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新型抗淋巴瘤药物anti-CD19(Fab)-LDM的靶向分布研究 被引量：1
1
作者 时玉峥 刘红芹 +9 位作者 姜琳琳 杨铭 范冬梅 屈浩 石琳 石钏 冯春玲 刘芸 熊冬生 廖晓龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期917-921,共5页
目的研究抗体毒素偶联新型药物anti-CD19(Fab)-LDM体内外靶向CD19+B淋巴瘤细胞的能力。方法制备Cy5标记的anti-CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白),体外流式细胞仪分析其与人淋巴瘤Raji细胞表面CD19抗原的结合能力;体内建立裸鼠淋巴瘤皮... 目的研究抗体毒素偶联新型药物anti-CD19(Fab)-LDM体内外靶向CD19+B淋巴瘤细胞的能力。方法制备Cy5标记的anti-CD19(Fab)-LDP(LDP为LDM辅基蛋白),体外流式细胞仪分析其与人淋巴瘤Raji细胞表面CD19抗原的结合能力;体内建立裸鼠淋巴瘤皮下移植瘤模型,应用活体动物成像系统观察Cy5标记的anti-CD19(Fab)-LDP在荷瘤小鼠体内的靶向分布。结果 Cy5标记的anti-CD19(Fab)-LDP能有效与淋巴瘤Raji细胞膜表面的CD19抗原结合;成功建立人淋巴瘤Raji细胞皮下移植瘤模型,体内活体成像结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDP可靶向定位到肿瘤部位。结论体内外实验证实anti-CD19(Fab)-LDP能很好的靶向CD19+的淋巴瘤细胞,此抗体毒素偶联药物anti-CD19(Fab)-LDM有希望成为治疗恶性淋巴瘤的新型药物。 展开更多
关键词 淋巴瘤 anti-CD19(Fab) LDP Cy5标记 移植瘤模型 靶向分布
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清晨高血压的发病机制及处理 被引量：5
2
作者 时玉峥 刘炘锐 石志兴 《现代中西医结合杂志》 CAS 2010年第28期3686-3688,共3页
关键词 清晨高血压 发病机制 时辰药理学
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骨髓间充质干细胞对慢性胰腺炎胰腺损伤修复的价值 被引量：3
3
作者 刘炘锐 刘洪斌 +2 位作者 石钏 韩俊领 时玉峥 《现代中西医结合杂志》 CAS 2010年第9期1163-1166,共4页
关键词 慢性胰腺炎 间充质干细胞 损伤修复
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Ki67法检测间充质干细胞对淋巴细胞增殖抑制能力 被引量：4
4
作者 韩莹 时玉峥 +1 位作者 魏训东 曹利人 《药物评价研究》 CAS 2022年第4期673-679,共7页
目的 对比Ki67法与羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluoreseein di-acetate succinimidyl ester,CFSE)法检测间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)对淋巴细胞的增殖抑制能力,开发MSCs免疫调控功能评价的新方法。方法 选取5批脐带来源的... 目的 对比Ki67法与羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluoreseein di-acetate succinimidyl ester,CFSE)法检测间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)对淋巴细胞的增殖抑制能力,开发MSCs免疫调控功能评价的新方法。方法 选取5批脐带来源的MSCs,流式细胞术进行表面标志物(阳性CD73/CD90/CD105/CD44、阴性CD34/CD45/CD14/CD19)检测;试剂盒诱导后染色进行成脂、成骨、成软骨三系分化能力检测;流式细胞术进行增殖指数检测;CCK8法进行群体倍增时间检测;生物学有效性检测合格后与相同供者来源的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)进行共培养,分别用CFSE法与Ki67法检测MSCs对PBMC的增殖抑制率。结果 制备的MSCs生长状态良好,CD73/CD90/CD105/CD44表达率均≥98%,CD34/CD45/CD14/CD19表达率均≤3%,成脂、成骨、成软骨三系分化能力良好,增殖指数为35.8±9.9,倍增时间为(19.1±1.2) h,增殖情况良好。CFSE法检测5批MSCs对PBMC的增殖抑制率为(91.20±0.70)%,Ki67法检测5批MSCs对PBMC的增殖抑制率为(89.99±1.45)%,2种方法比较,差异无统计学意义。结论 Ki67法可作为评价MSCs免疫调控功能的新方法,有效避免传统方法在检测过程中的局限性。 展开更多
关键词 KI67 羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE) 间充质干细胞(MSCs) 外周血单个核细胞(PBMC) 免疫调控 增殖
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人羊膜上皮细胞旁分泌作用及其对糖尿病大鼠创面血管再生的影响 被引量：1
5
作者 刘春香 付寅生 +3 位作者 孙沛颖 芦慧颖 时玉峥 张怡 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期272-278,共7页
目的研究人羊膜上皮细胞(human amnioticepithelial cells,hAECs)旁分泌情况及其在糖尿病皮肤损伤大鼠模型中皮肤愈合及血管再生的作用。方法采用流式细胞术对hAECs表型进行分析;ELISA方法检测hAECs培养上清中旁分泌因子含量;划痕试验检... 目的研究人羊膜上皮细胞(human amnioticepithelial cells,hAECs)旁分泌情况及其在糖尿病皮肤损伤大鼠模型中皮肤愈合及血管再生的作用。方法采用流式细胞术对hAECs表型进行分析;ELISA方法检测hAECs培养上清中旁分泌因子含量;划痕试验检测hAECs条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical veinendothelial cells,HUVECs)划痕的愈合作用,确定旁分泌作用对其迁移能力的影响;对糖尿病大鼠进行皮肤损伤造模,检测经h AECs治疗后,皮肤中CD34表达及Cyclin D1基因mRNA转录水平。结果 hAECs表面高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD73、CD105及胚胎干细胞表面标志SSEA4,低表达间充质干细胞表面标志CD44、CD90及造血干细胞表面标志CD45、CD34、HLA-DR;可大量分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),72 h时表达量显著高于24和48 h及培养基对照组(P <0. 05);HUVECs划痕后24和48 h,两种浓度条件培养基组对细胞的愈合作用均较基础培养基对照组强,差异有统计学意义(P <0. 01),且两种浓度条件培养基组细胞迁移率差异无统计学意义(P> 0. 05);hAECs治疗后糖尿病大鼠皮肤中CD34表达及Cyclin D1基因mRNA转录水平均显著高于相同取材时间条件下的未治疗组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 hAECs可大量分泌VEGF,并能够通过旁分泌作用促进体外HUVECs迁移、增殖及糖尿病大鼠皮肤血管再生。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 旁分泌 糖尿病大鼠模型 皮肤损伤 血管再生
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局部乳酸微环境对人脐带来源间充质干细胞增殖和炎症调节能力的影响
6
作者 韦清霞 时玉峥 +2 位作者 孙芮 张凡 曹利人 《药物评价研究》 CAS 2023年第7期1519-1526,共8页
目的 研究局部乳酸堆积对人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)功能的影响。方法 采集足月婴儿脐带,分离hUC-MSCs,流式细胞术进行hUC-MSCs表面标志物检测,分别应用骨茜素红S、油红O、阿尔新蓝进行成骨、成脂、成软骨诱导分化染色。采用CC... 目的 研究局部乳酸堆积对人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)功能的影响。方法 采集足月婴儿脐带,分离hUC-MSCs,流式细胞术进行hUC-MSCs表面标志物检测,分别应用骨茜素红S、油红O、阿尔新蓝进行成骨、成脂、成软骨诱导分化染色。采用CCK-8法检测乳酸(0、1、3、5、10、15 mmol·L^(-1))处理24、48、72 h后对hUC-MSCs增殖能力的影响;乳酸各浓度处理hUC-MSCs 72 h,流式细胞术检测增殖指数(PI),流式细胞术检测hUC-MSCs表面标志物,ELISA试剂盒法检测hUC-MSCs的血管内皮生长因子(VEGF)分泌功能;取健康志愿者外周血,用Ficoll淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),hUC-MSCs经0、10、20 mmol·L^(-1)的乳酸处理72 h后,与PBMC共培养72 h,ELISA法检测上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))水平,流式细胞术检测PBMC的CD3^(+)/ki67^(+)水平。结果 hUC-MSCs高表达CD73、CD90、CD105,表达率≥95%;CD34、CD45、CD19、HLA-DR表达率≤2%;成脂分化14 d后有明显脂肪滴形成;成骨分化21 d后可见明显的矿化结节;软骨方向分化14 d后有软骨球形成。当乳酸作用hUC-MSCs 24、48 h时,随着乳酸浓度的升高hUC-MSCs的增殖能力增强(P<0.05、0.01、0.001),但当作用时间达到72 h,乳酸由促增殖作用转为抑增殖作用(P<0.01、0.001),PI减小;不同浓度的乳酸处理hUC-MSCs,其表面分子表达没有明显改变;与0 mol·L^(-1)组比较,随着乳酸浓度的提高,hUC-MSCs上清中VEGF的分泌量逐渐减少(P<0.001)。PBMC的CD3^(+)百分率为66.5%,符合行业标准。与PBMC组比较,PBMC+hUC-MSCs组上清TNF-α水平显著降低、PEG_(2)水平显著增加(P<0.001);与PBMC+hUC-MSCs组比较,10、20 mmol·L^(-1)的乳酸可以显著抑制hUC-MSCs抗炎因子PEG_(2)的分泌、而对促炎因子TNF-α的分泌显著促进(P<0.001)。与PBMC组比较,hUC-MSCs可以显著抑制CD3阳性细胞的增殖(P<0.001);与PBMC+hUC-MSCs组比较,10、20 mmol·L^(-1)的乳酸预处理可以显著减弱hUC-MSCs对CD3阳性细胞的抑制作用(P<0.001)。结论 慢性皮肤伤口微环境中的高浓度乳酸长时间作用,可能通过影响hUC-MSCs的增殖和炎症调节能力,阻碍伤口的愈合进程。 展开更多
关键词 乳酸微环境 间充质干细胞 增殖 分泌功能 炎症调节
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