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木霉菌原生质体的制备和再生的研究 被引量：7
1
作者 刘限 高增贵 +2 位作者 庄敬华 肖淑芹 陈捷 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期37-40,共4页
采用正交拉丁设计对影响木霉菌原生质体制备和再生的条件进行了系统研究。结果表明:木霉菌原生质体制备受到缓冲体系、渗透压稳定剂、木霉菌菌龄、细胞壁降解酶的种类、酶解时间和再生培养基的影响,而不受木霉菌株系的影响。其中以磷酸... 采用正交拉丁设计对影响木霉菌原生质体制备和再生的条件进行了系统研究。结果表明:木霉菌原生质体制备受到缓冲体系、渗透压稳定剂、木霉菌菌龄、细胞壁降解酶的种类、酶解时间和再生培养基的影响,而不受木霉菌株系的影响。其中以磷酸缓冲体系和蔗糖为渗透压调节剂的降解体系为最佳,木霉菌菌龄以培养20h较好,崩溃酶对木霉菌细胞壁的降解效果好,酶解时间以4h为最佳,再生培养基以基础培养基和NaCl为渗透压调节剂为最佳。 展开更多
关键词 木霉菌 原生质体制备 渗透压调节剂 再生培养基 渗透压稳定剂 细胞壁降解酶 缓冲体系 酶解时间 基础培养基 系统研究 降解效果 NaCl 最佳 菌龄 株系
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柞蚕5龄幼虫血淋巴中蛋白质和糖类物质的动态变化 被引量：4
2
作者 刘限 夏润玺 +3 位作者 石生林 马积彪 邹璐琳 刘忠文 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期412-414,共3页
为探讨柞蚕壮蚕期体内物质代谢对滞育生理的影响,研究了不同蚕季的柞蚕5龄幼虫血淋巴中蛋白质和糖类物质含量的动态变化。结果表明:春、秋期柞蚕5龄幼虫血淋巴中总糖、海藻糖和蛋白质含量均随着生长发育而增加,总糖和海藻糖在5龄末期稍... 为探讨柞蚕壮蚕期体内物质代谢对滞育生理的影响,研究了不同蚕季的柞蚕5龄幼虫血淋巴中蛋白质和糖类物质含量的动态变化。结果表明:春、秋期柞蚕5龄幼虫血淋巴中总糖、海藻糖和蛋白质含量均随着生长发育而增加,总糖和海藻糖在5龄末期稍有下降;秋期柞蚕血淋巴中的总糖含量略高于春期柞蚕,海藻糖含量二者大致相似,而蛋白质含量却高于春期柞蚕,并且显示出特征蛋白质谱带。推测秋蚕期柞蚕体内物质的变化与发生滞育有关。 展开更多
关键词 柞蚕 血淋巴 蛋白质 糖类 季节变化
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木霉菌REMI转化体对番茄灰霉病的防治及其机理的研究 被引量：4
3
作者 刘限 郭培磊 +1 位作者 高增贵 赵岩 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期80-85,共6页
研究不同木霉菌转化体对番茄灰霉病防治效果及机理,为木霉菌生物防治的合理利用奠定基础。利用限制性内切酶介导基因整合技术(restriction enzyme-mediated integration,REMI),通过插入线性化质粒DNA获得了生物防治番茄灰霉病(Botrytis ... 研究不同木霉菌转化体对番茄灰霉病防治效果及机理,为木霉菌生物防治的合理利用奠定基础。利用限制性内切酶介导基因整合技术(restriction enzyme-mediated integration,REMI),通过插入线性化质粒DNA获得了生物防治番茄灰霉病(Botrytis cinerea)效果优于出发菌T21菌株(出发菌)的3个木霉菌转化体Ttrm31、Ttrm34和Ttrm55,对侵染花器和叶片的灰霉病防效分别比原生物防治木霉菌株提高了16.9%和8%。木霉菌转化体的产孢能力、分生孢子的萌发率、对碳氮源的利用能力及对高温的抵抗能力都有所提高;木霉菌转化体本身产生的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性均比出发菌高,因此通过REMI技术可以获得新的有益木霉菌转化体,在一定程度上提高了生物菌株防治番茄灰霉病的水平。说明REMI技术可以用于改良生防木霉菌株的功能,提高生物防治效果。 展开更多
关键词 限制性内切酶介导整合技术 木霉菌转化体 番茄灰霉病 生防机理
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高等农业院校蚕学专业建设和教学改革思考 被引量：9
4
作者 刘限 夏润玺 +3 位作者 杨瑞生 石生林 姜义仁 秦利 《沈阳农业大学学报（社会科学版）》 2017年第6期695-699,共5页
传统的蚕学专业是稀有且冷门的专业,面向现代社会对大学教育提出的新要求,应充分结合行业和专业自身实际情况进行教学改革,培养蚕学专业实用型、科技型和创新型专业人才,促进行业进步和专业教育的可持续发展。在充分调研行业发展和专业... 传统的蚕学专业是稀有且冷门的专业,面向现代社会对大学教育提出的新要求,应充分结合行业和专业自身实际情况进行教学改革,培养蚕学专业实用型、科技型和创新型专业人才,促进行业进步和专业教育的可持续发展。在充分调研行业发展和专业教育的基础上,针对当前行业发展和专业教育存在的问题,提出蚕学专业教学改革措施,从而提升蚕学专业大学生的素质,为行业发展提供更多的专业人才。科学整合和优化教学体系,引入新兴学科或交叉学科的课程,扩增现代新知识、新理念和新技术;融合理论教学与实践教学,改善理论教学和实践教学的脱节现象;重新构建蚕学专业实践教学体系与内容,建立完善的实践教学平台,设计理论教学和实践教学相融合的教学内容,改善传统的蚕学专业教学模式。 展开更多
关键词 蚕学专业 教学改革 课程体系 素质教育 高等农业教育
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发挥师生互动性提高学士学位论文质量 被引量：6
5
作者 刘限 杨丹 +2 位作者 秦利 石生林 夏润玺 《沈阳农业大学学报（社会科学版）》 2007年第2期228-231,共4页
在完成毕业设计和学位论文写作过程中,良性的师生互动会最大限度地发挥指导教师和学生的潜力,从而提高毕业论文质量。要做到这一点,指导教师要不断提高自身修养和个人学识,最重要的是对学生认真负责,具有严谨的治学态度和科研协作精神;... 在完成毕业设计和学位论文写作过程中,良性的师生互动会最大限度地发挥指导教师和学生的潜力,从而提高毕业论文质量。要做到这一点,指导教师要不断提高自身修养和个人学识,最重要的是对学生认真负责,具有严谨的治学态度和科研协作精神;学生积极配合,严格要求自己,敢于提出问题,与教师充分互动。 展开更多
关键词 毕业设计 学位论文质量 互动性 激励策略
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除草剂莠去津降解菌的筛选及降解效果 被引量：3
6
作者 刘限 李安 +1 位作者 高增贵 姚远 《江苏农业科学》 2018年第22期286-290,共5页
除草剂莠去津超量或不正确使用对土壤环境、下茬作物、各种动物等都会产生不利的影响,而且莠去津的残效期比较长,不易被降解,因此,获得具有高效降解莠去津能力的细菌就显得非常重要。利用细菌培养基筛选技术对莠去津降解菌进行筛选,并... 除草剂莠去津超量或不正确使用对土壤环境、下茬作物、各种动物等都会产生不利的影响,而且莠去津的残效期比较长,不易被降解,因此,获得具有高效降解莠去津能力的细菌就显得非常重要。利用细菌培养基筛选技术对莠去津降解菌进行筛选,并研究细菌在培养基及土壤中对莠去津的降解效果。结果表明,通过筛选获得2株(N1和N34)对莠去津具有降解作用的细菌,Biolog微生物自动鉴定仪鉴定N1和N34分别为腐叶芽孢杆菌(Bacillus decisifrondis)、弗雷尼棒状杆菌(Corynebacterium freneyi)。在LB液体培养基中,2株细菌对莠去津都具有降解作用,96 h时绝对降解率分别为62.34%、90.39%;在土壤中N34对莠去津的降解率无论在灭菌土壤还是未灭菌土壤中的绝对降解率都能达到60%以上。菌株N34中莠去津降解酶不是分泌型的,说明其主要是通过菌体生长利用代谢来降解莠去津的。 展开更多
关键词 莠去津 降解菌 降解酶 降解效果 腐叶芽孢杆菌 弗雷尼棒状杆菌
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哈茨木霉菌T21转化体生物学特性研究 被引量：2
7
作者 刘限 高增贵 +1 位作者 庄敬华 陈捷 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期71-75,共5页
本研究表明，木霉菌转化体孢子萌发率有的高于野生菌株，如菌株Tmn3，有的低于野生菌株，如菌株Ttrm47和Ttrm94；菌株Ttnn34产孢能力极显著高于野生菌株T21，而菌株Ttrm94和Ttrm111极显著低于野生菌株T21，菌株Ttmflll根本不产孢；对高... 本研究表明，木霉菌转化体孢子萌发率有的高于野生菌株，如菌株Tmn3，有的低于野生菌株，如菌株Ttrm47和Ttrm94；菌株Ttnn34产孢能力极显著高于野生菌株T21，而菌株Ttrm94和Ttrm111极显著低于野生菌株T21，菌株Ttmflll根本不产孢；对高温的适应能力也存在差异，其中菌株Ttnn31、Ttrm34、Ttrm47和Ttrm76比较耐高温，而菌株Ttm155、Ttrm94和Ttrm111较差，短时间高温处理能够促进木霉菌转化体生长。不同木霉菌对低温（15℃）的适应也不同，菌株Ttrm76、Tmn31和Ttrm55生长速度快于野生菌株T21，而菌株Ttrm94和Ttrm111生长明显慢于R1；在20-30℃范围内，菌株Ttrm31、T21、Ttrm34和Ttrm55生长速度基本一致，生长较快，菌株Ttrm94生长却很慢；超过30℃，菌株Ttrm76、Ttrm111和Ttrm47生长比较快，生长速度大于T21。不同pH条件下，木霉菌转化体培养形态和产孢方式均有变化。木霉菌转化体利用氮源较好的是蛋白质和天冬氨酸，碳源较好的是麦芽糖和葡萄糖。不同木霉菌转化体培养性状也不同，如菌株Ttrm111不产孢；菌株Ttrm94产孢少，两者培养颜色为黄色，而其他菌株为绿色。 展开更多
关键词 木霉菌转化体 孢子萌发 生物学特性
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高等农业院校蚕学专业兴衰与专业教育分析 被引量：2
8
作者 刘限 夏润玺 +2 位作者 姜义仁 杨瑞生 秦利 《沈阳农业大学学报（社会科学版）》 2019年第6期719-723,共5页
蚕学作为特有且冷僻的学科,造成很多人对蚕学专业存在不正确的认识。在全面分析张迎迎"没落的蚕学"一文认识的基础上,从蚕学专业为什么没人报考的原因,蚕学教学到底应该教些什么和蚕学专业本科生在学习过程中如何学习和重点... 蚕学作为特有且冷僻的学科,造成很多人对蚕学专业存在不正确的认识。在全面分析张迎迎"没落的蚕学"一文认识的基础上,从蚕学专业为什么没人报考的原因,蚕学教学到底应该教些什么和蚕学专业本科生在学习过程中如何学习和重点学什么,蚕学专业毕业生如何正确进行自我定位和选择就业方面深度思考,因此,振兴蚕学教育和蚕桑行业的途经就是要充分利用蚕桑业的发展空间和特色优势,不断在蚕学科学技术和产业领域方面攻克难关,解决行业发展的瓶颈问题,才能达到双赢,从而保证蚕学专业教育及其行业的可持续发展。 展开更多
关键词 高等农业院校 蚕学 招生 就业 行业发展
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柞蚕变态期雌体生殖系统发育的组织结构观察 被引量：1
9
作者 刘限 李健男 +3 位作者 王世富 许方国 石生林 何海波 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第6期439-441,共3页
采用石蜡切片法对柞蚕雌体生殖系统的组织结构进行了研究 ,结果发现 ,在蛹发育的前期卵巢及卵巢管发育较快 ,卵巢管壁分泌卵泡细胞 ,将卵母细胞及滋养细胞包围起来形成卵室和滋养室 ;中期滋养细胞发达 ,核分枝 ;后期卵母细胞进一步发育 ... 采用石蜡切片法对柞蚕雌体生殖系统的组织结构进行了研究 ,结果发现 ,在蛹发育的前期卵巢及卵巢管发育较快 ,卵巢管壁分泌卵泡细胞 ,将卵母细胞及滋养细胞包围起来形成卵室和滋养室 ;中期滋养细胞发达 ,核分枝 ;后期卵母细胞进一步发育 ,滋养细胞萎缩退化 ,卵母细胞增大 ,同时卵泡细胞分泌卵壳物质形成卵壳。蛹发育前期附腺开始形成 ,中期开始分泌粘液 ,此时附腺的端部、中部和基部的组织结构无明显差别 ,后期端部的腺细胞发达并形成皱褶 ,而中部和基部的腺腔扩大 ,腺细胞逐渐失去分泌功能。受精囊腺在蛹发育前期逐渐形成 ,到中后期其端部、中部和基部的组织结构发生变化。端部的腺细胞发达 ,形成大量的皱褶 ;中部的腺细胞皱褶减少 ,腺腔扩大 ,外层肌肉增厚 ;基部腺细胞不发达 。 展开更多
关键词 柞蚕 变态期 生殖系统 组织结构 雌体生殖系统
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春柞蚕不同品种中、后部丝腺细胞数目及谷丙转氨酶活性的测定分析 被引量：1
10
作者 刘限 李青峰 +1 位作者 许方国 王英 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期200-202,共3页
采用醋酸地衣红染色法测定了3个春柞蚕品种的丝腺细胞数,以三里丝最多,C蚕次之,青六最少。通过比色法测定各品种丝腺细胞中谷丙转氨酶(GPT)的活性,也是三里丝的酶活性高于C蚕,C蚕高于青六;同一品种中则是雄要的酶活性高于雌蚕。
关键词 春柞蚕 品种 中部丝腺 后部丝腺 细胞数目 谷丙转氨酶 酶活性 醋酸地衣红染色法 比色法
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环境伦理学——一门新兴交叉性学科 被引量：3
11
作者 刘限 王春年 《河北师范大学学报（哲学社会科学版）》 2003年第6期48-52,共5页
环境伦理学是伴随着世界性环境生态危机的深化而发展起来的一门交叉性、综合性的学科,是伦理学、环境科学、生态学等学科相互交融、相互结合的产物,并在相当多的领域都产生了一定的影响。
关键词 环境伦理 交叉学科 生态学 影响和突破
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环境伦理与科学技术 被引量：1
12
作者 刘限 李建珊 《中国科技论坛》 CSSCI 北大核心 2003年第1期85-88,共4页
人类活动的历史表明,科学技术既是人类为自身创造幸福、改善生活的手段,也是造成环境污染问题、生态破坏问题等全球性问题的至关重要的因素之一。因此十分有必要对导致后面这种负面结果的科学技术决定论加以深入反思。为了防止科学技术... 人类活动的历史表明,科学技术既是人类为自身创造幸福、改善生活的手段,也是造成环境污染问题、生态破坏问题等全球性问题的至关重要的因素之一。因此十分有必要对导致后面这种负面结果的科学技术决定论加以深入反思。为了防止科学技术的进一步滥用,人类迫在眉睫的任务是必须努力探索科学技术的人文价值定位问题,在操作理念层次则要确立科学技术绿色化的理想。 展开更多
关键词 环境伦理 科学技术 人文价值 绿色化
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木霉REMI转化体耐热机理的初步研究
13
作者 刘限 赵岩 +2 位作者 郭培磊 高增贵 庄敬华 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期52-57,共6页
本文利用蛋白质电泳、基因克隆和荧光定量PCR等技术对耐高温木霉REMI转化体的抗逆机理进行了初步研究。结果表明,耐高温木霉REMI转化体的蛋白质谱带明显多于出发菌株T21,且差异主要集中在Rf值大于0.593的区域,该区域主要是小分子的热休... 本文利用蛋白质电泳、基因克隆和荧光定量PCR等技术对耐高温木霉REMI转化体的抗逆机理进行了初步研究。结果表明,耐高温木霉REMI转化体的蛋白质谱带明显多于出发菌株T21,且差异主要集中在Rf值大于0.593的区域,该区域主要是小分子的热休克蛋白,说明影响耐高温木霉REMI转化体对温度耐受性的蛋白主要以小分子量蛋白质为主。对其中一种热休克蛋白HSP24的基因进行克隆、测序,结果表明不同木霉REMI转化体和出发菌株T21间该基因序列没有差异,但经荧光定量PCR对HSP24基因转录检测表明,耐高温木霉REMI转化体的热激蛋白HSP24的表达量有所增加,从而表明REMI插入提高了该基因的转录水平。 展开更多
关键词 木霉REMI转化体 高温 热激蛋白 HSP24
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柞蚕核型多角体病毒对柞蚕蛹的感染性试验
14
作者 刘限 王学英 +1 位作者 石生林 许方国 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期239-239,共1页
关键词 柞蚕核型多角体病毒 柞蚕蛹 感染性试验 载体表达系统 外源基因表达
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木霉REMI突变株主要生防酶活性改变及其基因部分序列差异的研究
15
作者 刘限 孙淑清 +1 位作者 高增贵 黄哲 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期14-20,共7页
本文探讨了来源于同一出发菌株木霉T21的不同木霉REMI突变株的主要生防酶活性的改变及其基因部分序列的差异,利用生化技术测定了木霉几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶酶活性,并对这两种酶的基因部分序列进行了分析。结果表明,木霉REMI突变株... 本文探讨了来源于同一出发菌株木霉T21的不同木霉REMI突变株的主要生防酶活性的改变及其基因部分序列的差异,利用生化技术测定了木霉几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶酶活性,并对这两种酶的基因部分序列进行了分析。结果表明,木霉REMI突变株几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性变化较大;相对于出发菌株T21,菌株Ttrm68和Ttrm31酶活性极显著高于出发菌株T21,而Ttrm94则极显著低于T21。采用简并引物克隆几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因的部分序列,发现菌株Ttrm68、Ttrm31在几丁质酶基因中插入了GGTATCGATATCGAC片段,菌株Ttrm94在β-1,3-葡聚糖酶基因中插入了GTC片段。 展开更多
关键词 木霉REMI突变株 生防酶 活性改变 基因序列差异
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省力化养蚕新技术(5) 被引量：1
16
作者 刘限 马积彪 《新农业》 2007年第5期57-57,共1页
4．室外大棚育 采用室外建大棚，大蚕每日一回育或两回育。特点是投资蚕室的费用减少，每平方米建蚕室费用10元左右，节省用工43％以上，节省桑叶3％左右，提高养蚕工效，蚕病少，茧质好，适合规模化养蚕。
关键词 省力化养蚕 技术 室外大棚 规模化 费用 蚕室 大蚕 投资
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省力化养蚕新技术(3) 被引量：1
17
作者 刘限 马积彪 《新农业》 2007年第3期58-58,共1页
2．小蚕平面2回育和普通的饲养方法基本相同，只在饲养过程中为减少劳动强度，节省工时，减少给桑次数，每天给桑2次。但在饲养过程中需要注意以下问题。①要规范饲育，控制好温湿度。俗话说“小蚕火养，大蚕风养”，一般1、2龄温度27... 2．小蚕平面2回育和普通的饲养方法基本相同，只在饲养过程中为减少劳动强度，节省工时，减少给桑次数，每天给桑2次。但在饲养过程中需要注意以下问题。①要规范饲育，控制好温湿度。俗话说“小蚕火养，大蚕风养”，一般1、2龄温度27～28℃，相对湿度85％～90％；3、4龄温度25～27℃，相对湿度75％～80％。 展开更多
关键词 省力化养蚕 技术 饲养过程 给桑次数 相对湿度 饲养方法 劳动强度 温湿度
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省力化养蚕新技术(2) 被引量：1
18
作者 刘限 马积彪 《新农业》 2007年第2期53-53,共1页
饲育箱的制作 用宽3厘米、厚1．5厘米的木条做成长、宽、高分别为70厘米、50厘米、22厘米的饲育箱。底部横钉2根木条，在饲育箱箱壁木条上端每隔2厘米钉1个小钉子，每只箱只需钉2～3颗。箱四周用塑料薄膜包裹，底部垫1张纸，饲育时上盖... 饲育箱的制作 用宽3厘米、厚1．5厘米的木条做成长、宽、高分别为70厘米、50厘米、22厘米的饲育箱。底部横钉2根木条，在饲育箱箱壁木条上端每隔2厘米钉1个小钉子，每只箱只需钉2～3颗。箱四周用塑料薄膜包裹，底部垫1张纸，饲育时上盖塑料薄膜。每张蚕种需上述规格的饲育箱6个。另需长50厘米的穿叶竹签60根，每只箱需要2根长70厘米的竹棍。 展开更多
关键词 省力化养蚕 技术 塑料薄膜 饲育箱 木条 底部 蚕种 竹签
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省力化养蚕新技术(4) 被引量：1
19
作者 刘限 马积彪 《新农业》 2007年第4期57-57,共1页
三．大蚕饲养的省力化 1．省力化蚕台育（活动式蚕台）蚕台的制作可根据实际情况，选择当地充足的资源制作蚕台，蚕台为2．5米×1．2米的长方形，长边两端各留出25厘米，横向捆4根木棒。蚕台上放草帘或竹帘，并铺上1层编织布。10... 三．大蚕饲养的省力化 1．省力化蚕台育（活动式蚕台）蚕台的制作可根据实际情况，选择当地充足的资源制作蚕台，蚕台为2．5米×1．2米的长方形，长边两端各留出25厘米，横向捆4根木棒。蚕台上放草帘或竹帘，并铺上1层编织布。10层蚕台可饲养1张蚕。从4齿令起蚕开始移至省力化蚕台上饲养，除沙前加1张比蚕台稍大一点的蚕网，除沙时把蚕网的四个角挂在上一层蚕台的钩上，1人或两人快速除沙，可大大提高大蚕除蚕沙的劳动工效。省力化蚕台是立体的，比地面育节省占地空间，又有利于防病。 展开更多
关键词 省力化养蚕 大蚕饲养 技术 蚕台育 活动式 长方形 编织布 除沙
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省力化养蚕新技术(1) 被引量：1
20
作者 刘限 马积彪 《新农业》 2007年第1期56-56,共1页
关键词 省力化养蚕 上簇技术 小蚕共育 技术体系 劳动力 蚕桑业 密集型 少回育
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