单克隆抗体的研究 被引量：13
15
作者 李作生 余兴龙 +5 位作者 李敏 马刚 马丛林 李红卫 涂长春 殷震 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期76-77,共2页
关键词 DNA疫苗 CSFV E2基因 单克隆抗体 猪瘟病毒 制备
原文传递
鸡减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的序列分析 被引量：16
16
作者 曾力宇 金奇章 +6 位作者 金钢 朱雷 姚二梅 李茂祥 李富胜 殷震 侯云德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期215-218,共4页
从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ），经非免疫鸭胚增殖后，用差速离心法纯化和蛋白酶Ｋ法抽提，获得全长约为３４ｋｂ的ＥＤＳＶ全基因组。用限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ酶解ＥＤＳＶ全基因，以ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡ... 从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ），经非免疫鸭胚增殖后，用差速离心法纯化和蛋白酶Ｋ法抽提，获得全长约为３４ｋｂ的ＥＤＳＶ全基因组。用限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ酶解ＥＤＳＶ全基因，以ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡ为载体，构建了ＥＤＳＶ的ＨｉｎｄⅢ酶解片段的文库，并对其中的Ｄ片段（长为３．６ｋｂ）进行了序列测定及同源分析，结果提示该片段中唯一一个完整的开放读码框架（ＯＲＦ）（４３０～３１６２位）编码ＥＤＳＶ的六邻体蛋白，其特定氨基酸残基的排列组合和功能区的分布等与其他几个具有代表性的腺病毒的六邻体蛋白相似，它们之间的核苷酸序列同源性在４９．６％～７２．９％，氨基酸序列同源性在４６．３％～８３．９％。本研究为进一步阐明ＥＤＳＶ基因组的结构特点。 展开更多
关键词 六邻体蛋白 序列 鸡 减蛋综合征 病毒
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细胞因子与猪瘟病毒E_2基因真核双表达载体的构建及其免疫增强作用 被引量：8
17
作者 陈创夫 余兴龙 +4 位作者 马正海 李作生 李红卫 涂长春 殷震 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1406-1410,共5页
构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2、IL 3基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果表明 ,构建了 2种猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2、3的真核表达质粒pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3。将 2种质粒转染BHK 2 1细... 构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2、IL 3基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果表明 ,构建了 2种猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2、3的真核表达质粒pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3。将 2种质粒转染BHK 2 1细胞 ,均可在体外表达E2 抗原和有生物活性的IL 2、IL 3两种质粒能诱导产生CSFV的特异性免疫反应。pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3所诱导的免疫应答反应比使用单表达质粒 pIRST强。试验表明 ,细胞因子与目的基因构建的双表达基因疫苗能有效提高基因疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 细胞因子 猪瘟病毒 E2基因 免疫增强作用 双表达载体 猪瘟 基因疫苗 真核表达
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减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析 被引量：17
18
作者 李茂祥 金奇 +3 位作者 章金钢 曾力宇 殷震 侯云德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期27-31,共5页
克隆了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株基因组ＨｉｎｄⅢ－Ｅ片段，并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央５８．７～６８．９物理图谱单位（ｍｕ），片段全长共３１９４ｂｐ。其中含有１个完整的和２个不完整的开放性读码... 克隆了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株基因组ＨｉｎｄⅢ－Ｅ片段，并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央５８．７～６８．９物理图谱单位（ｍｕ），片段全长共３１９４ｂｐ。其中含有１个完整的和２个不完整的开放性读码框架（ＯＲＦ），分别编码ｐＶⅢ蛋白、１００Ｋ蛋白基因Ｃ端和纤维蛋白Ｎ末端部分。ｐＶⅢ蛋白基因由７５３个碱基（ｎｔ）组成，编码２５０个氨基酸（ａａ），编码产物的分子量为２８５００。氨基酸水平的同源性比较表明，ＥＤＳＶ的ｐＶⅢ蛋白与禽腺病毒１型（ＦＡＶ１）及人和其他动物腺病毒ｐＶⅢ蛋白的同源性为２８％～３６％，而与羊腺病毒（ＯＡＶ）的同源性高达５２％，提示ＥＤＳＶ与ＯＡＶ间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征，在ｐＶⅢ和纤维蛋白基因之间，应为Ｅ３区，但该序列只有２４５个ｎｔ组成，序列中保留了ＴＡＴＡＢｏｘ和ｐｏｌｙＡ信号。但除了２个仅编码４９ａａ和３２ａａ多肽的ＯＲＦｓ外，不编码任何产物，且核苷酸序列与其他腺病毒的Ｅ３区无同源性，证实此区无明显Ｅ３区样结构。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 PVⅢ 蛋白基因 序列分析
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体内精原干细胞转染法建立转基因小鼠 被引量：8
19
作者 赵君 刘彬 +6 位作者 任文陟 张守峰 宇丽 李元平 乔贵林 扈荣良 殷震 《实验生物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期197-201,共5页
将人Bcl-2 cDNA与小鼠乳清酸蛋白(WAP)5’上游调控序列融合后,与脂质体按一定比例混合,再加入适量的台盼蓝制成转染液,注入到小鼠睾丸中的曲细精管中,转染精原干细胞以探讨建立转基因小鼠的可行性。共注射了3只公鼠,4天后将公鼠与发情... 将人Bcl-2 cDNA与小鼠乳清酸蛋白(WAP)5’上游调控序列融合后,与脂质体按一定比例混合,再加入适量的台盼蓝制成转染液,注入到小鼠睾丸中的曲细精管中,转染精原干细胞以探讨建立转基因小鼠的可行性。共注射了3只公鼠,4天后将公鼠与发情母鼠合笼交配,共生仔鼠20只。检测结果表明,有3只呈PCR阳性,Southern blot检测,阳性鼠2只,1只公鼠,1只母鼠,其中,公鼠意外死亡;Western blot证实,1只母鼠的乳腺组织表达了Bcl-2蛋白,其F1代的16只小鼠中,有7只呈PCR阳性。证实了体内精原干细胞转染建立转基因动物的可行性。 展开更多
关键词 精原干细胞 转染 转基因小鼠 人Bcl-2 CDNA 小鼠乳清酸蛋白 乳腺组织 表达
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肌注狂犬病病毒糖蛋白cDNA表达载体诱导的小鼠体液免疫反应 被引量：15
20
作者 扈荣良 杜坚 +4 位作者 涂长春 李红卫 殷震 崔青山 侯世宽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第4期321-326,共6页
将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段分别正向插入ｐｍＭＴ－１ＢｇｌⅡ位点和ｐＭＴ０１０／Ａ＋ＢａｍＨＩ位点，构建重组质粒ｐｍＭＴ－Ｒｇｐ和ｐＭＴ０１０／Ａ＋－Ｒｇｐ，通过磷酸钙共沉淀法转染ＢＨＫ－２... 将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段分别正向插入ｐｍＭＴ－１ＢｇｌⅡ位点和ｐＭＴ０１０／Ａ＋ＢａｍＨＩ位点，构建重组质粒ｐｍＭＴ－Ｒｇｐ和ｐＭＴ０１０／Ａ＋－Ｒｇｐ，通过磷酸钙共沉淀法转染ＢＨＫ－２１细胞，经ＰＣＲ、打点杂交及ＥＬＩＳＡ检测，证明糖蛋白基因发生了整合并获得表达。以该表达载体给小鼠肌肉内注射２～３次，采其注射前、后双份血清，经ＥＬＩＳＡ检测证明，注射了表达载体的小鼠，血清中病毒特异性抗体明显升高，表明狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡ在小鼠体内表达后。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 基因免疫 小鼠 抗体
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